專利名稱：一種飼用約氏乳桿菌高密度發(fā)酵培養(yǎng)基及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于乳酸菌培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種飼用約氏乳桿菌高密度發(fā)酵培養(yǎng)基及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
乳酸菌是動(dòng)物消化道中常有的正常菌，應(yīng)用該類菌研制益生菌劑的歷史最早，此菌已被廣泛的應(yīng)用于發(fā)酵食品、動(dòng)物飼料和保健食品中。約氏乳桿菌(LactcAacillus johnsonii)為乳酸菌中的一種，綜合目前關(guān)于約氏乳桿菌的文獻(xiàn)報(bào)道，其對(duì)動(dòng)物的益生功能主要體現(xiàn)在以下兩方面，一方面，約氏乳桿菌對(duì)動(dòng)物天然防御系統(tǒng)及免疫機(jī)能具有調(diào)節(jié)作用；另一方面，約氏乳桿菌表現(xiàn)出對(duì)動(dòng)物皮炎的特異性預(yù)防作用。Tanaka等發(fā)現(xiàn)，灌服約氏乳桿菌的小鼠特異性皮炎(atopic dermatitis, AD)發(fā)病率降低，同時(shí)可有效抑制小鼠表皮增生。傳統(tǒng)的靜置發(fā)酵法得到的發(fā)酵液中菌體的發(fā)酵密度較低，約氏乳桿菌活菌數(shù)在 5-10億左右，為了得到更多的活菌數(shù)，就需要增加生物反應(yīng)器的體積或增加發(fā)酵次數(shù)等，從而增加生物量的分離費(fèi)用，延長(zhǎng)生產(chǎn)周期，從而提高生產(chǎn)成本、降低生產(chǎn)效率。約氏乳桿菌目前仍難以實(shí)現(xiàn)高密度發(fā)酵，難以實(shí)現(xiàn)的主要問(wèn)題是發(fā)酵培養(yǎng)基及其發(fā)酵方法，發(fā)酵后期營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不足和代謝產(chǎn)物(主要是乳酸)積累抑制菌體生長(zhǎng)，導(dǎo)致高密度發(fā)酵難以實(shí)現(xiàn)。

發(fā)明內(nèi)容
(一)要解決的技術(shù)問(wèn)題本發(fā)明的目的是提供一種飼用約氏乳桿菌高密度發(fā)酵培養(yǎng)基。本發(fā)明的另一目的是提供該高密度發(fā)酵培養(yǎng)基在約氏乳桿菌發(fā)酵中的應(yīng)用。( 二 )技術(shù)方案本發(fā)明的目的是通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的本發(fā)明提供一種飼用約氏乳桿菌(LactcAacillus johnsonii)高密度發(fā)酵培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基的主要組分及其含量如下葡萄糖20 30g/L、胰蛋白胨10 15g/L、牛肉膏或牛肉粉6 15g/L、酵母粉5 10g/L、K2HP04 2 3g/L、CH3COONa 5 8g/L、檸檬酸鈉 2 4g/L、Mg2+水溶性化合物0. 2 0. 4g/L、Fe2+水溶性化合物0. 1 0. 2g/L和Mn2+水溶性化合物45 55mg/L。其中，所述的Mg2+水溶性化合物為MgS04、MgCl2中的任一種；所述的!^2+水溶性化合物為FeS04、FeCl2, (NH4)2Fe (SO4)2中的任一種；所述的Mn2+水溶性化合物為MnS04。本發(fā)明發(fā)酵培養(yǎng)基的配制方法如下(1)按含量分別稱取各組分，用蒸餾水溶解，其中葡萄糖單獨(dú)溶解；(2)葡萄糖115°C單獨(dú)滅菌20分鐘，其它組分裝入發(fā)酵罐中121°C滅菌30分鐘；(3)接種前通過(guò)無(wú)菌操作將葡萄糖加入發(fā)酵罐中，攪拌混勻，即得。
本發(fā)明的飼用約氏乳桿菌高密度發(fā)酵培養(yǎng)基可以應(yīng)用于約氏乳桿菌的發(fā)酵中，為最大的發(fā)揮本發(fā)明培養(yǎng)基的效果，使用本發(fā)明的培養(yǎng)基發(fā)酵約氏乳桿菌時(shí)，其發(fā)酵過(guò)程如下(1)將冷凍保存的約氏乳桿菌在MRS瓊脂平板活化三次，挑取單菌落接種于深層 MRS液體試管，37°C培養(yǎng)10小時(shí)后，以1 %接種量轉(zhuǎn)接于MRS液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)8 10小時(shí)后作為種子液；(2)配制約氏乳桿菌高密度發(fā)酵培養(yǎng)基，培養(yǎng)基降至所需溫度時(shí)，接上溶氧電極， 標(biāo)定溶氧為100% ；(3)以5% 10%的接種量將步驟(1)所得的種子液接種于步驟(2)的發(fā)酵培養(yǎng)
基中；(4)發(fā)酵，發(fā)酵過(guò)程中維持發(fā)酵液pH值為6 6.5，當(dāng)pH超過(guò)設(shè)定值時(shí)，補(bǔ)加料液； 當(dāng)PH低于設(shè)定值時(shí)，自動(dòng)流加堿性中和劑氨水、KOH、NaOH中的任一種；在溫度37 39°C、 轉(zhuǎn)速IOOrpm條件下發(fā)酵10 14小時(shí)，發(fā)酵過(guò)程不通氣或通入隊(duì)，維持溶氧小于；(5)當(dāng)補(bǔ)加料液pH不再降低或發(fā)酵液在600nm波長(zhǎng)下的吸光值不再增加時(shí)，終止發(fā)酵，即得約氏乳桿菌活菌數(shù)達(dá)KTcfu/ml以上的發(fā)酵液。其中，所述料液的主要組分及其含量如下蔗糖500g/L、蛋白胨150g/L、牛肉粉或牛肉膏150g/L、酵母膏或酵母浸粉75g/L。本發(fā)明的高密度發(fā)酵培養(yǎng)基及其發(fā)酵方法也可應(yīng)用于其它乳酸菌，但為達(dá)到最好的發(fā)明效果，優(yōu)選適用于約氏乳桿菌(LactcAacillusjohnsonii)。(三)有益效果本發(fā)明采用pH反饋控制分批補(bǔ)料發(fā)酵策略，同時(shí)降低發(fā)酵液中乳酸的濃度，從而解除乳酸的反饋抑制作用，使用本發(fā)明的高密度發(fā)酵培養(yǎng)基及其發(fā)酵方法發(fā)酵的約氏乳桿菌，菌體密度較普通發(fā)酵顯著提高，活菌數(shù)不低于101(lCfU/ml，這是現(xiàn)有的技術(shù)難以達(dá)到的發(fā)酵標(biāo)準(zhǔn)，較普通MRS培養(yǎng)基培養(yǎng)活菌數(shù)5. 1 X 108cfu/ml，提高80倍以上，實(shí)現(xiàn)了約氏乳桿菌的高密度發(fā)酵；本發(fā)明的發(fā)酵培養(yǎng)基及其應(yīng)用也減小了生物量的分離費(fèi)用，縮短生產(chǎn)周期，從而降低生產(chǎn)成本、提高生產(chǎn)效率。
具體實(shí)施例方式通過(guò)下列實(shí)施例將更具體的說(shuō)明本發(fā)明，但是應(yīng)理解所述實(shí)施例僅是為了說(shuō)明本發(fā)明，而不是以任何方式限制本發(fā)明的范圍。本發(fā)明下列實(shí)施例所用的儀器型號(hào)、試劑及其來(lái)源如下發(fā)酵罐NewBrunswick公司 BioFlo/Celligenll5 型；循環(huán)水機(jī)北京長(zhǎng)流科學(xué)儀器公司DX-208型；空氣壓縮機(jī)北京豪福機(jī)電技術(shù)開發(fā)應(yīng)用有限公司HF-6100C型；分光光度計(jì)上海精密科學(xué)儀器有限公司721N型；顯微鏡OLYMPUSCX31 型；超凈臺(tái)蘇凈安泰SW-CJ-2FD型；生化培養(yǎng)箱上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠SPX-250B-Z型酵母膏、牛肉粉、胰蛋白胨購(gòu)自北京奧博星生物技術(shù)責(zé)任有限公司，其他試劑均購(gòu)
4自北京化學(xué)試劑公司。約氏乳桿菌來(lái)源于中國(guó)普通微生物菌種保藏管理中心，保藏編號(hào)為CGMCC No.4926。實(shí)施例1發(fā)酵培養(yǎng)基的配制及發(fā)酵比較1、約氏乳桿菌高密度發(fā)酵培養(yǎng)基組分及其含量為葡萄糖:20g/L、胰蛋白胨:10g/L、牛肉膏10g/L、酵母粉5g/L、K2HPO4:2g/L、 CH3COONa :5g/L、檸檬酸鈉:2g/L、MgSO4 :0. 2g/L, FeSO4 :0. lg/L、MnSO4 :55mg/L。2、培養(yǎng)基配制方法(1)按上述含量分別稱取各組分，用蒸餾水溶解，其中葡萄糖單獨(dú)溶解；(2)葡萄糖115°C單獨(dú)滅菌20分鐘，其他組分裝入發(fā)酵罐中121°C滅菌30分鐘；(3)接種前通過(guò)無(wú)菌操作將葡萄糖加入發(fā)酵罐中，攪拌混勻，即得。3、高密度發(fā)酵與現(xiàn)有技術(shù)發(fā)酵的比較3. 1高密度發(fā)酵主要步驟如下(1)將冷凍保存的約氏乳桿菌在MRS瓊脂平板活化三次，挑取單菌落接種于深層 MRS液體試管，37°C培養(yǎng)10小時(shí)后，以接種量轉(zhuǎn)接于MRS液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)10小時(shí)后作為種子液；(2)配制發(fā)酵培養(yǎng)基，培養(yǎng)基降至所需溫度時(shí)，接上溶氧電極，標(biāo)定溶氧為100% ；(3)以5%的接種量將步驟(1)所得的種子液接種于步驟O)的發(fā)酵培養(yǎng)基中；(4)發(fā)酵，發(fā)酵過(guò)程中維持發(fā)酵液pH值為6. 0，當(dāng)pH超過(guò)6. 0時(shí)，補(bǔ)加料液約 IOOml ；當(dāng)pH低于6. 0時(shí)，自動(dòng)流加堿性中和劑氨水；在溫度37°C、轉(zhuǎn)速IOOrpm條件下發(fā)酵 10小時(shí)，發(fā)酵過(guò)程不通氣，維持溶氧小于；(5)當(dāng)補(bǔ)加料液pH不再降低時(shí)，終止發(fā)酵，即得約氏乳桿菌活菌數(shù)達(dá) 4. 3X1010cfu/ml 的發(fā)酵液。3. 2對(duì)照實(shí)驗(yàn)(1)約氏乳桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基(MRS培養(yǎng)基)其組分與含量為葡萄糖:20g/L、蛋白胨:10g/L、牛肉膏5g/L、酵母粉4g/L、K2HPO4:2g/L、 CH3COONa :5g/L、檸檬酸鈉:2g/L、MgSO4 :0. 2g/LMnSO4 :50mg/L、吐溫 80 :1ml。(2)發(fā)酵將冷凍保存的約氏乳桿菌在MRS瓊脂平板活化三次，挑取單菌落接種于深層MRS 液體試管，37°C培養(yǎng)10小時(shí)后。以接種量轉(zhuǎn)接于MRS液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)10小時(shí)后作為種子液，以10%接種量接種發(fā)酵培養(yǎng)基。37°C靜置培養(yǎng)10小時(shí)，終止發(fā)酵，得到約氏乳桿菌活菌數(shù)為 5. lX108cfu/ml。3. 3結(jié)果分析應(yīng)用本發(fā)明的培養(yǎng)基及其發(fā)酵方法，可以得到約氏乳桿菌活菌數(shù)達(dá)4. 3 X IO10Cfu/ ml的發(fā)酵液，而應(yīng)用現(xiàn)行發(fā)酵培養(yǎng)基(MRS培養(yǎng)基)及其發(fā)酵方法，得到的約氏乳桿菌活菌數(shù)僅為5. lX108cfu/mL·實(shí)驗(yàn)證明本發(fā)明的培養(yǎng)基及其發(fā)酵方法得到的約氏乳桿菌活菌數(shù)為現(xiàn)有技術(shù)的近80倍，實(shí)現(xiàn)了約氏乳桿菌的高密度發(fā)酵。實(shí)施例2發(fā)酵培養(yǎng)基的配制及發(fā)酵比較1、約氏乳桿菌高密度發(fā)酵培養(yǎng)基其組分與含量為
5
葡萄糖25g/L、胰蛋白胨10g/L、牛肉粉15g/L、酵母粉10g/L、K2HPO4:2g/L、 CH3COONa :7g/L、檸檬酸鈉:3g/L、MgCl2 :0. 2g/L、FeCl2 :0. lg/L、MnSO4 :50mg/L。2、培養(yǎng)基配制方法(1)按含量分別稱取各組分，用蒸餾水溶解，其中葡萄糖單獨(dú)溶解；(2)葡萄糖115°C單獨(dú)滅菌20分鐘，其他組分裝入發(fā)酵罐中121°C滅菌30分鐘；(3)接種前通過(guò)無(wú)菌操作將葡萄糖加入發(fā)酵罐中，攪拌混勻，即得。3、高密度發(fā)酵與現(xiàn)有技術(shù)發(fā)酵的比較3. 1高密度發(fā)酵主要步驟如下(1)將冷凍保存的約氏乳桿菌在MRS瓊脂平板活化三次，挑取單菌落接種于深層 MRS液體試管，37°C培養(yǎng)10小時(shí)后，以接種量轉(zhuǎn)接于MRS液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)8小時(shí)后作為種子液；(2)配制發(fā)酵培養(yǎng)基，培養(yǎng)基降至所需溫度時(shí)，接上溶氧電極，標(biāo)定溶氧為100% ；(3)以5%的接種量將步驟(1)所得的種子液接種于步驟O)的發(fā)酵培養(yǎng)基中；(4)發(fā)酵，發(fā)酵過(guò)程中維持發(fā)酵液pH值為6. 3，當(dāng)pH超過(guò)設(shè)定值時(shí)，補(bǔ)加料液約 IOOml ；當(dāng)pH低于設(shè)定值時(shí)，自動(dòng)流加堿性中和劑氨水；在溫度38°C、轉(zhuǎn)速IOOrpm條件下發(fā)酵12小時(shí)，發(fā)酵過(guò)程不通氣，維持溶氧小于；(5)當(dāng)補(bǔ)加料液發(fā)酵液0D_不再增加時(shí)，終止發(fā)酵，即得約氏乳桿菌活菌數(shù)達(dá) 5.9X1010cfu/ml 的發(fā)酵液。3. 2對(duì)照實(shí)驗(yàn)(1)約氏乳桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基(MRS培養(yǎng)基)其組分與含量為葡萄糖:20g/L、蛋白胨:10g/L、牛肉粉5g/L、酵母粉4g/L、K2HPO4:2g/L、 CH3COONa :5g/L、檸檬酸鈉:2g/L、MgSO4 :0. 2g/L、MnSO4 :50mg/L、吐溫 80 :1ml。(2)發(fā)酵將冷凍保存的約氏乳桿菌在MRS瓊脂平板活化三次，挑取單菌落接種于深層MRS 液體試管，37°C培養(yǎng)10小時(shí)后。以接種量轉(zhuǎn)接于MRS液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)10小時(shí)后作為種子液，以10%接種量接種發(fā)酵培養(yǎng)基。38°C靜置培養(yǎng)12小時(shí)，終止發(fā)酵，得到所述約氏乳桿菌活菌數(shù)為6. OX 108cfu/ml。3. 3結(jié)果分析應(yīng)用本發(fā)明的培養(yǎng)基及其發(fā)酵方法，可以得到約氏乳桿菌活菌數(shù)達(dá)5. 9 X IO10Cfu/ ml的發(fā)酵液，而應(yīng)用現(xiàn)行發(fā)酵培養(yǎng)基(MRS培養(yǎng)基)及其發(fā)酵方法，得到的約氏乳桿菌活菌數(shù)僅為6. OX 108CfU/ml。實(shí)驗(yàn)證明本發(fā)明的培養(yǎng)基及其發(fā)酵方法得到的約氏乳桿菌活菌數(shù)為現(xiàn)有技術(shù)的98倍，實(shí)現(xiàn)了約氏乳桿菌的高密度發(fā)酵。實(shí)施例3發(fā)酵培養(yǎng)基的配制及發(fā)酵比較1、約氏乳桿菌高密度發(fā)酵培養(yǎng)基其組分與含量為葡萄糖30g/L、胰蛋白胨15g/L、牛肉膏6g/L、酵母粉6g/L、K2HPO4:3g/L、 CH3COONa :8g/L、檸檬酸鈉4g/L、(NH4)2Fe(SO4)2 :0. 2g/L、MgSO4 :0. 4g/L、MnSO4 :45mg/L。2、培養(yǎng)基配制方法(1)按含量分別稱取各組分，用蒸餾水溶解，其中葡萄糖單獨(dú)溶解；(2)葡萄糖115°C單獨(dú)滅菌20分鐘，其他組分裝入發(fā)酵罐中121°C滅菌30分鐘；
(3)接種前通過(guò)無(wú)菌操作將葡萄糖加入發(fā)酵罐中，攪拌混勻，即得。3、高密度發(fā)酵與現(xiàn)有技術(shù)發(fā)酵的比較3. 1高密度發(fā)酵主要步驟如下(1)將冷凍保存的約氏乳桿菌在MRS瓊脂平板活化三次，挑取單菌落接種于深層 MRS液體試管，37°C培養(yǎng)10小時(shí)后，以接種量轉(zhuǎn)接于MRS液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)10小時(shí)后作為種子液；(2)配制發(fā)酵培養(yǎng)基，培養(yǎng)基降至所需溫度時(shí)，接上溶氧電極，標(biāo)定溶氧為100% ；(3)以10%的接種量將步驟(1)所得的種子液接種于步驟O)的發(fā)酵培養(yǎng)基中；(4)發(fā)酵，發(fā)酵過(guò)程中維持發(fā)酵液pH值為6. 5，當(dāng)pH超過(guò)設(shè)定值時(shí)，補(bǔ)加料液約 IOOml ；當(dāng)pH低于設(shè)定值時(shí)，自動(dòng)流加堿性中和劑氨水；在溫度39°C、轉(zhuǎn)速IOOrpm條件下發(fā)酵14小時(shí)，發(fā)酵過(guò)程通入氮?dú)猓S持溶氧小于；(5)當(dāng)補(bǔ)加料液pH不再降低時(shí)，終止發(fā)酵，即得約氏乳桿菌活菌數(shù)達(dá) 4.9X1010cfu/ml 的發(fā)酵液。3. 2對(duì)照實(shí)驗(yàn)(1)約氏乳桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基(MRS培養(yǎng)基)其組分為葡萄糖:20g/L、蛋白胨:10g/L、牛肉膏5g/L、酵母粉4g/L、K2HPO4:2g/L、 CH3COONa :5g/L、檸檬酸鈉:2g/L、MgSO4 :0. 2g/L、MnSO4 :50mg/L、吐溫 80 :1ml。(2)發(fā)酵將冷凍保存的約氏乳桿菌在MRS瓊脂平板活化三次，挑取單菌落接種于深層MRS 液體試管，37°C培養(yǎng)10小時(shí)后。以接種量轉(zhuǎn)接于MRS液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)10小時(shí)后作為種子液，以10%接種量接種發(fā)酵培養(yǎng)基。39°C靜置培養(yǎng)14小時(shí)，終止發(fā)酵，得到約氏乳桿菌活菌數(shù)為 4. 8X108cfu/ml。3. 3結(jié)果分析應(yīng)用本發(fā)明的培養(yǎng)基及其發(fā)酵方法，可以得到約氏乳桿菌活菌數(shù)達(dá)4. 9 X IO10Cfu/ ml的發(fā)酵液，而應(yīng)用現(xiàn)行發(fā)酵培養(yǎng)基(MRS培養(yǎng)基)及其發(fā)酵方法，得到的約氏乳桿菌活菌數(shù)僅為4. 8X 108CfU/ml。實(shí)驗(yàn)證明本發(fā)明的培養(yǎng)基及其發(fā)酵方法得到的約氏乳桿菌活菌數(shù)為現(xiàn)有技術(shù)的近102倍，實(shí)現(xiàn)了約氏乳桿菌的高密度發(fā)酵。生產(chǎn)中，高密度發(fā)酵的實(shí)現(xiàn)可以減小生物量的分離費(fèi)用，縮短生產(chǎn)周期，降低生產(chǎn)成本、提高生產(chǎn)效率等，這在高效節(jié)能的當(dāng)代社會(huì)具有極其重要的意義。
權(quán)利要求
1.一種飼用約氏乳桿菌(LactcAacillus johnsonii)高密度發(fā)酵培養(yǎng)基，其特征在于培養(yǎng)基的主要組分及其含量如下葡萄糖20 30g/L、胰蛋白胨10 15g/L、牛肉膏或牛肉粉6 15g/L、酵母粉5 10g/L,K2HPO4 2 3g/L,CH3COONa 5 8g/L、檸檬酸鈉2 4g/L、Mg2+水溶性化合物0. 2 0. 4g/L、Fe2+水溶性化合物0. 1 0. 2g/L和Mn2+水溶性化合物45 55mg/L。
2.權(quán)1所述的飼用約氏乳桿菌高密度發(fā)酵培養(yǎng)基，其特征在于所述的Mg2+水溶性化合物為MgS04、MgCl2中的任一種；所述的1 2+水溶性化合物為i^eS04、FeCl2、(NH4)2Fe(SO4)2中的任一種；所述的Mn2+水溶性化合物為MnS04。
3.權(quán)1或權(quán)2所述的飼用約氏乳桿菌高密度發(fā)酵培養(yǎng)基，其特征在于發(fā)酵培養(yǎng)基的配制方法如下(1)按含量分別稱取各組分，用蒸餾水溶解，其中葡萄糖單獨(dú)溶解；(2)葡萄糖115°C單獨(dú)滅菌20分鐘，其它組分裝入發(fā)酵罐中121°C滅菌30分鐘；(3)接種前通過(guò)無(wú)菌操作將葡萄糖加入發(fā)酵罐中，攪拌混勻，即得。
4.如權(quán)1-3任一項(xiàng)所述的飼用約氏乳桿菌高密度發(fā)酵培養(yǎng)基在約氏乳桿菌發(fā)酵中的應(yīng)用，其特征在于發(fā)酵過(guò)程如下(1)將冷凍保存的約氏乳桿菌在MRS瓊脂平板活化三次，挑取單菌落接種于深層MRS液體試管，37°C培養(yǎng)10小時(shí)后，以1 %接種量轉(zhuǎn)接于MRS液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)8 10小時(shí)后作為種子液；(2)配制約氏乳桿菌高密度發(fā)酵培養(yǎng)基，培養(yǎng)基降至所需溫度時(shí)，接上溶氧電極，標(biāo)定溶氧為100% ；(3)以5% 10%的接種量將步驟(1)所得的種子液接種于步驟( 的發(fā)酵培養(yǎng)基中；(4)發(fā)酵，發(fā)酵過(guò)程中維持發(fā)酵液pH值為6 6.5，當(dāng)pH超過(guò)設(shè)定值時(shí)，補(bǔ)加料液；當(dāng) PH低于設(shè)定值時(shí)，自動(dòng)流加堿性中和劑氨水、KOH、NaOH中的任一種；在溫度37 39°C、轉(zhuǎn)速IOOrpm條件下發(fā)酵10 14小時(shí)，發(fā)酵過(guò)程不通氣或通入隊(duì)，維持溶氧小于；(5)當(dāng)補(bǔ)加料液pH不再降低或發(fā)酵液在600nm波長(zhǎng)下的吸光值不再增加時(shí)，終止發(fā)酵， 即得約氏乳桿菌活菌數(shù)達(dá)KTcfu/ml以上的發(fā)酵液。
5.權(quán)4所述的飼用約氏乳桿菌高密度發(fā)酵培養(yǎng)基在約氏乳桿菌發(fā)酵中的應(yīng)用，其特征在于所述料液的主要組分及其含量如下蔗糖500g/L、蛋白胨150g/L、牛肉粉或牛肉膏 150g/L、酵母膏或酵母浸粉75g/L。
全文摘要
本發(fā)明屬于乳酸菌培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種飼用約氏乳桿菌高密度發(fā)酵培養(yǎng)基及其應(yīng)用。使用本發(fā)明的高密度發(fā)酵培養(yǎng)基及其發(fā)酵方法發(fā)酵的約氏乳桿菌，菌體密度較普通發(fā)酵顯著提高，活菌數(shù)不低于1010cfu/ml，較普通MRS培養(yǎng)基培養(yǎng)活菌數(shù)提高80倍以上，實(shí)現(xiàn)了約氏乳桿菌的高密度發(fā)酵；本發(fā)明的發(fā)酵培養(yǎng)基及其應(yīng)用也減小了生物量的分離費(fèi)用，縮短生產(chǎn)周期，從而降低生產(chǎn)成本、提高生產(chǎn)效率。
文檔編號(hào)A23K1/16GK102417892SQ20111042839
公開日2012年4月18日 申請(qǐng)日期2011年12月20日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月20日
發(fā)明者孫曉雯, 張軍, 汪攀, 王安如, 閆軼潔 申請(qǐng)人:北京大北農(nóng)科技集團(tuán)股份有限公司, 哈爾濱大北農(nóng)牧業(yè)科技有限公司, 湖南大北農(nóng)農(nóng)業(yè)科技有限公司