專利名稱：一種肉仔雞下丘腦食欲調(diào)控研究的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種肉仔雞下丘腦食欲調(diào)控研究的方法，屬生物技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
下丘腦作為動(dòng)物食欲的中樞，對(duì)于采食量的調(diào)節(jié)起著重要作用。因此，不同藥物對(duì)于下丘腦中食欲相關(guān)神經(jīng)元的研究越來越多。由于血腦屏障的作用，外周血液中的藥物很難進(jìn)入下丘腦，或進(jìn)入腦室內(nèi)后劑量大大減少。第三腦室中位于下丘腦上部，能暫時(shí)容納一定劑量的藥物。通過先將藥物注入到第三腦室中，再觀察藥物對(duì)對(duì)下丘腦作用，這樣得到的數(shù)據(jù)更為直接和準(zhǔn)確。但由于不同物種、品種、日齡的差異，第三腦室的位置也會(huì)不同，本技術(shù)建立利用7日齡肉仔雞第三腦室注射研究下丘腦食欲調(diào)控機(jī)制的研究方法，對(duì)于以后家禽生物學(xué)試驗(yàn)的開展建立了一套迅速有效的試驗(yàn)技術(shù)。

發(fā)明內(nèi)容為了解決上述問題，本發(fā)明提供了一種肉仔雞下丘腦食欲調(diào)控研究的方法，具體是一種利用7日齡肉仔雞第三腦室注射研究下丘腦食欲調(diào)控機(jī)制的研究方法。通過確定7日齡 AA肉仔雞第三腦室的三維空間位置，實(shí)現(xiàn)研究某種生物活性物質(zhì)(或信號(hào)物質(zhì))調(diào)控下丘腦神經(jīng)中樞的目的，為以后生物學(xué)試驗(yàn)研究提供一種方便快捷的技術(shù)手段。
本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的利用CT技術(shù)檢測7日齡雞的腦室三維圖譜，確定第三腦室的三維空間位置；再利用腦室注射儀將生物活性物質(zhì)注入到7日齡AA肉仔雞第三腦室；利用染料伊卡斯蘭(其他試劑也可以)標(biāo)記待測溶液，試驗(yàn)結(jié)束后剖檢下丘腦及腦室，確定注射效果。
具體做法為在7日齡AA肉仔雞囟門處用記號(hào)筆做一標(biāo)記，記為零點(diǎn)(0，0，0)， 以零點(diǎn)向雞耳蝸處為X軸，以零點(diǎn)向雞喙處為Y軸，以零點(diǎn)向雞顱骨下面垂直方向的延伸為Z軸。自零點(diǎn)處開始向喙端做螺旋CT，利用計(jì)算機(jī)斷層攝影系統(tǒng)(CT儀)中刻度尺測量從零點(diǎn)到出現(xiàn)第三腦室的距離和從零點(diǎn)到第三腦室消失的距離，并記錄第三腦室到顱骨的垂直距離，所得數(shù)據(jù)即為第三腦室的位置。第三腦室位于囟門向X軸方向延伸 1.8-2. 1mm，沿Z軸方向的延伸距離為5.4-5. 7mm。因此，7日齡AA肉仔雞第三腦室的坐標(biāo)為(0，1. 8-2. 1，5. 4-5. 7)，單位為mm ；再利用腦室注射儀將生物活性物質(zhì)注入到7日齡AA 肉仔雞第三腦室。
將染料伊卡斯蘭(其他試劑也可以)溶解在含有待測生物活性物質(zhì)的生理鹽水中， 伊卡斯蘭溶液的質(zhì)量體積濃度為0. 1%-0. 5%，其他試劑的注射濃度可根據(jù)需求而定，試驗(yàn)結(jié)束后(一般不超過3 h)通過剖檢確定注射效果。如果在腦室外組織中不存在伊卡斯蘭染色， 判定為注射成功。
本發(fā)明的有益效果是快速確定7日齡AA肉仔雞第三腦室的位置，能迅速、高準(zhǔn)確率的將試驗(yàn)試劑注射到7日齡AA肉仔雞的第三腦室中，實(shí)現(xiàn)研究下丘腦采食調(diào)控機(jī)制的目的。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1在7日齡AA肉仔雞囟門處用記號(hào)筆做一標(biāo)記，記為零點(diǎn)(0，0，0 )，以零點(diǎn)向耳蝸處為X 軸，以零點(diǎn)向喙處為Y軸，以零點(diǎn)向顱骨垂直方向的延伸為Z周。自零點(diǎn)處開始向喙端做螺旋CT，利用計(jì)算機(jī)斷層攝影系統(tǒng)(CT儀)中刻度尺測量從零點(diǎn)到出現(xiàn)第三腦室的距離以及從零點(diǎn)到第三腦室消失的距離，記錄第三腦室到顱骨的垂直距離，所得數(shù)據(jù)即為第三腦室的位置。第三腦室位于囟門向X軸方向延伸1. 8-2. 1mm，向Z軸方向延伸距離為5. 4-5. 7mm。 因此，7日齡AA肉仔雞第三腦室的坐標(biāo)為(0，1.8-2. 1,5. 4-5. 7)，單位為mm。
實(shí)施例2 (一)固定1、在一水平桌面上，水平調(diào)整好立體定向器(江彎I型C)，包括水平上的左右2個(gè)固定夾、前面的喙固定夾。要求左右2個(gè)固定夾在一水平線上，左右距離一致，喙固定夾部位水平，與左右2個(gè)固定夾在一水平面上，并且與左右2個(gè)固定夾的尖端連接處形成一個(gè)邊長為 2-3cm的等邊三角形。
2、將7日齡肉仔水平并以俯臥的姿勢置于固定夾處，并使水平上的左右2根固定夾剛好對(duì)準(zhǔn)耳蝸，先將喙卡好，然后慢慢的旋緊水平固定夾，使之尖端緩緩的伸進(jìn)耳蝸(一側(cè)一側(cè)進(jìn)行)，直至松緊適宜，整個(gè)頭顱水平固定，不能搖動(dòng)為止(可從定向器前方察看)。
(二)注射將染料伊卡斯蘭(其他試劑也可以)溶解在生理鹽水中，伊卡斯蘭溶液的質(zhì)量體積濃度為0. 1%-0. 5%，(其他試劑的注射濃度可根據(jù)需求而定)，將盛有伊卡斯蘭溶液的微量注射器固定在腦室注射儀上，移動(dòng)微量注射器對(duì)準(zhǔn)因門，以此為坐標(biāo)的0點(diǎn)，向X軸移動(dòng)注射器 1. 8-2. Imm,然后Z軸移動(dòng)注射器至針頭接觸到頭部皮下組織，繼續(xù)向Z軸移動(dòng)5. 4-5. 7mm 距離，調(diào)整微量注射泵注射劑量為2-lOul，注射時(shí)間為30-60秒，按下微量注射泵注射開關(guān)，注射完畢后移出微量注射器，松開肉仔雞。按照同樣的方法連續(xù)將伊卡斯蘭注入到40 只7日齡肉仔雞第三腦室中。
(三)檢測腦組織體外檢測發(fā)現(xiàn)按照本發(fā)明確定的第三腦室的坐標(biāo)，成功將藥物注入到7日齡肉仔雞的第三腦室的有36只，成功率為90%。
權(quán)利要求
1. 一種肉仔雞下丘腦食欲調(diào)控研究的方法，其特征在于先利用CT技術(shù)檢測7日齡雞腦室三維圖譜，確定第三腦室的三維空間位置在7日齡AA肉仔雞囟門處用記號(hào)筆做一標(biāo)記，記為零點(diǎn)(0，0，0)，以零點(diǎn)向雞耳蝸處為X軸，以零點(diǎn)向雞喙處為Y軸，以零點(diǎn)向雞顱骨下面垂直方向的延伸為Z軸；自零點(diǎn)處開始向喙端做螺旋CT，利用計(jì)算機(jī)斷層攝影系統(tǒng)CT 儀中刻度尺測量從零點(diǎn)到出現(xiàn)第三腦室的距離和從零點(diǎn)到第三腦室消失的距離，并記錄第三腦室到顱骨的垂直距離；所得數(shù)據(jù)即為第三腦室的位置，第三腦室位于因門向X軸方向延伸1.8-2. 1mm，沿Z軸方向的延伸距離為5.4-5. 7mm ；確定7日齡AA肉仔雞第三腦室的坐標(biāo)為(0，1. 8-2. 1，5. 4-5. 7)，單位為mm ；再利用腦室注射儀將生物活性物質(zhì)注入到7日齡 AA肉仔雞第三腦室。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種肉仔雞下丘腦食欲調(diào)控研究的方法，是先利用CT技術(shù)確定7日齡AA肉仔雞第三腦室位置；通過利用腦室注射儀，將藥物注入到第三腦室中，檢測其成功率。作為一種生物技術(shù)，能迅速準(zhǔn)確地將藥物注射到7日齡AA肉仔雞第三腦室中，為研究藥物對(duì)下丘腦作用提供有效的技術(shù)手段。
文檔編號(hào)A61D7/00GK102512260SQ20111042970
公開日2012年6月27日 申請(qǐng)日期2011年12月20日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月20日
發(fā)明者劉磊, 宋志剛, 朱立賢, 李先磊, 林海, 焦洪超 申請(qǐng)人:山東農(nóng)業(yè)大學(xué)