專利名稱：一種利用植物源提取物提高玫煙色擬青霉對煙粉虱侵染力的方法
技術領域：
本發(fā)明屬于害蟲生物防治技術領域，具體涉及一種利用仙鶴草乙醇提取物提高玫煙色擬青霉對煙粉虱侵染力的方法。
背景技術：
煙粉風Bemisia tabaci (Gennadius) (Homoptera Aleyrodidae)為多食性刺吸式害蟲，分布在世界各地。煙粉虱成若蟲不僅吸取植物汁液造成直接為害，還能傳播多種植物 病毒病造成更大的間接為害，給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)帶來巨大的經(jīng)濟損失。一直以來，如何高效安全防治煙粉虱都是世界性難題。玫煙色擬青霉Paecilomyces fumosoroseus作為一種昆蟲病原真菌，可寄生多種昆蟲，是蚜蟲、粉虱等蔬菜害蟲以及果樹、茶樹害蟲的重要致病真菌。玫煙色擬青霉已在一些發(fā)達國家開發(fā)為煙粉虱生物殺蟲劑，如在美國被開發(fā)為生物殺蟲劑，用于防治扶桑、一品紅等煙粉虱；在荷蘭也已開發(fā)出玫煙色擬青霉商品制劑Biocon，用于防治黃瓜上粉虱。但玫煙色擬青霉作為煙粉虱生物殺蟲劑尚未能得到較廣泛應用，造成這一現(xiàn)狀除了因為真菌侵染對環(huán)境要求高這一因素外，玫煙色擬青霉本身的侵染力也是重要影響因素，該真菌對不同來源寄主以及同一寄主不同齡期及蟲態(tài)侵染力存在差異，如對煙粉虱低齡若蟲侵染率很高，對成蟲侵染力則較低。如何進一步提升玫煙色擬青霉侵染力是提高該菌作為生物殺蟲劑實用性的關鍵之一。仙鶴草Agrimonia pilosa Ledeb.是一種多年生草本植物,屬薔薇科,在我國大部分地區(qū)均有分布。仙鶴草作為一種中藥已得到廣泛應用，其具有抗炎鎮(zhèn)痛、降血糖、降血壓、抗腫瘤和增強機體免疫功能等作用。仙鶴草還能顯著提高害蟲寄生性天敵-寄生蜂和捕食性天敵-蜘蛛的控害能力。本發(fā)明研究仙鶴草乙醇提取物對殺蟲真菌-玫煙色擬青霉侵染力的影響，研究結果對于提升利用殺蟲真菌進行重大害蟲生物防治水平具有重要指導意義。

發(fā)明內(nèi)容
I、發(fā)明目的提供一種利用仙鶴草乙醇提取物提高玫煙色擬青霉侵染力的方法，能安全有效地提高玫煙色擬青霉對煙粉虱的侵染力，提升害蟲的生物防治水平。2、技術方案為達到上述目的，本發(fā)明選用仙鶴草的乙醇提取物和殺蟲真菌同時處理煙粉虱，獲得了一種安全高效的生物防治方法，它的應用顯著提高了玫煙色擬青霉對害蟲的侵染力。本發(fā)明為一種玫煙色擬青霉侵染力提高方法，其特征在于利用仙鶴草乙醇提取物和玫煙色擬青霉同時處理煙粉虱，提高玫煙色擬青霉對煙粉虱的侵染力。
3、有益效果本發(fā)明的方法與現(xiàn)有技術相比，產(chǎn)生以下有益效果(1)突破傳統(tǒng)單用殺蟲真菌防治害蟲，將植物源提取物同真菌一同防治害蟲，提高殺蟲真菌的控害效果，切實提高害蟲生物防治水平；(2)植物源提取物和殺蟲真菌環(huán)境相容性均好，用于害蟲的防治，可有效減少環(huán)境污染。
具體實施例方式本發(fā)明的實施例是采用室內(nèi)生物測定的方法。通過室內(nèi)生物測定，明確仙鶴草乙醇提取物對玫煙色擬青霉侵染煙粉虱能力的提高作用。供試材料仙鶴草由同仁堂藥店購得； 煙粉虱為室內(nèi)番茄苗上飼養(yǎng)，玫煙色擬青霉為室內(nèi)固體培養(yǎng)基培養(yǎng)。試驗方法仙鶴草的乙醇提取用萬能粉碎機將仙鶴草和苦楝皮中藥粉碎，稱取IOOg干粉放入IOOOml三角瓶中，加入75%乙醇450ml，在室溫下(20°C -25°C )浸提14天，過濾。用旋轉蒸發(fā)儀在水浴中減壓濃縮，然后將提取物放置于-80°C冰箱內(nèi)冷凍6h后，再放置于真空冷凍干燥機中進行干燥，真空抽提12h后得到仙鶴草乙醇提取物干粉，保存于4°C冰箱中備用。仙鶴草乙醇提取物對玫煙色擬青霉侵染力的影響試蟲準備將生長旺盛的無蟲健康番茄植株放置于養(yǎng)蟲籠內(nèi)，接入羽化24h的煙粉風成蟲，產(chǎn)卵24h后移去煙粉風成蟲,養(yǎng)蟲籠置于養(yǎng)蟲室中(溫度25±1°C,光照L : D=14 10)，待煙粉虱發(fā)育至2齡若蟲時備用，剪下番茄葉片，每張葉片上保留50-100頭煙粉風若蟲，番爺葉柄用浸有植物營養(yǎng)液的脫脂棉包裹。孢子懸浮液濃度的配制及處理選取試驗中產(chǎn)孢量大和致病力強的玫煙色擬青霉菌株，在PDA培養(yǎng)基上大量培養(yǎng)分生孢子后，用O. I %吐溫-80的無菌水稀釋孢子，用血球計數(shù)板對孢子量進行計數(shù)，通過逐步稀釋配置濃度為IO5個/ml孢子懸浮液。各處理分別為IO5個/ml孢子懸浮液、IO5個/ml孢子懸浮液加2mg/ml仙鶴草乙醇提取液、2mg/ml仙鶴草乙醇提取液，對照處理為O. 1%吐溫-80的無菌水。采用浸葉法，將帶有2齡煙粉虱若蟲的番茄葉片浸入懸浮液，IOs后取出自然晾干，每處理為I個葉片，重復4次，將用脫脂棉包裹的番爺葉片置于9cm的培養(yǎng)皿中，放于光照培養(yǎng)箱內(nèi)(溫度25土 TC,光照L : D =
14 10，濕度65%)，每天觀察其若蟲的真菌感染情況，記錄處理后煙粉虱死亡蟲數(shù)，計算各處理校正死亡率。實施效果仙鶴草乙醇提取物對玫煙色擬青霉侵染煙粉虱能力的影響研究了仙鶴草乙醇提取物對玫煙色擬青霉侵染力的影響(表I)。比較I. OX IO5個/ml玫煙色擬青霉分生孢子懸浮液及相同濃度分生孢子懸浮液加2mg/ml仙鶴草乙醇提取物處理煙粉虱2齡若蟲后的感染率，發(fā)現(xiàn)仙鶴草乙醇提取物能顯著提高玫煙色擬青霉對煙粉虱的侵染能力。雖然在處理后6天內(nèi)，仙鶴草乙醇提取物沒有表現(xiàn)出顯著提高玫煙色擬青霉對煙粉虱的侵染能力，玫煙色擬青霉單用及與仙鶴草混用這兩個處理間的致死率無顯著差異，但均顯著高于仙鶴草單用的致死率(0.8% ) (F = 89. 772，df = 2，11，P =O.0000);在感染后8d，仙鶴草則顯著提高了玫煙色擬青霉對煙粉虱的侵染力，仙鶴草加玫煙色擬青霉處理組對煙粉虱的致死率為50. 9 %，真菌單用的致死率為41. 9 %，兩者差異顯著(F = 157. 293，df = 2，11，P = O. 000);至處理后10d，仙鶴草對真菌侵染力的提高作用更明顯，仙鶴草加玫煙色擬青霉處理組對煙粉虱的致死率為81. 6%，而真菌單用的致死率僅為 56.8%，極顯著低于前者(F = 107.6, df = 2，11，P = O. 000)。表I仙鶴草和苦楝皮乙醇提取物對玫煙色擬青霉侵染煙粉虱能力的影響
權利要求
1.一種殺蟲真菌侵染力的提高方法，其特征在于利用仙鶴草乙醇提取物和玫煙色擬青霉聯(lián)合作用，提高真菌對煙粉虱的侵染力。
2.根據(jù)權利要求I所述的仙鶴草乙醇提取物和玫煙色擬青霉聯(lián)合作用，其特征在于仙鶴草乙醇提取物和玫煙色擬青霉同時作用于煙粉虱。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種利用植物源提取物提高殺蟲真菌侵染能力的方法。針對玫煙色擬青霉對重大害蟲煙粉虱侵染力總體不高的問題，利用仙鶴草乙醇提取物和玫煙色擬青霉一同處理煙粉虱，可明顯提高玫煙色擬青霉對煙粉虱的侵染率，提升真菌的控害能力。同傳統(tǒng)的單用玫煙色擬青霉進行害蟲生物防治相比，此技術以重大害蟲煙粉虱為靶標對象，利用仙鶴草乙醇提取物提高玫煙色擬青霉的侵染力，從而提高其控害效果。此技術不僅增效作用明顯，而且安全性高，能夠切實提高重大害蟲的生物防治水平，將具有一定的應用前景。
文檔編號A01N65/34GK102630710SQ20121010263
公開日2012年8月15日 申請日期2012年4月10日 優(yōu)先權日2012年4月10日
發(fā)明者劉寶生, 方繼朝, 瞿鈺峰, 郭慧芳, 鐘萬芳 申請人:江蘇省農(nóng)業(yè)科學院