專利名稱：微生物與高羊茅聯(lián)合修復(fù)垃圾堆肥重金屬滲漏體系的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于垃圾堆肥在城市草坪建植技術(shù)領(lǐng)域中的應(yīng)用，涉及采用微生物與高羊茅聯(lián)合修復(fù)垃圾堆肥重金屬滲漏體系的方法。
背景技術(shù)：
近年來，由生活垃圾引發(fā)的環(huán)境污染問題已成為社會(huì)廣泛關(guān)注的焦點(diǎn)之一。隨著我國(guó)人民生活水平的日趨提高，城市生活垃圾產(chǎn)生量也隨之增加。將生活垃圾堆肥用作草 坪基質(zhì)，不但可以避開食物鏈，同時(shí)又解決了垃圾的出路問題。垃圾堆肥具有良好的理化性質(zhì)、豐富的養(yǎng)分，是替代土壤作為草坪基質(zhì)的較理想材料。在我國(guó)人口眾多，土地資源相對(duì)貧乏，以垃圾堆肥用作草坪基質(zhì)更具有現(xiàn)實(shí)意義。一些草坪植物能夠在重金屬污染較重的基質(zhì)中生長(zhǎng)，且生長(zhǎng)速度快、再生能力強(qiáng)，在化學(xué)方法和生物方法協(xié)同修復(fù)垃圾堆肥重金屬中具有較大的應(yīng)用價(jià)值。因此垃圾堆肥作為草坪基質(zhì)的同時(shí)，其重金屬又能得到草坪植物的修復(fù)，這樣既增加了垃圾堆肥的應(yīng)用潛力又提高了其使用的安全性。目前，我國(guó)已初步展開了將生活垃圾堆肥用于園林綠地基質(zhì)或肥料的科研工作，垃圾堆肥通常以肥料的形式加入土壤，可以改善土壤性質(zhì)，提高草坪草生物量、葉綠素含量等。但垃圾堆肥中含有高濃度的重金屬，在其改善土壤、土壤植物和微生物的同時(shí)，也對(duì)它們產(chǎn)生危害。所以，提出若想將垃圾堆肥應(yīng)用于實(shí)際必須去除其中的重金屬的想法。垃圾堆肥施用過程中，如何防止或者減少重金屬進(jìn)入土壤和地下水產(chǎn)生，已成為要解決的一大問題。研究發(fā)現(xiàn)，添加EDTA可以顯著提高重金屬在供試草坪植物中的富集量。利用EDTA協(xié)同植物修復(fù)的同時(shí)，由于EDTA以及EDTA與重金屬螯合形成的復(fù)合物具有很強(qiáng)的溶解性和生物毒性，且在土壤中很難被光、化學(xué)物質(zhì)以及生物降解，所以很可能會(huì)引起污染深層土壤及地下水污染等環(huán)境問題。但是NTA (Nitrilotriacetic acid),在過去50年一直被應(yīng)用于除垢劑，在分析化學(xué)中用作配位滴定劑和掩蔽劑，在催化動(dòng)力學(xué)分析中常作為活化劑。然而關(guān)于微生物與高羊茅聯(lián)合修復(fù)垃圾堆肥重金屬滲漏體系的方法，未見文獻(xiàn)報(bào)道。微生物修復(fù)技術(shù)彌補(bǔ)了植物修復(fù)法、化學(xué)浸提法、化學(xué)浸提協(xié)同植物修復(fù)等方法成本高、施用有局限性等缺點(diǎn)。實(shí)驗(yàn)證明弗蘭克菌屬對(duì)一定濃度的Cu、Co、Ni、Cd和Hg敏感性不強(qiáng)。Zhou等(2007)表明菌根能消減由玉米根系吸附的Cu向地上部運(yùn)輸。在微生物培養(yǎng)基中加入了不同濃度的Cu、Hg、Pb、Cd和Cr 5種重金屬,對(duì)大腸桿菌、枯草芽孢桿菌進(jìn)行脅迫培養(yǎng)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)Hg、Cd毒性較強(qiáng)，2種細(xì)菌的增殖在高濃度時(shí)受到抑制，枯草芽孢桿菌更為敏感，當(dāng)重金屬濃度>50 mg/L后，5種重金屬對(duì)兩種細(xì)菌的毒性順序?yàn)镠g>Cd>Cu>Cr ^ Pb。微生物修復(fù)的一個(gè)重要特性是能耐受高濃度的重金屬離子，常見的如Cu、Zn、Ni等。針對(duì)這一特點(diǎn)，目前有研究者開始嘗試采用復(fù)合菌群來聯(lián)合進(jìn)行修復(fù)。復(fù)合微生物由兩種或兩種以上微生物按合適比例共同培養(yǎng)組成，能夠充分發(fā)揮群體的聯(lián)合作用優(yōu)勢(shì)，實(shí)驗(yàn)表明接種復(fù)合微生物的垃圾堆肥其堆肥化效率顯著提高，并且可以提高種子的萌發(fā)率。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明通過對(duì)草坪堆肥基質(zhì)滲漏體系中重金屬富集、淋溶等的研究，系統(tǒng)地探討在微生物、NTA強(qiáng)化植物修復(fù)的同時(shí)重金屬淋溶遷移的潛在風(fēng)險(xiǎn)，并提出相應(yīng)的防治方法。為實(shí)現(xiàn)上述目的本發(fā)明公開了如下的技術(shù)內(nèi)容
一種微生物與高羊茅聯(lián)合修復(fù)垃圾堆肥重金屬滲漏體系的方法，其特征在于按如下的步驟進(jìn)行
(1)實(shí)驗(yàn)材料準(zhǔn)備
試驗(yàn)選用多年生高羊茅arundinacea L.)為實(shí)驗(yàn)材料；生活垃圾堆肥取自天津市小淀堆肥廠；供試土壤取0-20 cm深的表層土；堆肥和園土經(jīng)風(fēng)干后分別過2 _篩備用；隔層材料為由下至上分別由20g沸石、20g蛭石和20g鋸末組成；枯草芽孢桿菌、放線菌分離自天津小淀垃圾堆肥處理廠的生活垃圾堆肥；淋溶液用(NH4)2SO4,Na2SO4,K2SO4,MgSO4' Ca(NO3)2、Mg(NO3)2、H2SO4 配制出 SO42' NO3' Cl' NH+、Mg2+、Ca2+、K+、Na+ 濃度分別為14. 96,6. 54、I. 68,3. 71,0. 82、I. 38,0. 64 和 0. 78 mg/L，并用 HCl 調(diào)配 pH 為 5. 5-6 的淋溶液備用；
(2)實(shí)驗(yàn)方法
1)草坪基質(zhì)堆肥利用與隔層設(shè)置
選用PVC管直徑為7. 5cm, 25cm的長(zhǎng)管，管底部固定有直徑為0. 2 mm的尼龍網(wǎng)以支撐管內(nèi)的土和堆肥，將管吊起，管的下方配有錐形瓶接滲濾液；
2)在PVC管中裝入500g風(fēng)干的園土，鋪平，再裝入水平隔層由下至上分別由20g沸石、20g蛭石和20g鋸末組成，再裝入280g堆肥，鋪平于隔層之上；
3)微生物菌劑與草坪基質(zhì)隔層體系的建立 將0.6 g高羊茅播于PVC管中，播種IOd后，
I中加入I. 4 mL蒸餾水；
II中加入0.7 mL牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基和0.7 mL高氏一號(hào)培養(yǎng)基；
III中加入I. 4 mL枯草芽孢桿菌；
IV中加入I. 4 mL放線菌；
V中加入0. 7 mL液體枯草芽孢桿菌和0. 7 mL液體放線菌的復(fù)合劑；
接菌后，草坪植物再生長(zhǎng)30d，刈割，將刈割下的草坪植物地上部置于80°C的烘箱中烘干至衡重，記地上生物量；
4)劉割第二天用150mL人工淋溶液,相當(dāng)于34. 0 mm的降水量,進(jìn)行第一次淋洗，之后每7 d淋洗一次，每次150mL，共4次淋入600 mL，4次分別稱重，并收集于同一個(gè)錐形瓶中，混合均勻待測(cè)；其中高羊茅種植期間均用自來水澆灌，保持其整體田間持水量為60-65%。種植期間室內(nèi)的溫度和相對(duì)濕度分別為14-25°C和30_55%，光照強(qiáng)度為350-800// mo I m 2 s 1 ；
5)利用TAS-990原子吸收分光光度計(jì)測(cè)定消化液中重金屬Cd、Cr、Cu、Pb和Ni的含量變化。本發(fā)明所述的沸石為天然沸石，篩取粒徑小于4_的；蛭石取自日本弘洋園公司，取粒徑小于4mm的；鋸末取自加工廠廢棄下腳料，以上材料均80°C烘干至恒重，備用。本發(fā)明所述的枯草芽孢桿菌、放線菌均有市售。也可以采用天津小淀垃圾堆肥處理廠的生活垃圾堆肥進(jìn)行分離。其分離的方法為將分離出的菌種純化培養(yǎng)2代，取活化菌種，接入裝有50 mL液體培養(yǎng)基的250 mL三角瓶中，180 r/min適溫培養(yǎng)，用接種針挑取活化的枯草芽孢桿菌菌種，接入裝有50 mL液態(tài)的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的250 mL三角瓶中，180 r/min適溫培養(yǎng)12 h，獲得本實(shí)驗(yàn)用枯草芽孢桿菌；用接種針挑取活化的放線菌菌種，接入裝有50 mL液態(tài)的高氏一號(hào)培養(yǎng)基的250 mL三角瓶中，180 r/min適溫培養(yǎng)96h，獲得本實(shí)驗(yàn)用放線菌。本發(fā)明進(jìn)一步公開了所述方法在增加重金屬在植物體內(nèi)的富集阻礙Cd，Cr, Cu和Ni的垂直遷移方面的應(yīng)用；其方法是采用O. 7 mL液體枯草芽孢桿菌和O. 7 mL液體放線菌的復(fù)合劑以及水平隔層由下至上分別由20g沸石、20g蛭石和20g鋸末組成隔層。本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明水平隔層鋪與土壤至上、堆肥之下，可以減少垃圾堆肥中的有害物質(zhì)和重金屬向土壤中遷移，使草坪植物在化學(xué)螯合劑誘導(dǎo)下或者微生物協(xié)同下，增加其吸收堆肥中的重金屬的時(shí)間和重金屬在其體內(nèi)的富集，并減少重金屬向深層土壤的遷移。本發(fā)明采用的枯草芽孢桿菌(拉丁學(xué)名Bacillus subtil is )(保藏號(hào)CGMCC NO2548)，中北生物科技有限公司，對(duì)外可以提供。中國(guó)專利號(hào)為ZL200710062503. I。生理生化特性枯草芽孢桿菌菌體細(xì)胞為短桿狀，有芽孢，在顯微鏡下觀察菌體的大小為O. 4 0.8 μ mX 2. 3 3.7 μ m。菌體細(xì)胞呈較粗壯的桿狀，排列不整齊。革蘭氏染色呈陽(yáng)性。在固體培養(yǎng)基表面，菌體形成半透明的淺黃色菌落，菌落粘稠，邊緣不整齊。本發(fā)明公開的土壤放線菌發(fā)酵液與申請(qǐng)?zhí)?00610122277. 7公開的相同。本發(fā)明采用天津小淀垃圾堆肥處理廠的生活垃圾堆肥進(jìn)行分離得出的枯草芽孢桿菌、放線菌與現(xiàn)有文獻(xiàn)報(bào)道的特性相同，(保藏號(hào)CGMCC NO 2548 ；CCTCC NO M206067菌株)固未保藏?？莶菅挎邨U菌是芽孢桿菌中具有應(yīng)用潛力的菌種之一。近年來國(guó)內(nèi)外對(duì)于芽孢桿菌應(yīng)用方面的研究日益增多。放線菌可以促進(jìn)植物新陳代謝，提高植物抗性。本發(fā)明將配制成不同濃度的枯草芽孢桿菌發(fā)酵液、放線菌發(fā)酵濾接種到草坪建植體系中。通過研究不同濃度的枯草芽孢桿菌發(fā)酵濾液、放線菌發(fā)酵濾液對(duì)高羊茅種子萌發(fā)的影響，為草坪植物的生態(tài)建植提供依據(jù)。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，綜合來看復(fù)合微生物對(duì)增加重金屬在植物體內(nèi)的富集作用，和對(duì)阻礙Cd，Cr, Cu和Ni的垂直遷移都最為顯著。其中枯草芽孢桿菌對(duì)阻礙Pb的垂直遷移最為顯著。本發(fā)明更加詳細(xì)的孩子被方法如下
I實(shí)驗(yàn)材料與方法
I.I 土壤、堆肥與草坪植物 (I)實(shí)驗(yàn)用植物
本試驗(yàn)選用我國(guó)北方比較常見的多年生高羊茅arundinacea L.)為實(shí)驗(yàn)材料。(2)實(shí)驗(yàn)用堆肥和土壤及其理化
生活垃圾堆肥取自天津市小淀堆肥廠。供試土壤取自天津師范大學(xué)實(shí)驗(yàn)地0-20 cm深的表層土。堆肥和園土經(jīng)風(fēng)干后分別過2 _篩備用。、
堆肥理化性質(zhì)為pH 7. 62，有機(jī)質(zhì)含量12. 12%，全氮5. 18%，有效磷77. 92 mg/Kg,飽和含水量0. 76 mL/g。其重金屬Cd，Cr，Cu，Pb，Ni背景值分別為I. 97，67. 00,238. 73，172. 11,33. 42 //g/g。土壤性質(zhì)為pH 8. 30，有機(jī)質(zhì)含量 4. 68%，全氮 0. 21%，有效磷 22. 03mg/kg，飽和含水量0. 58 mL/g。其重金屬Cd，Cr，Cu，Pb，Ni的背景值分別為0. 18，2. 13，9. 33, 5. 75, 2. 64 //g/g。I. 2隔層材料選擇
本實(shí)驗(yàn)隔層材料為沸石、蛭石、鋸末。沸石為天然沸石，篩取粒徑小于4_的；蛭石取自日本弘洋園公司，取粒徑小于4mm的。鋸末取自加工廠廢棄下腳料，以上材料均80°C烘干至恒重，備用。本實(shí)驗(yàn)隔層由下至上分別由20g沸石、20g蛭石和20g鋸末組成，裝入PVC管中共高 4cm。I. 3菌劑的制備
實(shí)驗(yàn)用枯草芽孢桿菌、放線菌分離自天津小淀垃圾堆肥處理廠的生活垃圾堆肥。取10g新鮮堆肥加到90 mL的滅菌水中，配置適宜濃度的堆肥懸濁液，取混合均勻的懸濁液100
#L加入到相應(yīng)的固體平板培養(yǎng)基上，適溫培養(yǎng)，根據(jù)菌落形態(tài)，挑取和已知枯草芽孢桿菌和放線菌比較相似的菌落進(jìn)行革蘭氏染色法(鑒定細(xì)菌)、芽孢染色法(鑒定枯草芽孢桿菌)和印片法(鑒定放線菌)鑒定。根據(jù)鑒定結(jié)果，將分離出的菌種純化培養(yǎng)2代，取活化菌種，接入裝有50 mL液體培養(yǎng)基的250 mL三角瓶中，180 r/min適溫培養(yǎng)，選用600 nm波長(zhǎng)進(jìn)行比濁測(cè)定，以菌懸液的OD值為縱坐標(biāo)，培養(yǎng)時(shí)間為橫坐標(biāo)，繪制微生物的生長(zhǎng)曲線。根據(jù)生長(zhǎng)曲線獲得微生物生長(zhǎng)至穩(wěn)定期的時(shí)間，得出枯草芽孢桿菌的穩(wěn)定期為8_18h，放線菌的穩(wěn)定期為84-108h。用接種針挑取活化的枯草芽孢桿菌菌種，接入裝有50mL液態(tài)的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的250 mL三角瓶中，180 r/min適溫培養(yǎng)12 h，獲得本實(shí)驗(yàn)用枯草芽孢桿菌；用接種針挑取活化的放線菌菌種，接入裝有50 mL液態(tài)的高氏一號(hào)培養(yǎng)基的250 mL三角瓶中，180 r/min適溫培養(yǎng)96h，獲得本實(shí)驗(yàn)用放線菌。I. 4淋溶液制備
根據(jù)韓毓(2008)調(diào)查全天津市降水pH值范圍為4. 00-8. 24，年均值為5. 59，屬酸性降/K。本實(shí)驗(yàn)用(NH4)2SO4, Na2SO4, K2SO4, MgSO4, Ca(NO3)2、Mg(NO3)2、H2SO4 配制出 SO42' NO3'Cr、NH+、Mg2+、Ca2+、K+、Na+濃度分別為 14. 96,6. 54、I. 68,3. 71,0. 82、I. 38,0. 64 和 0. 78 mg/L，并用HCl調(diào)配pH為5. 59的淋溶液。I. 5實(shí)驗(yàn)方法
(I)草坪基質(zhì)堆肥利用與隔層設(shè)置
PVC管直徑為7. 5cm,將其分別截成21cm的短管6根，25cm的長(zhǎng)管24根。所有管底部都固定有直徑為0. 2 mm的尼龍網(wǎng)以支撐管內(nèi)的土和堆肥，將管吊起，管的下方配有錐形瓶接滲濾液。土壤耕層為0_20cm的表層土。本實(shí)驗(yàn)?zāi)M表層土,設(shè)置園土高12cm,堆肥高8cm。制備高為20cm的短管6根，高為24cm的長(zhǎng)管24根。短管的制備先裝入500g風(fēng)干的園土，鋪平，再裝入280g堆肥，鋪平于園土之上；長(zhǎng)管的制備裝入500g風(fēng)干的園土，鋪平，再裝入水平隔層，再裝入280g堆肥，鋪平于隔層之上。 (2)微生物菌劑與草坪基質(zhì)隔層體系的建立草坪植物選用多年生高羊茅。將0.6 g高羊茅播于PVC管中，每組3次重復(fù)，處理見表
I。播種10 d后，I中加入I.4 mL蒸餾水；II中加入0.7 mL牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基和0.7 mL高氏一號(hào)培養(yǎng)基；III中加入I. 4 mL枯草芽孢桿菌；IV中加入I. 4 mL放線菌；V中加入0. 7mL液體枯草芽孢桿菌和0.7 mL液 體放線菌的復(fù)合。接菌后，草坪植物再生長(zhǎng)30 d，刈割(高羊茅均共生長(zhǎng)40 d)，將刈割下的草坪植物地上部置于80° C的烘箱中烘干至衡重，記地上生物量。劉割第二天用150 mL人工淋溶液(相當(dāng)于34. 0 mm的降水量)進(jìn)行第一次淋洗,之后每7 d淋洗一次，每次150 mL，共4次淋入600 mL。4次分別稱重，并收集于同一個(gè)錐形瓶中，混合均勻待測(cè)。草坪植物種植期間均用自來水澆灌，保持其整體田間持水量為60%。種植期間室內(nèi)的溫度和相對(duì)濕度分別為14-25°C和30-55%，光照強(qiáng)度為350-800// mo I nT2 s'表I微生物菌劑接種和隔層處理方案
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(4)重金屬含量分析
高羊茅草樣均稱取0.2 g，用10 mL HNO3和2 mL HClO4在120_140°C下電熱板消化，待棕黃色煙消去，所得溶液用1%硝酸定容到25 mL。滲濾液取20 mL，用8 mL HNO3和2 mL此104在120-140°C下電熱板消化，待棕黃色煙消去，所得溶液用1%硝酸定容到50 mL。最后利用TAS-990原子吸收分光光度計(jì)測(cè)定消化液中重金屬(Cd、Cr、Cu、Pb和Ni)含量。I. 6數(shù)據(jù)分析
數(shù)據(jù)分析用EXCEL2003和SPSS 14.0統(tǒng)計(jì)軟件分析完成。
重金屬富集量=重金屬濃度*生物量干童。
童金屬滲濾比率=(童金屬琳洗總量/誰肥中童金屬總量)*100%。
2結(jié)果與分析
2. I不同微生物菌劑和隔層設(shè)置對(duì)草坪植物生物量的影響
從表2可以看出隔層可以增加高羊茅的生物量。接種菌劑對(duì)草坪植物的生物量有顯著的提高0X0. 05)。復(fù)合菌劑協(xié)同水平隔層(V )對(duì)提高高羊茅生物量的影響最為顯著，分別比對(duì)處理I提高了 18. 8%和34. 2%。
表2不同處理對(duì)草坪植物生物量的影響(g/PVC)
權(quán)利要求
1.一種微生物與高羊茅聯(lián)合修復(fù)垃圾堆肥重金屬滲漏體系的方法，其特征在于按如下的步驟進(jìn)行 (1)實(shí)驗(yàn)材料準(zhǔn)備 試驗(yàn)選用多年生高羊茅arundinacea L.)為實(shí)驗(yàn)材料；生活垃圾堆肥取自天津市小淀堆肥廠；供試土壤取表層土 ；堆肥和園土經(jīng)風(fēng)干后分別過2 mm篩備用；隔層材料為由下至上分別由20g沸石、20g蛭石和20g鋸末組成；枯草芽孢桿菌、放線菌分離自天津小淀垃圾堆肥處理廠的生活垃圾堆肥；淋溶液用(NH4)2S04、Na2S04、K2S04、MgS04、Ca(NO3)2、Mg (NO3) 2、H2SO4 配制出 SO42'NO3'Cl'NH+、Mg2+、Ca2+、K+、Na+濃度分別為 14. 96,6. 54、I. 68、.3.71,0. 82、I. 38,0. 64 和 O. 78 mg/L，并用 HCl 調(diào)配 pH 為 5. 5-6 的淋溶液備用； (2)實(shí)驗(yàn)方法 .1)草坪基質(zhì)堆肥利用與隔層設(shè)置 選用PVC管直徑為7. 5cm, 25cm的長(zhǎng)管，管底部固定有直徑為O. 2 mm的尼龍網(wǎng)以支撐管內(nèi)的土和堆肥，將管吊起，管的下方配有錐形瓶接滲濾液； .2)在PVC管中裝入500g風(fēng)干的園土，鋪平，再裝入水平隔層由下至上分別由20g沸石、.20g蛭石和20g鋸末組成，再裝入280g堆肥，鋪平于隔層之上； .3)微生物菌劑與草坪基質(zhì)隔層體系的建立 將O. 6 g高羊茅播于PVC管中，播種IOd后， I中加入I. 4 mL蒸餾水； II中加入O. 7 mL牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基和0.7 mL高氏一號(hào)培養(yǎng)基； III中加入I. 4 mL枯草芽孢桿菌； IV中加入I. 4 mL放線菌； V中加入O. 7 mL液體枯草芽孢桿菌和O. 7 mL液體放線菌的復(fù)合劑； 接菌后，草坪植物再生長(zhǎng)30d，刈割，將刈割下的草坪植物高羊茅地上部置于80°C的烘箱中烘干至衡重，記地上生物量； .4)劉割第二天用150mL人工淋溶液,相當(dāng)于34. O mm的降水量,進(jìn)行第一次淋洗，之后每7 d淋洗一次，每次150mL，共4次淋入600 mL，4次分別稱重，并收集于同一個(gè)錐形瓶中，混合均勻待測(cè)；其中高羊茅種植期間均用自來水澆灌，保持其整體田間持水量為60-65%;種植期間室內(nèi)的溫度和相對(duì)濕度分別為14-25 °C和30_55%，光照強(qiáng)度為.350-800// mo I m 2 s 1 ； .5)利用TAS-990原子吸收分光光度計(jì)測(cè)定消化液中重金屬Cd、Cr、Cu、Pb和Ni的含量變化。
2.權(quán)利要求I所述的方法，其中沸石為天然沸石，篩取粒徑小于4_的；蛭石取自日本弘洋園公司，取粒徑小于4mm的；鋸末取自加工廠廢棄下腳料，以上材料均80°C烘干至恒重，備用。
3.權(quán)利要求I所述的方法，其中枯草芽孢桿菌、放線菌分離的方法為將分離出的菌種純化培養(yǎng)2代，取活化菌種，接入裝有50 mL液體培養(yǎng)基的250 mL三角瓶中，180 r/min適溫培養(yǎng)，用接種針挑取活化的枯草芽孢桿菌菌種，接入裝有50 mL液態(tài)的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的250 mL三角瓶中，180 r/min適溫培養(yǎng)12 h，獲得本實(shí)驗(yàn)用枯草芽孢桿菌；用接種針挑取活化的放線菌菌種，接入裝有50 mL液態(tài)的高氏一號(hào)培養(yǎng)基的250 mL三角瓶中，180 r/min適溫培養(yǎng)96h,獲得本實(shí)驗(yàn)用放線菌。
4.權(quán)利要求I所述方法在增加重金屬在植物體內(nèi)的富集阻礙Cd，Cr, Cu和Ni的垂直遷移方面的應(yīng)用；其方法是采用O. 7 mL液體枯草芽孢桿菌和O. 7 mL液體放線菌的復(fù)合劑以及水平隔層由下至上分別由20g沸石、20g蛭石和20g鋸末組成隔層。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種微生物與高羊茅聯(lián)合修復(fù)垃圾堆肥重金屬滲漏體系的方法，它是,它是在直徑為7.5cm，長(zhǎng)25cm的PVC管中裝入500g風(fēng)干的園土，裝入水平隔層60g，再裝入280g堆肥；在管中播種0.6g高羊茅種子,播種30d后，將不同濃度的微生物菌劑和10-20mmol/kg堆肥的NTA鈉鹽水溶液施于堆肥表面，10d后刈割草，測(cè)定重金屬Cd，Cr，Cu，Pb和Zn的含量變化。本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明水平隔層鋪與土壤至上、堆肥之下，可以減少垃圾堆肥中的有害物質(zhì)和重金屬向土壤中遷移，使草坪植物在化學(xué)螯合劑誘導(dǎo)下或者微生物協(xié)同下，增加其吸收堆肥中的重金屬的時(shí)間和重金屬在其體內(nèi)的富集，并減少重金屬向深層土壤的遷移。
文檔編號(hào)A01G1/00GK102630475SQ201210134880
公開日2012年8月15日 申請(qǐng)日期2012年5月4日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月4日
發(fā)明者多立安, 賈麗娜, 趙樹蘭 申請(qǐng)人:天津師范大學(xué)