專利名稱：包括萌芽物和抗菌劑的組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本申請涉及一種具有抗菌性質(zhì)的組合物，以及使用這種組合物消毒表面的方法。本申請尤其涉及一種對形成病原體的孢子具有有效抗菌活性的組合物。
背景技術(shù)：
形成病原體的孢子，例如梭狀芽孢桿菌，為重要的致病原。在英國，梭狀芽孢桿菌是院內(nèi)腹瀉的主要原因，并是英國醫(yī)院內(nèi)的相當(dāng)數(shù)量的死亡的致死原因。最近數(shù)據(jù)顯示梭狀芽孢桿菌感染的案例數(shù)量有所下降。然而，雖然有所下降，梭狀芽孢桿菌的案例仍然幾乎是抗甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)案例的10倍。當(dāng)前，聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)核糖核酸型027是最普遍的從梭狀芽孢桿菌處分離的核糖核酸型，接下來是核糖核酸型 106和101。感染患者在環(huán)境中分泌出大量的作為感染儲主的梭狀芽孢桿菌孢子和細(xì)胞。因此，患者通常通過吸入來自污染環(huán)境的孢子而獲得這種有機體。一旦吸入，這種孢子可以在胃部的酸性環(huán)境下存活，并可以進入腸胃道，在腸胃道中它們可以萌芽生成營養(yǎng)細(xì)胞以產(chǎn)生毒素A和B，這些毒素便在易感染病人中弓I起疾病。孢子萌芽是不可逆過程，其中高度穩(wěn)定，靜止的孢子轉(zhuǎn)變成新陳代謝的活性細(xì)胞。萌芽在幾個階段進行，首先通過在細(xì)胞質(zhì)膜上與萌芽受體結(jié)合而被活化。隨后失去耐熱性和不同的陽離子，包括鉀，氫和鈉，以及鈣和吡啶二羧酸(DPA)的絡(luò)合物。這樣導(dǎo)致核心的部分重新水合，然而，在皮層沒有分解之前該有機體不容易成為完全的水合物。隨著皮層的水解，小的酸性可溶性蛋白分解，細(xì)胞的代謝活性便啟動。眾所周知，梭狀芽孢桿菌可以通過暴露于萌芽溶液而模擬生成孢子，該萌芽溶液包含甘氨酸和?；悄懰猁}的結(jié)合。這種從孢子狀態(tài)的轉(zhuǎn)變引起病原體容易受到抗菌劑的攻擊，該抗菌劑例如雙氯苯雙胍己烷。
背景技術(shù)：
的目的為設(shè)計萌芽/根除利用病原體萌芽后易感性的實驗方案。這種實驗方案如圖I所示。特別地，背景技術(shù)嘗試設(shè)計抗菌溶液，該抗菌溶液刺激萌芽，并具有抗菌劑來攻擊萌芽病原體。然而，以這種方式的抗菌劑對萌芽溶液具有抑制效果，使得萌芽/根除方式在臨床條件上的成就的受限。本發(fā)明的目的在于提供一種替代性的抗菌組合物，該組合物克服以上問題并在臨床重要的病原體上具有效果。

發(fā)明內(nèi)容
與背景技術(shù)中的僅與?；悄懰猁}結(jié)合的甘氨酸組合物相比，本申請的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)包含氨基酸和?；悄懰徕c結(jié)合的特定組合物能提高孢子生殖活性。此外，發(fā)明人還發(fā)現(xiàn)特定的抗菌劑在作為組合物中防腐劑的同時可以有有效地殺滅萌芽的孢子。這些試劑并沒有背景技術(shù)中所觀察到的用于萌芽/根除的抗菌劑對病原體的萌芽的抑制效果。此外，本申請的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，同樣刺激營養(yǎng)細(xì)胞從梭狀芽孢桿菌孢子處生成的同時，本發(fā)明的組合物能預(yù)防梭狀芽孢桿菌營養(yǎng)細(xì)胞的孢子生殖。這在臨床條件上非常有利。在醫(yī)院治療的患者排泄出許多營養(yǎng)細(xì)胞(還有孢子)。該營養(yǎng)細(xì)胞會最終形成孢子，而孢子隨后作為疾病傳輸?shù)妮d體。保持細(xì)胞處于營養(yǎng)形式則比較優(yōu)選，因為它們會自然地被空氣消滅，它們完全厭氧，或在醫(yī)院中用作普遍的硬表層消毒劑。本發(fā)明的組合物因此具有兩種方式進攻，首先，將孢子轉(zhuǎn)化成營養(yǎng)細(xì)胞，其次，保持營養(yǎng)細(xì)胞處于營養(yǎng)形式。本發(fā)明的一個方面提供了一種抗菌組合物，該抗菌組合物包括萌芽物和抗菌劑，其中所述萌芽物增加病原體對抗菌劑進攻的易感性，且其中的抗菌劑并沒有抑制萌芽。本發(fā)明的第二個方面提供了一種抗菌抹布，所述抗菌抹布包括經(jīng)過本發(fā)明組合物浸潰的織物，網(wǎng)或紗布類材料。本發(fā)明的第三個方面提供了一種 抗菌洗手液或用于對非生物表面涂層的涂料，該洗手液或涂料包括本發(fā)明的組合物。本發(fā)明的第四個方面提供了一種消毒表面的方法，使得該表面擺脫病原體，該方法包括用本發(fā)明的組合物或含有本發(fā)明組合物的抗菌抹布或涂料以使病原體萌芽和被消滅的足夠長的時間來接觸表面。本發(fā)明的抗菌組合物包括與抗菌劑結(jié)合的萌芽物。所述萌芽物選自至少兩種氨基酸。所述氨基酸優(yōu)選為組氨酸，精氨酸，天冬氨酸，甘氨酸的結(jié)合。更優(yōu)選為組氨酸，精氨酸，天冬氨酸，甘氨酸和纈氨酸的結(jié)合。發(fā)明人所展示的這種氨基酸的特定結(jié)合尤其利于增加了細(xì)菌萌芽效果。孢子所提供的量為適用于刺激有效的孢子繁殖。優(yōu)選地，孢子的量為最終組合物的I至ΙΟηΜ。萌芽溶液中的氨基酸成分的量為50mM (組氨酸)，50mM (甘氨酸)，50mM(精氨酸)，50mM 1:50 (纈氨酸)和50mM (天冬氨酸)?？咕鷦橐环N一旦接觸病原體微生物所在的表面，能有效殺滅病原體微生物的試齊U。優(yōu)選地，抗菌劑在孢子繁殖后的萌芽階段為有效的或可以消滅病原體。該抗菌劑同樣有效殺滅沒有形成孢子的病原體。優(yōu)選地，抗菌劑為苯扎氯銨和苯甲醇的結(jié)合。抗菌組合物中，苯扎氯銨與苯甲醇的比例為1:50。抗菌劑所提供的量(相對于抗菌組合物中抗菌劑的總量而言)為O. 01%至2%?？咕M合物以臨床環(huán)境下用于消毒表面的形式來提供。優(yōu)選地，該表面為非生物的表面?？商娲?，該表面可以為患者，醫(yī)生或護工的皮膚。優(yōu)選地，該組合物的形式為液體，凝膠，泡沫或噴霧，這些形式可以便利地用于所需要處理的表面。在另一個實施例中，抗菌抹布包括經(jīng)過抗菌組合物浸潰的織物，網(wǎng)或紗布類材料。該組合物同樣可以以藥片形式提供。這種藥片形式例如在清潔較大表面面積時，可溶于適量的水，然后醫(yī)院清潔人員再將所得溶液當(dāng)做消毒劑使用。在一個實施例中，該表面為人的皮膚，然后，該抗菌組合物的形式可以為洗手液或抹布。優(yōu)選地，該抗菌組合物的形式為涂料，該涂料涂在待處理的表面上。與背景技術(shù)的抗菌劑相比，這種涂料特別有利，一旦干燥后，便有效地在長時間周期內(nèi)消滅病原體，背景技術(shù)的抗菌劑一旦干燥便有效，但在特定時間長度內(nèi)，抗菌劑導(dǎo)致對萌芽劑的抑制。該抗菌劑更優(yōu)選地以涂漆的形式存在，該涂漆在應(yīng)用的表面上形成不會輕易擦掉的硬膜。本發(fā)明的抗菌組合物一般可以消毒廣譜病原體的表面。該組合物對形成細(xì)菌的孢子特別有效。這種孢子形成細(xì)菌的的一個實施例為梭狀芽孢桿菌。然而，該組合物可以對其它例如MRSA，綠膿桿菌，白念珠菌和黑曲霉菌株的病原體同樣有效。以下結(jié)合附圖和表格，通過實施例來對本發(fā)明的實施進行詳細(xì)說明其中，
圖I簡要地展示了背景技術(shù)中使用的萌芽/根除實驗方案。
圖2展示了梭狀芽孢桿菌NCTC I 1204孢子的CFU (菌落數(shù))/mL對數(shù)值減少所述梭狀芽孢桿菌NCTC I 1204孢子暴露在不同的萌芽溶液I小時，接著進行10分鐘的熱沖擊。圖3展示了暴露于每種氨基酸萌芽溶液I小時后，梭狀芽孢桿菌NCTC I 1204孢子的CFU/mL的對數(shù)值減少，接著在70°C下，進行10分鐘的熱沖擊。圖4展示了用核糖核酸型027，001，106和菌株NCTC I 1204的梭狀芽孢桿菌孢子培養(yǎng)一小時后，在同樣包含6. 9mM牛磺膽酸鈉的萌芽溶液中的氨基酸組合(精氨酸，天冬氨酸，甘氨酸和組氨酸)濃縮物的效果。圖5展示了暴露于不同萌芽溶液，并隨后進行10分鐘的熱沖擊后，不同的梭狀芽孢桿菌菌株孢子的CFU/mL的對數(shù)值減少。
圖6展示了 pH值對Tris緩沖液中梭狀芽孢桿菌NCTC I 1204孢子萌芽的效果，所述Tris緩沖液包括IOmM的精氨酸，天冬氨酸，組氨酸和甘氨酸，以及6. 9mlVl的牛磺膽酸鈉。圖7展示了在I小時暴露于不同萌芽溶液，接著進行熱沖擊或用冰冷卻的處理后，梭狀芽孢桿菌孢子的CFU/mL的對數(shù)值減少。(AA=氨基酸，ST=?；悄懰徕c，BZC=苯扎氯銨，BZA=苯甲醇)。圖8展示了在I小時暴露于不同萌芽溶液，接著進行熱沖擊或用冰冷卻的處理后，梭狀芽孢桿菌孢子的CFU/mL的對數(shù)值減少(CHG=氯己定二葡糖酸鹽)。圖9展示了在PBS (對照)中培養(yǎng)的梭狀芽孢桿菌營養(yǎng)細(xì)胞的計數(shù)，24小時后的孢子計數(shù)為100%。


圖10展示了在本發(fā)明萌芽溶液中梭狀芽孢桿菌營養(yǎng)細(xì)胞的計數(shù)，72小時后100%的計數(shù)仍然為營養(yǎng)細(xì)胞。表I展示了在I小時暴露于不同萌芽溶液，接著進行熱沖擊或用冰冷卻的處理后，梭狀芽孢桿菌孢子的CFU/mL的對數(shù)值減少。實施例I :用于萌芽溶液氨基酸的組合 梭狀芽孢桿菌菌株
將核糖核酸型106菌株(18587)，核糖核酸型001菌株(8565) (Health ProtectionAgency,英國東北)以及家典型菌種保藏中心(NCTC) 11204參照菌株,連同三種核糖核酸型O27 菌株，R2O29I (Anaerobic Reference Laboratory 加的夫)，I8O4O 和 I59OO (ΗΡΑ,英國東北)一起使用。梭狀芽孢桿菌孢子懸浮液的制備
梭狀芽孢桿菌孢子如之前所述來制備(Shetty等，1999)。用梭狀芽孢桿菌的相關(guān)菌株來接種血瓊脂平板，并在37°C下厭氧地培養(yǎng)(iniMACS anaerobic work station, DonWhitley, Shipley,英國)72小時，隨后在收集所有的菌落并置于10mL50%生理鹽水(0. 9%w/v)和50%甲基化酒精之前，移開所述平板并在常溫下放置24小時。所述懸浮液在用玻璃棉過濾之前進行完全地渦旋混合，并在4°C下保存直到使用。在每次實驗之前，孢子懸浮液以13000rpm速度離心5分鐘，并在消毒的蒸餾水中重新懸浮。氨基酸
在實驗中使用了以下氨基酸甘氨酸，L-異亮氨酸，L-脯氨酸，D-丙氨酸，L-谷氨酸，L-絲氨酸，L-蘇氨酸，L-天冬氨酸，L-精氨酸，L-纈氨酸，L-亮氨酸，L-谷氨酰胺，L-色氨酸和L -天冬酰胺(都來自英國Sigma-Aldrich公司)，L-賴氨酸，L-組氨酸和L-蛋氨酸(BDH), L-β -苯基丙氨酸(Fisons公司)L-半胱氨酸(Fluka公司)。酪氨酸由于不溶于蒸餾水，所以沒有進行測試。作為共同萌芽物的不同氨基酸對梭狀芽孢桿菌孢子的效果
所有的萌芽溶液包含O. 4% (w/v)的氨基酸(之前研究使用的甘氨酸濃度(Wheeldon等.,2008))和13. 8mM(w/v)的?；悄懰徕c(Sigma-Aldrich公司,英國)，(在十二指腸中加倍生理濃度(Leverrier等.，2003))，將該?；悄懰徕c溶于蒸餾水中，并在121°C下高壓滅菌15分鐘來消毒。同樣測試包含13. SmM?；悄懰徕c(ST)的加倍強度的硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基(Oxid，英國)，用于與其它萌芽溶液作對比。如果梭狀芽孢桿菌長孢子(包含IO6CFU/mL)，便隨后將一百微升的每種萌芽溶液加多100 μ L，并完全渦旋混合。I小時后，將整個200 μ L的體積加入9. 8mL的威爾金查而根培養(yǎng)基(Wilkins Chalgren broth) (Oxoid,英國)，使其在70°C下平衡10分鐘，或用冰使其冷卻。經(jīng)過合適的稀釋，在加入15mL的，包 含0.1 % (w/v) ST和5% (v/v)脫纖維馬血的molton苛養(yǎng)厭氧菌瓊脂(FAA) (Lab M,英國)之前，將ImL的樣品置于消毒的皮氏(Petri)培養(yǎng)皿中。平板在37°C下厭氧培養(yǎng)48小時之前，進行完全混合。上述方法是來自Levinson和Hyatt (1966)的改進。梭狀芽孢桿菌孢子萌芽所需要的氨基酸的最佳濃度的確定
精氨酸，天冬氨酸，甘氨酸和組氨酸以200，20，2，0. 2和0. 02mM的量制備，連同13. 8mM的ST (在實驗中以1:2稀釋時為雙倍效果)，一起溶于蒸餾水中。加熱所有溶液直到溶解，并用高壓滅菌來消毒。用與以上相同的方法來測試不同濃度的萌芽溶液對梭狀芽孢桿菌NCTC I 1204，核糖核酸型 027 (R20291 )，001 和 106 的效果。針對六種不同的梭狀芽孢桿菌菌株的孢子，氨基酸和?；悄懰猁}的功效。分別單獨或混合加入精氨酸、天冬氨酸、甘氨酸和組氨酸(20mM w/v)至13. 8mM(w/v) ST，并加熱溶解于蒸餾水中，然后高壓滅菌消毒。用以上的相同方法來確定這些氨基酸溶液對梭狀芽孢桿菌核糖核酸型001、106、027 (R20291，15900和18040)和NCTC I1204的孢子的功效。緩沖萌芽溶液的pH值對梭狀芽孢桿菌孢子的萌芽效果
將精氨酸，天冬氨酸，甘氨酸和組氨酸(20mM w/v), 13. 8mM (w/v) ST和200mM (w/v)Tris溶于蒸餾水中，在用過濾或高壓滅菌消毒之前用鹽酸調(diào)節(jié)pH值至5，6，7，8和9。用與以上相同的方法來測試對梭狀芽孢桿菌NCTC I 1204孢子的每份緩沖溶液。實施例2-具有抗菌和防腐的萌芽溶液對梭狀芽孢桿菌的功效 萌芽溶液
一種溶液包含IOOmM (w/v)甘氨酸，組氨酸，纈氨酸，天冬氨酸和精氨酸，13. 8mM (w/v)?；悄懰徕c，IOOmM (w/v) Tris緩沖液，0.04% (w/v)苯扎氯銨以及2% (v/v)的苯甲醇，將該溶液用蒸餾水調(diào)整至所需體積，并用鹽酸調(diào)節(jié)PH值至7。加熱該溶液，并在過濾通過0. 2pm的孔尺寸之前，加熱并完全混合該溶液，以溶解所有的成分(該溶液在實驗中以I :2來稀釋時，為加倍功效)。梭狀芽孢桿菌孢子懸浮液的制備 梭狀芽孢桿菌孢子的制備如上所述緩沖液
緩沖液的改進來自Espigares等，(2003),并包含以下成分120mL (v/v)吐溫(Tween) -80, 25mL (v/v)的 40% 偏亞硫酸鈉，15. 69g (w/v)五水硫代硫酸鈉，IOg (w/v)L-半胱氨酸，4g (w/v)卵磷脂，用蒸餾水制成IOOOmL溶液，并將pH值調(diào)節(jié)至7，用高壓滅
菌消毒。萌芽效果測試
將100微升的萌芽溶液加入IOOyL的梭狀芽孢桿菌孢子中(包含106 CFU/mL)，并完全渦旋混合。對于對照樣，將100 μ L的消毒蒸餾水與100 μ L的梭狀芽孢桿菌孢子懸浮液混合。孢子懸浮液同樣用包含氯芐烷銨和Tris緩沖液(沒有氨基酸或?；悄懰猁})，具有Tris緩沖液的苯甲醇(沒有氨基酸或?；悄懰猁})，以及包含五種氨基酸和?；悄懰猁}的溶液(無抗菌劑)來培養(yǎng)。一小時后，將整個200 μ L體積的溶液加入9. 8mL緩沖液中 (如上所述)，在70°C下平衡10分鐘(熱沖擊來殺滅萌芽細(xì)胞)，或用冰塊冷卻(對照)。經(jīng)過合適的稀釋后，在加入包含O. I % (w/v)的ST和5% (v/v)脫纖維馬血的molten苛養(yǎng)厭氧菌瓊脂(molten Fastidious Anaerobe Agar FAA) (Lab M,英國)之前，將 ImL 的樣品置于消毒的皮氏(Petri)培養(yǎng)皿中。該平板在37°C下厭氧培養(yǎng)48小時(mini ACSAnaerobic Workstation, Don Whitley Scientific 公司)前，進行完全混合。上述方法從之前Levinson和Hyatt (1966)的研究中改進。結(jié)果和討論
作為與甘氨酸共同萌芽物的其它氨基酸對梭狀芽孢桿菌NCTC 11204孢子的功效用精氨酸，天冬氨酸或組氨酸，甘氨酸和ST來培養(yǎng)梭狀芽孢桿菌NCTC I 1204,并在熱沖擊后，產(chǎn)生CFU/mL的較大對數(shù)值減少，分別為2. 78 (99. 8%)，3. 06 (9. 99%)和3. 12(99. 9%)。纈氨酸(具有甘氨酸和ST)和亮氨酸(具有甘氨酸和ST)分別產(chǎn)生CFU/mL的對數(shù)值減少分別為I .72 (98. I %)和I .62 (97. 6%)，這和只有甘氨酸和ST (I .85對數(shù)值減少(98.6%))較為相似。所有的其它氨基酸測試所產(chǎn)生的對數(shù)值減少小于只有甘氨酸和?；悄懰猁}所產(chǎn)生的對數(shù)值減少。 單獨的共同萌芽物和與甘氨酸以及牛磺膽酸鈉的結(jié)合對梭狀芽孢桿菌NCTC11204孢子的功效
與用精氨酸和天冬氨酸或具有ST的組氨酸來培養(yǎng)孢子相比，當(dāng)最初篩選的四種最有效氨基酸(精氨酸，天冬氨酸，組氨酸和甘氨酸)一起置于具有ST的溶液，并用梭狀芽孢桿菌孢子培養(yǎng)時，在熱沖擊之后產(chǎn)生了 CFU/mL為3. 71 (99. 9%)的更大對數(shù)值減少，但沒有甘氨酸時，每個溶液產(chǎn)生少于一個對數(shù)值的減少。梭狀芽孢桿菌孢子萌芽所需的氨基酸最佳濃度的確定
當(dāng)氨基酸的濃度處于10到IOOmM之間時，在所有的菌株測試中，梭狀芽孢桿菌孢子的萌芽為最理想。低于這個濃度時，在0. ImM及以下濃度處觀察，梭狀芽孢桿菌孢子的萌芽就會小于一個對數(shù)值減少而顯著下降。在所有的梭狀芽孢桿菌菌株中，當(dāng)孢子暴露于IOOmM的氨基酸，而沒有熱沖擊時，可以觀察到CFU/mL的顯著下降。氨基酸和?；悄懰猁}鈉對于梭狀芽孢桿菌PCR核糖核酸型027的不同菌株孢子的功效。暴露于與ST結(jié)合的四種氨基酸的梭狀芽孢桿菌PCR核糖核酸型027的所有菌株產(chǎn)生的對數(shù)值減少與當(dāng)孢子暴露于硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基和ST所產(chǎn)生的對數(shù)值減少相似。當(dāng)與甘氨酸和牛磺膽酸鈉結(jié)合時，在每個核糖核酸型027菌株處觀察，天冬氨酸與組氨酸都增加了 CFU/mL的對數(shù)值減少。然而，當(dāng)加入甘氨酸和ST時，精氨酸并沒有引起CFU/mL對數(shù)值下降的更進一步提高。更有趣的是，與R20291菌株相比，對于硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基或四種氨基酸與ST結(jié)合，兩種臨床菌株(18040和15900)產(chǎn)生顯著的更大的對數(shù)值下降。對于六種不同的梭狀芽孢桿菌菌株的孢子，氨基酸和?；悄懰徕c的功效
在暴露于氨基酸和硫乙醇酸鹽溶液之后，觀察到梭狀芽孢桿菌的NCTC I 1204參照菌株產(chǎn)生了 CFU/mL的最大對數(shù)值減少。在每個不同的測試的萌芽溶液中，PGR核糖核酸型001所產(chǎn)生的對數(shù)值減少與PCR核糖核酸型207所產(chǎn)生的對數(shù)值減相似。例如，梭狀芽孢桿菌核糖核酸型001和027 R20291在用四種氨基酸和ST培養(yǎng)，并且進行熱沖擊后所產(chǎn)生的CFU.Ml的對數(shù)值減少分別為2. 12 (99. 2%)和I .98 (99%)。
緩沖萌芽溶液的pH值對梭狀芽孢桿菌NCTC 11204孢子萌芽的效果
緩沖萌芽溶液的PH值大大地影響著用氨基溶液(和ST)培養(yǎng)后，接著進行熱沖擊所產(chǎn)生的CFU/mL的對數(shù)值減少。在酸性的pH為5時，萌芽溶液沒有產(chǎn)生任何CFU/mL的對數(shù)值減少。在中性的ρΗ6· 98時，所觀察到CFU/mL (99. 9%)中3. 32的對數(shù)值下降，該pH值為理想的PH值。更大堿性的pH8. 81沒有增加所觀察到的CFU/mL的對數(shù)值減少，但程度比酸性pH程度要更小。具有抗菌劑和防腐劑的萌芽溶液對梭狀芽孢桿菌的效果
將梭狀芽孢桿菌孢子用氨基酸和Tris緩沖液中的?；悄懰猁}混合物培養(yǎng)一小時，并進行熱沖擊后產(chǎn)生CFU/mL (99. 9%減少)的3個對數(shù)值減少。然而，如果沒有熱沖擊，在用氨基酸溶液培養(yǎng)后，剩余孢子的數(shù)量中只有很少的減少(O. 13對數(shù)值減少)。用包含Tris中的苯扎氯銨或Tris中的苯甲醇來培養(yǎng)梭狀芽孢桿菌孢子時，無論進行或沒有進行熱沖擊都產(chǎn)生CFU/mL小于O. 3的非常低的對數(shù)值減少。然而，當(dāng)梭狀芽孢桿菌孢子用包含氨基酸，?；悄懰猁}，苯扎氯銨和Tris的苯甲醇培養(yǎng)時，如果用冰處理孢子則有2. 77的CFU/mL對數(shù)值減少(99. 8%減少)，如果用熱沖擊處理孢子則有2. 99的CFU/mL對數(shù)值減少(99. 9%減少)。發(fā)明人同樣發(fā)現(xiàn)EDTA和雙氯苯雙胍己烷抑制萌芽溶液，其中苯扎氯銨和苯甲醇并沒有影響萌芽。苯扎氯銨和苯甲醇并不能殺滅孢子，且不能引發(fā)萌芽。用苯扎氯銨，苯甲醇，氨基酸和?；悄懰徕c培養(yǎng)I小時之后，沒有經(jīng)過熱處理的孢子被殺滅，而孢子似乎與包含苯扎氯銨和苯甲醇的萌芽溶液中發(fā)生萌芽時才能被殺滅。緩沖液被發(fā)現(xiàn)對梭狀芽孢桿菌細(xì)胞和其它細(xì)菌沒有毒性，并有效地使抗菌劑失去活性。因此，用苯扎氯銨，本甲醇，氨基酸和?；悄懰徕c培養(yǎng)I小時后，所產(chǎn)生的CFU/mL的下降不可能是瓊脂板“延續(xù)”效果的結(jié)果。本發(fā)明還發(fā)現(xiàn)苯扎氯銨和苯甲醇不會影響萌芽溶液的效果。苯扎氯銨和苯甲醇因此展示了防腐功效，并似乎可以殺滅梭狀芽孢桿菌的萌芽孢子。萌芽溶液對孢子形成的抑制效果
結(jié)果展示在圖9和10中，在萌芽溶液的存在下培養(yǎng)72小時后，計數(shù)為100%的仍為營養(yǎng)細(xì)胞，同時在對照物中(PBS中培養(yǎng)細(xì)胞)，24小時后計數(shù)100%的孢子。這樣的結(jié)果表明本發(fā)明的萌芽溶液阻止了梭狀芽孢桿菌營養(yǎng)細(xì) 胞的孢子繁殖。
權(quán)利要求
1.一種抗菌組合物，其特征在于，所述抗菌組合物包括萌芽物和抗菌劑，其中所述萌芽物增加病原體對來自抗菌劑的攻擊的易感性，其中所述抗菌劑并不抑制所述萌芽物。
2.一種根據(jù)權(quán)利要求I所述的組合物，其特征自傲與在于，所述萌芽物包括牛磺膽酸鹽和至少兩種氨基酸。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的組合物，其特征在于，所述?；悄懰猁}為牛磺膽酸鈉，所述至少兩種氨基酸為組氨酸、精氨酸、天冬氨酸、甘氨酸和纈氨酸。
4.根據(jù)前面任一項權(quán)利要求所述的組合物，其特征在于，細(xì)菌病原體選自梭狀芽孢 桿菌、抗甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)、綠膿桿菌、白色念珠菌和黑曲菌。
5.根據(jù)前面任一項權(quán)利要求所述的組合物，其特征在于，所述抗菌劑包括苯扎氯銨和苯甲醇。
6.根據(jù)前述任一項權(quán)利要求所述的組合物，其特征在于，相對于最終組合物，所述萌芽物的量為I至10禮，而抗菌劑的量為0. 01 %至2%。
7.根據(jù)前述任一項權(quán)利要求所述的組合物，其特征在于，所述組合物的形式為液體、凝膠、泡沫、噴霧或藥片。
8.一種抗菌抹布，其特征在于，所述抗菌抹布包括用前述任一項權(quán)利要求所述的組合物浸潰的織物、網(wǎng)或紗布類材料。
9.抗菌洗手液、或者用于涂抹在非生物表面上的涂料或漆，其特征在于，包含根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一項所述的組合物。
10.一種消毒表面、從而使得表面基本無病原體的方法，其特征在于，所述方法包括使所述表面與權(quán)利要求1-7中任一項所述的組合物、或者權(quán)利要求8所述的抗菌抹布、或者權(quán)利要求8所述的涂料接觸足夠長的時間，以使病原體萌芽并被殺滅。
全文摘要
本申請涉及一種抗菌組合物，該抗菌組合物包括萌芽物和抗菌劑，其中的萌芽物增加了病原體對來自抗菌劑的攻擊的易感性，而其中的抗菌劑并不抑制萌芽物。本申請同樣提供了一種包含這種抗菌組合物的抗菌抹布、洗手液和涂料，以及使用這種組合物對表面進行消毒的方法。
文檔編號A01N33/12GK102802413SQ201180009870
公開日2012年11月28日 申請日期2011年2月15日 優(yōu)先權(quán)日2010年2月16日
發(fā)明者托尼·沃辛頓, 勞拉·威爾頓 申請人:英賽特保健有限責(zé)任公司