專利名稱：一種制備金針菇液體菌種的簡易方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種金針菇液體菌種的制備，特別是公開一種采用簡單設(shè)備進(jìn)行金針菇液體菌種快速培養(yǎng)的方法，適用于菇農(nóng)進(jìn)行金針菇液體菌種的批量生產(chǎn)。
背景技術(shù)：
金針菇(Flammulina velutipes)不僅含有蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素、礦質(zhì)元素等多種營養(yǎng)物質(zhì)，具有營養(yǎng)功能，而且，富含多糖、多肽、生物堿、苷類、蒜菇素、金針菇原素、冬菇素等多種生理活性物質(zhì)，具有保健、防病抗癌功能，還可促進(jìn)兒童健康成長和智力發(fā)育。利用金針菇生產(chǎn)保健食品、功能食品已為世人矚目。隨著國內(nèi)外市場對金針菇產(chǎn)品需求的增長，其生產(chǎn)方式由傳統(tǒng)的固體栽培、季節(jié)性生產(chǎn)模式，逐漸向設(shè)施化、工廠化、周年化、規(guī)?；a(chǎn)發(fā)展。生產(chǎn)方式的變革使得采用制備的金針菇液體菌種栽培子實體成為發(fā)展趨勢。但是金針菇子實體的栽培具有某種特殊性，相對于細(xì)菌、霉菌等微生物發(fā)酵產(chǎn)品的生產(chǎn)而言，發(fā)酵周期長、商品價值也不太高。如果建立工業(yè)微生物發(fā)酵生產(chǎn)設(shè)備來進(jìn)行其液體菌種生產(chǎn)，技術(shù)要求高、設(shè)備利用率低、投資大，光配套的水、電、氣、汽設(shè)備就需要幾十萬元以上的資金，從生產(chǎn)成本來看不合算。然而液體菌種的生產(chǎn)有其先進(jìn)的地方，潛在著明顯的優(yōu)勢，因此尋找投資少、適合個體菇農(nóng)使用的金針菇液體菌種的簡易制備方法具有現(xiàn)實意義，簡便的液體菌種培養(yǎng)方法成為關(guān)注的熱點ο

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是針對上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種制備金針菇液體菌種的簡易方法，一種利用培養(yǎng)微生物的常規(guī)設(shè)備進(jìn)行金針菇液體菌種制備的方法， 可克服微生物液體深層培養(yǎng)設(shè)備昂貴、操作復(fù)雜的缺陷，便于菇農(nóng)進(jìn)行金針菇液體菌種的
批量生產(chǎn)。為了解決上述現(xiàn)有技術(shù)問題，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是一種制備金針菇液體菌種的簡易方法，該方法為采用無菌操作法將制備的金針菇菌絲體懸液接種至裝有滅菌的液體菌種培養(yǎng)基的三角瓶中，三角瓶中培養(yǎng)基裝量為30-50%，懸液接種量為10-15%， 然后將三角瓶放置在置于25-26°C恒溫培養(yǎng)箱中的磁力攪拌器上，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速為180-200轉(zhuǎn)/ 分，2516°C恒溫培養(yǎng)7-9天，形成的黃色小菌球(見圖幻即為液體菌種。上述金針菇菌絲體懸液的制備方法為微生物的基本操作方法，為現(xiàn)有技術(shù)，是將保藏的金針菇菌種用PDA固體培養(yǎng)基進(jìn)行試管斜面培養(yǎng)，試管大小為ISOmmX 18mm， 2516°C恒溫培養(yǎng)6-7天，待形成豐滿的白色菌絲，無雜菌生長后，加入無菌生理鹽水，用刮鏟刮下菌絲體，制成菌絲體懸液，其中，無菌生理鹽水的加入量為每ISOmmX 18mm的試管制備的斜面菌種加無菌生理鹽水8-12ml ；上述金針菇液體菌種培養(yǎng)基的配制按常規(guī)方法配制，每升含可溶性淀粉40g、 蛋白胨5g、七水硫酸鎂0. 5g、磷酸二氫鉀lg、葡萄糖10g、維生素BIO. 05mg、及維生素B20. 05mg, !1值6.8。上述提及的液體菌種培養(yǎng)基的滅菌是指將配制的培養(yǎng)基采用不銹鋼手提式壓力滅菌鍋于121°C滅菌30分鐘。采用本發(fā)明方法培養(yǎng)的液體菌種與常規(guī)培養(yǎng)的固體菌種進(jìn)行栽培試驗以棉籽殼為主要原料，按常規(guī)方法制備栽培袋，采用熟料袋栽法進(jìn)行菌種栽培試驗。每袋裝培養(yǎng)料干重400g，滅菌后，分為2組，在無菌條件下，一組接種本發(fā)明方法培養(yǎng)的液體菌種，每袋接種量5%，另一組接種常規(guī)培養(yǎng)的固體菌種，每袋接種18-20g。其栽培流程如下拌料一裝袋一消毒滅菌——接種——菌絲培養(yǎng)——搔菌一出菇一催菇生長一采收。 栽培過程中首先將培養(yǎng)溫度控制在18 20°C。濕度控制在70% 80%，并定期進(jìn)行通風(fēng)換氣。菌絲長滿袋后分開培養(yǎng)(因各袋菌絲生長情況不一樣)。長滿后調(diào)節(jié)室內(nèi)溫度13 14°C、相對濕度85% 90%進(jìn)行培養(yǎng)。待子實體萌發(fā)后，菌蓋直徑為Imm左右、柄長為3 5cm時，將栽培袋移入室溫為4°C的控制室，進(jìn)行遮光處理。當(dāng)菌柄長12 15cm。 菌蓋0.5 Icm時即可采收。觀測記錄栽培袋內(nèi)菌絲生長及出菇情況，并統(tǒng)計頭潮菇產(chǎn)量、總產(chǎn)量、出菇時間、 記錄菌柄菌蓋直徑及測定生物學(xué)效率。(生物學(xué)效率=子實體鮮重/培養(yǎng)料干重X100%)。 結(jié)果見下表1 表1本發(fā)明方法培養(yǎng)的液體菌種與常規(guī)培養(yǎng)的固體菌種的栽培數(shù)據(jù)對照表
權(quán)利要求
1.一種制備金針菇液體菌種的簡易方法，其特征在于該方法為采用無菌操作法將制備的金針菇菌絲體懸液接種至裝有滅菌的液體菌種培養(yǎng)基的三角瓶中，三角瓶中培養(yǎng)基體積裝量為30-50%，懸液接種量為10-15%，然后將三角瓶放置在置于25-26°C恒溫培養(yǎng)箱中的磁力攪拌器上，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速為180-200轉(zhuǎn)/分，25-26°C恒溫培養(yǎng)7-9天，形成的黃色小菌球即為液體菌種。
2.如權(quán)利要求1所述的一種制備金針菇液體菌種的簡易方法，其特征在于所述金針菇菌絲體懸液的制備方法是將保藏的金針菇菌種用PDA固體培養(yǎng)基進(jìn)行試管斜面培養(yǎng)， 2516°C恒溫培養(yǎng)6-7天，待形成豐滿的白色菌絲，無雜菌生長后，加入無菌生理鹽水，用刮鏟刮下菌絲體，制成菌絲體懸液，其中，無菌生理鹽水的加入量為每ISOmmX 18mm的試管制備的斜面菌種加無菌生理鹽水8-12ml。
3.如權(quán)利要求1所述的一種制備金針菇液體菌種的簡易方法，其特征在于所述液體菌種培養(yǎng)基每升含可溶性淀粉40g、蛋白胨5g、七水硫酸鎂0. 5g、磷酸二氫鉀lg、葡萄糖 10g、維生素 BIO. 05mg、及維生素 B20. 05mg, pH 值 6. 8。
全文摘要
一種制備金針菇液體菌種的簡易方法，是采用無菌操作法將制備的菌絲體懸液接種至裝有滅菌的液體菌種培養(yǎng)基的三角瓶中，然后將三角瓶放置在置于恒溫培養(yǎng)箱中的磁力攪拌器上進(jìn)行恒溫培養(yǎng)，形成的黃色小菌球即為液體菌種。本發(fā)明利用培養(yǎng)微生物的常規(guī)設(shè)備進(jìn)行金針菇液體菌種的制備，便于菇農(nóng)進(jìn)行金針菇液體菌種的批量生產(chǎn)；以液體菌種代替固體菌種進(jìn)行金針菇子實體的栽培，可以縮短發(fā)菌時間、降低生產(chǎn)成本、提高生產(chǎn)效率，滿足市場的大量需求。
文檔編號A01G1/04GK102349416SQ20111026492
公開日2012年2月15日 申請日期2011年9月8日 優(yōu)先權(quán)日2011年9月8日
發(fā)明者劉紅, 勒磊, 陳冬純, 陳力力 申請人:湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)