專利名稱：一種提高昆蟲病原線蟲侵染能力的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種高效的昆蟲病原線蟲活體繁殖方法。
背景技術(shù)：
昆蟲病原線蟲(Entomopathogenic Nematode, EPN)是害蟲的重要天敵，具有廣泛的寄主昆蟲，是目前害蟲生物防治的重要手段。昆蟲病原線蟲能夠低成本、高效地大量繁殖是其推廣應(yīng)用的前提。它的小規(guī)模繁殖技術(shù)主要是活體培養(yǎng)法，以往多數(shù)采用對病原線
蟲很敏感的寄主昆蟲-大臘螟(Galleria mellonella Linnaeus),其成本較高。黃粉蟲
(Tenebrio molitor)是一種可以替代大蠟螟的常用的廉價寄主，用黃粉蟲作線蟲的寄主進行活體繁殖的成本僅是大蠟螟的25%。所以在目前活體繁殖技術(shù)中，病原線蟲能成功地侵 染寄主——黃粉蟲是關(guān)鍵步驟。在專利申請?zhí)枮?00610016563. 5的《工廠化昆蟲病原線蟲活體高倍繁殖方法》中公開一種利用黃粉蟲作為病原線蟲的寄主可工廠化活體高倍繁殖技術(shù)，但是昆蟲病原線蟲對黃粉蟲的侵染水平較低，即黃粉蟲對病原線蟲不太敏感，使得很多寄主不能被侵染，花費很多勞動力除去未被侵染的寄主昆蟲，也影響了線蟲的產(chǎn)量。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的要解決昆蟲病原線蟲對黃粉蟲的侵染水平低的問題，提供一種高效地昆蟲病原線蟲活體繁殖方法。一種提高昆蟲病原線蟲侵染能力的方法，具體是按以下步驟完成的首首先在溫度為41°C 43°C下對黃粉蟲幼蟲進行干熱處理20min 30min，然后將干熱后的黃粉蟲幼蟲放入侵染期昆蟲病原線蟲懸浮液浸潰ls，即完成昆蟲病原線蟲對黃粉蟲幼蟲的浸染。本發(fā)明優(yōu)點本發(fā)明用物理方法(在41°C 43°C恒溫下干熱處理)處理寄主昆蟲，打破黃粉蟲對昆蟲病原線蟲的防御系統(tǒng)，提高昆蟲病原線蟲的侵染水平，使黃粉蟲被侵染率從55 % 57 %提高到95 % 98 %，進而提高了昆蟲病原線蟲的產(chǎn)量，且昆蟲病原線蟲對寄主的毒力也稍有增強。
具體實施例方式具體實施方式
一本實施方式是一種提高昆蟲病原線蟲侵染能力的方法，具體是按以下步驟完成的首先在溫度為41°C 43°C下對黃粉蟲幼蟲進行干熱處理20min 30min，然后將干熱后的黃粉蟲幼蟲放入侵染期昆蟲病原線蟲懸浮液浸潰ls，即完成昆蟲病原線蟲對黃粉蟲幼蟲的浸染。本實施方式用物理方法(在41°C 43°C恒溫下干熱處理)處理寄主昆蟲，打破黃粉蟲對昆蟲病原線蟲的防御系統(tǒng)，提高昆蟲病原線蟲的侵染水平，使黃粉蟲被侵染率從55 % 57 %提高到95 % 98 %，進而提高了昆蟲病原線蟲的產(chǎn)量，且昆蟲病原線蟲對寄主的毒力也稍有增強。
具體實施方式
二 本實施方式與具體實施方式
一的不同點是首先在溫度為42°C下對黃粉蟲幼蟲進行干熱處理25min，然后將干熱后的黃粉蟲幼蟲放入侵染期昆蟲病原線蟲懸浮液浸潰ls，即完成昆蟲病原線蟲對黃粉蟲的浸染。
具體實施方式
三本實施方式與具體實施方式
一或二之一不同點是所述的昆蟲病原線蟲為嗜菌異小桿線蟲(Heterorhabditis bacteriophora)。采用下述試驗驗證本發(fā)明效果試驗一一種提高昆蟲病原線蟲侵染能力的方法，具體是按以下步驟完成的首先將黃粉蟲幼蟲裝入網(wǎng)眼直徑為2_的篩網(wǎng)袋中，再放入恒溫培養(yǎng)箱中，并在溫度為42°C干熱處理25min，然后將干熱后的黃粉蟲幼蟲放入濃度為20000條/mL的侵染 期嗜菌異小桿線蟲懸浮液浸潰ls，即完成嗜菌異小桿線蟲對黃粉蟲幼蟲的浸染。采用定量檢測方法檢測黃粉蟲被侵染率，完成本試驗異小桿線蟲對黃粉蟲幼蟲的浸染48h后，隨機數(shù)6次100頭黃粉蟲幼蟲中被病原線蟲侵染致死的百分比，可知本試驗黃粉蟲被侵染率為97. 3%，與現(xiàn)有浸染方法相比提高了 45%左右；采用本試驗浸染方法侵染后繼續(xù)Whitetrap培養(yǎng)法培養(yǎng)與現(xiàn)有浸染方法侵染后繼續(xù)White trap培養(yǎng)法培養(yǎng)相比，嗜菌異小桿線蟲(H. bacteriophora-NJ)的產(chǎn)量提高了 23.4%。White trap培養(yǎng)法，即在直徑為60mm的塑料培養(yǎng)皿蓋中墊有同皿底相同大小的雙層中速定性濾紙，每皿蓋中30頭7齡黃粉蟲幼蟲，然后倒扣皿底。用O. 5ml滅菌水浸潤濾紙，25°C恒溫培養(yǎng)至黃粉蟲幼蟲幾乎全部死亡后，移去直徑為60mm培養(yǎng)皿底，并將直徑為60mm培養(yǎng)皿蓋置于盛有IOml滅菌自來水的直徑為90mm的玻璃皿內(nèi)。繼續(xù)置于25°C恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)10天后，發(fā)現(xiàn)玻璃皿水中有侵染期線蟲出現(xiàn)時，每天收集玻璃皿中的線蟲懸浮液，并向玻璃皿中添加IOml滅菌來自水，即得到擴繁后的大量線蟲，于10°C保存，備用。
權(quán)利要求
1.一種提高昆蟲病原線蟲侵染能力的方法，其特征在于提高昆蟲病原線蟲侵染能力的方法是按以下步驟完成的 首先在溫度為41°c 43°C下對黃粉蟲幼蟲進行干熱處理20min 30min，然后將干熱后的黃粉蟲幼蟲放入侵染期昆蟲病原線蟲懸浮液浸潰ls，即完成昆蟲病原線蟲對黃粉蟲幼蟲的浸染。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種提高昆蟲病原線蟲侵染能力的方法，其特征在于首先在溫度為42°C下對黃粉蟲幼蟲進行干熱處理25min，然后將干熱后的黃粉蟲幼蟲放入侵染期昆蟲病原線蟲懸浮液浸潰ls，即完成昆蟲病原線蟲對黃粉蟲幼蟲的浸染。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或所述的一種提高昆蟲病原線蟲侵染能力的方法，其特征在于所述的昆蟲病原線蟲為嗜菌異小桿線蟲。
全文摘要
一種提高昆蟲病原線蟲侵染能力的方法，它涉及一種昆蟲病原線蟲的浸染方法。本發(fā)明的目的要解決昆蟲病原線蟲對黃粉蟲的侵染水平低的問題。方法具體是按以下步驟完成的首先將黃粉蟲恒溫培養(yǎng)箱干熱處理，然后將干熱后的黃粉蟲放入侵染期昆蟲病原線蟲懸浮液浸漬，即完成昆蟲病原線蟲對黃粉蟲的浸染。優(yōu)點黃粉蟲被侵染率從55％～57％提高到95％～98％。本發(fā)明主要用于昆蟲病原線蟲侵染黃粉蟲。
文檔編號A01K67/033GK102640731SQ20121011265
公開日2012年8月22日 申請日期2012年4月17日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月17日
發(fā)明者司兆勝, 李春杰, 韓新華 申請人:中國科學(xué)院東北地理與農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所