專利名稱：利用體細(xì)胞胚繁育文山兜蘭苗的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及ー種利用體細(xì)胞胚繁育文山兜蘭苗的方法，屬于植物組織培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
文山5 蘭iPaph. FeflsAafleflseO 為蘭科(Orchidaceae) 5 蘭屬(PaphiopediUtnH物，是蘭科中的珍品，被《華盛頓公約》列為iv級珍稀瀕危物種，是極具觀賞價(jià)值的世界級花卉名品。文山兜蘭花期長，花色莊重、素雅，花型奇特，其唇瓣?duì)钊缤闲?，故有“拖鞋蘭”之稱，背萼特別發(fā)達(dá)，具有艷麗的花紋。中國的兜蘭屬植物雖然豐富，但由于過度采集，走私出境猖獗以及生境破壞等原因，近十幾年來野生兜蘭的數(shù)量急劇減少，分布區(qū)逐漸萎縮，不少種類已經(jīng)到了滅絕的邊緣。針對野生兜蘭受到掠奪性采挖、交易而導(dǎo)致該類群植物迅速減少甚至滅絕的狀況，《華盛頓公約》(即《瀕危野生動植物種國際貿(mào)易公約》，(Convention on International Trade in Endangered Species of Wild Fauna and Flora, CITEbノ把所有兜蘭屬植物列入其附錄一名錄。文山5 蘭分布于云南東南部文山縣,生長在海拔1000 1200m的石灰?guī)r并有茂密灌木和草叢的地區(qū)?；ǘ涑嗜榘咨螯S白色，中萼片具與花瓣具有褐紅色粗斑點(diǎn)。由于文山兜蘭生長分布區(qū)域狹窄，且原始生境受損嚴(yán)重，野生文山兜蘭種質(zhì)已變得極為稀少；同吋，文山兜蘭的種子與大多數(shù)蘭花種子一祥，沒有胚乳，在自然環(huán)境下極難萌發(fā)。采用傳統(tǒng)分株方式繁殖，繁殖系數(shù)也較低，難以達(dá)到保護(hù)及開發(fā)的要求。兜蘭屬植物采用傳統(tǒng)蘭花無菌播種技術(shù)進(jìn)行繁殖，不僅難度大，且增殖困難，對文山兜蘭的有效繁殖產(chǎn)生了較大的瓶頸。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是采用一種體細(xì)胞胚繁育技術(shù)來繁殖文山兜蘭的方法，該方法通過對培養(yǎng)基的篩選、培養(yǎng)方法的選擇，利用文山兜蘭種子進(jìn)行體細(xì)胞胚的誘導(dǎo)，最終得到文山兜蘭苗。本發(fā)明采用如下技術(shù)方案ー種利用體細(xì)胞胚繁育文山兜蘭苗的方法，其特征在于經(jīng)過下列各步驟
(1)把成熟文山兜蘭果實(shí)滅菌后，切開果實(shí)取出種子，接種于下列誘導(dǎo)萌發(fā)培養(yǎng)基中Ms + 2. 0mg/L 的 6-BA + 100ml/L 的椰子汁 + 80g/L 的香蕉泥+ 50g/L 的土豆泥+ 5g/L的活性炭+ 30g/L的蔗糖+6g/L的瓊脂，pH值為5. 2 5. 4 ;暗培養(yǎng)至種子萌發(fā)后，轉(zhuǎn)入1000 15001X的弱光下，培養(yǎng)25 35天，得到幼胚；
(2)將步驟(I)得到的幼胚轉(zhuǎn)接到下列液體培養(yǎng)基中Ms+2.0mg/L的6-BA+O. 5mg/L的TDZ+100ml/L的椰子汁+80g/L的香蕉泥+50g/L的土豆泥+5g/L的活性炭+30g/L的鹿糖，pH值為5. 2 5. 4 ;在溫度為26 27°C，光照強(qiáng)度為1000 15001x，轉(zhuǎn)速為120 150r/min的條件下，培養(yǎng)40 50天，每15天更換一次上述液體培養(yǎng)基，過濾分離出的培養(yǎng)物即為體細(xì)胞胚；(3)把步驟(2)得到的體細(xì)胞胚切散后，轉(zhuǎn)接到下列分化培養(yǎng)基上l/2Ms+l.Omg/L的6-BA+100ml/L的椰子汁+80g/L的香蕉泥+50g/L的土豆泥+5g/L的活性炭+30g/L的鹿糖+6g/L的瓊脂，pH值為5. 2 5. 4 ;在溫度為26 27°C，光照強(qiáng)度為2000 25001x條件下，培養(yǎng)90 120天，每45天更換一次上述分化培養(yǎng)基，直至小苗長出2 3片的伸長葉片，且株高2 3cm吋，即得到分化苗；
(4)把步驟(3)得到的分化苗切去小苗基部黃、褐部分，再轉(zhuǎn)接到下列生根培養(yǎng)基上l/2Ms+0. 5mg/L 的 6-BA+1. Omg/L 的NAA+100ml/L 的椰子汁 +100g/L 的香蕉泥+50g/L 的土泥+5g/L的活性炭+30g/L的蔗糖+6g/L的瓊脂，pH值為5. 2 5. 4 ’在溫度為26 27。。’光照強(qiáng)度為2000 25001x的條件下，培養(yǎng)至苗高為4 5cm，根長3cm以上，即得種苗； (5)將步驟(4)所得種苗在30%遮明度的自然光下放置7 10天后，用稀釋1000倍的多菌靈溶液浸泡種苗10分鐘后，移栽至下列質(zhì)量比的混合基質(zhì)中蕨根蘭石細(xì)樹皮=1:4:1，保持基質(zhì)水分為70 85%，并適當(dāng)通風(fēng)，即得到可移栽的文山兜蘭苗。所述步驟(I)的成熟文山兜蘭果實(shí)是指在文山兜蘭開花的季節(jié)，待開花后5 7天，選取健康無病植株于無雨的上午10 12點(diǎn)進(jìn)行授粉自交，自交前I天及自交后I天，停止對植株進(jìn)行水噴淋，授粉后140 150天，即得飽滿的成熟文山兜蘭果實(shí)。所述步驟(I)的滅菌是先用體積濃度為70%的酒精擦拭果實(shí)表面，然后用無菌水洗滌3次，再用質(zhì)量濃度為0. 1%的升汞滅菌lOmin，用無菌水洗滌3次，用質(zhì)量濃度為10%的次氯酸鈉浸泡lOmin，最后用無菌水洗滌3次，得滅菌的成熟文山兜蘭果實(shí)。所述步驟(2)得到的培養(yǎng)物在解剖鏡下觀察，呈現(xiàn)類似于圓球莖的體細(xì)胞胚集合體，并且有芽尖在體細(xì)胞胚頂端出現(xiàn)。所述步驟(5)的30%遮明度的自然光是指在自然光下，采用30%遮明度的遮陰網(wǎng)進(jìn)行遮明，以防光線過強(qiáng)造成葉面灼燒。本發(fā)明優(yōu)點(diǎn)和效果在于通過使用文山兜蘭成熟果實(shí)無菌萌發(fā)后獲得的幼胚，采用TDZ促進(jìn)植物芽的再生和繁殖，打破芽的休眠，促進(jìn)種子萌發(fā)，促進(jìn)愈傷組織生長，對其它的植物激素和生理活性物質(zhì)進(jìn)行調(diào)節(jié)；并利用液體培養(yǎng)增值速度快的特點(diǎn)，對植物體細(xì)胞胚進(jìn)行快速培養(yǎng)，打破文山兜蘭的增值休眠，提高增值效率及增值時(shí)間，使得文山兜蘭組培的增值系數(shù)由原來I倍提高到5倍以上，大大提高了文山兜蘭的繁殖效率，成苗存活率達(dá)95%，移栽后成活率達(dá)90%以上，對野生文山兜蘭的保護(hù)及其他珍稀兜蘭的保護(hù)和繁殖提供了科學(xué)依據(jù)。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明做進(jìn)ー步說明。實(shí)施例I
(I)種子萌發(fā)在文山兜蘭開花的5月，待開花后5天，選取健康無病植株于無雨的上午11點(diǎn)進(jìn)行授粉自交，自交前I天及自交后I天停止對植株進(jìn)行水噴淋；授粉后150天果子成熟，選擇飽滿的果實(shí)作為成熟文山兜蘭果實(shí)，把成熟文山兜蘭果實(shí)進(jìn)行下列滅菌用體積比濃度為70%的酒精擦拭果實(shí)表面，然后用無菌水洗滌3次，用質(zhì)量濃度為0. 1%的升汞滅菌lOmin，用無菌水洗滌3次,再用質(zhì)量濃度為10%的次氯酸鈉浸泡lOmin，最后用無菌水洗滌3次，切開果實(shí)取出種子，接種于下列誘導(dǎo)萌發(fā)培養(yǎng)基中Ms + 2. Omg/L的6_BA + 100ml/L的椰子汁+ 80g/L的新鮮香蕉泥+ 50g/L的土豆泥+ 5g/L的活性炭+ 30g/L的鹿糖+6g/L的瓊脂，PH值為5. 2 ;暗培養(yǎng)至種子萌發(fā)后，轉(zhuǎn)入12001x的弱光下，培養(yǎng)30天，得到幼胚；
(2)體細(xì)胞胚的誘導(dǎo)將步驟(I)所得的剛開始膨大萌發(fā)的幼胚轉(zhuǎn)接到下列液體培養(yǎng)基中Ms+2. Omg/L 的 6-BA+O. 5mg/L 的 TDZ+100ml/L 的椰子汁 +80g/L 的新鮮香蕉泥 +50g/L的土豆泥+5g/L的活性炭+30g/L的蔗糖，pH值為5. 2，在溫度為27°C，光照強(qiáng)度為12001x，轉(zhuǎn)速為120r/min的條件下培養(yǎng)45天，每15天更換I次液體培養(yǎng)基，然后用無菌篩網(wǎng)過濾出培養(yǎng)物，即得到誘導(dǎo)后的體細(xì)胞胚，該培養(yǎng)物在解剖鏡下觀察，呈現(xiàn)類似于圓球莖的體細(xì)胞胚集合體，有芽尖在體細(xì)胞胚頂端出現(xiàn)；
(3)分化培養(yǎng)把步驟(2)誘導(dǎo)出的體細(xì)胞胚切散后轉(zhuǎn)接到下列分化培養(yǎng)基上l/2Ms+l. Omg/L的6-BA+100ml/L的椰子汁+80g/L的新鮮香蕉泥+50g/L的土豆泥+5g/L的活性炭+30g/L的蔗糖+6g/L的瓊脂，pH值為5. 3，在溫度為26°C，光照強(qiáng)度為20001x條件下，培養(yǎng)100天，每45天更換一次分化培養(yǎng)基，直至小苗長有2片伸長葉片、株高2cm吋，即得到分化苗； (4)生根培養(yǎng)把步驟(3)得到的分化苗切去小苗基部黃、褐部分，轉(zhuǎn)接到下列生根培養(yǎng)基上l/2Ms+0. 5mg/L的6-BA+l. Omg/L的NAA+100ml/L的椰子汁+100g/L的新鮮香蕉泥+50g/L的土豆泥+5g/L的活性炭+30g/L的蔗糖+6g/L的瓊脂，pH值為5. 4，在溫度為27°C，光照強(qiáng)度為20001x的條件下，培養(yǎng)至苗高為4cm，根長3cm以上，即得種苗；
(5)煉苗毎年3月后，將步驟(4)所得種苗置于自然光下10天，并采用30%遮明度的遮陰網(wǎng)進(jìn)行遮明，以防治光線過強(qiáng)造成葉面灼燒，然后使用稀釋1000倍的多菌靈溶液浸泡種苗10分鐘，以洗凈種苗后，移栽至下列質(zhì)量比的混合基質(zhì)中蕨根蘭石細(xì)樹皮=1:4:1，保持基質(zhì)的水分為80%，并適當(dāng)通風(fēng)，即得到可移栽的文山兜蘭苗，移栽后成活率達(dá)90%。實(shí)施例2
(1)種子萌發(fā)在文山兜蘭開花的5月，待開花后6天，選取健康無病植株于無雨的上午10點(diǎn)進(jìn)行授粉自交，自交前I天及自交后I天不對植株進(jìn)行水噴淋；授粉后150天果子成熟，選擇飽滿的果實(shí)作為成熟文山兜蘭果實(shí)，把成熟文山兜蘭果實(shí)進(jìn)行滅菌，用體積比濃度為70%的酒精擦拭果實(shí)表面，然后依次用無菌水洗滌3次、質(zhì)量比濃度為0. 1%的升汞滅菌lOmin、無菌水洗滌3次,再用質(zhì)量比濃度為10%的次氯酸鈉浸泡lOmin，最后用無菌水洗滌3次，切開果實(shí)取出種子，接種于下列誘導(dǎo)萌發(fā)培養(yǎng)基中Ms + 2. 0mg/L的6_BA + 100ml/L的椰子汁+ 80g/L的新鮮香蕉泥+ 50g/L的土豆泥+ 5g/L的活性炭+ 30g/L的鹿糖+6g/L的瓊脂，PH值為5. 4 ;暗培養(yǎng)至種子萌發(fā)后，轉(zhuǎn)入IOOOIx的弱光下，培養(yǎng)35天，得到幼胚；
(2)體細(xì)胞胚的誘導(dǎo)將步驟(I)所得的剛開始膨大萌發(fā)的幼胚轉(zhuǎn)接到下列液體培養(yǎng)基中Ms+2. 0mg/L 的 6-BA+O. 5mg/L 的 TDZ+100ml/L 的椰子汁 +80g/L 的新鮮香蕉泥 +50g/L的土豆泥+5g/L的活性炭+30g/L的蔗糖，pH值為5. 3，在溫度為26°C，光照強(qiáng)度為lOOOlx，轉(zhuǎn)速為150r/min的搖床下培養(yǎng)40天,姆15天更換I次液體培養(yǎng)基，然后用無菌篩網(wǎng)過濾出培養(yǎng)物，即得到誘導(dǎo)后的體細(xì)胞胚，該培養(yǎng)物在解剖鏡下觀察，呈現(xiàn)類似于圓球莖的體細(xì)胞胚集合體，有芽尖在體細(xì)胞胚頂端出現(xiàn)；
(3)分化培養(yǎng)把步驟(2)誘導(dǎo)出的體細(xì)胞胚切散后轉(zhuǎn)接到下列分化培養(yǎng)基上l/2Ms+l. 0mg/L的6-BA+100ml/L的椰子汁+80g/L的新鮮香蕉泥+50g/L的土豆泥+5g/L的活性炭+30g/L的蔗糖+6g/L的瓊脂，pH值為5. 2，在溫度為27°C，光照強(qiáng)度為25001x條件下，培養(yǎng)90天，每45天更換一次分化培養(yǎng)基，直至小苗長有2片以上伸長葉片、株高2cm以上時(shí)，即得到分化苗；
(4)生根培養(yǎng)把步驟(3)得到的分化苗切去小苗基部黃、褐部分，轉(zhuǎn)接到下列生根培養(yǎng)基上l/2Ms+0. 5mg/L的6-BA+l. Omg/L的NAA+100ml/L的椰子汁+100g/L的新鮮香蕉泥+50g/L的土豆泥+5g/L的活性炭+30g/L的蔗糖+6g/L的瓊脂，pH值為5. 2，在溫度為26°C，光照強(qiáng)度為25001x的條件下，培養(yǎng)至苗高為4. 5cm，根長3cm以上，即得種苗；
(5)煉苗毎年3月后，將步驟(4)所得種苗置于自然光下10天，并采用30%遮明度的遮陰網(wǎng)進(jìn)行遮明，以防治光線過強(qiáng)造成葉面灼燒，然后使用稀釋1000倍的多菌靈溶液浸泡種苗10分鐘，以洗凈種苗后，移栽至下列質(zhì)量比的混合基質(zhì)中蕨根蘭石細(xì)樹皮=1:4:1，保持基質(zhì)的水分為80%，并適當(dāng)通風(fēng)，即得到可移栽的 文山兜蘭苗，移栽后成活率達(dá)90%。實(shí)施例3
(1)種子萌發(fā)在5月文山兜蘭開花的季節(jié)，待開花后7天，選取健康無病植株于無雨的上午2點(diǎn)進(jìn)行授粉自交，自交前I天及自交后I天不對植株進(jìn)行水噴淋；授粉后150天果子成熟，選擇飽滿的果實(shí)作為成熟文山兜蘭果實(shí)，把成熟文山兜蘭果實(shí)進(jìn)行滅菌，用體積比濃度為70%的酒精擦拭果實(shí)表面，然后依次用無菌水洗滌3次、質(zhì)量比濃度為0. 1%的升汞滅菌lOmin、無菌水洗滌3次,再用質(zhì)量比濃度為10%的次氯酸鈉浸泡lOmin，最后用無菌水洗滌3次，切開果實(shí)取出種子，接種于下列誘導(dǎo)萌發(fā)培養(yǎng)基中Ms + 2. 0mg/L的6-BA +100ml/L的椰子汁+ 80g/L的新鮮香蕉泥+ 50g/L的土豆泥+ 5g/L的活性炭+ 30g/L的鹿糖+6g/L的瓊脂，pH值為5. 3 ;暗培養(yǎng)至種子萌發(fā)后，轉(zhuǎn)入15001x的弱光下，培養(yǎng)25天，得到幼胚；
(2)體細(xì)胞胚的誘導(dǎo)將步驟(I)所得的剛開始膨大萌發(fā)的幼胚轉(zhuǎn)接到下列液體培養(yǎng)基中Ms+2. 0mg/L 的 6-BA+O. 5mg/L 的 TDZ+100ml/L 的椰子汁 +80g/L 的新鮮香蕉泥 +50g/L的土豆泥+5g/L的活性炭+30g/L的蔗糖，pH值為5. 4，在溫度為26°C，光照強(qiáng)度為15001x，轉(zhuǎn)速為120r/min的搖床下培養(yǎng)50天,姆15天更換I次液體培養(yǎng)基，然后用無菌篩網(wǎng)過濾出培養(yǎng)物，即得到誘導(dǎo)后的體細(xì)胞胚，該培養(yǎng)物在解剖鏡下觀察，呈現(xiàn)類似于圓球莖的體細(xì)胞胚集合體，有芽尖在體細(xì)胞胚頂端出現(xiàn)；
(3)分化培養(yǎng)把步驟(2)誘導(dǎo)出的體細(xì)胞胚切散后轉(zhuǎn)接到下列分化培養(yǎng)基上l/2Ms+l. 0mg/L的6-BA+100ml/L的椰子汁+80g/L的新鮮香蕉泥+50g/L的土豆泥+5g/L的活性炭+30g/L的蔗糖+6g/L的瓊脂，pH值為5. 4，在溫度為27°C，光照強(qiáng)度為22001x條件下，培養(yǎng)100天，每45天更換一次分化培養(yǎng)基，直至小苗長有2片以上伸長葉片、株高2cm以上時(shí)，即得到分化苗；
(4)生根培養(yǎng)把步驟(3)得到的分化苗切去小苗基部黃、褐部分，再轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)，生根培養(yǎng)基為l/2Ms+0. 5mg/L的6-BA+l. 0mg/L的NAA+100ml/L的椰子汁+100g/L的新鮮香蕉+50g/L的土豆泥+5g/L的活性炭+30g/L的鹿糖+6g/L的瓊脂，pH值為5. 3，在溫度為27°C，光照強(qiáng)度為22001x的條件下，培養(yǎng)至苗高為5cm，根長3cm以上，即得種苗；
(5)煉苗毎年3月后，將步驟(4)所得種苗置于自然光下10天，并采用30%遮明度的遮陰網(wǎng)進(jìn)行遮明，以防治光線過強(qiáng)造成葉面灼燒，然后使用稀釋1000倍的多菌靈溶液浸泡種苗10分鐘，以洗凈種苗后，移栽至下列質(zhì)量比的混合基質(zhì)中蕨根蘭石細(xì)樹皮=1:4:1，保持基質(zhì)的水分為80%，并適當(dāng)通風(fēng)，即得到可移栽的文山 兜蘭苗，移栽后成活率達(dá)90%。
權(quán)利要求
1.一種利用體細(xì)胞胚繁育文山兜蘭苗的方法，其特征在于經(jīng)過下列各步驟 (1)把成熟文山兜蘭果實(shí)滅菌后，切開果實(shí)取出種子，接種于下列誘導(dǎo)萌發(fā)培養(yǎng)基中Ms + 2. Omg/L 的 6-BA + 100ml/L 的椰子汁 + 80g/L 的香蕉泥+ 50g/L 的土豆泥+ 5g/L的活性炭+ 30g/L的蔗糖+6g/L的瓊脂，pH值為5. 2 5. 4 ;暗培養(yǎng)至種子萌發(fā)后，轉(zhuǎn)入1000 15001X的弱光下，培養(yǎng)30天，得到幼胚； (2)將步驟(I)得到的幼胚轉(zhuǎn)接到下列液體培養(yǎng)基中Ms+2.Omg/L的6-BA+O. 5mg/L的TDZ+100ml/L的椰子汁+80g/L的香蕉泥+50g/L的土豆泥+5g/L的活性炭+30g/L的鹿糖，pH值為5. 2 5. 4 ;在溫度為26 27°C，光照強(qiáng)度為1000 15001x，轉(zhuǎn)速為120 150r/min的條件下，培養(yǎng)45天，每15天更換一次上述液體培養(yǎng)基，過濾分離出的培養(yǎng)物即為體細(xì)胞胚； (3)把步驟(2)得到的體細(xì)胞胚切散后，轉(zhuǎn)接到下列分化培養(yǎng)基上l/2Ms+l.0mg/L的6-BA+100ml/L的椰子汁+80g/L的香蕉泥+50g/L的土豆泥+5g/L的活性炭+30g/L的鹿糖+6g/L的瓊脂，pH值為5. 2 5. 4 ;在溫度為26 27°C，光照強(qiáng)度為2000 25001x條件下，培養(yǎng)90 120天，每45天更換一次上述分化培養(yǎng)基，直至小苗長出2 3片的伸長葉片，且株高2 3cm時(shí)，即得到分化苗； (4)把步驟(3)得到的分化苗切去小苗基部黃、褐部分，再轉(zhuǎn)接到下列生根培養(yǎng)基上l/2Ms+0. 5mg/L 的 6-BA+1. 0mg/L 的 NAA+100ml/L 的椰子汁 +100g/L 的香蕉泥+50g/L 的土泥+5g/L的活性炭+30g/L的蔗糖+6g/L的瓊脂，pH值為5. 2 5. 4 ’在溫度為26 27°C，光照強(qiáng)度為2000 25001x的條件下，培養(yǎng)至苗高為4 5cm，根長3cm以上，即得種苗； (5)將步驟(4)所得種苗在30%遮陰度的自然光下放置7 10天后，用稀釋1000倍的多菌靈溶液浸泡種苗10分鐘后，移栽至下列質(zhì)量比的混合基質(zhì)中蕨根蘭石細(xì)樹皮=1:4:1，保持基質(zhì)的水分為70 85%，并適當(dāng)通風(fēng)，即得到可移栽的文山兜蘭苗。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的利用體細(xì)胞胚繁育文山兜蘭苗的方法，其特征在于所述步驟(I)的滅菌是先用體積濃度為70%的酒精擦拭果實(shí)表面，然后用無菌水洗滌3次，再用質(zhì)量濃度為0. 1%的升汞滅菌lOmin，用無菌水洗滌3次,用質(zhì)量濃度為10%的次氯酸鈉浸泡IOmin,最后用無菌水洗漆3次,得滅菌的成熟文山5 蘭果實(shí)。
全文摘要
本發(fā)明提供一種利用體細(xì)胞胚繁育文山兜蘭苗的方法，經(jīng)過把成熟文山兜蘭果實(shí)滅菌后，切開果實(shí)取出種子，接種于誘導(dǎo)萌發(fā)培養(yǎng)基中培養(yǎng)得到幼胚，再轉(zhuǎn)接到液體培養(yǎng)基中得到體細(xì)胞胚；然后分化培養(yǎng)得到分化苗；再轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)，最后煉苗移栽，即得到文山兜蘭苗。本發(fā)明通過使用文山兜蘭成熟果實(shí)無菌萌發(fā)后獲得的幼胚，打破芽的休眠，促進(jìn)種子萌發(fā)，促進(jìn)愈傷組織生長，對植物體細(xì)胞胚進(jìn)行快速培養(yǎng)，使得文山兜蘭組培增值系數(shù)由原來1倍提高到5倍以上，大大提高了文山兜蘭的繁殖效率，移栽后成活率達(dá)90%以上。
文檔編號A01H4/00GK102763598SQ201210291999
公開日2012年11月7日 申請日期2012年8月16日 優(yōu)先權(quán)日2012年8月16日
發(fā)明者唐路瑤, 張顥, 李涵, 王繼華, 瞿素萍, 蔣亞蓮, 蔡艷飛, 陳敏 申請人:云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院花卉研究所