專利名稱：一種抗莖點(diǎn)霉病菌和菌核病菌的中藥組合物、制備方法及應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物農(nóng)藥技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種抗莖點(diǎn)霉病菌和菌核病菌的中藥組合物，以及在制備抗莖點(diǎn)霉病菌和菌核病菌生物制劑中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
莖點(diǎn)霉屬真菌iphoma)屬半知菌綱、殼霉科。它分布廣泛，能侵染多種植物，是引起很多植物斑病、枯病的主要病原真菌。張劍斌等發(fā)現(xiàn)莖點(diǎn)霉是杜松赤枯病病原菌之一 ；G. Bohar等發(fā)現(xiàn)莖點(diǎn)霉是引起豚草屬葉斑病的病原菌；A. Garibaldi等報(bào)道了莖點(diǎn)霉引起杰克曼鐵線蓮發(fā)??；V. Gavrilovic等報(bào)道了莖點(diǎn)霉引起歐洲酸櫻桃發(fā)病；S. G. Bobev等首次報(bào)道莖點(diǎn)霉是藥用水蘇屬植物的病原菌；C. R. Hollingsworth等報(bào)道莖點(diǎn)霉是紫花苜蓿褐根腐病的病原菌?？梢?，莖點(diǎn)霉在世界各地不同種類的植物上均可引起病害。國內(nèi)外對于莖點(diǎn)霉的研究涉及鐵線蓮、歐洲酸櫻桃、紫花苜蓿、黃瓜、桑樹等植物，對于桑樹，莖點(diǎn)霉病菌主要位于桑枝上，是使桑樹莖干產(chǎn)生斑、枯病癥的主要致病菌，最近也有文章報(bào)道， 桑莖點(diǎn)霉病菌也作用于桑椹，是桑椹的致病菌之一。對于由莖點(diǎn)霉屬真菌引起的葉斑、莖枯、黒莖等病害，其主要防治方法為化學(xué)防治，主要藥劑包括50%多菌靈可濕性粉劑500-800倍液、50%托布津可濕性粉劑500-800倍液、70%代森錳鋅600-800倍液、波爾多液、75%百菌清500-800倍液、1 1 160波爾多液、30%氧氯化銅600-800倍液、75%百菌清可濕性粉劑500-600倍液等。但這些防治方法會(huì)導(dǎo)致化學(xué)藥劑大量殘留于農(nóng)作物，對環(huán)境造成污染，對人體，牲畜等產(chǎn)生危害。中藥因具有資源豐富，殘留少，副作用小等特點(diǎn)，利用中藥提取物進(jìn)行植物病害的防治具有高效、綠色、環(huán)保等化學(xué)藥品無法比擬的優(yōu)勢。但到目前為止，尚無有關(guān)利用中草藥防治莖點(diǎn)霉病菌和菌核病菌的研究報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
鑒于現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷，本發(fā)明旨在提供一種抗莖點(diǎn)霉病菌和菌核病菌的中藥組合物。本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供一種該中藥組合物制劑的制備方法。本發(fā)明還有一個(gè)目的在于提供該中藥組合物制劑在制備抗植物莖點(diǎn)霉病菌和菌核病菌生物制劑中的應(yīng)用。本發(fā)明的目的是通過下述方式實(shí)現(xiàn)的
本發(fā)明所述的一種抗莖點(diǎn)霉病菌和菌核病菌的中藥組合物，含有活性成分秦皮或其提取物以及活性成分白蘚皮或其提取物，其質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為秦皮或其提取物30%-90%，白蘚皮或其提取物10%-70%。進(jìn)一步，本發(fā)明所述的活性成分較佳的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為秦皮或其提取物70%_90%， 白蘚皮或其提取物10%-30%。
更進(jìn)一步，本發(fā)明所述的活性成分最佳的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為秦皮或其提取物85%，白蘚皮或其提取物15%。本發(fā)明所述的一種抗莖點(diǎn)霉病菌和菌核病菌的中藥組合物制劑，制備方法如下
(1)按比例稱取秦皮，研細(xì)成粉，按W:ν=ι :Γι :10的比例加入質(zhì)量比濃度為2(Γ90%的乙醇，浸泡24 h，超聲波提取4-8 h，抽濾；殘?jiān)僦貜?fù)提取2、次，合并抽提液，濃縮得到含水量為20%的秦皮提取物；
(2)按比例稱取白蘚皮，研細(xì)成粉，按W:V=1 :Γ 10的比例加入質(zhì)量比濃度為2(Γ90% 的乙醇，浸泡24 h，超聲波提取4-8 h，抽濾；殘?jiān)僦貜?fù)提取2、次，合并抽提液，濃縮得到含水量為20%的白蘚皮提取物；
(3)將步驟(1)所得的秦皮提取物與步驟(2)所得的白蘚皮提取物按前述比例混勻，按常規(guī)加入輔料，并進(jìn)行劑型化設(shè)計(jì)，即得本發(fā)明所述的中藥組合物制劑。秦皮是我國民間常用中藥。秦皮，別名岑皮(《淮南萬畢術(shù)》)、涔皮(《別錄》)、樊槻皮(陶弘景)、秦白皮(《藥性論》)、蠟樹皮(《中藥志》)、苦榴皮(《全展選編·皮膚病》)等， 為木犀科植物苦櫪白賭樹廠rari/ws rhynchophylla "a/ ce、白賭樹/^ari/ws chinensis Roxb.、尖葉白賭豐對/7Tarizw1S szaboana Lingelsh.或宿柱白賭豐對/7Tarizw1S styIosa Lingelsh.的干燥枝皮或干皮，主產(chǎn)陜西、河北、河南、山西、遼寧、吉林等地。秦皮中主要成分為香豆素類(秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮苷、秦皮素宿柱白蠟苷、6，7- 二甲氧基-8-羥基香豆素等)，此外，還有酚型、皂苷和鞣質(zhì)等。秦皮不但資源豐富、價(jià)格低廉，還具有諸多的藥理活性，如消炎、鎮(zhèn)痛；利尿；治療細(xì)菌性痢疾、慢性支氣管炎等。此外，通過大量的實(shí)驗(yàn)證明， 秦皮還具有顯著的抗真菌作用。白蘚皮，別名白蘚皮、北鮮皮、八股牛、山牡丹、羊鮮草等，多年生草本，全株有特異的刺激味，為蕓香科植物白鮮dasycarpus Turcz.的干燥根皮，主產(chǎn)遼寧、河北、 四川、江蘇、浙江、安徽等地，也是民間常用中藥。白蘚皮其根含白鮮堿、白鮮內(nèi)酯、谷甾醇、 黃柏酮酸、胡蘆巴堿、膽堿、涔皮酮。尚含菜油留醇、茵芋堿、Y-崖椒堿、白鮮明堿。地上部分含有補(bǔ)骨脂素和花椒毒素等。白蘚皮在分布廣泛的同時(shí)，同樣具有廣泛的藥理活性，如清熱燥濕、祛風(fēng)解毒，可用于濕熱瘡毒、黃水淋漓、濕疹、風(fēng)疹、疥癬瘡癩、風(fēng)濕熱痹、黃疸尿赤等，另外，白蘚皮還具有不錯(cuò)的抗菌、抗癌作用。雖然兩種中藥材均有一定的抑菌、抗菌效用，但各自起作用的菌的種類不盡相同， 對于有植物莖點(diǎn)霉病菌和菌核病菌參與、多種病原菌共同導(dǎo)致的菌核病，以及莖枯、黒莖等斑、枯病癥，單一用藥的效果顯然不夠。而本發(fā)明含有以上兩種中藥材的多種活性成分，在抑菌、抗菌過程中各有效成分相互配合、相互補(bǔ)充，協(xié)同作用，其藥效已不僅僅是兩種藥的簡單疊加。具有顯著的抑菌、 抗菌功效，適用于抑制植物莖點(diǎn)霉病菌和植物菌核病菌。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，相同的藥物濃度下，本發(fā)明中藥組合物制劑較兩種藥物單獨(dú)使用時(shí)的抑菌作用更強(qiáng)、更明顯；在劑量相同的情況下，本發(fā)明對植物莖點(diǎn)霉病菌和植物菌核病菌的抑制作用明顯強(qiáng)于活性成分單獨(dú)給藥 (詳見實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證部分)。本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)
(1)本中藥組合物制劑具有廣譜抗菌作用，對金黃色葡萄球菌、福氏痢疾桿菌、宋內(nèi)氏痢疾桿菌有顯著的抑制作用，對莖點(diǎn)霉病菌和菌核病菌抑菌率可達(dá)到90%以上。
(2)由于秦皮與白蘚皮二者均系常用藥材，成分明確、質(zhì)量可控，故本發(fā)明的中藥組合物制劑效果確切、無毒副作用，對人和其它牲畜等無不良影響。(3)藥效長本發(fā)明產(chǎn)品是中草藥提取物，對光和溫度具有較強(qiáng)的穩(wěn)定性，可以保持較長時(shí)間的藥效。(4)改良土壤效果顯著本發(fā)明的中藥組合物制劑的生產(chǎn)原料為植物，對土壤改良效果顯著，它能在很大程度上減少土壤中的病原菌，從而給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)實(shí)現(xiàn)增產(chǎn)增收打下了良好的物質(zhì)基礎(chǔ)。
(5)提高農(nóng)業(yè)投入產(chǎn)出效率本制劑生產(chǎn)原料來源廣泛，生產(chǎn)制作成本低廉。(6)本發(fā)明還可克服現(xiàn)有化學(xué)藥物存在的易引發(fā)病原菌耐藥性、導(dǎo)致化學(xué)試劑殘留超標(biāo)、不符合無公害要求等問題。本發(fā)明中藥組合物的最終形態(tài)可以是將有效藥用成分與藥物可以接受的輔料混合，再用水調(diào)兌成方便使用的藥劑形式。以下實(shí)驗(yàn)結(jié)果及其闡述均以桑樹莖點(diǎn)霉病菌和桑椹肥大性菌核病菌為例本發(fā)明組合物抗菌劑的使用方法如下
使用時(shí)，將提取物按0. 59Γ10. 0%的質(zhì)量比例混合于水中，即0. 5^10 ml抗菌劑混合在 99. 5 90ml水中；噴灑劑量按每5天每棵樹10(T500ml噴施。為驗(yàn)證本發(fā)明的抑菌、殺菌效果，發(fā)明人做了大量的試驗(yàn)將本發(fā)明的藥物與兩味主藥單獨(dú)使用時(shí)的藥效情況做了比較，發(fā)現(xiàn)本發(fā)明中藥組合物對桑莖點(diǎn)霉病菌和桑椹肥大性菌核病菌的抑制作用明顯加強(qiáng)，可以很好的用于莖枯、黒莖等斑、枯病癥以及桑椹菌核病的防治，是一種應(yīng)用前景良好的生物制劑。通過大量試驗(yàn)、預(yù)實(shí)驗(yàn)的篩選，分別從實(shí)驗(yàn)室平板實(shí)驗(yàn)和田間試驗(yàn)兩方面對兩種藥物和本發(fā)明中藥組合物(以85%的秦皮及其提取物和15%的白蘚皮及其提取物為例)的抑菌效果，以及他們之間存在的效果差異進(jìn)行比較。1、實(shí)驗(yàn)室平板實(shí)驗(yàn)
采用藥基混合法進(jìn)行試驗(yàn)。將28. 5 mL經(jīng)滅菌的半固體培養(yǎng)基和1. 5 mL中藥提取液混勻，分裝于3個(gè)培養(yǎng)皿中，冷卻凝固，接種直徑6 mm的供試菌落于混合培養(yǎng)基正中培養(yǎng)。 分別培養(yǎng)2 d、4 d后目測觀察，采用十字交叉法測量菌絲生長直徑，以菌絲生長速率法測定各種中草藥提取物對病原菌菌絲生長的抑制率。每處理重復(fù)3次，同時(shí)設(shè)對照組。根據(jù)下列公式計(jì)算抑制率抑菌率=(對照菌落直徑一處理菌落直徑)/ (對照菌落直徑一接種菌落直徑)X 100%。表1本發(fā)明中藥組合物與單味藥物的抑菌效果對比
權(quán)利要求
1.一種抗莖點(diǎn)霉病菌和菌核病菌的中藥組合物，其特征在于含有活性成分秦皮或其提取物以及活性成分白蘚皮或其提取物，其質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為秦皮或其提取物30%-90%，白蘚皮或其提取物10%-70%。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種抗莖點(diǎn)霉病菌和菌核病菌的中藥組合物，其特征在于， 所述活性成分的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為秦皮或其提取物70%-90%，白蘚皮或其提取物10%-30%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種抗莖點(diǎn)霉病菌和菌核病菌的中藥組合物，其特征在于， 所述活性成分的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為秦皮或其提取物85%，白蘚皮或其提取物15%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的一種抗莖點(diǎn)霉病菌和菌核病菌的中藥組合物，其特征在于，其制劑可有效防治植物菌核病，對引發(fā)菌核病、莖枯、黒莖等植物病害的兩種致病菌莖點(diǎn)霉病菌和菌核病菌均有顯著的抑制作用。
5.一種抗莖點(diǎn)霉病菌和菌核病菌的中藥組合物制劑，其特征在于制備方法如下(1)按比例稱取秦皮，研細(xì)成粉，按W:ν=1 :Γ :10的比例加入質(zhì)量比濃度為2(Γ90%的乙醇，浸泡24 h，超聲波提取4-8 h，抽濾；殘?jiān)僦貜?fù)提取2、次，合并抽提液，濃縮得到含水量為20%的秦皮提取物；(2)按比例稱取白蘚皮，研細(xì)成粉，按W:V=1 :Γ 10的比例加入質(zhì)量比濃度為2(Γ90% 的乙醇，浸泡24 h，超聲波提取4-8 h，抽濾；殘?jiān)僦貜?fù)提取2、次，合并抽提液，濃縮得到含水量為20%的白蘚皮提取物；(3)將步驟(1)所得的秦皮提取物與步驟(2)所得的白蘚皮提取物按前述比例混勻，按常規(guī)加入輔料，并進(jìn)行劑型化設(shè)計(jì)，即得本發(fā)明所述的中藥組合物制劑。
全文摘要
一種抗莖點(diǎn)霉病菌和菌核病菌的中藥組合物，含有活性成分秦皮或其提取物以及活性成分白蘚皮或其提取物，其質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為秦皮或其提取物30%-90%，白蘚皮或其提取物10%-70%。其制劑經(jīng)乙醇浸泡、超聲波提取、萃取、濃縮等步驟制備，對莖點(diǎn)霉病菌和菌核病菌抑菌率可達(dá)到90%以上，具有效果確切、藥效長、無毒副作用，生產(chǎn)制作成本低廉等優(yōu)點(diǎn)，可克服現(xiàn)有化學(xué)藥物存在的易引發(fā)病原菌耐藥性、導(dǎo)致化學(xué)試劑殘留超標(biāo)、不符合無公害要求等問題。
文檔編號(hào)A01N65/36GK102379316SQ201110306408
公開日2012年3月21日 申請日期2011年10月11日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月11日
發(fā)明者徐立, 梁楊 申請人:西南大學(xué)