專利名稱：opaque-2基因?qū)胛⑴呷橛衩椎挠N方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種opaque-2基因?qū)胛⑴呷橛衩椎挠N方法，屬于玉米品種選育領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
微胚乳玉米胚乳含量極少，胚成為其種子的主要成分，以胚為主要產(chǎn)品。而胚的蛋白質(zhì)和賴氨酸含量比胚乳高得多。玉米胚的蛋白質(zhì)大部分是白蛋白和球蛋白，富含人體必需氨基酸。玉米胚特別是脫脂后的玉米胚是一種以蛋白質(zhì)為主的營養(yǎng)物質(zhì)。所以微胚乳玉米棒油后的油柏可制作聞蛋白聞賴氣酸的聞級食品。因此如何提聞微胚乳玉米的賴氣酸等主要營養(yǎng)成分的含量是對微胚乳玉米進(jìn)行育種改良的主要研究方向之一。opaque-2 (簡稱o2)基因通過調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)的合成方向，減少胚乳中的醇溶蛋白，增·加清蛋白、球蛋白、白蛋白和富含賴氨酸的谷蛋白，進(jìn)而提高胚乳中賴氨酸的含量。o2基因能夠?qū)⒂衩着呷橹械馁嚢彼岷蜕彼岷刻岣呓槐?，全籽粒賴氨酸和色氨酸含量提高約70%。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種將02基因?qū)胛⑴呷橛衩字?，培育出含?2基因的微胚乳玉米育種的方法，將o2基因?qū)氲轿⑴呷橛衩字?，進(jìn)一步提高了微胚乳玉米的賴氨酸等營養(yǎng)成分的含量。本發(fā)明的技術(shù)方案是
opaque-2基因?qū)胛⑴呷橛衩椎挠N方法，包括如下步驟
a.通過雜交將o2基因?qū)胛⑴呷橛衩滓噪[性純合體o2玉米自交系(o2o2)與微胚乳玉米自交系雜交，收獲硬粒型雜交種種子F1。種植所得的硬粒型F1種子，從F1植株所結(jié)的果穗上分離的籽粒中采用直觀方法選取已導(dǎo)入02基因的微胚乳玉米。將其播種，當(dāng)植株生長到散粉吐絲期，套袋自交。在自交的同時(shí)用這些植株的花粉與02隱性純合體測交，成熟后同時(shí)收獲自交和測交的果穗，選擇測交果穗為不透明胚乳對應(yīng)的自交果穗，留種，即可確定為已導(dǎo)入02基因的微胚乳玉米；
b.自交選育將確定為已導(dǎo)入o2基因的微胚乳玉米，連續(xù)套袋自交5-8代，直至各主要性狀穩(wěn)定，保種或適當(dāng)進(jìn)行系內(nèi)彼此交，保種，即可獲得導(dǎo)入o2基因的微胚乳玉米自交系?？蛇M(jìn)一步作為親本利用，組配更高營養(yǎng)品質(zhì)的微胚乳玉米雜交種。本發(fā)明產(chǎn)生的效益是
通過本發(fā)明的方法所選育出的導(dǎo)入02基因的微胚乳玉米自交系，賴氨酸和必需氨基酸總量等營養(yǎng)成分含量高。這些自交系可作為親本，用于組配更高營養(yǎng)成分含量的微胚乳玉米雜交種。對以玉米胚為主要產(chǎn)品的高營養(yǎng)食品的加工業(yè)提供了較好的開發(fā)前景。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明的效果作詳細(xì)描述
取隱性純合體o2玉米自交系(o2o2)種子和微胚乳玉米自交系種子，同時(shí)播種，當(dāng)植株生長到散粉吐絲期，給每個(gè)植株套袋，取隱性純合體02玉米自交系植株的花粉與微胚乳玉米自交系植株雜交，收獲硬粒型雜交種種子匕。種植所得的硬粒型F1種子，從F1植株所結(jié)的果穗上分離的籽粒中采用直觀方法選取已導(dǎo)入o2基因的微胚乳玉米。種植這些直觀選出的已導(dǎo)入02基因的微胚乳玉米，當(dāng)植株生長到散粉吐絲期，套袋自交，在自交的同時(shí)用這些植株的花粉與02隱性純合體測交。成熟后同時(shí)收獲自交和測交的果穗，選擇測交果穗為不透明胚乳對應(yīng)的自交果穗，留種，即可確定為已導(dǎo)入02基因的微胚乳玉米；
將確定為已導(dǎo)入o2基因的微胚乳玉米種子，連續(xù)套袋自交5-8代，直至各主要性狀穩(wěn)定，保種，即可獲得導(dǎo)入02基因的微胚乳玉米自交系?？蛇M(jìn)一步作為親本利用，組配更高營養(yǎng)品質(zhì)的微胚乳玉米雜交種。隨機(jī)取30粒導(dǎo)入o2基因的微胚乳玉米自交系種子和隨機(jī)取30粒未導(dǎo)入o2基因的微胚乳玉米同型自交系種子(對照)，粉碎烘干后測整粒賴氨酸的含量，再隨機(jī)各自取30粒種子，用自來水浸泡24小時(shí)，將種子胚與非胚部位分別剝離出來，烘干后分別粉碎后測胚與非胚部氨基酸含量，利用日立L8800型高速氨基酸分析儀測定。所得數(shù)據(jù)如下表所示
表I :本發(fā)明方法導(dǎo)入o2基因的微胚乳玉米自交系的種子與對照的種子的營養(yǎng)成分的
比較
權(quán)利要求
1.一種opaque-2基因?qū)胛⑴呷橛衩椎挠N方法，其特征在于包括以下步驟 a.通過雜交將o2基因?qū)胛⑴呷橛衩滓噪[性純合體o2玉米自交系(o2o2)與微胚乳玉米自交系雜交，收獲硬粒型雜交種種子F1 ;種植所得的硬粒型F1種子，成熟后從F1植株所結(jié)的果穗上分離的籽粒中采用直觀方法選取已導(dǎo)入02基因的微胚乳玉米；將其播種，當(dāng)植株生長到散粉吐絲期，套袋自交，在自交的同時(shí)用這些植株的花粉與02隱性純合體測交；成熟后同時(shí)收獲自交和測交的果穗，選擇出測交果穗為不透明胚乳對應(yīng)的自交果穗，留種，即可確定為已導(dǎo)入o2基因的微胚乳玉米； b.自交選育將確定為已導(dǎo)入o2基因的微胚乳玉米，連續(xù)套袋自交5-8代，直至各主要性狀穩(wěn)定，保種或適當(dāng)進(jìn)行系內(nèi)彼此交，保種，即可獲得導(dǎo)入o2基因的微胚乳玉米自交系O
全文摘要
本發(fā)明提供一種提高微胚乳玉米賴氨酸等營養(yǎng)成分含量的選育方法。以隱性純合體opaque-2(簡稱o2)玉米自交系與微胚乳玉米自交系雜交，在F1植株所結(jié)的果穗上觀察表現(xiàn)型差異，采用直觀方法選擇出已導(dǎo)入o2基因的微胚乳玉米，將其播種后自交，在自交的同時(shí)用其花粉與o2隱性純合體測交，成熟后選擇測交結(jié)果為不透明胚乳(o2玉米表現(xiàn)型)所對應(yīng)的自交果穗留種。連續(xù)自交選育5-8代，可獲得導(dǎo)入o2基因的微胚乳玉米自交系。
文檔編號A01H1/02GK102919119SQ20121047492
公開日2013年2月13日 申請日期2012年11月21日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月21日
發(fā)明者郝小琴 申請人:廣西大學(xué)