專利名稱：一種秸稈飼料的制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及農(nóng)作物秸桿應用技術領域，特別是涉及一種秸桿飼料的制備方法。
背景技術：
農(nóng)作物秸桿是重要 的潛在生物資源，我國年產(chǎn)各類農(nóng)作物秸桿7億噸左右?，F(xiàn)階段國家正大力提倡秸桿資源綜合利用，一方面是解決秸桿資源季節(jié)性過剩造成嚴重污染環(huán)境的問題，另一方面是解決目前秸桿綜合利用效率低下的問題。我國目前秸桿資源大部分是焚燒還田和用作生活燃料，少部分用作反芻家畜飼料，數(shù)量還達不到秸桿資源總量的10%，綜合利用率低。我國對秸桿飼料的開發(fā)利用仍處于起步階段，飼料工業(yè)集約化生產(chǎn)水平較低。秸桿飼料的轉化和加工利用技術主要有物理處理和化學處理。其中物理處理、化學處理方法最新的成果也只能做到改善秸桿的適口性，少部分能改善纖維素的品質(zhì)，但均不能有效地提高秸桿飼料的營養(yǎng)價值。目前用于飼料加工的主要是玉米秸桿和水稻秸桿，利用率不及10%，少數(shù)養(yǎng)殖企業(yè)也引進了微貯處理技術。但微貯處理技術由于引進的秸桿分解菌種不適宜各地區(qū)的氣候條件，分解效果不理想。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術問題是克服現(xiàn)有秸桿飼料綜合利用效率低下、物理處理和化學處理方法不能有效提高秸桿飼料的營養(yǎng)價值、微貯處理技術又不能滿足不能氣候條件的缺陷，針對各地區(qū)不同氣候條件下秸桿微生物分解發(fā)酵的不同特點，對癥下藥，提供一種秸桿飼料的制備方法，為廣大山區(qū)大力發(fā)展生態(tài)畜牧業(yè)提供有力保障，方法簡單，營養(yǎng)豐富，易消化。為了解決上述技術問題，本發(fā)明采用如下的技術方案
本發(fā)明秸桿飼料的制備方法包括如下步驟
(O菌種采集采集堆放在田間自然腐爛的油菜秸桿；
(2)菌種分離將油菜秸桿浸泡后稀釋，取稀釋液涂布在馬丁氏培養(yǎng)基上于25°C培養(yǎng)5 7d，繼續(xù)用馬丁氏培養(yǎng)基分離純化菌種至無污染，篩選D/d值(菌落生長直徑為d，菌落周圍透明圈直徑為D)大于2的菌落即為菌種；
(3)菌液培養(yǎng)取少量步驟(2)得到的菌種接種于馬丁氏液體培養(yǎng)基上搖床培養(yǎng)制得菌液；
(4)稻桿發(fā)酵取菌液20 100ml、稻桿洛150 250g、鹿糖15 25g和蒸懼水100 150ml，混勻發(fā)酵，即得秸桿飼料。具體的，上述秸桿飼料的制備方法為
(O菌種采集采集堆放在田間300天以上并自然腐爛的油菜秸桿；
(2)菌種分離將油菜秸桿與水按1:8 12的質(zhì)量比混合浸泡20 28h后稀釋至10_4倍，取稀釋液O. ImL涂布在8 12ml馬丁氏培養(yǎng)基上，于25°C培養(yǎng)5 7d，繼續(xù)用馬丁氏培養(yǎng)基分離純化菌種至無污染，篩選D/d值大于2的菌落即為菌種；
(3)菌液培養(yǎng)用O.3cm打孔器取步驟(2)得到的菌種接種于45 55ml馬丁氏液態(tài)培養(yǎng)基中，于25°C、110 130r/min搖床培養(yǎng)70 74h，再取20%的培養(yǎng)產(chǎn)物接種于80 120ml馬丁氏液態(tài)培養(yǎng)基中制得菌液；
(4)秸桿發(fā)酵取菌液20 100ml、秸桿渣200g、蔗糖20g和蒸餾水120ml，混勻，置于25 28°C條件下發(fā)酵15 20d即可。更進一步的，前述的制備方法中，所述菌種分離為將油菜秸桿與水按1:10的質(zhì)量比混合浸泡24h后稀釋至10_4倍，取稀釋液O. ImL涂布在IOml馬丁氏培養(yǎng)基上，于25°C培養(yǎng)5 7d，繼續(xù)用馬丁氏培養(yǎng)基分離純化菌種至無污染，篩選D/d值大于2的菌落即為菌種。所述菌液培養(yǎng)為用O. 3cm打孔器取步驟(2)得到的菌種接種于50ml馬丁氏液態(tài)培養(yǎng) 基中，于25°C、120r/min搖床培養(yǎng)72h，再取20%的培養(yǎng)產(chǎn)物接種于IOOml馬丁氏液態(tài)培養(yǎng)基中制得菌液。優(yōu)選的，前述制備方法中，在所述馬丁氏培養(yǎng)基中按250ml馬丁氏培養(yǎng)基加入15 25mg青霉素和25 35mg鏈霉素的比例加入青霉素和鏈霉素,青霉素和鏈霉素的優(yōu)選加入量分別為20mg和30mg。在所述馬丁氏液態(tài)培養(yǎng)基中按250ml馬丁氏液態(tài)培養(yǎng)基加入15 25mg青霉素和25 35mg鏈霉素的比例加入青霉素和鏈霉素,青霉素和鏈霉素的優(yōu)選加入量分別為20mg和30mg。在馬丁氏培養(yǎng)基中加入青霉素和鏈霉素可以抑制黃曲霉等能引起稻桿霉變的有害細菌生長。與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明針對各地區(qū)不同氣候條件下具有不同的秸桿微生物分解發(fā)酵特點，對癥下藥，利用當?shù)匚⑸?采集于堆放在田間并自然腐爛的油菜秸桿)處理當?shù)亟諚U，將秸桿粗纖維轉化為可消化的養(yǎng)分，且污染少、效益高，所得秸桿飼料是一種無異味、纖維素含量低，各項營養(yǎng)指標都較高、適口性好、易消化的綠色動物飼料，提高了秸桿資源飼料利用的效率，解決了我國大力發(fā)展生態(tài)畜牧業(yè)卻缺乏冬季家畜飼料和秸桿飼用率低下的瓶頸問題。在制備時，還可以在馬丁氏培養(yǎng)基和馬丁氏液態(tài)培養(yǎng)基中加入青霉素和鏈霉素，能抑制黃曲霉等能引起秸桿霉變的有害菌生長，在5 30°C的條件下，秸桿飼料的保質(zhì)期長達1-2個月。使用本發(fā)明提供的制作方法可以實現(xiàn)規(guī)?；?、產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)，方法簡單，取材方便，技術可行，為農(nóng)作物秸桿加工與利用開辟了一條新路。
具體實施例方式實施例I :
發(fā)酵池構造長IOm,寬5m,高lm, 40cm厚的磚墻，C25輪灌衆(zhòng),側面粉刷。(I)秸桿預處理于每年3 5月份或8 11月份農(nóng)作物成熟后收集秸桿，將農(nóng)作物秸桿中的石塊、土塊等動物不能食用的雜物去除，采用粉碎機將農(nóng)作物秸桿粉碎成2 5cm長度，以便發(fā)酵時微生物能充分接觸；
(2)微生物菌種采集采集長期堆放在田間自然腐爛的油菜秸桿；
(3)菌種分離將秸桿與水按1:10的質(zhì)量比混合，浸泡24h后稀釋至10_4，取稀釋液
O.ImL涂布在IOml馬丁氏培養(yǎng)基上，于25°C培養(yǎng)5 7d，取D/d值大于2的菌落繼續(xù)分離純化培養(yǎng)(分離純化培養(yǎng)的方法是將菌種接種于馬丁氏培養(yǎng)基上于25°C培養(yǎng)5 7d)，至菌落無污染并且D/d值大于2，制得菌種；(4)菌液培養(yǎng)用3_打孔器采集步驟(2)所制得的菌種，接種于50ml馬丁氏液態(tài)培養(yǎng)基中，于25°C、120r/min搖床培養(yǎng)72h，取20%的培養(yǎng)產(chǎn)物接種于IOOml馬丁氏液態(tài)培養(yǎng)基中制得菌液；
(5)秸桿發(fā)酵取菌液20 100ml、秸桿渣200g、蔗糖20g和蒸餾水120ml，混勻，置于25 28°C條件下發(fā)酵15 20d即可，檢驗合格后，可直接給反芻動物食用。發(fā)酵前，秸桿渣的粗蛋白含量為I. 26%、粗纖維含量為47%、粗脂肪含量為O. 69%，發(fā)酵后，秸桿飼料中粗蛋白含量為3. 21%、粗纖維含量為9. 8%、粗脂肪含量為I. 25%。實施例2:
(O菌種采集將油菜秸桿堆放在田間300天以上使其自然腐爛后采集腐爛的油菜秸
桿；
(2)菌種分離將油菜秸桿與水按1:8的質(zhì)量比浸泡20h后稀釋至10_4，取稀釋液O.ImL涂布在12ml馬丁氏培養(yǎng)基上，于25°C培養(yǎng)5 7d，如菌種有污染則繼續(xù)分離純化，將菌種接種于馬丁氏培養(yǎng)基上于25°C培養(yǎng)5 7d，直至菌種無污染，篩選D/d值大于2的菌落即為分離得到的菌種；
(3)菌液培養(yǎng)用3mm打孔器采集步驟(2)所制得的菌種，接種于55ml馬丁氏液態(tài)培養(yǎng)基中，于25°C、110r/min搖床培養(yǎng)74h，取20%的培養(yǎng)產(chǎn)物接種于80ml馬丁氏液態(tài)培養(yǎng)基中制得菌液；
(4)秸桿發(fā)酵取菌液20 100ml、秸桿渣150g、蔗糖15g和蒸餾水150ml，混勻，置于25 28°C條件下發(fā)酵15 20d即可。檢驗合格后，可直接給反芻動物食用。得到的秸桿飼料各成分為水分7. 23% 7. 57%、灰分3. 15% 3. 61%、P 58. I 64. 5mg/100g、Ca 863 962mg/100g、粗蛋白 3. 52% 4. 66%、粗纖維 9. 8% 10. 8%、粗脂肪
I.35% 4. 25%，纖維素含量降低，各項營養(yǎng)指標都提高，再經(jīng)過檢驗合格后，可直接給反芻動物食用，適口性好，營養(yǎng)豐富。實施例3:
(O菌種采集將油菜秸桿堆放在田間300天以上使其自然腐爛后采集腐爛的油菜秸
桿；
(2)菌種分離將油菜秸桿與水按1:12的質(zhì)量比浸泡28h后稀釋至10_4，取稀釋液
O.ImL涂布在8ml馬丁氏培養(yǎng)基上，于25°C培養(yǎng)5 7d，如菌種有污染則繼續(xù)分離純化，將菌種接種于馬丁氏培養(yǎng)基上于25°C培養(yǎng)5 7d，直至菌種無污染，篩選D/d值大于2的菌落即為分離得到的菌種；
(3)菌液培養(yǎng)用直徑O.3cm打孔器采集步驟(2)所制得的菌種，接種于45ml馬丁氏液態(tài)培養(yǎng)基中，于25°C、130r/min搖床培養(yǎng)70h，取20%的培養(yǎng)產(chǎn)物接種于120ml馬丁氏液態(tài)培養(yǎng)基中制得菌液；
(4)秸桿發(fā)酵取菌液20 100ml、秸桿渣250g、蔗糖25g和蒸餾水100ml，混勻，置于25 28°C條件下發(fā)酵15 20d即可。檢驗合格后，可直接給反芻動物食用。
權利要求
1.一種秸桿飼料的制備方法，其特征在于包括如下步驟 (1)菌種采集采集堆放在田間自然腐爛的油菜秸桿； (2)菌種分離將油菜秸桿浸泡后稀釋，取稀釋液涂布在馬丁氏培養(yǎng)基上于25°C培養(yǎng)5 7d，繼續(xù)用馬丁氏培養(yǎng)基分離純化菌種至無污染，篩選D/d值大于2的菌落即為菌種； (3)菌液培養(yǎng)取少量步驟(2)得到的菌種接種于馬丁氏液體培養(yǎng)基上搖床培養(yǎng)制得菌液； (4)稻桿發(fā)酵取菌液20 100ml、稻桿洛150 250g、鹿糖15 25g和蒸懼水100 150ml，混勻發(fā)酵，即得秸桿飼料。
2.按照權利要求I所述秸桿飼料的制備方法，其特征在于 (O菌種采集采集堆放在田間300天以上并自然腐爛的油菜秸桿； (2)菌種分離將油菜秸桿與水按1:8 12的質(zhì)量比混合浸泡20 28h后稀釋至10_4倍，取稀釋液O. ImL涂布在8 12ml馬丁氏培養(yǎng)基上，于25°C培養(yǎng)5 7d，繼續(xù)用馬丁氏培養(yǎng)基分離純化菌種至無污染，篩選D/d值大于2的菌落即為菌種； (3)菌液培養(yǎng)用O.3cm打孔器取步驟(2)得到的菌種接種于45 55ml馬丁氏液態(tài)培養(yǎng)基中，于25°C、110 130r/min搖床培養(yǎng)70 74h，再取20%的培養(yǎng)產(chǎn)物接種于80 120ml馬丁氏液態(tài)培養(yǎng)基中制得菌液； (4)秸桿發(fā)酵取菌液20 100ml、秸桿渣200g、蔗糖20g和蒸餾水120ml，混勻，置于25 28°C條件下發(fā)酵15 20d即可。
3.按照權利要求2所述秸桿飼料的制備方法，其特征在于所述菌種分離為將油菜秸桿與水按1:10的質(zhì)量比混合浸泡24h后稀釋至ICT4倍，取稀釋液O. ImL涂布在IOml馬丁氏培養(yǎng)基上，于25°C培養(yǎng)5 7d，繼續(xù)用馬丁氏培養(yǎng)基分離純化菌種至無污染，篩選D/d值大于2的菌落即為菌種。
4.按照權利要求2所述秸桿飼料的制備方法，其特征在于所述菌液培養(yǎng)為用O.3cm打孔器取步驟(2)得到的菌種接種于50ml馬丁氏液態(tài)培養(yǎng)基中，于25°C、120r/min搖床培養(yǎng)72h，再取20%的培養(yǎng)產(chǎn)物接種于IOOml馬丁氏液態(tài)培養(yǎng)基中制得菌液。
5.按照權利要求1、2或3所述秸桿飼料的制備方法，其特征在于在所述馬丁氏培養(yǎng)基中按250ml馬丁氏培養(yǎng)基加入15 25mg青霉素和25 35mg鏈霉素的比例加入青霉素和鏈霉素。
6.按照權利要求5所述秸桿飼料的制備方法，其特征在于所述青霉素和鏈霉素的加入量分別為20mg和30mg。
7.按照權利要求1、2或4所述秸桿飼料的制備方法，其特征在于在所述馬丁氏液態(tài)培養(yǎng)基中按250ml馬丁氏液態(tài)培養(yǎng)基加入15 25mg青霉素和25 35mg鏈霉素的比例加入青霉素和鏈霉素。
8.按照權利要求7所述秸桿飼料的制備方法，其特征在于所述青霉素和鏈霉素的加入量分別為20mg和30mg。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種秸稈飼料的制備方法，采集堆放在田間并自然腐爛的油菜秸稈作為菌種原料，用馬丁氏培養(yǎng)基分離培養(yǎng)制得菌種，將菌種用馬丁氏液態(tài)培養(yǎng)基培養(yǎng)后制成菌液，將菌液接種于秸稈發(fā)酵生產(chǎn)秸稈飼料，針對各地區(qū)不同氣候條件下具有不同的秸稈微生物分解發(fā)酵特點，對癥下藥，利用當?shù)匚⑸?采集于堆放在田間并自然腐爛的油菜秸稈)處理當?shù)亟斩挘媒斩掞暳鲜且环N無異味、纖維素含量降低，各項營養(yǎng)指標都較高、適口性好、易消化的綠色動物飼料，使用本發(fā)明提供的制作方法可以實現(xiàn)規(guī)?；?、產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)，方法簡單，取材方便，技術可行，為農(nóng)作物秸稈加工與利用開辟了一條新路。
文檔編號A23K1/14GK102613392SQ201210095488
公開日2012年8月1日 申請日期2012年4月1日 優(yōu)先權日2012年4月1日
發(fā)明者任春光, 向準, 孫超, 王瑩, 賀紅早 申請人:貴州省生物研究所