專利名稱：一種槐綠虎天牛的人工飼養(yǎng)方法
技術領域：
本發(fā)明屬于植物保護技術領域，涉及蛀干害蟲槐綠虎天牛的防治和研究，更具體地說是ー種槐綠虎天牛的人工飼養(yǎng)方法。
背景技術：
瓶綠說天牛iChlorophorus diadema )是我國特有瀕 危植物四合木
mongoIica Maxim.)主要的姓干害蟲之一。靡 危植物四合木ijetreana mongoIica Maxim.)為落葉灌木。是我國西鄂爾多斯荒漠特有的單種屬植物；也是蒙古高原、亞洲中部的特征屬植物之一；被認為是古地中海南岸熱帶成分的孑遺種，被列為國家ニ級保護植物和優(yōu)先保護植物。四合木集中分布在內蒙古卓子山地區(qū)的狹小區(qū)域內，該地區(qū)亦被稱為古老殘遺植物的“避難所”。1998年成立了西鄂爾多斯國家級自然保護區(qū)；被列為具有國際意義荒漠生態(tài)系統(tǒng)重要保護地點的第一類地點。根據(jù)我們幾年來的研究，槐綠虎天牛的發(fā)育歷期長，在西鄂爾多斯地區(qū)2年完成一代，跨3年，;卵期約6-7天，幼蟲期約670天，蛹期10-18天，成蟲壽命約30天。幼蟲經(jīng)歷了 22個月2次越冬，幼蟲在樹干內取食期長達14月左右；世代不整齊，毎年都有成蟲出現(xiàn)；防治難度大，對四合木造成的危害十分嚴重。我們在西鄂爾多斯國家級自然保護區(qū)的研究顯示，在調查的5個地段，其中4個地段的危害率分別為95. 35%、80. 60%,78. 51%和40. 74% ;在受害最輕的區(qū)段最低危害率為6%，平均危害率達60. 24%。已造成大批四合木死亡，這將成為瀕危植物四合木近期滅絕的主要威脅。其危害程度大于紅緣天牛?；本G虎天牛槐綠虎天牛(Chlorophorus diadema (Motschulsky))隸屬昆蟲綱,鞘翅目，天?？疲炫喛?，虎天牛族，綠虎天牛屬昆蟲。是ー種重要鉆蛀害蟲，寄主包括樺樹、柳樹、櫻桃、棗樹等多種具較高生態(tài)及經(jīng)濟價值的樹種。適生性預測結果認為該蟲在我國具有廣泛的適生區(qū)域。已報道的寄主有四合木、楊、刺槐、槐、櫻桃、樺、棗、柳、亞細亞櫻桃、石榴、葡萄、山楂、泡桐、檸條錦雞兒、小葉錦雞兒等，另外槐綠虎天牛還蛀蝕建筑物梁、椽及家具。主要分布在黑龍江、吉林、遼寧、內蒙、甘肅、河北、山東、江蘇、湖北、陜西、河南、北京、安徽、廣西、江西、臺灣、朝鮮、日本、西伯利亞、蒙古等地。近年來，隨著綠化水平的提高，植樹造林的樹木品種趨于優(yōu)化，尤其是毛白楊和黑楊派無性系栽植數(shù)量劇增，但由于樹木無性系過于單一，遺傳基礎窄，存在很多隱患，蛀干害蟲如槐綠虎天牛等的發(fā)生危害直線上升，給美化和林業(yè)生產(chǎn)帶來極大的損失，防治天牛已勢在必行。我們首先在西鄂爾多斯自然保護區(qū)發(fā)現(xiàn)了槐綠虎天牛和紅緣天牛對瀕危植物四合木的危害，并對槐綠虎天牛進行了長達6年的研究，包括形態(tài)學、生物學、行為學、危害與防治、化學生態(tài)學等方面。已發(fā)表了 “ニ種天牛對瀕危植物四合木的危害”、“槐綠虎天牛對不同誘劑的EAG反應及誘劑的誘捕效果”、“Chemical Communicationin Chlorophorusdiadema (Motschulsky) ”等論文。并對其形態(tài)學和生物學進行了深入研究。由于在自然狀態(tài)下，槐綠虎天牛生活周期長，在四合木分布地區(qū)完成一代要經(jīng)歷2年垮3年的時間。另外，成蟲羽化極不整齊，成蟲期短、活動隱蔽，幼蟲蛀干生長。這些特點給虎天牛的防治和研究帶來了極大困難。人工飼料不僅可以持續(xù)獲得大量發(fā)育整齊，生理一致的昆蟲，而且也能解決季節(jié)性寄主飼養(yǎng)飼料短缺的問題，如冬季由于大多數(shù)自然食料不可利用，而人工飼才能使研究繼續(xù)下去。實現(xiàn)槐綠虎天牛人工飼料繼代飼養(yǎng)，可為槐綠虎天牛的生物防治、生理生態(tài)等研究長期提供研究材料，是槐綠虎天牛的防治研究的重要基礎。

發(fā)明內容
一種槐綠虎天牛的人工飼養(yǎng)方法，其特征在于按以下的步驟進行
(O處女成蟲和卵的獲得
A、最初，將野外獲得老熟幼蟲采用原寄主的枝條來進行飼養(yǎng)直至化蛹；
B、飼養(yǎng)用枝條選取直徑O.5 -O. 8cm,截成長為20-25 cm木段；在木段一端劈開3-5cm，剪去劈開木段的一半，用5cm的紙條將剰余的一半卷成桶狀，紙內保留去掉的木片留下的空隙，將虎天牛幼蟲頭向內放入空隙內，再用膠帶封ロ ；
C、把接種有虎天牛幼蟲的枝條放入溫度為30-32°C、濕度為55-60%的人工氣候箱內待其化蛹；以下飼養(yǎng)環(huán)境均相同；
D、飼養(yǎng)的槐綠虎天?；己?，區(qū)分雌雄，單只放入小的玻璃瓶，標明雌雄和化蛹時間，等待其羽化。E、將羽化時間相近的、剛羽化的雌雄成蟲各ー對放入鋪有濾紙的培養(yǎng)皿內，用脫脂棉蘸取重量百分數(shù)為10%的葡萄糖水溶液飼喂，待其交尾。F、將交尾后的雌蟲単獨放入鋪有濾紙的培養(yǎng)皿，在培養(yǎng)皿內放直徑為1-2 cm、長為5 -8cm的劈成兩半的新鮮的原寄主枝條，待其產(chǎn)卵；
(2)卵的孵化管理
A、將產(chǎn)有卵的枝條在48小時之后用水浸潤，將卵小心挑取，用75%酒精消毒20s，再利用無菌水沖洗2次，放入鋪有濾紙的培養(yǎng)皿，在卵上加蓋ー層濾紙；30-32°C、濕度為55-60%的人工氣候箱內；
B、每天在濾紙上噴2次無菌水進行濕潤，對卵保濕，觀察卵的孵化；
C、收集同批次孵化幼蟲，接蟲到人工飼料上進行飼養(yǎng)；
(3)室內人工飼養(yǎng)
A、初孵幼蟲的飼養(yǎng)在經(jīng)過75%酒精消毒的12孔養(yǎng)蟲板中加入3g人工飼料，取同批次孵化幼蟲在養(yǎng)蟲板內飼養(yǎng)2-3天；
B、幼蟲的后期飼養(yǎng)轉入到試管中進行飼養(yǎng)用裝有人エ飼料的試管，在無菌條件下用玻璃棒在飼料上扎I個小孔，然后挑選養(yǎng)蟲板中無染菌健壯的I只幼蟲，試管用脫脂棉封ロ ；放在溫度為30°C、濕度為55%的人工氣候箱中，每I個月更換新鮮飼料，同時記錄幼蟲生長情況和存活率；
C、待幼蟲化蛹后取出；
D、飼養(yǎng)的槐綠虎天?；己?，區(qū)分雌雄，單只放入小的玻璃瓶，標明雌雄和化蛹時間，等待其羽化；
E、將羽化時間相近的、剛羽化的雌雄成蟲各ー對放入鋪有濾紙的培養(yǎng)皿內，用脫脂棉蘸取重量百分數(shù)為10%的葡萄糖水溶液飼喂，待其交尾；
F、將交尾后的雌蟲單獨放入鋪有濾紙的培養(yǎng)皿，在培養(yǎng)皿內放直徑為1-2cm、長為5-8cm的的劈成兩半的新鮮的原寄主枝條，待其產(chǎn)卵。本發(fā)明所述的槐綠虎天牛人工飼養(yǎng)方法，其中步驟(I)所述的原寄主枝條指的是四合木、楊、刺槐、槐、櫻桃、樺、棗、柳、亞細亞櫻桃、石榴、葡萄、山楂、泡桐、檸條錦雞兒或小葉錦雞兒等。本發(fā)明公開的槐綠虎天牛的人工飼養(yǎng)方法，更加詳細的步驟如下 (I)處女成蟲和卵的獲得
A、最初，將野外獲得老熟幼蟲采用了其原寄主(如四合木、楊、刺槐、槐、櫻桃、樺、棗、柳、亞細亞櫻桃、石榴、葡萄、山楂、泡桐、檸條錦雞兒、小葉錦雞兒等)的枝條來進行飼養(yǎng)直
至化蛹。B、飼養(yǎng)用枝條選取直徑O. 5 cm左右,截成長為20 cm木段；在木段一端劈開3 cm,剪去劈開木段的一半，用5cm左右的紙條將剰余的一半卷成桶狀，紙內保留去掉的木片留下的空隙，將虎天牛幼蟲頭向內放入空隙內，再用膠帶封ロ。C、把接種有虎天牛幼蟲的枝條放入溫度為30°C左右、濕度為55%左右的人工氣候箱內待其化蛹。以下飼養(yǎng)環(huán)境均相同。D、飼養(yǎng)的槐綠虎天?；己?，區(qū)分雌雄，單只放入小的玻璃瓶，標明雌雄和化蛹時間。等待其羽化。E、將羽化時間相近的、剛羽化的雌雄成蟲各ー對放入鋪有濾紙的培養(yǎng)皿內，用脫脂棉蘸取10%的葡萄糖水溶液飼喂，待其交尾。F、將交尾后的雌蟲單獨放入鋪有濾紙的培養(yǎng)皿，在培養(yǎng)皿內放直徑為I cm左右、長為5 cm左右的劈成兩半的新鮮的寄主枝條,待其廣卵。(2)卵的孵化管理
A、將產(chǎn)有卵的枝條在48小時之后用水浸潤，用毛筆和鑷子將卵小心挑取，用75%酒精消毒20s，再利用無菌水沖洗2次，放入鋪有濾紙的培養(yǎng)皿，在卵上加蓋ー層濾紙。放入溫度為30°C左右、濕度為55%左右的人工氣候箱內。B、每天在濾紙上噴2次無菌水進行濕潤，對卵保濕。觀察卵的孵化。C、收集同批次孵化幼蟲，接蟲到人工飼料上進行飼養(yǎng)。(3)室內人工飼養(yǎng)
A、初孵幼蟲的飼養(yǎng)在經(jīng)過75%酒精消毒的12孔養(yǎng)蟲板中加入3g人工飼料，取同批次孵化幼蟲在養(yǎng)蟲板內飼養(yǎng)2-3天。B、幼蟲的后期飼養(yǎng)轉入到試管中進行飼養(yǎng)用裝有人エ飼料的試管，在無菌條件下用玻璃棒在飼料上扎I個小孔，然后挑選養(yǎng)蟲板中無染菌健壯的I只幼蟲，試管用脫脂棉封ロ。放在溫度為30°C、濕度為55%的人工氣候箱中，每I個月更換新鮮飼料，同時記錄幼蟲生長情況和存活率。C、待幼蟲化蛹后取出。D、飼養(yǎng)的槐綠虎天?；己?，區(qū)分雌雄，單只放入小的玻璃瓶，標明雌雄和化蛹時間。等待其羽化。E、將羽化時間相近的、剛羽化的雌雄成蟲各一對放入鋪有濾紙的培養(yǎng)皿內，用脫脂棉蘸取10%的葡萄糖水溶液飼喂，待其交尾。F、將交尾后的雌蟲單獨放入鋪有濾紙的培養(yǎng)皿，在培養(yǎng)皿內放直徑為I cm左右、長為5 cm左右的劈成兩半的新鮮的寄主枝條,待其廣卵。本發(fā)明有關槐綠虎天牛主要研究結果如下
槐綠虎天牛的形態(tài)特征 Cl)卵槐綠虎天牛卵為長卵圓形，乳白色，長平均I. 45mm，寬平均O. 65mm。卵產(chǎn)于枝條的皮縫或傷口內，夕卜表不可見。(2)幼蟲初孵幼蟲平均體長I. 24mm，老熟幼蟲體長可達20mm左右。將幼蟲從蟲道剝出后蟲體不呈S型彎曲，體乳白色或淡黃色，幼蟲體圓筒形，向后漸狹，至第七、八節(jié)又寬。頭顱近方形，寬略勝于長，中部以后稍寬，側緣呈弧形，后端平直，中央稍凹入；中額線棕褐色，細而明顯，額線不顯著，口器框棕黑色區(qū)較細；唇基扁狹，為后唇基所遮蓋，僅露出2狹條，上唇淡色，很小，近圓形，密生長剛毛，上顎粗短，全部黑色，切口鑿形；下顎負顎須節(jié)外緣較直，背側突不明顯，具長剛毛，下顎須第一節(jié)外端角背側突也不明顯，第三節(jié)瘦長往形，幾與第二節(jié)等長，下顎葉外緣直，近長方形，端部具短剛毛；下唇舌很小，高不及下唇須第一節(jié)，第二節(jié)短小。口后片前緣具齒狀縱隆脊5個左右，外咽片寬，具I對小突起。單眼I對，圓凸。觸角伸出，細長，第二節(jié)長為寬的2倍，頂部錐形主感器很小，第三節(jié)細長，長超過錐形突3倍以上，頂端具2支細毛。前胸背板色淡，扁圖形，前緣光滑，側緣有細短毛，前端橫帶色淡，背中線直貫后區(qū)，側溝間骨化板呈“山”形隆起，色淡，后方有細縱刻紋，前方兩側有少數(shù)粗刻點；前胸腹板中前腹片穹形，中央有I條寬淺縱溝，兩旁有淺網(wǎng)狀刻紋。腹部背步泡突突起，表面光指，無瘤突，僅具I細淺橫溝和兩側各2斜溝，中溝淺凹，中溝后方備有I斜橢圓形隆起，表面有短斜線刻紋；腹部氣門小，黃褐色。胸足細長，與觸角約等長，色淡。肛門3裂。老熟幼蟲化蛹前會選擇適合地點作為蛹室，咬出羽化用蟲道后用蟲糞封堵蛹室前后的蟲道，并在蛹室內發(fā)生形變成為預蛹。預蛹情況與紅緣天牛相似，形態(tài)與幼蟲不同，身體縮短，頭部突出，前胸縊縮，腹部膨脹，體型自背腹扁平變成左右側扁，行動方式改變?yōu)樗朴及銛[動腹部進行運動。(3)蛹蛹平均體長12. 6mm，離蛹，淡黃色，疏生剛毛，腹部背面可見8節(jié)，觸角緊貼身體側面，于足后向下走行，長度不超過中足腿節(jié)末端，一般止于第一腹節(jié)背板后緣，第2至7腹節(jié)背板中后部有小刺，在后緣排列成排，以第7腹節(jié)背板小刺最長，以背中線為界左右分開，分別基本對稱，但左右小刺數(shù)目常不同。槐綠虎天牛兩性蛹外形沒有明顯區(qū)別，觸角基本等長，除腹部末端外差異不大。雌性蛹腹部末端尖細，肉眼可見腹面的產(chǎn)卵器末端，很小，鏡下所見為2個明顯的半球形突起；雄性腹部末端亦尖細，肉眼看不到明顯結構，鏡下僅可見腹面中間有I個很小的凸起。(4)成蟲
I) 一般形態(tài)及雌雄差異
成蟲體長6.4-12mm，體寬1.9-3.8mm。體棕褐色，頭部及腹面被有灰黃色絨毛。觸角基瘤內側呈角狀突起，頭頂無毛，分布深密刻點，觸角約伸展至鞘翅中央，觸角第3節(jié)較柄節(jié)稍短。前胸背板長略大于寬，略呈球面，密布顆粒狀刻點。前緣及基部有灰黃色絨毛，有時絨毛分布較多，使中央無毛 區(qū)域形成I褐色橫條，或前端與基部絨毛擴大至中央相遇，使橫條區(qū)域分割成斷續(xù)斑點。小盾片后端圓形，蓋有黃絨毛。鞘翅在基部有少量黃絨毛，肩部前后有黃絨毛斑兩個，靠小盾片延內緣為I向外彎斜的條斑、其外端幾與肩部第2斑點相接，中央稍后有I橫條、末端與楊柳虎天牛極相似，其較明顯的區(qū)別為此種前胸背板中域無細長絨毛。如表I所示，槐綠虎天牛雌性平均體長和平均體寬稍大于雄性，沒有顯著性差異，同性個體間差異很大，同性別成蟲最大的個體可超過最小個體的I. 8倍。雄性成蟲的觸角體長比大于雌性成蟲，但差異同樣不顯著，不能以此作為判別成蟲性別的依據(jù)。兩性成蟲腹部末端都比較尖細，外觀上不能用于分辨成蟲性別?；本G虎天牛成蟲無雌雄ニ型現(xiàn)象。表I槐綠虎天牛成蟲數(shù)據(jù)
權利要求
1.一種槐綠虎天牛的人工飼養(yǎng)方法，其特征在于按以下的步驟進行 (O處女成蟲和卵的獲得 A、最初，將野外獲得老熟幼蟲采用原寄主的枝條來進行飼養(yǎng)直至化蛹； B、飼養(yǎng)用枝條選取直徑O.5-0. 8cm,截成長為20-25 cm木段；在木段一端劈開3 -5cm,剪去劈開木段的一半，用5cm的紙條將剰余的一半卷成桶狀，紙內保留去掉的木片留下的空隙，將虎天牛幼蟲頭向內放入空隙內，再用膠帶封ロ ； C、把接種有虎天牛幼蟲的枝條放入溫度為30-32°C、濕度為55-60%的人工氣候箱內待其化蛹；以下飼養(yǎng)環(huán)境均相同； D、飼養(yǎng)的槐綠虎天?；己?，區(qū)分雌雄，單只放入小的玻璃瓶，標明雌雄和化蛹時間，等待其羽化； E、將羽化時間相近的、剛羽化的雌雄成蟲各ー對放入鋪有濾紙的培養(yǎng)皿內，用脫脂棉蘸取重量百分數(shù)為10%的葡萄糖水溶液飼喂，待其交尾； F、將交尾后的雌蟲單獨放入鋪有濾紙的培養(yǎng)皿，在培養(yǎng)皿內放直徑為1-2cm、長為5-8cm的劈成兩半的新鮮的原寄主枝條，待其產(chǎn)卵； (2)卵的孵化管理 A、將產(chǎn)有卵的枝條在48小時之后用水浸潤，將卵小心挑取，用75%酒精消毒20s，再利用無菌水沖洗2次，放入鋪有濾紙的培養(yǎng)皿，在卵上加蓋ー層濾紙；30-32°C、濕度為55-60%的人工氣候箱內； B、每天在濾紙上噴2次無菌水進行濕潤，對卵保濕，觀察卵的孵化； C、收集同批次孵化幼蟲，接蟲到人工飼料上進行飼養(yǎng)； (3)室內人工飼養(yǎng) A、初孵幼蟲的飼養(yǎng)在經(jīng)過75%酒精消毒的12孔養(yǎng)蟲板中加入3g人工飼料，取同批次孵化幼蟲在養(yǎng)蟲板內飼養(yǎng)2-3天；所述的人工飼料為樹鋸末200g、蔗糖20g、酵母粉12. 5g、大豆粉30g、山梨酸鉀2g、瓊脂15g、水400 mL、抗壞血酸O. 5g、復合維生素B O. 5g ； B、幼蟲的后期飼養(yǎng)轉入到試管中進行飼養(yǎng)用裝有人エ飼料的試管，在無菌條件下用玻璃棒在飼料上扎I個小孔，然后挑選養(yǎng)蟲板中無染菌健壯的I只幼蟲，試管用脫脂棉封ロ ；放在溫度為30°C、濕度為55%的人工氣候箱中，每I個月更換新鮮飼料，同時記錄幼蟲生長情況和存活率； C、待幼蟲化蛹后取出； D、飼養(yǎng)的槐綠虎天?；己?，區(qū)分雌雄，單只放入小的玻璃瓶，標明雌雄和化蛹時間，等待其羽化； E、將羽化時間相近的、剛羽化的雌雄成蟲各ー對放入鋪有濾紙的培養(yǎng)皿內，用脫脂棉蘸取重量百分數(shù)為10%的葡萄糖水溶液飼喂，待其交尾； F、將交尾后的雌蟲單獨放入鋪有濾紙的培養(yǎng)皿，在培養(yǎng)皿內放直徑為1-2cm、長為5-8cm的的劈成兩半的新鮮的原寄主枝條，待其產(chǎn)卵。
2.權利要求I所述的槐綠虎天牛人工飼養(yǎng)方法，其中步驟(I)所述的原寄主枝條指的是四合木、楊、刺槐、槐、櫻桃、樺、棗、柳、亞細亞櫻桃、石榴、葡萄、山楂、泡桐、檸條錦雞兒或小葉錦雞兒。
3.權利要求I所述的槐綠虎天牛人工飼養(yǎng)方法，其中步驟(3)所述的樹鋸末為柳樹鋸末或刺槐 樹鋸末。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種槐綠虎天牛的人工飼養(yǎng)方法，包括(1)處女成蟲和卵的獲得；(2)室內卵的孵化管理；(3)室內人工飼養(yǎng)等步驟，實驗結果表明本發(fā)明的槐綠虎天牛人工飼養(yǎng)方法具有產(chǎn)卵量、化蛹率和羽化率顯著提高；發(fā)育歷期可縮短4倍左右；幼蟲和成蟲的體重、體長增加，成活率高；持續(xù)獲得大量發(fā)育整齊,生理一致的槐綠虎天牛不受季節(jié)性限制等效果。
文檔編號A01K67/033GK102613141SQ201210099979
公開日2012年8月1日 申請日期2012年4月9日 優(yōu)先權日2012年4月9日
發(fā)明者劉強, 尋鋒, 李升 , 李敏, 肖方叔 申請人:天津師范大學