專利名稱：一種利用黃酒糟作為液體培養(yǎng)基來生產(chǎn)藥用或藥食兼用菌絲體的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種利用黃酒糟作為液體培養(yǎng)基來生產(chǎn)藥用或藥食兼用菌絲體的方法。
背景技術(shù)：
黃酒糟其主要成分是在黃酒釀造發(fā)酵后的糯米殘留物以及大麥殘留物，其為在不能被釀酒酵母群完全利用的情況下殘留下來的物質(zhì)，經(jīng)過檢測黃酒糟中含有豐富的纖維素、蛋白質(zhì)、大分子糖類物質(zhì)等基礎(chǔ)生長物質(zhì)以及一些微量元素。每年僅紹興地區(qū)黃酒生產(chǎn)廠家的黃酒糟產(chǎn)量在4. 5萬噸左右，大多數(shù)廠家的做法是將黃酒糟廉價賣給周邊的養(yǎng)殖場直接作為雞鴨等禽畜的飼料，并且價格非常低，如供往稍遠(yuǎn)一點(diǎn)的地區(qū)還不抵運(yùn)費(fèi)，另外有一部分企業(yè)將黃酒糟再次發(fā)酵制白酒，消耗大量的能源及人力，同時，釀造后的殘渣更難以出售利用，往往是作為廢棄物進(jìn)行處理，如處理不當(dāng)則易造成環(huán)境的污染。猴頭菇是一類具有很高藥用價值的藥食兼用的真菌，它們在提高人體免疫功能， 滋補(bǔ)、抗衰老以及在預(yù)防、抑制和治療等方面的作用已經(jīng)引起各界的廣泛關(guān)注。中醫(yī)認(rèn)為， 猴頭菇性平味甘，有利五臟、助消化、滋補(bǔ)身體等功效。20世紀(jì)70年代以來，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)陸續(xù)證明猴頭菌有良好的藥用價值，臨床應(yīng)用表明，猴頭菇可治療消化不良、胃潰瘍、胃竇炎、 胃痛、胃脹及神經(jīng)衰弱等疾病。但如果是輕度神經(jīng)衰弱患者，食用猴頭菇不失為較好的輔助治療。在臨床應(yīng)用上面，采用猴頭菇進(jìn)行治療，對于輕度或是重度神經(jīng)衰弱均可取得較為顯著理想的療效?？茖W(xué)研究表明，靈芝的藥理成分非常豐富，其中有效成份可分為十大類，包括靈芝多糖、靈芝多肽、三萜類、16種氨基酸(其中含有七種人體必需氨基酸)、蛋白質(zhì)、留類、甘露醇、香豆精苷、生物堿、有機(jī)酸(主含延胡索酸)，以及微量元素Ca、Fe、P、Mn、Zn、Ge、Se等。 靈芝對人體具有雙向調(diào)節(jié)作用，所治病種，涉及心腦血管、消化、神經(jīng)、內(nèi)分泌、呼吸、運(yùn)動等各個系統(tǒng)，尤其對腫瘤、肝臟病變、失眠以及衰老的防治作用十分顯著。鳳尾菇的營養(yǎng)十分豐富，干物質(zhì)中含蛋白質(zhì)高達(dá)21. 2 %，并含有人體所必需的八種氨基酸，其含量占所有氨基酸總量的35 %以上。鮮鳳尾菇每百克含維生素C高達(dá)33毫克，有助于提高人體免疫功能。還含有維生素BI、B2、尼克酸、多種礦物質(zhì)。另據(jù)最近研究證實(shí)，鳳尾菇含有的一些生理活性物質(zhì)，具有誘發(fā)干擾素的合成，提高人體免疫功能，具有防癌、抗癌的作用。鳳尾菇含脂肪、淀粉很少，是糖尿病人和肥胖癥患者的理想食品，還有降低膽固醇的作用。人們稱為“健康食品”、“安全食品”。有鑒于此，本發(fā)明提供了一種通過采用有機(jī)可誘導(dǎo)因子利用黃酒糟作為液體培養(yǎng)基來生產(chǎn)藥用或藥食兼用菌的方法，在低碳環(huán)保的基礎(chǔ)上進(jìn)一步提升了黃酒糟的經(jīng)濟(jì)價值和社會價值。

發(fā)明內(nèi)容
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為了解決上述問題，本發(fā)明的目的在于提供了一種利用黃酒糟作為液體培養(yǎng)基來生產(chǎn)藥用或藥食兼用菌絲體的方法，利用本發(fā)明生產(chǎn)的菌絲體，以及菌絲體開發(fā)的后續(xù)產(chǎn)品包括子實(shí)體，對人體安全，為綠色有機(jī)產(chǎn)品；其生產(chǎn)成本更低，處理黃酒糟的周期更短，效益更高，且二氧化碳排放低，同時可以開發(fā)低脂肪、高蛋白的，富含食用纖維素的保健食品及保健品。為達(dá)到上述的目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案，
一種利用黃酒糟作為液體培養(yǎng)基生產(chǎn)藥用或藥食兼用菌絲體的方法，包括如下步驟 I)制備培養(yǎng)基用黃酒糟；2)配制含有有機(jī)誘導(dǎo)因子的黃酒糟液體培養(yǎng)基；3)將馴化復(fù)壯后的菌種接種到黃酒糟液體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)來生產(chǎn)藥用或藥食兼用菌絲體；其中加入的有機(jī)物誘導(dǎo)因子為土豆汁玉米汁或玉米漿麥芽汁；其比例為(6 9): (I 2): (O. 2 0.8)。視其質(zhì)量情況而定。所述的有機(jī)誘導(dǎo)因子的質(zhì)量比為土豆汁玉米汁或玉米漿麥芽汁=8:1. 5:0. 5 ; 且采用一級發(fā)酵、二級或三級發(fā)酵中的一種來生產(chǎn)。所述的步驟I)中黃酒糟采用黃酒釀造后期壓榨后得到的發(fā)酵物的固體殘渣，經(jīng)過粉碎再發(fā)酵，使之利用釀酒酵母二次充分發(fā)酵產(chǎn)酒精后，利用甑鍋將酒精提吊出來，剩下的殘渣就為黃酒糟，再利用自然日曬法或熱烘干法，將水分降低到8 10%以下待用。所述的步驟2)中有機(jī)誘導(dǎo)因子土豆汁、玉米汁或玉米漿、麥芽汁分別選用馬鈴薯、 玉米粉(30 50目)(或玉米漿)、麥芽作為原料，加水煮沸后過濾得到濃縮土豆汁、玉米汁或玉米漿、麥芽汁(也可直接在市面上購買得到)。所述的步驟2)中黃酒糟液體培養(yǎng)基配方為以所配液體培養(yǎng)基的量(水)為基準(zhǔn) (g)，黃酒糟(干)為3 7% ;麥芽糖I I. 5% ;麩皮O. 5 O. 6% ;磷酸二氫鉀O. 25 O. 3% ； 七水硫酸鎂O. 25 O. 3%。有機(jī)可誘導(dǎo)因子3 5%。pH為5 7。所述的步驟3)中菌種選用猴頭菇、鳳尾菇和靈芝的菌種并進(jìn)行復(fù)壯；(菌種由中科院微生物所單位提供)復(fù)壯的過程主要是將低溫保藏的菌種通過斜面培養(yǎng)后恢復(fù)其活力。菌種的接種量為2 3% ;所述的培養(yǎng)環(huán)境為前期菌絲體的生長采用恒溫遮光箱式搖床及培養(yǎng)罐培養(yǎng)，其轉(zhuǎn)速為160轉(zhuǎn)/min，培養(yǎng)溫度為27. 5°C，培養(yǎng)周期為72hours 92hours 天即可得到菌絲體產(chǎn)品。亦可采用二級三級發(fā)酵培養(yǎng)將搖瓶種子以I 5%量接入500 升 I噸種子罐培養(yǎng)；24 30hours后移入二級發(fā)酵罐發(fā)酵48hours ;或者經(jīng)過二次種子放大，移入5 10噸的三級發(fā)酵罐中培養(yǎng)45 50hours，形成菌絲體產(chǎn)品。本發(fā)明的有益效果是本發(fā)明在利用工業(yè)生物微生物技術(shù)方面，對黃酒產(chǎn)業(yè)中的下游產(chǎn)物資源的充分利用和減排創(chuàng)效方面有著深遠(yuǎn)的前景。本發(fā)明利用黃酒糟生產(chǎn)藥用或藥食兼用真菌的方法，特別是將已經(jīng)進(jìn)過2次發(fā)酵，充分被提取酒精后剩下的固體殘洛—— 黃酒糟做技術(shù)處理后，轉(zhuǎn)化為社會經(jīng)濟(jì)價值更高的產(chǎn)品的方法。通過選擇適宜在黃酒糟生長的應(yīng)用微生物，根據(jù)黃酒糟的成分，采用科學(xué)的方法適當(dāng)補(bǔ)充藥食兼用真菌培養(yǎng)所需的養(yǎng)分。同時進(jìn)行菌種馴化，不同發(fā)酵配方的研究，添加有機(jī)誘導(dǎo)因子后，減少培養(yǎng)發(fā)酵的時間，培養(yǎng)得到的藥用菌(藥食兼用菌)既可以充分降解得到黃酒糟中的纖維素、大分子蛋白質(zhì)，同時得到的菌絲體可以直接形成產(chǎn)品，同時進(jìn)一步培養(yǎng)得到的子實(shí)體也是可以形成產(chǎn)品。同時提高酒糟培養(yǎng)基的飼料蛋白含量，提升黃酒糟作為飼料的價值，實(shí)現(xiàn)黃酒糟的雙向利用，最終提升黃酒糟的綜合價值，變廢為寶，實(shí)現(xiàn)黃酒行業(yè)的環(huán)境友好可持續(xù)健康發(fā)展。
綜上所述，利用本發(fā)明生產(chǎn)的菌絲體對人體安全，為綠色有機(jī)產(chǎn)品；其生產(chǎn)成本更低，處理黃酒糟的速度更快，效益更高，且二氧化碳排放低，同時可以開發(fā)低脂肪、高蛋白的，富含食用纖維素的保健食品及保健品。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例I
本實(shí)施例的一種利用黃酒糟作為液體培養(yǎng)基來生產(chǎn)藥用或藥食兼用菌絲體的方法，包括如下步驟
I)制備培養(yǎng)基用黃酒糟
(I)、黃酒釀造后期壓榨后得到的發(fā)酵物的固體殘渣，進(jìn)過壓榨后成為水分含量在35% 左右的糟板。(2)、利用機(jī)械粉碎，在黃酒糟中拌入大糠，用食品級聚乙烯塑料膜覆蓋，使之利用釀酒酵母群二次充分發(fā)酵產(chǎn)酒精后，，利用甑鍋將酒精提吊出來，剩下得到水分含量在65% 左右的黃酒糟。(3)、一般情況用自然攤曬法，一般晾曬2 3天(日照)，將黃酒糟內(nèi)水分降低到 8 10%以下即可。(4)、最后將黃酒糟粉碎，過篩，顆粒細(xì)末均勻備用。2)配制含有有機(jī)誘導(dǎo)因子的黃酒糟液體培養(yǎng)基
有機(jī)誘導(dǎo)因子土豆汁、玉米汁或玉米漿、麥芽汁分別選用馬鈴薯、玉米粉、麥芽作為原料，有機(jī)誘導(dǎo)因子(土豆汁)的制作方法選用黃肉品種馬鈴薯，以IOOOg為例，去皮一稱取 lOOOg，切片一加入IOOOml水一煮沸，再煮約30min —過濾，取其濾汁。玉米汁、麥芽汁制作方法同土豆汁，然后將玉米汁、麥芽汁分別加入制好的土豆汁后磨碎過濾制成。其渣可另加入培養(yǎng)基中。本實(shí)施例有機(jī)誘導(dǎo)因子的質(zhì)量配比土豆汁玉米汁(玉米漿)麥芽汁 =8:1. 5:0. 5。亦可根據(jù)有機(jī)物的質(zhì)量做適當(dāng)?shù)恼{(diào)整比例。該有機(jī)誘導(dǎo)因子的配比隨著加入量得增加同時擴(kuò)大。本實(shí)施例黃酒糟液體培養(yǎng)基配方見表I所示。pH為6 7。液體培養(yǎng)基配置要點(diǎn)
以其配比稱取各種原料倒入杯中，加入純凈水或合格的天然水，同時不停攪拌， 使渾濁液均勻，測其pH為6 7 —以70 80ml/瓶，分裝到300ml三角瓶中，一滅菌 (121°C，O.llMPa,30min)
3)將馴化復(fù)壯后的菌種接種到黃酒糟液體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)來生產(chǎn)藥用或藥食兼用
菌；
(I)、本實(shí)施例采用母株馴化復(fù)壯的方法，即將冷藏中的猴頭菇菌種進(jìn)行斜面接種培養(yǎng)，使其恢復(fù)活力。A、斜面培養(yǎng)基制作流程取IOOOml馬鈴薯燒汁加入硫酸鎂2. 5g ;磷酸二氫鉀5g; 蔗糖20g溶解一加瓊脂15g，繼續(xù)加熱直至溶解一分裝至試管內(nèi)，約1/3處，棉塞密封一滅菌，要求121°C，30min —冷卻到一定溫度制成斜面。B、接種所需工具接種針I(yè)個；燒杯2個一個用來裝冷卻用酒精(95%)，一個裝垃圾；操作人數(shù)2人至數(shù)人。
C、培養(yǎng)采用隔水式恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)，其培養(yǎng)溫度為24°C。待菌絲長滿整個斜面即可用。(2)、上述步驟2)中的液體培養(yǎng)基滅菌后冷卻到40°C以下，開始接種，接種方法同母株復(fù)壯過程中的接種方法，將試管斜面菌種接到裝有液體培養(yǎng)基的三角瓶中，接種量為 I 2% ；
(3)培養(yǎng)
主要采用氣浴恒溫微光箱式搖床振蕩培養(yǎng)，避光。設(shè)備國產(chǎn)氣浴恒溫振蕩器，搖床頻率160轉(zhuǎn)/min ;溫度27. 5°C。培養(yǎng)3天后，菌絲生長情況良好，基本已經(jīng)布滿整個培養(yǎng)瓶。將搖瓶種子以I 5%量接入500升 I噸種子罐培養(yǎng)。30小時后移入二級發(fā)酵罐發(fā)酵30 48小時?；蛘呓?jīng)過二次種子放大，移入5-10噸的三級發(fā)酵罐中培養(yǎng)48 50小時，形成菌絲體產(chǎn)品。發(fā)酵罐的裝量為容量的65 70%。得到猴頭菇菌絲體鮮重為9. 42g/ L0實(shí)施例2
本實(shí)施例具體操作方法同實(shí)施例1，不同之處在于，本實(shí)施例采用鳳尾菇菌種，且加入的有機(jī)誘導(dǎo)因子為土豆汁、玉米汁或玉米漿、麥芽汁；其質(zhì)量比為土豆汁玉米汁或玉米漿麥芽汁=6:1:0. 2。黃酒糟液體培養(yǎng)基配方見表2所示。收獲情況得到鳳尾菇菌絲體鮮重為11. 36g/L。實(shí)施例3
本實(shí)施例具體操作方法同實(shí)施例1，不同之處在于，本實(shí)施例采用靈芝菌種，且加入的有機(jī)誘導(dǎo)因子為土豆汁、玉米汁或玉米漿、麥芽汁；其質(zhì)量比為土豆汁玉米汁或玉米漿 麥芽汁=9:2:0. 8。黃酒糟液體培養(yǎng)基配方見表3所示。收獲情況得到靈芝菌絲體鮮重為10. 22g/L。
權(quán)利要求
1.一種利用黃酒糟作為液體培養(yǎng)基來生產(chǎn)藥用或藥食兼用菌絲體的方法，其特征在于包括如下步驟1)制備培養(yǎng)基用黃酒糟；2)配制含有有機(jī)誘導(dǎo)因子的黃酒糟液體培養(yǎng)基；3)將馴化復(fù)壯后的菌種接種到黃酒糟液體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)來生產(chǎn)藥用或藥食兼用菌菌絲體；其中加入的有機(jī)誘導(dǎo)因子為土豆汁、玉米汁或玉米漿、麥芽汁；其質(zhì)量比為土豆汁玉米汁或玉米漿麥芽汁=(6 9) : (I 2): (O. 2 0.8)。
2.如權(quán)利要求I所述的一種利用黃酒糟作為液體培養(yǎng)基來生產(chǎn)藥用或藥食兼用菌絲體的方法，所述的有機(jī)誘導(dǎo)因子的質(zhì)量比為土豆汁玉米汁或玉米漿麥芽汁 =8:1. 5:0. 5 ;且采用一級發(fā)酵、二級或三級發(fā)酵中的一種來生產(chǎn)。
3.如權(quán)利要求I所述的一種利用黃酒糟作為液體培養(yǎng)基來生產(chǎn)藥用或藥食兼用菌絲體的方法，其特征在于所述的步驟I)中黃酒糟采用黃酒釀造后期壓榨后得到的發(fā)酵物的固體殘渣，經(jīng)過粉碎再發(fā)酵，使之利用釀酒酵母二次充分發(fā)酵產(chǎn)酒精后，利用甑鍋將酒精提吊出來，剩下的殘渣就為黃酒糟，再利用自然日曬法或熱烘干法，將水分降低到8 10%以下待用。
4.如權(quán)利要求I所述的一種利用黃酒糟作為液體培養(yǎng)基來生產(chǎn)藥用或藥食兼用菌絲體的方法，其特征在于所述的步驟2)中有機(jī)誘導(dǎo)因子土豆汁、玉米汁或玉米漿、麥芽汁分別選用馬鈴薯、玉米粉、麥芽作為原料，加水煮沸后過濾得到濃縮土豆汁、玉米汁或玉米漿、麥芽汁。
5.如權(quán)利要求I所述的一種利用黃酒糟作為液體培養(yǎng)基來生產(chǎn)藥用或藥食兼用菌絲體的方法，其特征在于所述的步驟2)中黃酒糟液體培養(yǎng)基配方為以所配液體培養(yǎng)基的量 (水)為基準(zhǔn)(g)，黃酒糟(干)為3 7% ;麥芽糖I I. 5% ;麩皮O. 5 O. 6% ;磷酸二氫鉀O.25 O. 3% ;七水硫酸鎂O. 25 O. 3% ;有機(jī)可誘導(dǎo)因子3 5% ;pH為6 7。
6.如權(quán)利要求I所述的一種利用黃酒糟作為液體培養(yǎng)基來生產(chǎn)藥用或藥食兼用菌絲體的方法，其特征在于所述的步驟3)中菌種選用猴頭菇、鳳尾菇和靈芝的菌種；菌種的接種量為2 5% ;所述的培養(yǎng)環(huán)境為前期菌絲體的生長繁殖采用恒溫微光箱式搖床培養(yǎng)，其轉(zhuǎn)速為160轉(zhuǎn)/min，培養(yǎng)溫度為27. 5°C，培養(yǎng)周期為3 4天即可得到菌絲體產(chǎn)品，亦可擴(kuò)大培養(yǎng)將搖瓶種子以I 3%量接入500升 I噸種子罐培養(yǎng)；30小時后移入二級發(fā)酵罐發(fā)酵48小時；或者經(jīng)過二次種子放大，移入5 10噸的三級發(fā)酵罐中培養(yǎng)48 50小時， 形成菌絲體產(chǎn)品。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種利用黃酒糟作為液體培養(yǎng)基來生產(chǎn)藥用或藥食兼用菌絲體的方法，包括如下步驟1)制備培養(yǎng)基用黃酒糟；2)配制含有有機(jī)誘導(dǎo)因子的黃酒糟液體培養(yǎng)基；3)將馴化復(fù)壯后的菌種接種到黃酒糟液體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)來生產(chǎn)藥用或藥食兼用菌絲體；其中加入的有機(jī)誘導(dǎo)因子為土豆汁、玉米汁或玉米漿、麥芽汁等；均為綠色有機(jī)產(chǎn)品；其生產(chǎn)成本更低，處理黃酒糟的速度更快，效益更高，且二氧化碳排放低，同時可以開發(fā)低脂肪、高蛋白的，富含食用纖維素的保健食品及保健品。
文檔編號C05F15/00GK102584363SQ20111039255
公開日2012年7月18日 申請日期2011年12月1日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月1日
發(fā)明者倪興軍, 單之初, 吳文娟, 夏湛恩, 韋一馨 申請人:浙江塔牌紹興酒有限公司