專利名稱：丙型肝炎病毒抑制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的抗病毒劑。更具體地，本發(fā)明涉及能抑制由丙型肝炎病毒(HCV)編碼的NS5A蛋白的功能的化合物、包含所述化合物的組合物、抑制HCV病毒復(fù)制的方法、治療或預(yù)防HCV感染的方法以及制備所述化合物的方法。
背景技術(shù)：
HCV感染是全世界人類肝病的主要原因。在美國，估計450萬美國人慢性感染HCV。盡管只有30%的急性感染是具有癥狀的，但是超過85%的被感染個體發(fā)展為慢性、持續(xù)性感染。1997年，美國HCV感染的治療費用已被估計為54. 6億美元。在全世界估計超過2億人被慢性感染。HCV感染是所有慢性肝病的40-60%和所有肝臟移植的30%的原因。在美國，慢性HCV感染導(dǎo)致所有肝硬化、終末期肝病和肝癌的30%。CDC估計，到2010年HCV造成的死亡人數(shù)將最少増加至每年38，000人。由于病毒表面抗原的高度變異性、多種病毒基因型的存在以及所證實的免疫特異性，在不久的將來開發(fā)成功的疫苗是不可能的。α-干擾素(単獨使用或與利巴韋林組合使用)自從被批準(zhǔn)用于治療慢性HCV感染后已經(jīng)得到廣泛應(yīng)用。然而，該治療常伴有不良的副作用流行性感冒樣癥狀、白細(xì)胞減少、血小板減少、干擾素所致的抑郁以及利巴韋林誘導(dǎo)的貧血(Lindsay, K. L. (1997)Hepatology 26(suppl I) :71S_77S)。與其它 5 種主要HCV基因型導(dǎo)致的感染相比，該治療對HCV基因型I導(dǎo)致的感染(其構(gòu)成了發(fā)達(dá)市場中所有HCV感染的約75% )不太有效。不幸的是，只有約50-80%的患者對該治療應(yīng)答(通過血清HCV RNA水平的降低以及肝酶的正?；瘉頊y量)，并且50-70%的應(yīng)答者在停止治療的6個月內(nèi)復(fù)發(fā)。最近，隨著聚こニ醇化干擾素(Peg-IFN)的引進(jìn)，初始和持續(xù)的應(yīng)答率都已經(jīng)大大改善，Peg-IFN和利巴韋林的組合治療構(gòu)成了治療的金標(biāo)準(zhǔn)。然而，與組合治療相關(guān)的副作用以及基因型I患者應(yīng)答的受損為改善該疾病的控制提供了機(jī)會。HCV在1989年首次通過分子克隆被鑒定(Choo，Q-L等人(1989) Science 244 359-362)，現(xiàn)在被廣泛接受為輸血后非甲非こ型肝炎(NANBH)最常見的致病物(Kuo，G等人(1989) Science 244:362-364)。由于其基因組結(jié)構(gòu)和序列同源性,該病毒被指定為黃病毒科家族的新屬。與黃病毒科的其它成員如黃病毒屬(例如黃熱病病毒和登革熱病毒1-4型)和瘟病毒屬(例如牛病毒性腹瀉病毒、搖羊毛者病病毒和經(jīng)典豬瘟病毒(classicswine fever virus))相似(Choo, Q-L 等人(1989) Science 244 :359-362 ；Miller, R. H.和R. H. Purcell (1990)Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87 :2057-2061)，HCV 是含有正極性的單鏈RNA分子的包膜病毒。HCV基因組約9. 6千堿基(kb)，具有約340堿基的長的、高度保守的非加帽的5'非翻譯區(qū)(NTR)，其作為內(nèi)核糖體進(jìn)入位點(IRES)發(fā)揮功能(Wang CY等人“RNA假結(jié)是位于丙型肝炎病毒5’非編碼區(qū)RNA內(nèi)的內(nèi)核糖體進(jìn)入位點的ー個必要的結(jié)構(gòu)要素(An RNA pseudoknot is an essential structural element of tne internalribosome entry site located within the Hepatitis C virus 5! noncoding regionRNA)-A Publication of RNA Society. 1 (5) :526_537，1995 年 7 月)。該要素之后是編碼單長可讀框(ORF)的區(qū)域，其編碼包含結(jié)構(gòu)和非結(jié)構(gòu)病毒蛋白的約3000個氨基酸的多肽。當(dāng)進(jìn)入細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)后，該RNA被直接翻譯成包含結(jié)構(gòu)和非結(jié)構(gòu)病毒蛋白的約3000個氨基酸的多肽。該大型多肽隨后通過宿主和病毒編碼的蛋白酶的組合被加工成各結(jié)構(gòu)和非結(jié)構(gòu)蛋白(Rice,CM. (1996),B. N. Fields,D. M. Knipe和P. M. Howley (編輯)Virology第2版，p931-960 ；Raven Press, N. Y.)。有三種結(jié)構(gòu)蛋白-C、El和E2。P7蛋白的功能未知，該蛋白由高度可變的序列構(gòu)成。有多種非結(jié)構(gòu)蛋白。NS2是鋅離子依賴性金屬蛋白酶(zinc-dependent metalloproteinase),其與NS3蛋白的一部分聯(lián)合發(fā)揮功能。NS3合并了兩個催化功能(獨立于它與NS2的聯(lián)合)在N-端末端的絲氨酸蛋白酶(其需要NS4A作
為輔因子)和在羰基端的ATP酶依賴性解旋酶功能。NS4A是緊密結(jié)合的但非共價的絲氨酸蛋白酶輔因子。NS5A是膜錨定磷蛋白，其以基礎(chǔ)磷酸化(56kDa)和高度磷酸化(58kDa)的形式存在。盡管其功能還沒有完全闡明，但NS5A被認(rèn)為在病毒復(fù)制中很重要。HCV的NS5B蛋白(591 個氨基酸，65kDa) (Behrens, S. E.等人(1996)EMBO J. 1512-22)編碼 RNA 依賴性RNA聚合酶(RdRp)活性，含有其它RNA病毒聚合酶中存在的規(guī)范基序。NS5B蛋白類內(nèi)(在Ib分離物間約95-98%的氨基酸(aa)同一性)和類間(在基因型Ia和Ib分離物之間約85%的aa同一性)都相當(dāng)保守。HCV NS5B RdRp產(chǎn)生感染性子代病毒體的活性的本質(zhì)已經(jīng)在黑猩猩中得到正式證明(A. A. Kolykhalov 等人(2000) Journal of Virology, 74 (4)2046-2051)。因此，人們預(yù)期抑制NS5B RdRp活性(抑制RNA復(fù)制)對于治療HCV感染是有用的。在長ORF末端的終止密碼子之后，有一個大致由三個區(qū)域組成的3' NTR :在各種基因型之間保守性差的約40個堿基的區(qū)域，可變長度的poly (U)/聚嘧啶段，以及也被稱為“3' X-尾”的高度保守的98個堿基的單元(Kolykhalov, A.等人(1996) J. Virology70 :3363-3371 ；Tanaka, T.等人(1995)Biochem Biophys. Res. Commun. 215744-749 ;Tanaka,T.等人(1996)J. Virology 70 :3307-3312 ;Yamada，N.等人(1996)Virology 223 255-261)。預(yù)期3' NTR形成穩(wěn)定的ニ級結(jié)構(gòu)，其對HCV在黒猩猩中的生長是必須的，并被認(rèn)為在啟動和調(diào)節(jié)病韋RNA復(fù)制中發(fā)揮功能。需要選擇性抑制HCV病毒復(fù)制的對治療HCV感染的患者有用的化合物。特別是，需要有效抑制NS5A蛋白功能的化合物。HCV NS5A蛋白在例如Tan，S. -L.，Katzel,M. G. Virology 2001，284，I 以及 Rice，C. M. Nature2005，435，374 中有描述。基于以上所述，非常需要鑒定具有抑制HCV的能力的化合物。發(fā)明概述本發(fā)明涉及下文所述的新的抗病毒化合物、包含所述化合物的藥物組合物以及在需要這類治療的受試者中使用所述化合物治療或預(yù)防病毒(特別是HCV)感染的方法。本發(fā)明的化合物干擾丙型肝炎病毒的生命周期，且作為抗病毒劑也是有用的。在其首要的方面，本發(fā)明提供了式⑴的化合物Q-G-A-L-B-W (I)
或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中A和B各自獨立地不存在或者是單環(huán)或多環(huán)的基團(tuán)，所述基團(tuán)獨立地選自芳基、雜芳基、雜環(huán)基、C3-C8環(huán)烷基和C3-C8環(huán)烯基，其各自任選被取代；優(yōu)選地，A和B各自獨立地是任選被取代的芳基或任選被取代的雜芳基；L不存在或者是脂族基團(tuán)；優(yōu)選地，L選自O(shè)、-NH-、-C (O)-、-C (O) NH-、CrC4烷基、C2-C4烯基、C2-C4炔基、-(C1-C4烷基)-N (R) - (C1-C4烷基)-和雜環(huán)基，其各自任選被取代；其中A、B和L中至少ー個是存在的；W選自
權(quán)利要求
1.式⑴的化合物 Q-G-A-L-B-W (I) 或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中 A和B各自獨立地不存在或者是單環(huán)或多環(huán)的基團(tuán)，其各自獨立地選自芳基、雜芳基、雜環(huán)基、C3-C8環(huán)烷基和C3-C8環(huán)烯基，所述各基團(tuán)任選被取代； L不存在或者是脂族基團(tuán)； 其中A、B和L中至少一個是存在的； W選自
2.權(quán)利要求I的化合物，其中L選自O(shè)、-NH-,-C(O)-, -C(O)NH-, C1-C4烷基、C2-C4烯基和C2-C4炔基以及-(C1-C4烷基)-NH- (C1-C4烷基)_，其各自任選被取代；或其藥學(xué)上可接受的鹽。
3.權(quán)利要求I的化合物，其是式(IIa)、(IIb)或(IIc)的化合物
4.權(quán)利要求3的化合物，其中 L各自不存在或選自O(shè)、-C(O)NH-, -(C1-C4烷基)-NH-(C1-C4烷基)-、雜環(huán)基、C2-C4烯基或C2-C4炔基，其各自任選被取代； A和B各自獨立地不存在、是任選被取代的芳基或任選被取代的雜芳基；或者作為替代選擇，A、L和B —起形成選自下列基團(tuán)之一的連接基
5.權(quán)利要求I的化合物，其是式(Ilia)、(IIIb)、(IIIc)或(IIId)的化合物
6.權(quán)利要求I的化合物，其是式(IVa)、(IVb)或(IVc)的化合物
7.權(quán)利要求I的化合物，其是式(Va)、(Vb)、(Vc)、(Vd)、(Ve)或(Vf)的化合物
8.權(quán)利要求I的化合物，其是式(VIa)或(VIb)的化合物
9.權(quán)利要求I的化合物，其選自
10.權(quán)利要求I的化合物，其選自下面的表中匯編的化合物1-376 化合物1-219
11.藥物組合物，其包含權(quán)利要求I所述的一種化合物或化合物的組合或其藥學(xué)上可接受的鹽，以及藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。
12.抑制含RNA病毒的復(fù)制的方法，其包括使所述病毒與治療有效量的權(quán)利要求I所述的一種化合物或化合物的組合或其藥學(xué)上可接受的鹽接觸。
13.治療或預(yù)防由含RNA病毒導(dǎo)致的感染的方法，其包括給需要這類治療的患者施用治療有效量的權(quán)利要求I所述的一種化合物或化合物的組合或其藥學(xué)上可接受的鹽。
14.權(quán)利要求12的方法，其中所述的含RNA病毒是丙型肝炎病毒。
15.權(quán)利要求12的方法，其進(jìn)一步包括共同施用一個或多個選自宿主免疫調(diào)節(jié)劑和抗病毒劑或其組合的活性劑的步驟。
16.權(quán)利要求14的方法，其中所述的宿主免疫調(diào)節(jié)劑選自干擾素-α、聚乙二醇化干擾素-α、干擾素_β、干擾素-Y、復(fù)合干擾素、細(xì)胞因子和疫苗。
17.權(quán)利要求14的方法，其中所述的抗病毒劑通過抑制與病毒復(fù)制相關(guān)的宿主細(xì)胞功能而抑制HCV的復(fù)制。
18.權(quán)利要求14的方法，其中所述的抗病毒劑通過靶向于病毒基因組的蛋白質(zhì)而抑制HCV的復(fù)制。
19.權(quán)利要求14的方法，其中所述的抗病毒劑是HCV病毒蛋白質(zhì)、復(fù)制過程或其組合的抑制劑，其中所述的靶向的蛋白質(zhì)或復(fù)制過程選自解旋酶、蛋白酶、聚合酶、金屬蛋白酶、NS4A、NS4B、NS5A、裝配、進(jìn)入和 IRES。
20.權(quán)利要求12的方法，其進(jìn)一步包括共同施用治療或減輕HCV感染的癥狀的一個活性劑或活性劑的組合的步驟，所述癥狀選自肝硬化和肝臟的炎癥。
21.權(quán)利要求12的方法，其進(jìn)一步包括共同施用治療患者的由乙型肝炎(HBV)感染導(dǎo)致的疾病的一個或多個活性劑的步驟。
22.權(quán)利要求12的方法，其進(jìn)一步包括共同施用治療患者的由人免疫缺陷病毒(HIV)感染導(dǎo)致的疾病的一個或多個活性劑的步驟。
23.權(quán)利要求10的藥物組合物，其進(jìn)一步包含選自干擾素、聚乙二醇化干擾素、利巴韋林、金剛烷胺、HCV蛋白酶抑制劑、HCV聚合酶抑制劑、HCV解旋酶抑制劑或內(nèi)核糖體進(jìn)入位點抑制劑的活性劑。
24.權(quán)利要求10的組合物，其進(jìn)一步包含細(xì)胞色素P450單加氧酶抑制劑或其藥學(xué)上可接受的鹽。
25.權(quán)利要求23的組合物，其中所述的細(xì)胞色素P450單加氧酶抑制劑是利托那韋。
26.在需要其的個體中治療丙型肝炎感染的方法，其包括給所述個體共同施用細(xì)胞色素P450單加氧酶抑制劑或其藥學(xué)上可接受的鹽和權(quán)利要求I的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。
27.制備權(quán)利要求I至9中任意一項所述的化合物的方法，其包括 i)通過過渡金屬催化的交叉偶聯(lián)反應(yīng)、環(huán)-閉合-復(fù)分解或其它分子內(nèi)環(huán)-閉合反應(yīng)例如各種類型的Diels-Alder反應(yīng)、酰胺(內(nèi)酰胺)形成、還原性胺化、肟化、酯形成(內(nèi)酯化)、氨基甲酸酯或脲形成制備式(l-1-a)的化合物 Q1-G-A-L-B-W1 (l-1-a)； 其中 W1獨立地選自
全文摘要
本發(fā)明公開了式(I)的化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽、酯或前體藥物Q-G-A-L-B-W(I)，其抑制含RNA病毒，特別是丙型肝炎病毒(HCV)。因此，本發(fā)明的化合物干擾丙型肝炎病毒的生命周期并且也可用作抗病毒劑。本發(fā)明進(jìn)一步涉及用于施用于患有HCV感染的患者的包含上述化合物的藥物組合物。本發(fā)明還涉及通過施用包含本發(fā)明的化合物的藥物組合物在個體中治療HCV感染的方法。
文檔編號A01N43/00GK102843909SQ201180015376
公開日2012年12月26日 申請日期2011年1月25日 優(yōu)先權(quán)日2010年1月25日
發(fā)明者邱遙齡, 王策, 彭小文, 應(yīng)律, 曹暉, 柯日新 申請人:埃南塔制藥公司