專利名稱：一種羽毛蛋白肽飼料添加劑及應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種羽毛蛋白肽飼料添加劑及其制備與應(yīng)用。
背景技術(shù)：
近年來(lái)，以集約化為特點(diǎn)全球養(yǎng)殖業(yè)的飛速發(fā)展，為人類生活水平的提高做出了巨大貢獻(xiàn)，但是飼料蛋白資源開始出現(xiàn)嚴(yán)重的短缺，已制約養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。然而富含動(dòng)物多種必需氨基酸、蛋白質(zhì)含量達(dá)75% 90%的家禽羽毛卻沒(méi)有得到有效的利用，我國(guó)每年可收集利用的羽毛達(dá)20 30萬(wàn)噸，加工后用于飼料的不足2萬(wàn)噸，大部分羽毛及動(dòng)物毛發(fā)未被合理利用，既浪費(fèi)了資源，又污染了環(huán)境。羽毛不能利用的主要原因是羽毛粉加工技術(shù)不過(guò)關(guān)，產(chǎn)品消化吸收率低，質(zhì)量參差不齊，導(dǎo)致飼養(yǎng)效果不佳。要利用羽毛角質(zhì)蛋白，必須對(duì)角蛋白進(jìn)行科學(xué)處理，破解角質(zhì)蛋白的空間結(jié)構(gòu)，使其變成可消化吸收的狀態(tài)。國(guó)內(nèi)外對(duì)羽毛粉的加工已有了一定研究。目前，國(guó)內(nèi)外主要采用高溫高壓水解法、酸水解法、堿水解法、酶解法、微生物法和擠壓膨化等方法對(duì)羽毛粉的加工。這些方法都能在一定程度上提高羽毛粉的消化率，但都存在著明顯的不足，如加工技術(shù)不過(guò)關(guān)，產(chǎn)品消化吸收率低，質(zhì)量參差不齊，導(dǎo)致飼養(yǎng)效果不佳，經(jīng)濟(jì)效益不佳，處理過(guò)程造成二次污染等。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的是提供一種羽毛蛋白肽飼料添加劑及應(yīng)用，將羽毛和酵母培養(yǎng)物采用多菌種聯(lián)合發(fā)酵生產(chǎn)一種羽毛蛋白肽飼料添加劑，不但消除了羽毛不能被畜禽消化利用問(wèn)題，而且含有多種活性肽，角蛋白酶、消化酶以及促生長(zhǎng)因子，能完全替代魚粉、血漿蛋白粉等動(dòng)物性蛋白飼料。本發(fā)明采用的技術(shù)方案是一種羽毛蛋白肽飼料添加劑，所述羽毛蛋白肽飼料添加劑按如下方法制備(1)酵母培養(yǎng)物的制備將底物與水a(chǎn)混合，獲得固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基A，再將釀酒酵母和扣囊復(fù)膜孢酵母接種到固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基A中，在30°C下培養(yǎng)28 30h，培養(yǎng)結(jié)束后將培養(yǎng)物于35 45°C干燥，獲得酵母培養(yǎng)物；所述底物由如下質(zhì)量配比的原料組成麩皮40飛0%、玉米粉310%、酒糟15 20%、豆柏粉20 25%和尿素2 5% ;所述水a(chǎn)與底物總質(zhì)量的比值為0. 5 I 1 ；(2)羽毛蛋白肽飼料添加劑制備將禽類羽毛粉碎，獲得禽類羽毛粉末，將禽類羽毛粉末與步驟(I)所述酵母培養(yǎng)物混合，加入水b，攪拌均勻，獲得固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基B，分別將地衣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌接種至固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基B中，35 38°C發(fā)酵培養(yǎng)3(T45h，發(fā)酵培養(yǎng)結(jié)束后，將發(fā)酵產(chǎn)物干燥，粉碎，獲得所述的羽毛蛋白肽飼料添加劑；所述禽類羽毛粉末與酵母培養(yǎng)物的投料質(zhì)量比為擴(kuò)49:1，所述的水b的加入量與酵母培養(yǎng)物和禽類羽毛粉末總質(zhì)量的比值為0. 5 I. 2:1。進(jìn)一步，步驟(I)所述釀酒酵母和扣囊復(fù)膜孢酵母分別以含菌細(xì)胞懸液的形式加入。、
進(jìn)一步，步驟(I)所述釀酒酵母含菌細(xì)胞懸液的加入量以活菌數(shù)計(jì)為
I.2 3. 6X 107cfu/g固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基A干重。進(jìn)一步，所述扣囊復(fù)膜孢酵母含菌細(xì)胞懸液的加入量以活菌數(shù)計(jì)為2飛X IO7Cfu/g固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基A干重。進(jìn)一步，步驟(2)所述禽類羽毛粉末細(xì)度為2(T40目，水分含量小于10%。進(jìn)一步，步驟(2)所述地衣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌分別以含菌細(xì)胞懸液的形式加入。進(jìn)一步，所述地衣芽孢桿菌含菌細(xì)胞懸液的加入量以活菌數(shù)計(jì)為2飛X IO7CfVg固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基B干重。 進(jìn)一步，所述枯草芽孢桿菌含菌細(xì)胞懸液的加入量以活菌數(shù)計(jì)為5 30X 107cfu/g固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基B干重。進(jìn)一步，所述羽毛蛋白肽飼料添加劑按如下步驟制備(1)酵母培養(yǎng)物的制備將底物與水a(chǎn)混合,在0. 12Mpa壓力下蒸煮35min進(jìn)行滅菌,再悶料35min,獲得固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基A，再將釀酒酵母ACCC20042含菌細(xì)胞懸液和扣囊復(fù)膜孢酵母ACCC20015含菌細(xì)胞懸液分別接種到固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基A中，在30°C下培養(yǎng)28 30h，培養(yǎng)結(jié)束后將培養(yǎng)物于35 45°C下干燥，獲得酵母培養(yǎng)物；所述底物由如下質(zhì)量配比的原料組成麩皮40飛0%、玉米粉310%、酒糟15 20%、豆柏粉20 25%和尿素2 5% ;所述水a(chǎn)與底物總質(zhì)量的比值為0. 65 I 1 ;所述釀酒酵母ACCC20042含菌細(xì)胞懸液的加入量以活細(xì)胞數(shù)計(jì)為I. 2X107cfu/g固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基A干重；所述扣囊復(fù)膜孢酵母ACCC20015含菌細(xì)胞懸液的加入量以活菌數(shù)計(jì)為2 X IO7Cfu/g固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基A干重；(2)羽毛蛋白肽飼料添加劑的制備將禽類羽毛粉末與步驟(I)所述酵母培養(yǎng)物以質(zhì)量比11. 5^49 1混合，加入水b，攪拌均勻，用鈷-60在5kGy下照射滅菌，獲得固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基B，分別將地衣芽孢桿菌ACCCOl 198含菌細(xì)胞懸液和枯草芽孢桿菌ACCCOl 185含菌細(xì)胞懸液接種至固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基B中，35 38°C發(fā)酵培養(yǎng)3(T45h，發(fā)酵培養(yǎng)結(jié)束后，將發(fā)酵產(chǎn)物在45°C下干燥至水分含量小于10%，粉碎至細(xì)度為40飛0目，獲得所述的羽毛蛋白肽飼料添加劑；所述禽類羽毛粉末水分小于10%，細(xì)度為2(T40目；所述水b與酵母培養(yǎng)物和禽類羽毛粉末總質(zhì)量的比值為0. 5^1. 2 1 ;所述地衣芽孢桿菌含菌細(xì)胞懸液的加入量以活菌數(shù)計(jì)為2飛X107cfu/g固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基B干重；所述枯草芽孢桿菌含菌細(xì)胞懸液的加入量以活菌數(shù)計(jì)為5lX107cfU/g固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基B干重。一種所述羽毛蛋白肽飼料添加劑在畜禽配合飼料中的應(yīng)用，進(jìn)一步，所述羽毛蛋白肽飼料添加劑在畜禽配合飼料中的有效質(zhì)量添加量為2 8% (重量)。本發(fā)明所述固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基干重是指將制備的固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基在55飛8°C烘干至恒重，測(cè)量每克制備的固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基的含水量，根據(jù)含水量來(lái)計(jì)算所制備的固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基的干重。本發(fā)明所述禽類羽毛粉末來(lái)自于各種禽類的羽毛，優(yōu)選以下禽類的羽毛雞、鴨、鵝或鵪鶉等。本發(fā)明所述釀酒酵母，優(yōu)選為釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiaeACCC20042),購(gòu)自中國(guó)農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心，所述釀酒酵母ACCC20042含菌細(xì)胞懸液按如下方法制備將釀酒酵母ACCC20042接種至麥芽糖糖液a種子培養(yǎng)基(糖度7 8° Be)中，30°C保溫培養(yǎng)10h，再轉(zhuǎn)接至麥芽糖糖液b種子培養(yǎng)基(糖度7 8° Be)中，30°C保溫培養(yǎng)10h，然后轉(zhuǎn)接至糖水培養(yǎng)基(糖度7 8° Be)中，30°C培養(yǎng)10h，最后轉(zhuǎn)接至擴(kuò)大培養(yǎng)基(組成為麩皮與谷粉和水的質(zhì)量比為I :3 20) 30°C保溫培養(yǎng)20h，獲得釀酒酵母種子液，即為釀酒酵母含菌細(xì)胞懸液；所述麥芽糖糖液a與麥芽糖糖液b的體積比為1:6，所述麥芽糖糖液a與麥芽糖糖液b均為麥芽糖糖液，字母本身沒(méi)有含義；流程為釀酒酵母原菌試管一小三角瓶種子(麥芽糖糖液100ml，糖度7 8° Be) 30°C保溫培養(yǎng)IOh——轉(zhuǎn)入大三角瓶(麥芽糖糖液600ml，糖度7 8° Be)，30°C保溫培養(yǎng)IOh——轉(zhuǎn)入卡氏罐內(nèi)(糖水13kg，糖度7 8。Be擴(kuò)大培養(yǎng))30°C培養(yǎng)IOh——將卡氏罐酵母種子在酒母缸擴(kuò)培(培養(yǎng)基為每缸放清水200kg，谷粉30kg，麩皮IOkg)總培養(yǎng)時(shí)間20h，即為釀酒酵母種子液。本發(fā)明所述扣囊復(fù)膜孢酵母 ,優(yōu)選為扣囊復(fù)膜孢酵母(EndomycopsisfibuligeraACCC20015)，購(gòu)自中國(guó)農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心。所述扣囊復(fù)膜孢酵母ACCC20015含菌細(xì)胞懸液制備方法與所述釀酒酵母ACCC20042含菌細(xì)胞懸液制備方法相同，流程為扣囊復(fù)膜孢酵母原菌試管——小三角瓶種子(麥芽糖糖液100ml，糖度7 8° Be) 30°C保溫培養(yǎng)IOh——轉(zhuǎn)入大三角瓶(麥芽糖糖液600ml，糖度7 8。Be), 30°C保溫培養(yǎng)IOh——轉(zhuǎn)
入卡氏罐內(nèi)(糖水13kg,糖度7 8。Be擴(kuò)大培養(yǎng))30°C培養(yǎng)IOh-將卡氏罐酵母種子在
酒母缸擴(kuò)培(培養(yǎng)基為每缸放清水200kg，谷粉30kg，麩皮IOkg)總培養(yǎng)時(shí)間20h，即為扣囊復(fù)膜孢酵母種子液。本發(fā)明所述地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis),優(yōu)選地衣芽孢桿菌ACCCOl 198 (Bacillus licheniformis),購(gòu)自中國(guó)農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心,所述地衣芽孢桿菌含菌細(xì)胞懸液按如下方法制備將地衣芽孢桿菌接種至適用于地衣芽孢桿菌生長(zhǎng)的液體種子培養(yǎng)基中，然后置搖床上，轉(zhuǎn)速為240r / min，40°C振蕩培養(yǎng)14h，得到地衣芽孢桿菌種子液，即為地衣芽孢桿菌含菌細(xì)胞懸液；更進(jìn)一步，所述地衣芽孢桿菌ACCCOl 198含菌細(xì)胞懸液按如下方法制備(I)斜面培養(yǎng)斜面培養(yǎng)基終濃度組成為牛肉膏5g/L、蛋白胨10g/L、氯化鈉5g/L、瓊脂30g/L，pH值7. 4，溶劑為水；將地衣芽孢桿菌ACCC01198從保存的斜面轉(zhuǎn)接于新鮮試管斜面，于37°C培養(yǎng)18h，得到斜面菌種；(2)種子培養(yǎng)液體種子培養(yǎng)基終濃度組成為牛肉膏5g/L，大豆蛋白胨10g/L，NaCl 5g/L，pH7. 0，溶劑為水；從步驟(I)培養(yǎng)好的斜面上用接種環(huán)挑I環(huán)接種于盛有50ml無(wú)菌液體種子培養(yǎng)基的250ml三角瓶中，然后置回轉(zhuǎn)式恒溫調(diào)速搖瓶柜中37°C振蕩(轉(zhuǎn)速為120r / min)培養(yǎng)24h，得到地衣芽孢桿菌ACCC01198種子液，即地衣芽孢桿菌ACCC01198含菌細(xì)胞懸液。本發(fā)明所述枯草芽孢桿菌，優(yōu)選為枯草芽孢桿菌ACCC01185 (Bacillussubtilis)，購(gòu)自中國(guó)農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心。所述枯草芽孢桿菌含菌細(xì)胞懸液按如下方法制備將枯草芽孢桿菌接種至適用于枯草芽孢桿菌生長(zhǎng)的液體種子培養(yǎng)基中，35 37°C、220r/min搖床培養(yǎng)24 26小時(shí)，得到枯草芽孢桿菌種子液，即枯草芽孢桿菌含菌細(xì)胞懸液；更進(jìn)一步，所述枯草芽孢桿菌ACCC01185含菌細(xì)胞懸液按如下方法制備
(I)斜面培養(yǎng)斜面培養(yǎng)基終濃度組成為蛋白胨10g/L、牛肉提取物3g/L、NaCl 5g/L、瓊脂20g/L、pH值7. 0，溶劑為水；將枯草芽孢桿菌ACCC01185從保存的斜面轉(zhuǎn)接于新鮮試管斜面，37°C培養(yǎng)24h，得到斜面菌種；(2)種子培養(yǎng)液體種子培養(yǎng)基終濃度組成為葡萄糖2g/L，NaCl 5g/L，酵母膏5g/L，蛋白胨10g/L，pH 7. 0，溶劑為水；將液體種子培養(yǎng)基在120°C條件下滅菌30min，降溫后從步驟(I)培養(yǎng)好的斜面上用接種環(huán)挑I環(huán)接種于盛有50ml無(wú)菌液體種子培養(yǎng)基的300ml三角瓶中，置37°C控溫?fù)u床培養(yǎng)，轉(zhuǎn)速220r/min，至芽孢率達(dá)90%以上(約需24h)時(shí)停止，獲得枯草芽孢桿菌ACCCOl 185種子液，即為枯草芽孢桿菌ACCCO1185含菌細(xì)胞懸液。本發(fā)明所述固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基A、固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基B均為固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基，水a(chǎn)，水b均為水，字母本身沒(méi)有含義。本發(fā)明的有益效果主要體現(xiàn)在本發(fā)明羽毛蛋白肽飼料添加劑能夠使羽毛蛋白消
化吸收效率達(dá)90%，含有多種生物活性肽，并且經(jīng)多種有益微生物發(fā)酵，經(jīng)低溫干燥而成，富
含角蛋白酶、消化酶、活性菌，有助消化和促進(jìn)生長(zhǎng)；有利于調(diào)控動(dòng)物腸道有益微生物菌群；
具有天然的發(fā)酵香味，適口性好，具有良好誘食效果，促進(jìn)幼齡動(dòng)物采食；能明顯改善畜禽
的異食癖，能完全替代魚粉、血漿蛋白粉等動(dòng)物性蛋白飼料，具有明顯的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效.、
Mo
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步描述，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不僅限于此實(shí)施例I菌種的種曲制備(I)枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis ACCCOl 185，中國(guó)農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心提供)斜面培養(yǎng)基終濃度組成為蛋白胨lg、牛肉提取物0. 3g、NaClO. 5g、瓊脂2. 0g、蒸餾水 100ml，pH 值 7. O。液體種子培養(yǎng)基為葡萄糖0. 2g, NaClO. 5g,酵母膏0. 5g,蛋白胨lg,蒸懼水IOOmL, pH 7. O0 在 120°C條件下滅菌 30min。將枯草芽孢桿菌ACCC01185接種于斜面培養(yǎng)基，37°C培養(yǎng)24h，得到斜面菌種；從斜面菌種挑取一接種環(huán)于盛有50ml無(wú)菌液體種子培養(yǎng)基的300ml三角瓶中，置37°C控溫?fù)u床培養(yǎng)，轉(zhuǎn)速220r/min，至芽孢率達(dá)90%以上(約需24h)時(shí)停止，獲得枯草芽孢桿菌ACCCOl 185種子液，即為枯草芽孢桿菌ACCCOl 185含菌細(xì)胞懸液。(2)地衣芽抱桿菌(Bacillus licheniformis ACCCOl 198由中國(guó)農(nóng)業(yè)微生物菌種
保藏管理中心提供)斜面培養(yǎng)基終濃度組成為牛肉膏5g、蛋白胨10g、氯化鈉5g、瓊脂30g、蒸餾水IOOOmL, pH 值 7. 4。液體種子培養(yǎng)基為牛肉膏5g，大豆蛋白胨10g，NaC15g、蒸餾水lL、pH7. O。將地衣芽孢桿菌從保存的斜面轉(zhuǎn)接于新鮮試管斜面，于37°C培養(yǎng)18h，得到斜面菌種；取培養(yǎng)好的斜面菌種，用接種環(huán)挑I環(huán)接種于盛有50ml無(wú)菌種子培養(yǎng)基的250ml三角瓶中，然后置回轉(zhuǎn)式恒溫調(diào)速搖瓶柜中37°C振蕩(轉(zhuǎn)速為120r / min)培養(yǎng)24h，得到地衣芽孢桿菌ACCCOl 198種子液，即為地衣芽孢桿菌ACCCOl 198含菌細(xì)胞懸液。(3)釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae ACCC20042,中國(guó)農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心提供)釀酒酵母原菌試管——小三角瓶種子(麥芽糖糖液100ml，糖度7 8° Be)30°C保溫培養(yǎng)IOh——轉(zhuǎn)入大三角瓶(麥芽糖糖液600ml，糖度7 8。Be), 30°C保溫培養(yǎng)IOh——轉(zhuǎn)入卡氏罐內(nèi)(糖水13kg,糖度7 8。Be擴(kuò)大培養(yǎng))30°C培養(yǎng)IOh-將卡氏罐酵母種子在酒母缸擴(kuò)培(培養(yǎng)基為每缸放清水200kg，谷粉30kg，麩皮IOkg)總培養(yǎng)時(shí)間20h，即為釀酒酵母種子液。(4)扣囊復(fù)膜孢酵母(Endomycopsisfbuligera ACCC20015,由中國(guó)農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心提供)扣囊復(fù)膜孢酵母原菌試管——小三角瓶種子(麥芽糖糖液100ml，糖度7 8° Be)30°C保溫培養(yǎng)IOh——轉(zhuǎn)入大三角瓶(麥芽糖糖液600ml，糖度7 8。Be)，30°C保溫培養(yǎng)IOh——轉(zhuǎn)入卡氏罐內(nèi)(糖水13kg，糖度7 8。Be擴(kuò)大培養(yǎng))30°C培養(yǎng)IOh——將卡氏罐酵母種子在酒母缸擴(kuò)培(培養(yǎng)基為每缸放清水200kg，谷粉30kg，麩皮IOkg)總培養(yǎng)時(shí)間20h，即為扣囊復(fù)膜孢酵母種子液。
實(shí)施例2羽毛蛋白肽飼料添加劑(I)酵母培養(yǎng)物的制備所述的酵母培養(yǎng)物制作方法將由麩皮600g，玉米粉30g，酒糟150g，豆柏粉200g，尿素20g組成的發(fā)酵底物加入滅菌罐中，再加入650g水，在0. 12Mpa壓力下蒸煮35min進(jìn)行滅菌，滅菌后關(guān)閉進(jìn)汽閥，悶料35min出料，得到固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基。通風(fēng)吹冷至33 35°C，分別接種實(shí)施例I方法制備的釀酒酵母ACCC20042含菌細(xì)胞懸液40g (活菌數(shù)以固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基干重計(jì)達(dá)到I. 2X107cfu/g),扣囊復(fù)膜孢酵ACCC20015含菌細(xì)胞懸液50g(活菌數(shù)以固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基干重計(jì)達(dá)到2X 107cfu/g)，發(fā)酵溫度控制在30°C發(fā)酵培養(yǎng)30小時(shí)后，在35°C干燥至水分含量小于10%，制成酵母培養(yǎng)物。(2)羽毛蛋白肽飼料添加劑的制備羽毛粉末(各種禽類羽毛均可，洗干凈，烘干至水分小于10%，粉碎到細(xì)度為40目)920g和步驟(I)制備的酵母培養(yǎng)物80g混合后，加入500g水，用鈷-60在5kGy下進(jìn)行輻照滅菌，得到羽毛蛋白肽固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基。分別將實(shí)施例I方法制備的地衣芽孢桿菌ACCCOl 198含菌細(xì)胞懸液Ig (活菌數(shù)以固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基干重計(jì)達(dá)到2X107cfu/g)，枯草芽孢桿菌ACCCOl 185含菌細(xì)胞懸液3g (活菌數(shù)以固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基干重計(jì)達(dá)到5X107cfu/g)，于35-38°C下共混發(fā)酵培養(yǎng)。發(fā)酵主要管理好發(fā)酵溫度。開啟溫度自控儀(BYS- II標(biāo)養(yǎng)室溫濕自控儀，河北省虹宇儀器設(shè)備有限公司)，接上風(fēng)機(jī)電源，溫度控制上限為38°C，下限為35°C。勤觀察，勤測(cè)試。溫控儀探頭落點(diǎn)要正確，深度要達(dá)到IOcm (可邊上插溫度計(jì)做對(duì)比)，主要防止探頭，溫控儀及連接儀表故障，一般6h后開始升溫，前期可用室內(nèi)風(fēng)巡回，當(dāng)室溫較高(通常達(dá)36°C )或料溫升溫過(guò)猛，可開啟室外風(fēng)門，達(dá)到調(diào)節(jié)生長(zhǎng)溫度之目的。經(jīng)30h發(fā)酵完畢，可加大風(fēng)門，開啟門窗，使料溫低于40°C。采用低溫干燥，前期料溫控制在38°C內(nèi)，后期料溫控制在45°C內(nèi)，水分小于10%即可出房。烘干后粉碎到細(xì)度40目，得到水分彡10%，粗蛋白質(zhì)量含量彡60%羽毛蛋白肽飼料添加劑。實(shí)施例3羽毛蛋白肽飼料添加劑(I)酵母培養(yǎng)物制備所述的酵母培養(yǎng)物制作方法將由麩皮400g，玉米粉100g，酒糟200g，豆柏粉250g,尿素50g組成的發(fā)酵底物加入滅菌罐中，加入IOOOg水,在0. 12Mpa壓力下蒸煮35min進(jìn)行滅菌，滅菌后關(guān)閉進(jìn)汽閥，悶料35min出料，得到固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基。通風(fēng)吹冷至33 35°C，分別接種實(shí)施例I方法制備的釀酒酵母ACCC20042含菌細(xì)胞懸液120g(活菌數(shù)以固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基干重計(jì)達(dá)到3.6X107cfu/g)，扣囊復(fù)膜孢酵ACCC20015含菌細(xì)胞懸液125g (活菌數(shù)以固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基干重計(jì)達(dá)到5X 107cfu/g)發(fā)酵溫度控制在30°C，共發(fā)酵培養(yǎng)28小時(shí)后，在35°C 45°C干燥至水分小于10%，制成酵母培養(yǎng)物。(2)羽毛蛋白肽飼料添加劑的制備羽毛粉(各種禽類羽毛均可，洗干凈，烘干至水分小于10%，粉碎到細(xì)度為20目)980g和步驟(I)制備的酵母培養(yǎng)物20g混合后，加入1200g水，用鈷-60在5kGy下進(jìn)行輻照滅菌，得到羽毛蛋白肽固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基。分別將實(shí)施例I方法制備的地衣芽孢桿菌ACC⑶1198含菌細(xì)胞懸液2. 5g (活菌數(shù)以固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基干重計(jì)達(dá)到5X107cfu/g)，枯草芽孢桿菌ACCC01185含菌細(xì)胞懸液18g (活菌數(shù)以固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基干重計(jì)達(dá)到3X IO8Cfu/g)，于35 38°C下共混發(fā)酵培養(yǎng)。其他操作同實(shí)施例2，經(jīng)45h發(fā)酵完畢，可加大風(fēng)門，開啟門窗，不使料溫超過(guò)40°C，等待出房干燥。采用低溫干燥 ，前期料溫控制在38°C內(nèi)，后期料溫控制在45°C內(nèi)，水分小于10%即可出房。烘干后粉碎到細(xì)度60目以上，得到水分彡10%、，粗蛋白彡60%羽毛蛋白肽飼料添加劑。實(shí)施例4羽毛蛋白肽飼料添加劑(I)酵母培養(yǎng)物的制備所述的酵母培養(yǎng)物制作方法將由麩皮500g，玉米粉65g，酒糟175g，豆柏粉225g，尿素35g組成的發(fā)酵底物加入滅菌罐中，再加入825g水，在0. 12Mpa壓力下蒸煮35min進(jìn)行滅菌，滅菌后關(guān)閉進(jìn)汽閥，悶料35min出料，得到固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基。通風(fēng)吹冷至33 35°C，分別接種實(shí)施例I方法制備的釀酒酵母ACCC20042含菌細(xì)胞懸液80g (活菌數(shù)以固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基干重計(jì)達(dá)到2. 4X 107cfu/g)，扣囊復(fù)膜孢酵ACCC20015含菌細(xì)胞懸液87. 5g(活菌數(shù)以固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基干重計(jì)達(dá)到3. 5X 107cfu/g)，發(fā)酵溫度控制在30°C發(fā)酵培養(yǎng)28小時(shí)后，在35°C干燥至水分含量小于10%，制成酵母培養(yǎng)物。(2)羽毛蛋白肽飼料添加劑的制備羽毛粉(各種禽類羽毛均可，洗干凈，烘干至水分小于10%，粉碎到細(xì)度為35目)950g和步驟(I)制備的酵母培養(yǎng)物50g混合后，加入850g水，用鈷-60在5kGy進(jìn)行輻照滅菌，得到羽毛蛋白肽固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基。分別將實(shí)施例I方法制備的地衣芽孢桿菌ACCC01198含菌細(xì)胞懸液I. 75g(活菌數(shù)以固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基干重計(jì)達(dá)到3. 5X 107cfu/g)，枯草芽孢桿菌ACCCOl 185含菌細(xì)胞懸液10. 5g(活菌數(shù)以固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基干重計(jì)達(dá)到I. 75X 108cfu/g)，于35-38°C下共混發(fā)酵培養(yǎng)。其他操作同實(shí)施例2，經(jīng)45h發(fā)酵完畢，可加大風(fēng)門，開啟門窗，不使料溫超過(guò)40°C，等待出房干燥。采用低溫干燥，前期料溫控制在38°C內(nèi)，后期料溫控制在45°C內(nèi)，水分小于10%即可出房。烘干后粉碎到細(xì)度60目以上，得到水分彡10%，粗蛋白質(zhì)量含量彡60%羽毛蛋白肽飼料添加劑。實(shí)施例5選取28日齡斷奶的三元雜交仔豬108頭，按窩別、性別、體重相近的原則分為3組(試驗(yàn)I組、試驗(yàn)II組和對(duì)照組)，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)12頭豬。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧(質(zhì)量配方見表I)，試驗(yàn)I組、試驗(yàn)II組分別用2% (重量)和5% (重量)的實(shí)施例2方法制備的羽毛蛋白肽飼料添加劑替代基礎(chǔ)日糧中等量的魚粉，試驗(yàn)期28-49日齡，自由采食，生產(chǎn)性能結(jié)果見表2所示。表I日糧質(zhì)量成分組成
權(quán)利要求
1.一種羽毛蛋白肽飼料添加劑，其特征在于所述羽毛蛋白肽飼料添加劑按如下方法制備(1)酵母培養(yǎng)物的制備將底物與水a(chǎn)混合，獲得固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基A，再將釀酒酵母和扣囊復(fù)膜孢酵母接種到固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基A中，在30°C下培養(yǎng)28 30h，培養(yǎng)結(jié)束后將培養(yǎng)物于35 45°C干燥，獲得酵母培養(yǎng)物；所述底物由如下質(zhì)量配比的原料組成麩皮40飛0%、玉米粉3 10%、酒糟15 20%、豆柏粉20 25%和尿素2 5% ;所述水a(chǎn)與底物總質(zhì)量比為O. 5 I 1 ；(2)羽毛蛋白肽飼料添加劑的制備將禽類羽毛粉碎，獲得禽類羽毛粉末，將禽類羽毛粉末與步驟(I)所述酵母培養(yǎng)物混合，加入水b，攪拌均勻，獲得固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基B，分別將地衣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌接種至固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基B中，35 38°C發(fā)酵培養(yǎng)3(T45h，發(fā)酵培養(yǎng)結(jié)束后，將發(fā)酵產(chǎn)物干燥，粉碎，獲得所述的羽毛蛋白肽飼料添加劑；所述禽類羽毛粉末與酵母培養(yǎng)物的投料質(zhì)量比為9 49:1，所述的水b的加入量與酵母培養(yǎng)物和禽類羽毛粉末總質(zhì)量比值為O. 5^1. 2 :1。
2.如權(quán)利要求I所述羽毛蛋白肽飼料添加劑，其特征在于步驟(I)所述釀酒酵母和扣囊復(fù)膜孢酵母分別以含菌細(xì)胞懸液的形式加入。
3.如權(quán)利要求2所述羽毛蛋白肽飼料添加劑，其特征在于步驟(I)所述釀酒酵母含菌細(xì)胞懸液的加入量以活菌數(shù)計(jì)為1.2 3.6父107(^11/^固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基4干重。
4.如權(quán)利要求2所述羽毛蛋白肽飼料添加劑，其特征在于步驟(I)所述扣囊復(fù)膜孢酵母含菌細(xì)胞懸液的加入量以活菌數(shù)計(jì)為2飛X107cfu/g固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基A干重。
5.如權(quán)利要求I所述羽毛蛋白肽飼料添加劑，其特征在于步驟(2)所述禽類羽毛粉末水分含量小于10%，細(xì)度為20 40目。
6.如權(quán)利要求I所述羽毛蛋白肽飼料添加劑，其特征在于步驟(2)所述地衣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌分別以含菌細(xì)胞懸液的形式加入。
7.如權(quán)利要求6所述羽毛蛋白肽飼料添加劑，其特征在于所述地衣芽孢桿菌含菌細(xì)胞懸液的加入量以活菌數(shù)計(jì)為2 5X 107CfU/g固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基B干重。
8.如權(quán)利要求6所述羽毛蛋白肽飼料添加劑，其特征在于所述枯草芽孢桿菌含菌細(xì)胞懸液的加入量以活菌數(shù)計(jì)為5 30X 107cfU/g固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基B干重。
9.如權(quán)利要求I所述羽毛蛋白肽飼料添加劑，其特征在于所述羽毛蛋白肽飼料按如下步驟制備(I)酵母培養(yǎng)物的制備將底物與水a(chǎn)混合,在O. 12MPa壓力下蒸煮35min進(jìn)行滅菌，再悶料35min，獲得固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基A，再將釀酒酵母ACCC20042含菌細(xì)胞懸液和扣囊復(fù)膜孢酵母ACCC20015含菌細(xì)胞懸液分別接種到固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基A中，在30°C下培養(yǎng)28 30h，培養(yǎng)結(jié)束后將培養(yǎng)物于35 45°C下干燥，獲得酵母培養(yǎng)物；所述底物由如下質(zhì)量配比的原料組成麩皮40 60%、玉米粉3 10%、酒糟15 20%、豆柏粉20 25%和尿素2 5% ;所述水a(chǎn)與底物總質(zhì)量的比值為O. 65^1 1 ;所述釀酒酵母ACCC20042含菌細(xì)胞懸液的加入量以活細(xì)胞數(shù)計(jì)為I. 2X107cfu/g固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基A干重；所述扣囊復(fù)膜孢酵母ACCC20015含菌細(xì)胞懸液的加入量以活菌數(shù)計(jì)為2X 107cfu/g固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基A干重；(2)羽毛蛋白肽飼料添加劑的制備將禽類羽毛粉末與步驟(I)所述酵母培養(yǎng)物以質(zhì)量比11. 5^49 1混合，加入水b，攪拌均勻，用鈷-60在5kGy下照射滅菌，獲得固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基B，分別將地衣芽孢桿菌ACCCOl 198含菌細(xì)胞懸液和枯草芽孢桿菌ACCCOl 185含菌細(xì)胞懸液接種至固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基B中，35^38 V發(fā)酵培養(yǎng)3(T45h，發(fā)酵培養(yǎng)結(jié)束后，將發(fā)酵產(chǎn)物在45 °C下干燥至水分含量小于10%，粉碎至細(xì)度為4(Γ60目，獲得所述的羽毛蛋白肽飼料添加劑；所述禽類羽毛粉末水分含量小于10%，細(xì)度為2(Γ40目；所述水b與酵母培養(yǎng)物和禽類羽毛粉末總質(zhì)量的比值為O. 5^1. 2 1 ;所述地衣芽孢桿菌含菌細(xì)胞懸液的加入量以活菌數(shù)計(jì)為2^5X107cfu/g固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基B干重；所述枯草芽孢桿菌含菌細(xì)胞懸液的加入量以活菌數(shù)計(jì)為5 8X 107cfu/g固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基B干重。
10.一種如權(quán)利要求I所述羽毛蛋白肽飼料添加劑在畜禽配合飼料中的應(yīng)用，其特征在于所述羽毛蛋白肽飼料添加劑在畜禽配合飼料中的有效質(zhì)量添加量為2 8%。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種羽毛蛋白肽飼料添加劑及應(yīng)用(1)將底物與水混合，獲得固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基A，再將釀酒酵母和扣囊復(fù)膜孢酵母接種到固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基A中，在30℃下培養(yǎng)28~30h，培養(yǎng)結(jié)束后將培養(yǎng)物于35~45℃干燥，獲得酵母培養(yǎng)物；(2)將禽類羽毛粉末與所述酵母培養(yǎng)物混合，加入水，攪拌均勻，獲得固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基B，分別將地衣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌接種至固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基B中，35~38℃發(fā)酵培養(yǎng)30~45h，獲得所述的羽毛蛋白肽飼料添加劑；本發(fā)明羽毛蛋白肽飼料添加劑能夠使羽毛蛋白消化吸收效率達(dá)90%，且含有多種生物活性肽，有助消化和促進(jìn)生長(zhǎng)；具有天然的發(fā)酵香味，適口性好；能明顯改善畜禽的異食癖。
文檔編號(hào)A23K1/16GK102726596SQ20121020140
公開日2012年10月17日 申請(qǐng)日期2012年6月18日 優(yōu)先權(quán)日2012年6月18日
發(fā)明者徐張賢, 洪奇華, 王萍, 金妙仁, 陳安國(guó) 申請(qǐng)人:杭州啟明星生物營(yíng)養(yǎng)有限公司