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維醫(yī)動(dòng)物模型的造模方法、模型、反證和綜合評(píng)價(jià)方法

文檔序號(hào):114448閱讀:298來(lái)源:國(guó)知局
專利名稱:維醫(yī)動(dòng)物模型的造模方法、模型、反證和綜合評(píng)價(jià)方法
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明屬于維吾爾醫(yī)學(xué)男科疾病研究領(lǐng)域,具體涉及一種維醫(yī)異常黏液質(zhì)證侯動(dòng)物模型的造模方法、一種維醫(yī)異常黏液質(zhì)證侯模型、一種維醫(yī)異常黏液質(zhì)陽(yáng)痿病證動(dòng)物模型制備的反證和綜合評(píng)價(jià)方法。
背景技術(shù)
陽(yáng)痿是指男子陰莖不舉或舉而不堅(jiān)為主要特征的病證,在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中稱為陰莖勃起功能障礙(erectile dysfunction,ED),并可見(jiàn)性欲減低與早泄等證狀。當(dāng)今社會(huì)男性因生活節(jié)奏加快,平均睡眠時(shí)間少、飲食結(jié)構(gòu)與環(huán)境的變化,更因心理健康與其他各類致病因素導(dǎo)致陽(yáng)痿的發(fā)病率逐年上升?,F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究資料顯示在世界范圍內(nèi)于1995年ED患者達(dá)
I.52億人,在40-70歲的男性中,約有52%的男性有不同程度的ED,預(yù)計(jì)到2025年將會(huì)上升到3. 22億人;我國(guó)城市男性患病率達(dá)到26. 1%,40歲以上總患病率為40. 2%。目前對(duì)ED治療藥物與方法而言,雖然有V型磷酸二脂酶抑制劑、激素、AGEs抑制劑等多種方法可供選擇,尤其是磷酸二酯鍵抑制劑的產(chǎn)生給ED的治療帶來(lái)了革命性的變化,然而與人們的期望值仍有較大差距,整體治療效果尚有不足。維吾爾醫(yī)學(xué)作為祖國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的重要組成部分,在新疆醫(yī)療衛(wèi)生體系中發(fā)揮著重要作用。維醫(yī)學(xué)其以獨(dú)立的理論體系與獨(dú)特的治療方法在男科疾病的治療上有著獨(dú)到之處和顯著療效,尤其是對(duì)陽(yáng)痿、早泄類疾病的治療是維醫(yī)的一大優(yōu)勢(shì)特色。但因維醫(yī)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)起步較晚,不同證型陽(yáng)痿的病證動(dòng)物模型尚未建立,導(dǎo)致其生物學(xué)基礎(chǔ)與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)發(fā)病機(jī)制的研究尚屬空白,從而制約著維醫(yī)男科學(xué)診療的標(biāo)準(zhǔn)化與現(xiàn)代化。于此同時(shí),在病證動(dòng)物模型基礎(chǔ)上的實(shí)驗(yàn)研究與新藥研發(fā)、藥效評(píng)價(jià)等工作無(wú)法開(kāi)展,因此建立維醫(yī)異常黏液質(zhì)陽(yáng)痿病證動(dòng)物模型。

發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)的不足,本發(fā)明的目的之一是提供一種維醫(yī)異常黏液質(zhì)證侯動(dòng)物模型的造模方法,該方法可以應(yīng)用與建立維醫(yī)異常黏液質(zhì)證侯模型。技術(shù)方案是一種維醫(yī)異常黏液質(zhì)證侯動(dòng)物模型的造模方法,該方法如下將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為對(duì)照組和造模組;對(duì)照組于常規(guī)環(huán)境中飼養(yǎng),每組每日20:00-22:00給300g普通飼料,500 ml水,更換墊料,墊料量為80 g;造模組置于人工氣候箱中飼養(yǎng),每組每日20:00-22:00給濕寒飼料300g,500 ml水,更換墊料,墊料量為80 g ;對(duì)照組和造模組均隨機(jī)飲食水;動(dòng)態(tài)觀測(cè)。作為優(yōu)選,所述實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為大鼠。作為優(yōu)選,所述大鼠為雄性SD大鼠。本發(fā)明的目的之二是提供一種維醫(yī)異常黏液質(zhì)證侯模型,該模型可應(yīng)用于維醫(yī)異常黏液質(zhì)陽(yáng)痿病證動(dòng)物模型制備的反證和綜合評(píng)價(jià)方法。技術(shù)方案是一種維醫(yī)異常黏液質(zhì)證侯模型,該方法采用上述權(quán)利要求1-3任一權(quán)利要求所述的維醫(yī)異常黏液質(zhì)證侯動(dòng)物模型的造模方法。本發(fā)明的目的之三是提供一種維醫(yī)異常黏液質(zhì)陽(yáng)痿病證動(dòng)物模型制備的反證和綜合評(píng)價(jià)方法,該方法可應(yīng)用在陽(yáng)痿病證臨床試驗(yàn)中。技術(shù)方案是一種維醫(yī)異常黏液質(zhì)陽(yáng)痿病證動(dòng)物模型制備的反證和綜合評(píng)價(jià)方法,該方法如下建立如權(quán)利要求4所述的維醫(yī)異常黏液質(zhì)證侯模型;通過(guò)APO陰莖勃起實(shí)驗(yàn)并結(jié)合性行為學(xué)實(shí)驗(yàn)篩選出陽(yáng)痿病證模型;將陽(yáng)痿病證模型隨機(jī)分為病證模型組Al、自然反證組A2和藥物反證組A3 ;未成陽(yáng)痿的證侯模型隨機(jī)分為證侯模型組BI、自然反證組B2和藥物反證組B3,反證時(shí)間為2周;反證結(jié)束時(shí),再進(jìn)行APO陰莖勃起實(shí)驗(yàn)與性行為學(xué)檢測(cè);自然反證對(duì)照將自然反證組A2和B2于常規(guī)環(huán)境下飼養(yǎng)2周,常規(guī)飲食,通過(guò)生物學(xué)表征觀測(cè)及其與正常對(duì)照組比較后,確定模型自然恢復(fù)情況;藥物反證對(duì)照將藥物反證組 A3和B3于常規(guī)環(huán)境下飼養(yǎng)2周,常規(guī)飲食,同時(shí)以對(duì)證藥物伊木薩克片干預(yù)2周,并通過(guò)生物學(xué)表征觀測(cè)及其與正常對(duì)照組比較后,對(duì)證藥物的治療效果;性行為學(xué)檢測(cè)室內(nèi)保持安靜,燈光調(diào)暗至僅夠觀察,將雄性大鼠放在玻璃箱中適應(yīng)環(huán)境10分鐘,按2:1投入雌鼠,觀測(cè)并記錄30分鐘內(nèi)雄性大鼠的騎跨潛伏期、騎跨次數(shù)、插入潛伏期、插入次數(shù)、射精潛伏期、射精次數(shù);所述常規(guī)飲食為每組每日20:00-22:00給300g普通飼料,500 ml水。作為優(yōu)選,所述藥物反證組A3和B3每日是用250mg伊木薩克片/Ikg蒸餾水灌胃,自然反證組A2、自然反證組B2、病證模型組Al和證侯模型組BI每日是用Ikg蒸餾水灌

冃 作為優(yōu)選,所述APO陰莖勃起先將雄性大鼠放在觀察箱中適應(yīng)環(huán)境10分鐘,燈光調(diào)暗,僅夠觀察即可,室內(nèi)保持安靜,然后每只大鼠在頸項(xiàng)皮膚松弛處注射阿樸嗎啡(APO) 85 μ g/kg (AP0溶解于O. 5mg/kg的維生素C與生理鹽水中,調(diào)整體積為5ml/kg),每只大鼠于注射后立刻觀察30分鐘,觀察指標(biāo)包括勃起潛伏期及勃起次數(shù)。陰莖龜頭充血及末端陰莖體出現(xiàn)記為陰莖勃起一次。作為優(yōu)選,所述生物學(xué)表征觀測(cè)為定性指標(biāo)觀測(cè)和定量指標(biāo)觀測(cè)。作為優(yōu)選,所述定性指標(biāo)觀測(cè)為皮膚毛發(fā)在日光下觀察,情緒反應(yīng)以一籠內(nèi)各大鼠相互反應(yīng)為主觀察30分鐘,行為狀態(tài)以此期間內(nèi)的活動(dòng)為主、安靜環(huán)境下觀察30分鐘,興奮程度以?shī)A尾實(shí)驗(yàn)時(shí)的反應(yīng)為主,舌象舌苔在日光下觀察、記錄并拍照,飲食水狀態(tài)以各組同一時(shí)間喂飼觀察飲食水狀態(tài),小便以各組大鼠當(dāng)日正排尿時(shí)顏色為主,大便狀態(tài)以當(dāng)日正排大便時(shí)大便形態(tài)為主;
所述定量指標(biāo)為避免生理節(jié)奏的影響,每天固定于20:00-22:00收集各項(xiàng)資料,其中體重每天按規(guī)定時(shí)間稱重并記錄,以每籠總體重除以該籠大鼠只數(shù),得出平均體重,并按下述公式得出模型組各籠體重比值并記錄,體重比值=模型組平均體重-模型組初始體重/正常組平均體重-正常組初始體重;飲食量每天20:00添加飼料300g,次日20:00稱食物余量,根據(jù)下述公式得出IOOg體重相對(duì)應(yīng)的飲食量并記錄;飲水量每天20:00給水500ml,次日20:00量剩余水量,計(jì)算得出IOOg體重相對(duì)應(yīng)的飲水量并記錄;尿量造模第一天記錄好給的干墊料重量,第二天按規(guī)定時(shí)間稱含有尿液及大便的濕墊料的重量并記錄,然后在恒溫鼓風(fēng)干燥箱100°C下2小時(shí)烘干后再次稱重,計(jì)算各組尿量;大便量計(jì)算IOOg體重相對(duì)應(yīng)的大便量并記錄。通過(guò)本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),從模擬病因、證狀表現(xiàn)、慢性過(guò)程與自然會(huì)恢復(fù)反證和對(duì)證藥物反證方面建立的異常黏液質(zhì)證侯與陽(yáng)痿病證大鼠模型符合維吾爾醫(yī)學(xué)異常黏液質(zhì)證侯的認(rèn)識(shí)特點(diǎn),模擬出的一般狀態(tài)改變符合維吾爾醫(yī)學(xué)異常黏液質(zhì)的證侯特征,篩選的ED模型,也較穩(wěn)定。我們認(rèn)為,本研究中建立的異常黏液質(zhì)證侯與陽(yáng)痿病證動(dòng)物模型是可靠的、可行的,并具有良好的重復(fù)性與科學(xué)性。本發(fā)明異常黏液質(zhì)陽(yáng)痿病證的動(dòng)物模型可用于異常黏液質(zhì)證與異常黏液質(zhì)陽(yáng)痿病證的生物學(xué)基礎(chǔ)研究和藥物干預(yù)研究。本發(fā)明的有益效果在于本發(fā)明通過(guò)采取濕寒環(huán)境和濕寒飼料飼養(yǎng)得到的異常黏液質(zhì)陽(yáng)痿病證動(dòng)物模型。研究數(shù)據(jù)顯示,造模組出現(xiàn)了蜷臥少動(dòng),喜扎堆,行動(dòng)遲緩,毛發(fā)亂無(wú)光澤,舌質(zhì)暗,舌苔白膩,口腔、鼻腔分泌物增多等現(xiàn)象。同時(shí)可見(jiàn)造模組體重增長(zhǎng)緩慢,飲食量增加,飲水量減少,大小便量顯著增多,且尿液清,色淡,大便時(shí)軟時(shí)溏等情況,上述生物學(xué)表征符合維醫(yī)臨床證侯特點(diǎn),從而從異常黏液質(zhì)證侯大鼠模型中可成功篩選處陽(yáng)痿病證大鼠模型,且該模型具有良好的科學(xué)性、可靠性和穩(wěn)定性。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合附表為本發(fā)明做進(jìn)一步說(shuō)明。維醫(yī)異常黏液質(zhì)陽(yáng)痿病證動(dòng)物模型的制備
(I)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物SD大鼠,平均體重203-237g,清潔級(jí)SPF級(jí),新疆醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。(2)主要試劑、藥物及實(shí)驗(yàn)儀器阿樸嗎啡,美國(guó)Sigma公司;黃體酮,浙江仙琚制藥股份有限公司;雌二醇,上海通用藥業(yè)股份有限公司;RQH-350型人工氣候箱,上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司產(chǎn)品;伊木薩克片,新疆和田維吾爾藥業(yè)有限責(zé)任公司。(3)實(shí)驗(yàn)方法100只具有正常性功能的雄性SD大鼠,實(shí)驗(yàn)前1_3天均于常規(guī)環(huán)境中飼養(yǎng)。從中隨機(jī)取10只為正常對(duì)照組,在常規(guī)環(huán)境中飼養(yǎng)(溫度20°C ±2°C,濕度55%-65%,12h/12h人工照明),每日300g普通飼料,500ml水,80墊料;其余90只為造模組,置于人工氣候箱中飼養(yǎng)(設(shè)定溫度6°C,濕度85%-95%),9:00-19:00放入,每日300g濕寒飼料,該濕寒飼料由每Ikg常規(guī)飼料中加入芫荽實(shí)和菠菜實(shí)各150g制成,水和墊料與正常組相同。固定每日20:00-22:00給予飼料、飲水,更換墊料,觀測(cè)生物學(xué)表征的變化。表一、維醫(yī)異常粘液質(zhì)陽(yáng)痿病證動(dòng)物模型的定向指標(biāo)觀察。
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C3 Sy*£11 Q s5i C3異常黏液質(zhì)陽(yáng)痿病證動(dòng)物模型的體重及體重比值變化。
權(quán)利要求
1.一種維醫(yī)異常黏液質(zhì)證侯動(dòng)物模型的造模方法,該方法如下 將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為對(duì)照組和造模組; 對(duì)照組于常規(guī)環(huán)境中飼養(yǎng),每組每日20:00-22: OO給300g普通飼料,500 ml水,更換墊料,墊料量為80 g ;造模組置于人工氣候箱中飼養(yǎng),設(shè)定溫度6°C,濕度85% 95%,每組每日20:00 22:00給濕寒飼料300g,500 ml水,更換墊料,墊料量為80 g ; 對(duì)照組和造模組均隨機(jī)飲食水; 動(dòng)態(tài)觀測(cè)。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的維醫(yī)異常黏液質(zhì)證侯動(dòng)物模型的造模方法,其特征在于所述實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為大鼠。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的維醫(yī)異常黏液質(zhì)陽(yáng)痿病證動(dòng)物模型的制備方法,其特征在于所述大鼠為雄性SD大鼠。
4.一種維醫(yī)異常黏液質(zhì)證侯模型,其特征在于該方法采用上述權(quán)利要求1-3任一權(quán)利要求所述的維醫(yī)異常黏液質(zhì)證侯動(dòng)物模型的造模方法。
5.一種維醫(yī)異常黏液質(zhì)陽(yáng)痿病證動(dòng)物模型制備的反證和綜合評(píng)價(jià)方法,該方法如下 建立如權(quán)利要求4所述的維醫(yī)異常黏液質(zhì)證侯模型; 通過(guò)APO陰莖勃起實(shí)驗(yàn)并結(jié)合性行為學(xué)檢測(cè)篩選出陽(yáng)痿病證模型; 將陽(yáng)痿病證模型隨機(jī)分為病證模型組Al、病證自然反證組A2和病證藥物反證組A3 ;未成陽(yáng)痿的證侯模型隨機(jī)分為證侯模型組BI、證侯自然反證組B2和證侯藥物反證組B3,反證時(shí)間為2周; 反證結(jié)束時(shí),再進(jìn)行APO陰莖勃起實(shí)驗(yàn)與性行為學(xué)檢測(cè); 自然反證對(duì)照將自然反證組A2和B2于常規(guī)環(huán)境下飼養(yǎng)2周,常規(guī)飲食,通過(guò)生物學(xué)表征觀測(cè)及其與正常對(duì)照組比較后,確定模型自然恢復(fù)情況; 藥物反證對(duì)照將藥物反證組A3和B3于常規(guī)環(huán)境下飼養(yǎng)2周,常規(guī)飲食,同時(shí)以對(duì)證藥物伊木薩克片干預(yù)2周,并通過(guò)生物學(xué)表征觀測(cè)及其與正常對(duì)照組比較后,確定對(duì)證藥物的治療效果; 性行為學(xué)檢測(cè)室內(nèi)保持安靜,燈光調(diào)暗至僅夠觀察,將雄性大鼠放在玻璃箱中適應(yīng)環(huán)境10分鐘,按2:1投入雌鼠,觀測(cè)并記錄30分鐘內(nèi)雄性大鼠的騎跨潛伏期、騎跨次數(shù)、插入潛伏期、插入次數(shù)、射精潛伏期、射精次數(shù); 所述常規(guī)飲食為每組每日20:00-22:00給300g普通飼料,500 ml水。
6.一種如權(quán)利要求5所述的維醫(yī)異常黏液質(zhì)陽(yáng)痿病證動(dòng)物模型制備的反證和綜合評(píng)價(jià)方法,其特征在于所述藥物反證組A3和B3每日是用250mg伊木薩克片/Ikg蒸餾水灌胃,自然反證組A2、自然反證組B2、病證模型組Al和證侯模型組BI每日是用Ikg蒸餾水灌 胃。
7.—種如權(quán)利要求5所述的維醫(yī)異常黏液質(zhì)陽(yáng)痿病證動(dòng)物模型制備的反證和綜合評(píng)價(jià)方法,其特征在于所述APO陰莖勃起先將雄性大鼠放在觀察箱中適應(yīng)環(huán)境10分鐘,燈光調(diào)暗,僅夠觀察即可,室內(nèi)保持安靜,然后每只大鼠在頸項(xiàng)皮膚松弛處注射阿樸嗎啡(APO) 85 μ g/kg (AP0溶解于O. 5mg/kg的維生素C與生理鹽水中,調(diào)整體積為5ml/kg),每只大鼠于注射后立刻觀察30分鐘,觀察指標(biāo)包括勃起潛伏期及勃起次數(shù);陰莖龜頭充血及末端陰莖體出現(xiàn)記為陰莖勃起一次。
8.—種如權(quán)利要求5所述的維醫(yī)異常黏液質(zhì)陽(yáng)痿病證動(dòng)物模型制備的反證和綜合評(píng)價(jià)方法,其特征在于所述生物學(xué)表征觀測(cè)為定性指標(biāo)觀測(cè)和定量指標(biāo)觀測(cè)。
9.一種如權(quán)利要求7所述的維醫(yī)異常黏液質(zhì)陽(yáng)痿病證動(dòng)物模型制備的反證和綜合評(píng)價(jià)方法,其特征在于 所述定性指標(biāo)觀測(cè)為皮膚毛發(fā)在日光下觀察,情緒反應(yīng)以一籠內(nèi)各大鼠相互反應(yīng)為主觀察30分鐘,行為狀態(tài)以此期間內(nèi)的活動(dòng)為主、安靜環(huán)境下觀察30分鐘,興奮程度以?shī)A尾實(shí)驗(yàn)時(shí)的反應(yīng)為主,舌象舌苔在日光下觀察、記錄并拍照,飲食水狀態(tài)以各組同一時(shí)間喂飼觀察飲食水狀態(tài),小便以各組大鼠當(dāng)日正排尿時(shí)顏色為主,大便狀態(tài)以當(dāng)日正排大便時(shí)大便形態(tài)為主; 所述定量指標(biāo)為避免生理節(jié)奏的影響,每天固定于20:00-22:00收集各項(xiàng)資料,其中體重每天按規(guī)定時(shí)間稱重并記錄,以每籠總體重除以該籠大鼠只數(shù),得出平均體重,并按下述公式得出模型組各籠體重比值并記錄,體重比值=模型組平均體重-模型組初始體重/正常組平均體重-正常組初始體重;飲食量每天20:00添加飼料300g,次日20:00 稱食物余量,根據(jù)下述公式得出IOOg體重相對(duì)應(yīng)的飲食量并記錄;飲水量每天20:00給水500ml,次日20:00量剩余水量,計(jì)算得出IOOg體重相對(duì)應(yīng)的飲水量并記錄;尿量造模第一天記錄好給的干墊料重量,第二天按規(guī)定時(shí)間稱含有尿液及大便的濕墊料的重量并記錄,然后在恒溫鼓風(fēng)干燥箱100°C下2小時(shí)烘干后再次稱重,計(jì)算各組尿量;大便量計(jì)算IOOg體重相對(duì)應(yīng)的大便量并記錄。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種維醫(yī)異常黏液質(zhì)證侯、病證動(dòng)物模型的造模方法、模型、反證和綜合評(píng)價(jià)方法,屬維吾爾醫(yī)學(xué)男科領(lǐng)域,異常黏液質(zhì)證侯動(dòng)物模型的造模方法,成模后予以再分組、反證并綜合評(píng)價(jià)。方法為將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為對(duì)照組和造模組;對(duì)照組于常規(guī)環(huán)境中以常規(guī)飲食飼養(yǎng);造模組置于人工氣候箱(設(shè)定溫度6°C,濕度85%~95%)中,以濕寒性飼料飼養(yǎng),對(duì)照組和造模組均隨機(jī)飲食水;全程動(dòng)態(tài)觀測(cè)各組生物學(xué)表征與陰莖勃起功能、性行為學(xué)改變。本發(fā)明具有可靠的、可行的,并具有良好的重復(fù)性與科學(xué)性,并可用于維醫(yī)異常黏液質(zhì)證與異常黏液質(zhì)陽(yáng)痿病證的生物學(xué)基礎(chǔ)研究和藥物干預(yù)研究。
文檔編號(hào)A61D7/00GK102845365SQ20111025964
公開(kāi)日2013年1月2日 申請(qǐng)日期2011年9月5日 優(yōu)先權(quán)日2011年9月5日
發(fā)明者哈木拉提·吾甫爾, 阿地力江·伊明 申請(qǐng)人:新疆醫(yī)科大學(xué)
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