專利名稱：一種六星黑點(diǎn)豹蠹蛾人工飼養(yǎng)的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于植物保護(hù)技術(shù)領(lǐng)域，涉及林業(yè)有害生物蛀干害蟲六星黒點(diǎn)豹蠹蛾的防治和研究，更具體地說是ー種六星黒點(diǎn)豹蠹蛾人工飼養(yǎng)的方法。
背景技術(shù)：
六星黑豹點(diǎn)蠹蛾(Zewzera leuconotum Butler)又稱刺槐豹蠹蛾、金銀花六星黑點(diǎn)豹蠹蛾、核桃豹蠹蛾、白背斑蠹蛾、白背蠹蛾、豹蠹蛾等。隸屬于鱗翅目(Lepidoptera)、木蠹蛾總科(Cossidea)、木蠹蛾科(Cossidae)、豹蠹蛾亞科(Zeuzerinae)、豹蠹蛾屬。已知寄主有國(guó)槐、洋槐、刺槐、紫穗槐、白蠟、法桐、柳、楊、榆、松、棗、柿、梨、核桃、薄殼山核桃、黃楊、烏桕、楓、、懸鈴木、椿樹、金銀木、紫葉小蘗、桃、櫻桃、石榴、山楂、海棠、板栗、檀樹、梨、 蘋果、櫟、槭、樺、檫木、杜仲、木荊、蓖麻、棉花、茶葉等約50多種。該害蟲以幼蟲蛀食寄主植物的枝梢，造成枝梢干枯斷折，樹冠上形成大量枯枝落葉，嚴(yán)重者導(dǎo)致整株樹木死亡，被害寄主死亡率在5%以上，經(jīng)濟(jì)樹種造成的損失嚴(yán)重，對(duì)園林緑化林木造成極大危害。據(jù)文獻(xiàn)記載該種國(guó)內(nèi)分布于天津、山東、山西、陜西、北京、河北、河南、甘肅、江蘇、上海、浙江、安徽、江西、湖南、湖北、福建、廣東、廣西、云南等地；國(guó)外分布于日本，朝鮮。天津在2004年全市林業(yè)有害生物普查中首次在東麗區(qū)發(fā)現(xiàn)，據(jù)調(diào)查當(dāng)年危害面積僅有300 hm2,到2007年危害面積已達(dá)3 000多hm2，傳播擴(kuò)散速度非?？?，目前主要危害行道樹、園林緑化花灌木和部分經(jīng)濟(jì)林。被列為天津市重點(diǎn)林業(yè)有害生物。近年來我們對(duì)六星黒點(diǎn)豹蠹蛾的各蟲態(tài)形態(tài)特征、生活史、對(duì)寄主的選擇性和危害、生物防治技術(shù)等的研究；并且首次從六星黒點(diǎn)豹蠹蛾體上分離得到蟲生真菌交織頂孢霉菌株，開展了蟲生真菌交織頂孢霉菌種培養(yǎng)方法、蟲生真菌交織頂孢霉蟲體接種技術(shù)、蟲生真菌交織頂孢霉蟲體栽培技術(shù)等方面進(jìn)行了研究。發(fā)表了 “六星黒點(diǎn)豹蠹蛾幼蟲轉(zhuǎn)移寄主時(shí)的選擇行為”、“不同溫度下交織頂孢霉對(duì)六星黒點(diǎn)豹蠹蛾幼蟲的致病力研究”、“溫度對(duì)交織頂孢霉孢子萌發(fā)及對(duì)六星黒點(diǎn)豹蠹蛾致病力的影響”等論文。交織頂抱霉[Acremoniumimplicatum ( Miller et al) Gams ] RCEF0260 菌株，是極具藥用價(jià)值的菌株，現(xiàn)已被開發(fā)成ー種保健食品。交織頂孢霉菌絲體中也含有豐富的多糖和氨基酸，同時(shí)還含有核苷類、維生素類、多種人體必需的微量元素(如Zn、 Fe、Ca等)以及不飽和脂肪酸等成分。該菌絲體免疫調(diào)節(jié)作用顯著，具有明顯的細(xì)胞免疫、體液免疫作用和提高單核-巨噬細(xì)胞的吞噬功能，能促進(jìn)疲勞恢復(fù)，另外還有與其他蟲草菌株相似的藥理作用。在毒理學(xué)安全性評(píng)價(jià)方面，交織頂孢霉被證實(shí)安全無毒。 1997年以來，實(shí)際服用人群的反饋信息表明交織頂孢霉對(duì)こ型肝炎、丙型肝炎、腎炎及腫瘤患者的輔助治療等方面有一定作用。在固體培養(yǎng)和液體培養(yǎng)的ェ藝條件和不同的液體培養(yǎng)條件下菌絲體形態(tài)特征變化及多祥性、菌絲體及胞外多糖的產(chǎn)量保肝活性物質(zhì)等方面均有報(bào)道。但是，他們的菌絲是用培養(yǎng)基培養(yǎng)的。根據(jù)多年來人們對(duì)蟲生真菌的研究結(jié)果來看，天然的和人工栽培在蟲體上蟲草要遠(yuǎn)比通過培養(yǎng)基培養(yǎng)菌株的藥用價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值要大很多倍。我們的研究與他人工作有2個(gè)重要的區(qū)別(1)所用的交織頂孢霉菌株是我們自己從鱗翅目昆蟲六星黑點(diǎn)豹蠹蛾僵蟲提上分離得到的。(2)以六星黑點(diǎn)豹蠹蛾作為交織頂孢霉的寄主進(jìn)行人工栽培，最終要獲得的是帶有寄主的蟲生交織頂孢霉。而不同于人工培養(yǎng)基培養(yǎng)的交織頂孢霉菌絲。相當(dāng)于獲得的是"蟲草〃，而非"蟲草菌絲〃。所以掌握六星黑點(diǎn)豹蠹蛾人工飼養(yǎng)技術(shù)，無論從六星黑點(diǎn)豹蠹蛾的防治還是對(duì)交織頂孢霉蟲草的開發(fā)利用都滿足對(duì)六星黑點(diǎn)豹蠹蛾的需要。因?yàn)樽匀唤缌呛邳c(diǎn)豹蠹蛾其生活周期長(zhǎng)，不能隨時(shí)獲取實(shí)驗(yàn)所需蟲態(tài)，實(shí)驗(yàn)費(fèi)時(shí)費(fèi)力；也不可能獲得大量的幼蟲供交織頂孢霉蟲草的開發(fā)利用。本專利人工系統(tǒng)飼養(yǎng)六星黑點(diǎn)豹蠹蛾技術(shù)，不受季節(jié)和寄主因子的限制，能終年為科學(xué)研究提供試驗(yàn)用六星黑點(diǎn)豹蠹蛾。又能為蟲生交織頂孢霉的開發(fā)利用提供大量的蟲源。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明公開了一種六星黑點(diǎn)豹蠹蛾人工飼養(yǎng)的方法，其特征在于按如下的步驟進(jìn)
(O最初蟲源
采自野外寄主植物枝條中的六星黑點(diǎn)豹蠹蛾幼蟲作為最初蟲源；選用直徑8-lOcm，高 I. 5-2cm的配套培養(yǎng)皿飼養(yǎng)；
(2)幼蟲的飼養(yǎng)方法
用滅菌后的水果刀將已制備好的人工飼飼料分割成約4X3X 2cm大小的方塊，然后與幼蟲分別放置在培養(yǎng)皿中，每個(gè)培養(yǎng)皿中一塊飼料，一頭幼蟲，用培養(yǎng)皿蓋好，貼上標(biāo)簽，在溫度24-30°C，濕度55-80%RH的條件下飼養(yǎng)，平均每6天更換一次飼料，并記錄其頭寬、體長(zhǎng)及體重值，直至化蛹；
(3)蛹的管理:
1)幼蟲化蛹后將蛹從飼料中取出，區(qū)分雌雄，把同一性別同批化的蛹放在一個(gè)培養(yǎng)皿中，用黑紙遮蓋；
2)為了保證雌雄蟲同時(shí)羽化交尾，將先化的蛹放在6— 10°C條件下保存，等雌雄蛹的數(shù)量相同時(shí)，再將裝有蛹的培養(yǎng)皿移放到室溫下放置24-48小時(shí)，然后，放置于溫度范圍 14-350C、濕度范圍35% -80%RH的人工氣候箱內(nèi)；
3)在羽化的前兩天，把每只蛹單獨(dú)放入容器中，標(biāo)明雌雄；在每個(gè)容器中放入一截小樹枝，供其羽化展翅；并在每個(gè)容器底部放一塊圓形濾紙，定期給濾紙上滴加清水保濕；用保鮮膜封口，在保鮮膜上用解剖針扎幾個(gè)眼透氣，將容器用黑紙包裹，形成黑暗環(huán)境，等待羽化；
(4)成蟲的管理
1)將剛羽化、并且是羽化時(shí)間接近的雌雄成蟲各一對(duì)，分別放到養(yǎng)蟲籠內(nèi)，溫度為 24-30°C，濕度為30-60%RH，安靜黑暗的環(huán)境下；
2)在養(yǎng)蟲籠內(nèi)放入一些新鮮枝條，供成蟲產(chǎn)卵和展翅，定期在養(yǎng)蟲籠內(nèi)放置10%的蜂蜜水溶液飼喂，觀察雌雄成蟲的交尾及產(chǎn)卵情況；
4(5)卵孵化的管理
1)當(dāng)成蟲產(chǎn)卵后，將卵小心挑出，放在滅菌后的培養(yǎng)皿中，2天以后用75%酒精對(duì)卵消毒20s，再利用無菌水沖洗2次，放入經(jīng)過滅菌鋪有濾紙的培養(yǎng)皿，在卵上加蓋ー層濾紙，放入溫度為30°C、濕度為55%的人工氣候箱內(nèi)進(jìn)行孵化；
2)每天在濾紙上噴2次無菌水進(jìn)行濕潤(rùn)，對(duì)卵保濕，觀察卵的孵化；
3)待幼蟲孵化后立即將初孵幼蟲接入到裝有人工飼料的12孔養(yǎng)蟲板上；每孔ー只幼
蟲；
(6)初孵幼蟲的飼養(yǎng)
1)幼蟲在3齡之前,一直在養(yǎng)蟲板內(nèi)飼養(yǎng),到3齡可以在稍大的器皿內(nèi)飼養(yǎng),在器皿底部放入人工飼料后壓實(shí)，然后在飼料表面扎幾個(gè)稍大于蟲體的洞，每個(gè)洞放入一只幼蟲，洞與洞之間的距離約2公分；
2)將接好幼蟲的養(yǎng)蟲器皿放置于溫度24—30°C，濕度55-80%RH的條件下飼養(yǎng)，盡可能保持飼養(yǎng)條件黑暗，根據(jù)幼蟲大小和取食情況適時(shí)更換飼料，直至化蛹和羽化。本發(fā)明的飼養(yǎng)方法與通常的方法相比所具有的積極效果
這是對(duì)六星黒點(diǎn)豹蠹蛾首次進(jìn)行的人工飼養(yǎng)，經(jīng)過試驗(yàn)此方法不僅可以成功實(shí)現(xiàn)對(duì)六星黒點(diǎn)豹蠹蛾的人工飼養(yǎng)，還可縮短六星黒點(diǎn)豹蠹蛾的發(fā)育歷程1/2左右。 人工飼養(yǎng)條件下和自然狀態(tài)下六星黒點(diǎn)豹蠹蛾生長(zhǎng)的區(qū)別
內(nèi)容老熟幼蟲平均體重老熟幼蟲平均體長(zhǎng)蛹的平均體長(zhǎng)蛹期完成ー個(gè)世代的時(shí)間自然條件0. 234g24. Bttitti18. Imm35天左右330-一350 天人工飼養(yǎng)0. 312g24. 9mm19. 7mm20天左右110—180 天
本發(fā)明主要研究的六星黒點(diǎn)豹蠹蛾形態(tài)學(xué)包括
卵長(zhǎng)0. 85mm Imm,寬0. 55 0. 7mm。長(zhǎng)橢圓形，卵殼很薄，黃白色或粉紅色。幼蟲幼蟲初孵時(shí)為淡褐色,體長(zhǎng)約Imm,以后轉(zhuǎn)為暗紫紅色。頭、前胸背板和臀板為黑色，腹部顔色淺。腹部每節(jié)具剛毛八根。大顎很發(fā)達(dá)，為黑色或深紫紅色。前胸背板前緣有ー個(gè)橫脊?fàn)畹耐黄穑吘売悬\色鋸齒狀刺突。體節(jié)上每節(jié)有黑色毛瘤，其上有白色剛毛一根，每節(jié)共8根。中部有一條黃褐色細(xì)線，后緣有三排黑褐色棘突，第一排最大，第二排最長(zhǎng)，第三排細(xì)小而雜亂，腹足多序環(huán)狀。老熟幼蟲體長(zhǎng)21 45mm，此時(shí)幼蟲體色一般為紫紅色或桔紅色，體重0. 24 0. 64g。蛹被蛹，紅褐色，長(zhǎng)20 31mm，頂端有ー腭突，腹背每節(jié)具兩橫排刺突，生殖孔下半部?jī)蓚?cè)具明顯刺突10個(gè)，對(duì)稱排列。不同時(shí)期其顔色有變化，初化蛹時(shí)為紫紅色或桔紅色，到快羽化時(shí)變?yōu)楹稚?。成蟲雌成體長(zhǎng)28 35 mm，翅長(zhǎng)15 27mm，兩翅翅展開長(zhǎng)36 60 mm，有的靜息時(shí)翅可以覆蓋整個(gè)尾部。復(fù)眼黑色，體表附有白色長(zhǎng)毛，其中以胸部的較多且長(zhǎng)，去除長(zhǎng)毛后體色為紫紅色。腹節(jié)之間少有白色長(zhǎng)毛或鱗片，可以看到紫紅色的體節(jié)，這一點(diǎn)在雌蟲和雄蟲中一致。產(chǎn)卵前雌蟲腹部較鼓，產(chǎn)卵后明顯變小。翅白色，其上有許多藍(lán)黒色斑點(diǎn)， 斑點(diǎn)有光澤(所有的斑點(diǎn)都有光澤，為其上的鱗片反光所成)，在翅脈之間呈條狀或點(diǎn)狀，其中前翅較多，后翅較少，前翅的斑點(diǎn)分布不規(guī)則，靜息時(shí)可見背部和邊緣較多。腹節(jié)、背板上亦有藍(lán)黑色斑點(diǎn)，背板上有六個(gè)斑點(diǎn)，排成兩行。背板翅根處亦各有一個(gè)藍(lán)黑色斑點(diǎn)。腹節(jié)上的斑點(diǎn)排成六行,腹部有三排,腹側(cè)各ー排,每排六個(gè)斑點(diǎn),斑點(diǎn)直徑大小約為1mm。背部三排斑點(diǎn)，每排明顯能看到的斑點(diǎn)只有五個(gè)，其中中間一排的斑點(diǎn)很小。觸角絲狀。雌成蟲尾部有產(chǎn)卵器，產(chǎn)卵器伸出長(zhǎng)約7 10mm，為黃色。復(fù)眼黑色，足三對(duì)，每對(duì)足第一、二節(jié)腹布滿長(zhǎng)毛，為灰白色，去除鱗毛為淡橘紅色，其他部分為黑藍(lán)色。雄蟲全身亦覆有白色長(zhǎng)毛，且較雌蟲的長(zhǎng)，特別是腹部。雄蟲體長(zhǎng)21 25 mm,M 長(zhǎng)14 17mm,翅展35 40mm,靜息時(shí)翅一般不足以覆蓋整個(gè)尾部，約有3 4mm露在夕卜面。翅上斑紋與雌蛾基本相同，但是前翅藍(lán)黑斑點(diǎn)較雌蟲少且斑點(diǎn)小，后翅除外緣有藍(lán)黑色斑點(diǎn)外，其它部分斑點(diǎn)較少。胸部、背板上亦有藍(lán)黑色斑點(diǎn)，但腹部沒有斑點(diǎn)，側(cè)面有兩排， 每排六個(gè)斑點(diǎn)，斑點(diǎn)較雌蟲小。觸角基半部羽毛狀，端半部絲狀。三對(duì)足的形態(tài)與雌蟲大致一樣。雄蟲較雌蟲活躍，有趨光性。六星黑點(diǎn)豹蠹蛾的生活史
根據(jù)實(shí)際觀察，六星黑點(diǎn)豹蠹蛾在天津是一年發(fā)生一代，但是蟲齡很不整齊。一般以老熟幼蟲在蛀枝內(nèi)越冬，到次年3月初開始繼續(xù)活動(dòng)取食，隨著樹木發(fā)芽長(zhǎng)葉，受害枝枯黃萎蔫，與周圍枝條區(qū)別明顯，蟲量多的樹上，可見大量折枝倒掛。4月中旬老熟幼蟲陸續(xù)開始化蛹，到5月上旬開始羽化，隨后開始產(chǎn)卵。(見表I)。表I六星黑點(diǎn)豹蠹蛾生活史表
權(quán)利要求
1. 一種六星黑點(diǎn)豹蠹蛾人工飼養(yǎng)的方法，其特征在于按如下的步驟進(jìn)行(O最初蟲源采自野外寄主植物枝條中的六星黑點(diǎn)豹蠹蛾幼蟲作為最初蟲源；選用直徑8-lOcm，高.1.5-2cm的配套培養(yǎng)皿飼養(yǎng)；(2)幼蟲的飼養(yǎng)方法用滅菌后的水果刀將已制備好的人工飼飼料分割成約4X 3 X 2cm大小的方塊，然后與幼蟲分別放置在培養(yǎng)皿中，每個(gè)培養(yǎng)皿中一塊飼料，一頭幼蟲，用培養(yǎng)皿蓋好，貼上標(biāo)簽，在溫度24-30°C，濕度55-80%RH的條件下飼養(yǎng)，平均每6天更換一次飼料，并記錄其頭寬、體長(zhǎng)及體重值，直至化蛹；(3)蛹的管理:.1)幼蟲化蛹后將蛹從飼料中取出，區(qū)分雌雄，把同一性別同批化的蛹放在一個(gè)培養(yǎng)皿中，用黑紙遮蓋；.2)為了保證雌雄蟲同時(shí)羽化交尾，將先化的蛹放在6— 10°C條件下保存，等雌雄蛹的數(shù)量相同時(shí)，再將裝有蛹的培養(yǎng)皿移放到室溫下放置24-48小時(shí)，然后，放置于溫度范圍 14-350C、濕度范圍35% -80%RH的人工氣候箱內(nèi)；.3)在羽化的前兩天，把每只蛹單獨(dú)放入容器中，標(biāo)明雌雄；在每個(gè)容器中放入一截小樹枝，供其羽化展翅；并在每個(gè)容器底部放一塊圓形濾紙，定期給濾紙上滴加清水保濕；用保鮮膜封口，在保鮮膜上用解剖針扎幾個(gè)眼透氣，將容器用黑紙包裹，形成黑暗環(huán)境，等待羽化；(4)成蟲的管理.1)將剛羽化、并且是羽化時(shí)間接近的雌雄成蟲各一對(duì)，分別放到養(yǎng)蟲籠內(nèi)，溫度為 24-30°C，濕度為30-60%RH，安靜黑暗的環(huán)境下；.2)在養(yǎng)蟲籠內(nèi)放入一些新鮮枝條，供成蟲產(chǎn)卵和展翅，定期在養(yǎng)蟲籠內(nèi)放置10%的蜂蜜水溶液飼喂，觀察雌雄成蟲的交尾及產(chǎn)卵情況；(5)卵孵化的管理.1)當(dāng)成蟲產(chǎn)卵后，將卵小心挑出，放在滅菌后的培養(yǎng)皿中，2天以后用75%酒精對(duì)卵消毒20s，再利用無菌水沖洗2次，放入經(jīng)過滅菌鋪有濾紙的培養(yǎng)皿，在卵上加蓋一層濾紙，放入溫度為30°C、濕度為55%的人工氣候箱內(nèi)進(jìn)行孵化；每天在濾紙上噴2次無菌水進(jìn)行濕潤(rùn)，對(duì)卵保濕，觀察卵的孵化；.3)待幼蟲孵化后立即將初孵幼蟲接入到裝有人工飼料的12孔養(yǎng)蟲板上；每孔一只幼蟲；(6)初孵幼蟲的飼養(yǎng)O幼蟲在3齡之前,一直在養(yǎng)蟲板內(nèi)飼養(yǎng),到3齡可以在稍大的器皿內(nèi)飼養(yǎng),在器皿底部放入人工飼料后壓實(shí)，然后在飼料表面扎幾個(gè)稍大于蟲體的洞，每個(gè)洞放入一只幼蟲，洞與洞之間的距離約2公分；.2)將接好幼蟲的養(yǎng)蟲器皿放置于溫度24—30°C，濕度55-80%RH的條件下飼養(yǎng)，盡可能保持飼養(yǎng)條件黑暗，根據(jù)幼蟲大小和取食情況適時(shí)更換飼料，直至化蛹和羽化。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種六星黑點(diǎn)豹蠹蛾人工飼養(yǎng)的方法，包括最初蟲源、幼蟲的飼養(yǎng)容器、幼蟲的飼養(yǎng)方法、蛹的管理、成蟲的管理、卵孵化的管理等步驟。本發(fā)明的人工飼料不僅可以持續(xù)獲得大量發(fā)育整齊,生理一致的昆蟲,而且也能解決季節(jié)性寄主飼養(yǎng)飼料短缺的問題 這是對(duì)六星黑點(diǎn)豹蠹蛾首次進(jìn)行的人工飼養(yǎng)，經(jīng)過試驗(yàn)此方法不僅可以成功實(shí)現(xiàn)對(duì)六星黑點(diǎn)豹蠹蛾的人工飼養(yǎng)，還可縮短六星黑點(diǎn)豹蠹蛾的發(fā)育歷程1/2左右。
文檔編號(hào)A01K67/033GK102599116SQ20121009997
公開日2012年7月25日 申請(qǐng)日期2012年4月9日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月9日
發(fā)明者劉強(qiáng), 李敏, 汪敏捷, 雷玲 申請(qǐng)人:天津師范大學(xué)