用聚-n-乙?；咸前芳{米纖維治療疾病的制作方法
【專利摘要】本申請涉及包含聚-N-乙?；咸前泛?或其衍生物的縮短纖維(“sNAG納米纖維”)的組合物和此類組合物在治療疾病中的應(yīng)用。
【專利說明】用聚-N-乙?；咸前芳{米纖維治療疾病
[0001]1.引言
[0002]本申請涉及包含聚-N-乙酰基葡糖胺和/或其衍生物的縮短纖維(“sNAG納米纖維”)的組合物和此類組合物在治療疾病中的應(yīng)用。
[0003]2.背景
[0004]防御素(Defensins)是一種小的(3_4kDa)、富含半胱氨酸的陽離子多肽，存在于哺乳動物、昆蟲和植物中，根據(jù)它們的二硫鍵模式，被分成不同的家族(a，0和0)。這些小多肽是先天免疫的重要效應(yīng)子(effectors)并因此在機(jī)體對抗各種疾病的斗爭中起著重要的作用。
[0005]許多疾病在當(dāng)前是無法治愈的或只有亞適治療可選擇，這是由于此類治療只有部分有效性或與此類治療相關(guān)的副作用所致。這樣的疾病其中包括癌癥、一些病毒性疾病、一些真菌性疾病、炎癥性腸疾病(例如克羅恩病(Crohn’s disease))和皮膚病(例如銀屑病和皮炎)。對于這些疾病來說可以單獨(dú)使用或結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)療法使用的既安全又有效的有效治療仍然有需求。
[0006]3.概沭 [0007]在一個方面，本文描述的是用于預(yù)防和/或治療對于防御素產(chǎn)生和/或分泌的增加可能是有益的感染和/或疾病的方法，包括給予所述對象一種包含聚-3 -1 — 4-N-乙?；咸前泛?或其衍生物的縮短纖維(在本文中稱為“sNAG納米纖維”)的組合物。此類感染和/或疾病的實(shí)例包括但不限于實(shí)體腫瘤癌癥、皮膚癌、病毒性感染、酵母性感染、真菌性感染、炎癥性腸疾病、克羅恩病、皮炎和銀屑病。
[0008]在一個實(shí)施方案中，本文描述的是用于治療對象的病毒性感染的方法，包括將包含sNAG納米纖維的組合物給予患有(例如被診斷患有)病毒性感染(例如HSV感染)的對象。在另一個實(shí)施方案中，本文描述的是用于預(yù)防人對象的病毒性疾病的方法，包括將包含sNAG納米纖維的組合物給予處于發(fā)生病毒性疾病(例如HSV感染的癥狀，例如感冒瘡(cold sore)或損害(lesion))危險之中的對象。在一個具體的實(shí)施方案中，將所述sNAG納米纖維組合物局部給予所述對象(例如給予皮膚或粘膜)。在多個具體的實(shí)施方案中，所述對象是人。
[0009]在另一個實(shí)施方案中，本文描述的是用于治療對象的實(shí)體腫瘤的方法，包括將包含sNAG納米纖維的組合物給予被診斷患有實(shí)體腫瘤的對象。在一個具體的實(shí)施方案中，所述實(shí)體腫瘤的全部或一部分已經(jīng)從所述對象中除去(例如經(jīng)手術(shù)切除)，并且將所述sNAG納米纖維在除去所述實(shí)體腫瘤的全部或一部分之前、期間和/或之后給予所述實(shí)體腫瘤的部位。在多個具體的實(shí)施方案中，所述對象是人。
[0010]在另一個實(shí)施方案中，本文描述的是用于治療對象的皮膚癌的方法，包括將包含sNAG納米纖維的組合物局部給予被診斷患有皮膚癌的人對象。在一個具體的實(shí)施方案中，所述皮膚癌的全部或一部分已經(jīng)從所述對象中除去(例如經(jīng)手術(shù)切除)，并且將所述sNAG納米纖維在除去所述皮膚癌的全部或一部分之前、期間和/或之后給予所述皮膚癌的部位。在多個具體的實(shí)施方案中，所述對象是人。[0011]在另一個實(shí)施方案中，本文提供的是用于治療對象的炎癥性腸疾病的方法，包括將包含sNAG納米纖維的組合物給予罹患炎癥性腸疾病(例如被診斷患有炎癥性腸疾病)的對象。在一個具體的實(shí)施方案中，本文描述的是用于治療對象的克羅恩病的方法，包括將包含sNAG納米纖維的組合物給予罹患克羅恩病的對象(例如被診斷患有克羅恩病的對象)。在一個具體的實(shí)施方案中，將所述sNAG納米纖維組合物局部給予所述對象(例如通過栓劑直腸給藥)。在多個具體的實(shí)施方案中，所述對象是人。
[0012]在本文描述的方法中提到的sNAG納米纖維可具有不同的長度、寬度和分子量，如在第5.1節(jié)所描述的，參見下文。在某些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維的多數(shù)(和在某些實(shí)施方案中，至少或超過60%、70%、80%、90%、95%或99%)，或所述sNAG納米纖維的100%，是長度介于約I至15 Pm之間。在有些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維的多數(shù)(和在某些實(shí)施方案中，至少或超過60%、70%、80%、90%、95%或99%)，或所述sNAG納米纖維的100%，是長度介于約2至10 ii m、4至7 ii m、4至10 ii m或5至10 y m之間。所述長度的sNAG納米纖維是可獲得的，例如，如以下在第5.2節(jié)所描述的，參見下文。 [0013]在某些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維是通過輻照(例如Y射線輻照)聚-N-乙酰基葡糖胺或其衍生物來生產(chǎn)。在有些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維是通過輻照呈干纖維形式的聚-P -1 — 4-N-乙酰基葡糖胺(例如在500-2，OOOkgy)或輻照呈濕纖維形式的聚-0 -1 — 4-N-乙?；咸前?例如在100-500kgy)來生產(chǎn)。
[0014]在某些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維是從微藻(microalgae)中獲取。在另一個實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維不是從甲殼綱動物(crustaceans)中獲取。在又一個實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維可從微藻、甲殼綱動物(例如蝦)、真菌或任何其它來源中獲取。
[0015]在一個實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維包含N-乙酰基葡糖胺單糖和/或葡糖胺單糖，其中所述sNAG納米纖維的所述單糖的超過60%、70%、80%、90%、95%或99%是N-乙酰基葡糖胺單糖。在另一個實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維包含N-乙?；咸前穯翁呛?或葡糖胺單糖，其中所述sNAG納米纖維的所述單糖的超過70%是N-乙?；咸前穯翁恰?br> [0016]在某些實(shí)施方案中，在本文描述的方法中使用的sNAG納米纖維在一個或多個生物相容性試驗中是無反應(yīng)的(non-reactive)。例如，在本文描述的方法中使用的sNAG納米纖維當(dāng)在洗脫試驗、肌內(nèi)植入試驗、皮內(nèi)試驗或全身試驗(systemic test)中測試時可以是無反應(yīng)的。在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物當(dāng)在洗脫試驗、肌內(nèi)植入試驗、皮內(nèi)試驗或全身試驗中測試時是無反應(yīng)的。在其它的實(shí)施方案中，在本文描述的方法中使用的sNAG納米纖維當(dāng)在洗脫試驗、肌內(nèi)植入試驗、皮內(nèi)試驗或全身試驗中測試時具有等級0或等級
I。在又一個實(shí)施方案中，在本文描述的方法中使用的sNAG納米纖維當(dāng)在洗脫試驗、肌內(nèi)植入試驗、皮內(nèi)試驗或全身試驗中測試時最多是輕度反應(yīng)的。在一個實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維或包含此類納米纖維的組合物如通過肌內(nèi)植入試驗所測定是無反應(yīng)的。在某些實(shí)施方案中，本文描述的組合物不引起變應(yīng)原性反應(yīng)或刺激性，例如在施藥的部位。在其它的實(shí)施方案中，本文描述的組合物最多引起輕度變應(yīng)原性反應(yīng)或輕度刺激性，例如在施藥的部位。
[0017]在某些實(shí)施方案中，在本文描述的方法中使用的sNAG納米纖維在MTT測定中增加血清饑餓的人臍帶靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的代謝率和/或在錐蟲藍(lán)排除試驗(trypan blueexclusion test)中不拯救血清饑餓的人臍帶靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡。在有些實(shí)施方案中,所述sNAG納米纖維在MTT測定中增加血清饑餓的人臍帶靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的代謝率和在錐蟲藍(lán)排除試驗中不拯救血清饑餓的人臍帶靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡。
[0018]經(jīng)過考慮的本文描述的組合物的給藥方式是局部的，例如在皮膚上局部施藥；在創(chuàng)口、手術(shù)切口、病毒感染、真菌感染或感染的癥狀(例如紅腫、水皰(blister)、皮疹、損害)的部位局部施藥；和局部給予身體表面，例如皮膚、粘膜(例如陰道、肛門、咽喉、眼、耳)或其它組織的表面。在某些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維或包含此類納米纖維的組合物被配制成敷料、繃帶、墊子、噴霧劑、液體制劑、混懸劑(例如粘稠的混懸劑)、膜劑、粉劑、軟膏劑、乳膏劑、糊劑、栓劑或凝膠劑。在有些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維或包含此類納米纖維的組合物被配制成混懸劑、乳膏劑、液體溶液劑、凝膠劑、軟膏劑、膜劑、粉劑、噴霧劑或栓劑。在一個實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維或包含此類納米纖維的組合物被配制成混懸劑(例如粘稠的混懸劑)。在特別的實(shí)施方案中，包含所述sNAG納米纖維的組合物不是固體或形成屏障的。
[0019]在另一個方面，本文描述的是用于本文描述的方法中的組合物。在一個具體的實(shí)施方案中，所述組合物包含sNAG納米纖維。在某些實(shí)施方案中，本文描述的組合物包含sNAG納米纖維和一種或多種可用于預(yù)防和/或治療實(shí)體腫瘤癌癥、皮膚癌、病毒性感染、病毒性疾病、酵母性感染、真菌性感染、真菌性疾病、炎癥性腸疾病、克羅恩病、皮炎和銀屑病的另外的活性成分。在某些實(shí)施方案中，本文描述的組合物不包含任何另外的抗菌劑(例如抗生素)。在一個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物包含所述sNAG納米纖維作為唯一的活性成分并且不包含任何另外的活性成分。
[0020]在某些實(shí)施方案 中，本文描述的組合物是與一種或多種另外的療法聯(lián)合給予。在其它的實(shí)施方案中，本文描述的組合物不與任何其它療法聯(lián)合給予。
[0021]3.1 術(shù)語
[0022]如本文所用的，術(shù)語“sNAG納米纖維(sNAG nanofiber) ”、“sNAG”、“Taliderm”或“Talymed” (以前稱為“Taliderm”)可互換使用，是指聚_N_乙?；咸前泛?或其衍生物的縮短纖維(shortened fibers)。在一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，sNAG納米纖維完全由聚-N-乙?；咸前泛?或其衍生物的縮短纖維組成。Taliderm或Talymed是sNAG納米纖維的實(shí)例，它們是完全由聚-N-乙?；咸前泛?或其衍生物的縮短纖維組成的膜。
[0023]如本文所用的，術(shù)語“約”意指圍繞給定值的范圍，其中所得出的數(shù)值與明確記載的數(shù)值相同或基本相同(例如在10%、5%或1%以內(nèi))。在一個實(shí)施方案中，“約”意指在給定值或范圍的10%以內(nèi)。在另一個實(shí)施方案中，術(shù)語“約”意指在給定值或范圍的5%以內(nèi)。在另一個實(shí)施方案中，術(shù)語“約”意指在給定值或范圍的1%以內(nèi)。
[0024]如本文所用的，術(shù)語“疾病(disease) ”和“紊亂(disorder) ”可互換使用，是指對象的病癥(condition)?？筛鶕?jù)本文描述的方法治療或預(yù)防的示例性疾病/紊亂包括但不限于實(shí)體腫瘤癌癥、皮膚癌、病毒性疾病、酵母性疾病、真菌性疾病、炎癥性腸疾病和克羅恩病、銀屑病和皮炎。在病毒性疾病、酵母性疾病和真菌性疾病的情況下，所述疾病是分別由病毒、酵母或真菌感染所致的病理狀態(tài)。
[0025]如本文所用的，術(shù)語“感染”意指病原體(例如病毒、酵母或真菌)在細(xì)胞或?qū)ο笾械脑鲋澈?或存在引起的侵襲。[0026]如本文所用的，數(shù)值術(shù)語“l(fā)og”是指logl。。
[0027]如本文所用的，術(shù)語“對象(subject) ”和“患者(patient) ”可互換使用，是指動物(例如牛、馬、綿羊、豬肩、火雞、鶴鵓、貓、狗、小鼠、大鼠、兔、豚鼠等)。在有些實(shí)施方案中，所述對象是哺乳動物，例如非靈長類動物和靈長類動物(例如猴和人)。在多個具體的實(shí)施方案中，所述對象是人。 [0028]如本文所用的，術(shù)語“有效量”在sNAG納米纖維或其組合物給予對象的情況下是指導(dǎo)致產(chǎn)生有益效果或治療效果的sNAG納米纖維或其組合物的量。在多個具體的實(shí)施方案中，sNAG納米纖維或其組合物的“有效量”是指足以達(dá)到以下效果中的至少一、二、三、四種或更多種的sNAG納米纖維或其組合物的量:(i)所述對象或?qū)ο笕后w的疾病或與其相關(guān)的癥狀的嚴(yán)重程度減輕或緩解；(ii)所述對象或?qū)ο笕后w的疾病或與其相關(guān)的癥狀的持續(xù)時間減少；(iii)防止所述對象或?qū)ο笕后w的疾病或與其相關(guān)的癥狀的進(jìn)展；(iv)所述對象或?qū)ο笕后w的疾病或與其相關(guān)的癥狀消退；(V)防止所述對象或?qū)ο笕后w的疾病或與其相關(guān)的癥狀的發(fā)展或發(fā)作；(vi)防止所述對象或?qū)ο笕后w的疾病或與其相關(guān)的癥狀的復(fù)發(fā)；(vii)防止或減少疾病從所述對象或?qū)ο笕后w傳播到別的對象或?qū)ο笕后w；(viii)與所述對象或?qū)ο笕后w的疾病相關(guān)的器官衰竭減少；(ix)所述對象或?qū)ο笕后w的住院發(fā)生率減少；(X)所述對象或?qū)ο笕后w的住院長度減少；(xi)所述對象或?qū)ο笕后w的生存期增加；(xii)所述對象或?qū)ο笕后w的疾病消除；(xiii)所述對象或?qū)ο笕后w中另一種療法的預(yù)防效果或治療效果增強(qiáng)或改善；(xiv)防止病原體從所述對象的一個細(xì)胞、組織、器官傳播到所述對象的另一個細(xì)胞、組織、器官；(XV)所述對象或?qū)ο笕后w中疾病的癥狀數(shù)量減少；(xvi)被病原體(例如病毒、真菌或酵母)的感染清除；(xvii)與感染相關(guān)的一個或多個癥狀被根除；(xviii)清除感染所需要的時間減少；(xix)清除感染所需要的時間減少；(XX)感染和/或與其相關(guān)的一個或多個癥狀的嚴(yán)重程度減輕或緩解；(XXi)防止感染和/或與其相關(guān)的一個或多個癥狀的復(fù)發(fā)；(xxii)病原體減少或消除，例如通過病毒計數(shù)所測得的；(xxiii)減少或消除病原體從一個對象傳播到另一個對象，或者從一個器官或組織傳播到另一個器官或組織；(xxiv)防止病原體數(shù)的增加，例如通過病毒計數(shù)所測得的；(XXV)防止感染或與其相關(guān)的一個或多個癥狀的發(fā)展或發(fā)作；(xxvi)與感染相關(guān)的癥狀數(shù)量減少；(xxvii)與感染相關(guān)的炎癥穩(wěn)定或減少；(xxviii)誘導(dǎo)一種或多種防御素蛋白和/或防御素樣蛋白的表達(dá)；(xxix)誘導(dǎo)一種或多種Toll樣受體的表達(dá)；(XXX)誘導(dǎo)對病原體感染或與其相關(guān)的一個或多個癥狀的清除或減少是有益的一種或多種蛋白質(zhì)的表達(dá)；(xxxi)與病原體感染相關(guān)的器官衰竭或與其相關(guān)的疾病減少；(xxxii)防止由病原體感染引起的或與病原體感染相關(guān)的病癥的發(fā)作、發(fā)展或復(fù)發(fā)；(xxxiii)死亡率減少；(XXXiV)抑制癌癥和/或與其相關(guān)的一個或多個癥狀的進(jìn)展；(XXXV)癌細(xì)胞群體減少或消除；(xxxvi)腫瘤或贅生物生長減少；(xxxvii)腫瘤大小(例如體積或直徑)縮??；(xxxvii)新形成的腫瘤的形成減少；(xxxviii)原發(fā)性、局限性和/或轉(zhuǎn)移性癌癥被根除、去除或控制；(xxxix)轉(zhuǎn)移性瘤的數(shù)量或大小縮減；(xxxx)患者的無腫瘤生存率提高；(xxxxi)無復(fù)發(fā)生存期增加；(xxxxii)緩解的患者數(shù)增加；(xxxxiii)腫瘤的大小維持不變和不增加或增加小于在給予標(biāo)準(zhǔn)療法之后腫瘤的增加，如通過本領(lǐng)域技術(shù)人員可獲得的常規(guī)方法所測量的,所述常規(guī)方法例如PSA濃度的評估、數(shù)字直腸檢查(digital rectalexam)、超聲檢查(例如經(jīng)直腸超聲檢查)、骨掃描、計算機(jī)斷層(CT)掃描、磁共振成像(MRI)、動態(tài)對比增強(qiáng)MRI (DCE-MRI)或正電子發(fā)射斷層(PET)掃描；(xxxxiv)患者緩解的長度增加；(XXXXV)癌癥患者無癥狀生存期增加；(xxxxvi)腫瘤或腫瘤周炎癥或水腫穩(wěn)定或減少；(xxxxvii)腫瘤代謝或灌注抑制或減少；和/或(xxxiii)根據(jù)本領(lǐng)域眾所周知的方法(例如問卷調(diào)查)評價的生命質(zhì)量改善。在多個具體的實(shí)施方案中，sNAG納米纖維的“有效量”是指本文具體給出的sNAG納米纖維組合物的量，例如在第5.6節(jié)中，參見下文。
[0029]如本文所用的，術(shù)語“早產(chǎn)的人類嬰兒”是指在孕齡少于37周時出生的人類嬰兒。
[0030]如本文所用的，術(shù)語“人類嬰兒”是指剛出生的到I周歲的人。
[0031]如本文所用的，術(shù)語“早產(chǎn)的人類嬰兒”是指少于37周孕齡(例如在懷孕37周、36周、35周、34周、33周、32周、31周、30周、29周、28周，或少于28周之前)出生的剛出生的到I周歲的人。
[0032]如本文所用的，術(shù)語“人類幼兒”是指I歲到3歲的人。
[0033]如本文所用的，術(shù)語“人類兒童”是指I歲到18歲的人。
[0034]如本文所用的，術(shù)語“人類成年人”是指年滿18歲或18歲以上的人。
[0035]如本文所用的，術(shù)語“老年人”是指65歲或65歲以上的人。
[0036]如本文所用的，術(shù)語“低表達(dá)”在基因的表達(dá)(例如基于由該基因產(chǎn)生的蛋白質(zhì)或肽的水平)的情況下是指比該基因的“正?！北磉_(dá)少的表達(dá)。在一個具體的實(shí)施方案中，“低表達(dá)”是指基因的表達(dá)是該基因“正常”表達(dá)的小于99%、小于95%、小于90%、小于85%、小于75%、小于70%、小于65%、小于60%、小于55%、小于50%、小于45%、小于40%、小于35%、小于30%、小于25%或小于20%。在另一個具體的實(shí)施方案中，“低表達(dá)”是指基因的表達(dá)比該基因的“正?！北磉_(dá)少約20倍、約15倍、約10倍、約5倍、約4倍、約3倍、約2倍或約1.5倍。
[0037]如本文所用的，術(shù)語“多數(shù)”是指大于50%，包括例如50.5%、51%、55%，等等。
[0038]如本文所用的，術(shù)語“療法(復(fù)數(shù))”和“療法(單數(shù))”可指可用于預(yù)防和/或治療被病原體感染或其疾病或癥狀或本文描述的疾病(例如克羅恩病、炎癥性腸疾病、銀屑病、皮炎和實(shí)體腫瘤)的任何方案、方法、組合物、制劑和/或藥劑。病原體可以是病毒、真菌或酵母。在某些實(shí)施方案中，術(shù)語“療法(復(fù)數(shù))”和“療法(單數(shù))”是指可用于治療和/或預(yù)防被病原體感染或其疾病或癥狀或本文描述的疾病的藥物療法、輔助療法(adjuvanttherapy)、放射療法、外科手術(shù)療法、生物學(xué)療法、支持性療法和/或其它療法。在某些實(shí)施方案中，術(shù)語“療法”是指除了 sNAG納米纖維或其藥物組合物以外的療法。在多個具體的實(shí)施方案中，“另外的療法(單數(shù))”和“另外的療法(復(fù)數(shù))”是指除了使用sNAG納米纖維或其藥物組合物治療以外的療法。在一個具體的實(shí)施方案中，療法包括使用sNAG納米纖維作為輔助療法。例如，采用sNAG納米纖維與藥物療法、生物學(xué)療法、外科手術(shù)和/或支持性療法結(jié)合起來使用。`
[0039]4.附圖簡沭
[0040]圖1.納米纖維刺激Aktl活化,Etsl的一種上游調(diào)節(jié)物。(A)磷酸-Akt在對血清饑餓的EC的NAG和sNAG刺激應(yīng)答時的蛋白質(zhì)印跡分析(Western blot analysis)。(B)用雜亂對照(scrambled control) ( “SCR”)或 AktlshRNA 慢病毒(Ientiviruses)感染的EC的RT-PCR分析并評價了 Etsl和S26作為加載對照(loading control)的表達(dá)。(C)信號從sNAG納米纖維傳導(dǎo)到AktUEtsl和防御素上的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的示意圖。[0041]圖2.Aktl無效動物(null animals)中的傷口愈合延遲被Taliderm治療部分地拯救。(A)用和不用Taliderm治療的受傷WT和AKTl無效小鼠(null mice)的代表性圖像。(B)來自第3天創(chuàng)傷的代表性小鼠皮膚切片的H&E染色。
[0042]圖3.sNAG納米纖維刺激原代內(nèi)皮細(xì)胞中的細(xì)胞因子和防御素表達(dá)。(A)使用抗a -防御素的抗體，用或不用sNAG治療的EC的免疫組織化學(xué)。⑶ELISA，顯示EC的納米纖維治療導(dǎo)致a -防御素1-3的分泌(血清饑餓的，用5 ii g/ml或10 ii g/ml sNAG治療的)。
[0043]圖4.sNAG納米纖維以Aktl依賴性方式刺激原代內(nèi)皮細(xì)胞中的防御素表達(dá)。(A)和(B)用或不用sNAG( “snag”)、用或不用PD98059(MAPK抑制劑，“PD”)、渥曼青霉素(Wortmannin) (PI3K 抑制劑，“wtm”)治療的或用雜亂對照(“SCR”)或 Aktl( “AKT1”)shRNA慢病毒感染的血清饑餓的EC( “ss”)的定量RT-PCR分析并評價了所指基因的表達(dá)。
[0044]圖5.sNAG納米纖維刺激小鼠角質(zhì)化細(xì)胞中的@ _防御素3表達(dá)。⑷在第3天，用來自WT和Aktl無效動物的石蠟包埋的小鼠皮膚傷口切片的P -防御素3 (在右上圖肉眼可見為亮染色；參見例如粗的白色箭頭)和外皮蛋白(Involucrin)抗體的免疫熒光染色。(B)使用NIHImageJ軟件，P -防御素3免疫熒光染色的定量測定(TX=Taliderm; Aktl=Aktl無效)。(C)用(6-防御素3 (肉眼可見為亮染色；參見例如粗的白色箭頭)和T0PR0-3(核染色；參見例如細(xì)的白色箭頭)的WT和Aktl無效治療的和未治療的角質(zhì)化細(xì)胞的免疫熒光染色。請注意:在WT和AktlTaliderm治療的傷口中(6-防御素3染色有增加。
[0045]圖6.Aktl依賴性轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)。Aktl依賴性轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)的示意圖。使用Genomatix軟件,對轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)的500bp上游分析DEF1、4和5的mRNA上的保守位點(diǎn)(ETS-黑色橢圓；FKHD-有斜條紋的橢圓；CREB-白色橢圓；NFKB-有網(wǎng)格花紋的橢圓)。
[0046]圖7.sNAG治療在 體外導(dǎo)致防御素的表達(dá)和分泌。(A)用sNAG(50 U g/ml)治療指定次數(shù)的血清饑餓的(“SS”)原代內(nèi)皮細(xì)胞的RTPCR分析并評價了 (6-防御素3和a-防御素I的表達(dá)。⑶或者血清饑餓的(未治療的)或者用sNAG納米纖維治療(10 u g/ml達(dá)5小時)的內(nèi)皮細(xì)胞的免疫熒光標(biāo)記。抗體是針對a -防御素5 (FITC,左上圖)、P -防御素3 (德克薩斯紅(Texas Red)，右上圖)。細(xì)胞核用T0PR0-3染色(藍(lán)色，左下圖)。右下圖代表三圖重疊。(C)或者是血清饑餓的(未治療的)或者用sNAG納米纖維治療(10 u g/ml達(dá)5小時)的角質(zhì)化細(xì)胞(HaCat)的免疫熒光標(biāo)記?？贵w是針對a-防御素5(FITC，左上圖)、(6-防御素3 (德克薩斯紅，右上圖)。細(xì)胞核用T0PR0-3染色(藍(lán)色，左下圖)。
[0047]圖8.sNAG誘導(dǎo)的防御素表達(dá)是依賴于Aktl的。(A)定量RT-PCR分析，使用針對來自從用或不用sNAG治療3小時、用或不用ro098059(“ro”)(50 y M)、渥曼青霉素(“WTM”)(IOOnm)預(yù)治療的血清饑餓的內(nèi)皮細(xì)胞中分離的總RNA的a -防御素I的引物。定量測定是相對于S26蛋白亞基。(B)來自從用或不用sNAG治療3小時、用或不用ro98059(50iim)、渥曼青霉素(IOOnm)治療的血清饑餓的內(nèi)皮細(xì)胞中分離的總RNA的P -防御素3表達(dá)的定量測定并相對于S26顯示。(C)用sNAG刺激指定次數(shù)的血清饑餓的內(nèi)皮細(xì)胞(SS)中的磷酸-Akt的蛋白質(zhì)印跡分析。線條表示已去除的泳道。(D)用雜亂對照(SCR)或AktlshRNA慢病毒感染的、用或不用sNAG治療的血清饑餓的內(nèi)皮細(xì)胞的定量RT-PCR分析并評價了a -防御素4表達(dá)。定量測定是相對于S26顯示。(E)從用雜亂對照(SCR)或AktlshRNA慢病毒感染的、用或不用sNAG治療的血清饑餓的內(nèi)皮細(xì)胞中分離的總RNA的P -防御素3表達(dá)的定量測定。定量測量是相對于S26顯示。所有的實(shí)驗都做至少一式三份并重復(fù)至少獨(dú)立的三次并顯示P值。
[0048]圖9.sNAG誘導(dǎo)的防御素表達(dá)在體內(nèi)需要Aktl。(K)來自WT(n=3)和Aktl兩種小鼠在創(chuàng)傷后第3天收獲的皮膚傷口的石蠟包埋的切片。傷口或者是未治療的或者用sNAG膜治療過。使用抗(6-防御素3(綠色，在右上圖中肉眼可見為亮染色；參見例如白色粗箭頭)、外皮蛋白(紅色)和Topro(藍(lán)色，核染色；參見例如白色細(xì)箭頭)的抗體進(jìn)行免疫熒光。(B)來自在第3天收獲的用sNAG治療的WT的石蠟包埋的切片。使用抗P -防御素3(綠色，肉眼可見為亮染色；參見例如粗的白色箭頭)、外皮蛋白(紅色)和Topro(藍(lán)色，核染色；參見例如細(xì)的白色箭頭)的抗體進(jìn)行免疫熒光。包括這種較低的放大倍數(shù)(20x)以更好地說明表達(dá)P -防御素3的表皮層。比例尺=50 u m。(C)使用NIH ImageJ軟件對來自石蠟包埋的切片的(6-防御素3表達(dá)進(jìn)行定量測定。實(shí)驗被重復(fù)獨(dú)立的三次并顯示p值。
[0049]圖10.sNAG治療增加了野生型小鼠的傷口閉合。從未治療的或者用sNAG膜治療的C57B16野生型動物中獲取的創(chuàng)傷組織切片的H&E染色。創(chuàng)傷后當(dāng)天示于各圖的左邊。粗實(shí)線追蹤角質(zhì)化細(xì)胞的細(xì)胞層,表示傷口閉合。黑色箭頭指的是傷口床的邊緣。
[0050]圖11.sNAG治療以Aktl依賴性方式降低細(xì)菌感染。(A)來自WT小鼠的被金黃色葡萄球菌(S.aureus)感染的傷口的組織革蘭氏染色。WT小鼠用4mm活檢鉆孔器(biopsypunch)造成受傷。在創(chuàng)傷之后，立即給小鼠接種lxl09cfu/ml。感染后30分鐘，治療組中的小鼠用Taliderm治療。治療后5天取皮膚樣品并切片進(jìn)行分析。進(jìn)行了組織革蘭氏染色。暗紫色染色表明有革蘭 氏陽性菌和吞噬了細(xì)菌的嗜中性粒細(xì)胞。顯示了 20x和40x放大倍數(shù)下的切片。(B)來自WT和Aktl無效小鼠(n=3)的石蠟包埋的被金黃色葡萄球菌感染的傷口的組織革蘭氏染色。被感染傷口或者是未治療的或者用sNAG膜治療，并在第3天和第5天收獲傷口床進(jìn)行分析。暗紫色染色表明在傷口床中存在革蘭氏陽性菌。黑色箭頭指的是革蘭氏陽性染色的實(shí)例。請注意:在未治療的WT中有陽性染色的累積，這在用sNAG治療的WT動物中是缺乏的。比例尺=50 u m。(C)使用治療的和未治療的WT (n=3)和Aktl小鼠(n=3)，從被金黃色葡萄球菌感染的傷口中定量測定從創(chuàng)傷后第5天獲取的CFUs。與Aktl無效動物相比，sNAG治療的野生型小鼠顯示在傷口床中細(xì)菌負(fù)荷有顯著性(p〈.01)減少。所有的實(shí)驗都重復(fù)獨(dú)立的三次并顯示P值。(D)以(C)中描述的同樣方式，在創(chuàng)傷后第3天，來自被感染傷口定量的CFU。被感染傷口的sNAG治療顯示在第3天，在WT和Aktl無效動物二者中有CFU的顯著性減少，但是WT動物顯示與Aktl動物中相差2倍相比，大約相差10倍。(E)在或者未治療或者用不同量的sNAG納米纖維治療的金黃色葡萄球菌培養(yǎng)物中CFUs的定量測定。每個實(shí)驗都進(jìn)行獨(dú)立的三次并顯示p值。(F)在創(chuàng)傷后第3天從用或不用(6-防御素3肽(LOiiM)治療的WT小鼠(n=3)中收獲的被金黃色葡萄球菌感染的傷口的組織革蘭氏染色。請注意:在用(6-防御素3肽治療的被感染傷口中革蘭氏陽性染色有減少。(G)來自用或不用P -防御素3肽治療的被金黃色葡萄球菌感染的WT小鼠(n=3)的CFUs的定量測定。用肽治療的被感染傷口顯示CFU有顯著性減少(p〈.05)。比例尺=50iim。每個實(shí)驗都進(jìn)行獨(dú)立的三次并顯示p值。
[0051]圖12.用sNAG治療被金黃色葡萄球菌感染的傷口快速誘導(dǎo)防御素表達(dá)。(A)在第3天收獲的來自被金黃色葡萄球菌感染的傷口的石蠟包埋的組織切片，使用抗P -防御素3(綠色，在右上圖中和在中間的下圖中肉眼可見為亮染色；參見例如粗的白色箭頭)、外皮蛋白(紅色)(以標(biāo)出角質(zhì)化細(xì)胞層)和Topro (藍(lán)色，核染色；參見例如細(xì)的白色箭頭)的抗體進(jìn)行免疫熒光，均來自sNAG治療和WT (n=3)和未治療的WT小鼠(n=3)。角質(zhì)的非特異性染色被僅用二次抗體染色的無一次對照標(biāo)出。比例尺=50i!m。(B)使用NIHImageJ軟件，對來自石蠟包埋的切片的P -防御素3表達(dá)的定量測定。用sNAG治療的被金黃色葡萄球菌感染的傷口顯示P -防御素3染色有顯著性增加(p〈.05)。實(shí)驗被重復(fù)獨(dú)立的三次并顯示P值。
[0052]圖13.抗@ -防御素3的抗體阻礙sNAG治療的抗菌作用。(A)在第3天收獲的來自WT小鼠(n=3)的用sNAG治療的石蠟包埋的被金黃色葡萄球菌感染的傷口的組織革蘭氏染色。經(jīng)sNAG治療的傷口在sNAG治療前用P -防御素3抗體或同等型(isotype)對照山羊IgG抗體進(jìn)行治療。代表性的圖像顯示在用抗(6-防御素3的抗體治療的小鼠的傷口床中革蘭氏陽性染色有累積增加(黑色箭頭)。比例尺=20i!m。(B)在sNAG治療前或者用@ -防御素3抗體(n=3)或?qū)φ誌gG抗體(n=3)治療的被金黃色葡萄球菌感染的WT小鼠的CFUs的定量測定。P -防御素3應(yīng)用顯著地增加了(p〈.05)CFU。
[0053]圖14.輻照對聚-N-乙?；咸前?“pGlcNAc”)纖維的化學(xué)和物理結(jié)構(gòu)的影響。(A)pGlcNAc的分子量和用于輻照的輻照水平/公式之間的關(guān)系。(B)非輻照的pGlcNAc衆(zhòng)(最上面的線條)、以IOOkGy福照的pGlcNAc衆(zhòng)(最下面的線條)和以200kGy福照的pGlcNAc漿(中間的線條)的紅外(IR)光譜。(C)pGlcNAc的掃描電子顯微鏡(SEM)分析。(D)sNAG的掃描電子顯微鏡(SEM)分析。
[0054]圖15.pGlcNAc不影響代謝率。對于每個時間周期(即，在24和48小時)，四個條柱中的每一個的身份(從左到右)如下:血清饑餓(SS)、VEGF和pGlcNAc (NAG)(在50和100u g/ml)。
[0055]圖16.pGlcNAc保護(hù)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(EC)免于被血清剝奪誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡。對于每個時間周期(即，在24、48和72小時)，五個條柱中的每一個的身份(從左到右)如下:血清饑餓(SS)、VEGF 和 pGlcNAc (NAG)(在 50、100 和 250 u g/ml )。
[0056]圖17.sNAG誘導(dǎo)代謝率的明顯增加。五個條柱中的每一個的身份(從左到右)如下:血清饑餓(SS)、VEGF 和 sNAG (在 50、100 和 200 u g/ml )。
[0057]圖18.sNAG不保護(hù)EC免于被血清剝奪誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡。對于每個時間周期(即，在24和48小時)，五個條柱中的每一個的身份(從左到右)如下:血清饑餓(SS) ,VEGF和sNAG (在 50、100 和 200 ii g/ml)。
[0058]圖19.數(shù)字疼痛強(qiáng)度量表(Numeric Pain Intensity Scale)。
[0059]圖20.顯示小鼠模型中，3%DSS (葡聚糖硫酸鈉)誘導(dǎo)的炎癥性腸疾病(特別是潰瘍性結(jié)腸炎)的實(shí)驗建立的示意圖。
[0060]圖21.在炎癥性腸疾病的動物模型中，sNAG治療減少了炎癥。(A)來自通過飲用水給予3%DSS達(dá)7天(第0天到第7天)和通過直腸栓劑在第0天和第3天給予鹽水(100 U I)的10只小鼠的對照組的腸上皮的切片的H&E染色。(B)來自通過飲用水給予3%DSS達(dá)7天(第0天到第7天)和通過直腸栓劑在第0天和第3天給予sNAG (總共100 yl，含有12 ug/u I sNAG)的10只小鼠的試驗組的腸上皮的切片的H&E染色。細(xì)箭頭和括號指的是水腫的位點(diǎn)，粗箭頭指的是白細(xì)胞浸潤的位點(diǎn)。
[0061]圖22.在炎癥性腸疾病的動物模型中，sNAG治療減少了纖維化。(A)來自通過飲用水給予3%DSS達(dá)7天(第O天到第7天)和通過直腸栓劑在第O天和第3天給予鹽水(IOOul)的10只小鼠的對照組的腸上皮的切片的針對纖維化的染色。(B)來自通過飲用水給予3%DSS達(dá)7天(第0天到第7天)和通過直腸栓劑在第0天和第3天給予sNAG(總共100 iil，含有12ii g/iil sNAG)的10只小鼠的試驗組的腸上皮的切片的針對纖維化的染色。
[0062]5.詳沭
[0063]本發(fā)明的發(fā)明人已發(fā)現(xiàn)sNAG納米纖維可刺激防御素的表達(dá)，這可加強(qiáng)先天性免疫應(yīng)答。現(xiàn)被廣泛接受的是，防御素是先天性免疫中的重要參與者(players)。如在第6.1和6.2節(jié)中給出的實(shí)施例中所證明的(參見下文)，本發(fā)明的發(fā)明人已發(fā)現(xiàn)sNAG納米纖維可增加內(nèi)皮細(xì)胞中的a-和(6-型兩種防御素和角質(zhì)化細(xì)胞中的(6-型防御素的表達(dá)(在體外)以及傷口愈合模型中a-和(6-型防御素的表達(dá)(在體內(nèi))。
[0064]進(jìn)一步，如在第6.1和6.2節(jié)中給出的實(shí)施例所證明的(參見下文)，不受任何具體的作用機(jī)制的束縛，對于依賴sNAG的防御素表達(dá)(在體外和在體內(nèi))來說，在傷口愈合模型中，Aktl似乎是重要的。
[0065]本發(fā)明的發(fā)明人還發(fā)現(xiàn)許多Toll樣受體可以被人內(nèi)皮細(xì)胞的sNAG治療上調(diào)。Toll樣受體(“TLRs”或“TLR”)是激活先天免疫的高度保守的受體。最近的工作已將人防御素表達(dá)與TLR活化聯(lián)系起來，具體地說，TLRs的刺激可導(dǎo)致防御素合成增加。因此，不受任何作用機(jī)制的束縛，sNAG納米纖維可作為先天免疫的刺激物起作用。
[0066]因此，本文描述的是應(yīng)用sNAG納米纖維作為一種新的方法來預(yù)防和/或治療防御素和Toll樣受體中的一種或多種的表達(dá)和/或分泌增加可能是有益的感染和疾病。在某些實(shí)施方案中，用sNAG納米纖維治療病毒性、酵母性或真菌性感染減少了患者體內(nèi)的病原體計數(shù)。在多個具體的實(shí)施方`案中，sNAG納米纖維的應(yīng)用增強(qiáng)了傷口閉合，同時根除、減少或防止傷口的病毒性、真菌性或酵母性感染。在其它的實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維可用于治療皮膚病例如皮炎或銀屑病，例如，通過緩解此類疾病的一個或多個癥狀。在又一個實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維可用于治療炎癥性腸疾病(例如克羅恩病)，例如通過緩解此類疾病的一個或多個癥狀。
[0067]本發(fā)明的發(fā)明人實(shí)際上發(fā)現(xiàn)了 sNAG納米纖維能夠有效治療病毒感染。具體地說，本發(fā)明的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)sNAG納米纖維當(dāng)局部給予人患者時對治療HSV感染是有效的。實(shí)施例8 (參見下文)證明將sNAG納米纖維局部給予感冒瘡在人患者中減輕了與感冒瘡相關(guān)的疼痛并且減少了感冒瘡的持續(xù)時間。感冒瘡典型地由HSV-1感染引起。因此，本文描述的是應(yīng)用sNAG納米纖維治療病毒感染、特別是局部病毒感染。在多個具體的實(shí)施方案中，本文描述的是應(yīng)用sNAG納米纖維治療HSV感染或治療和/或預(yù)防與HSV感染相關(guān)的癥狀(例如感冒瘡或損害)，即將sNAG納米纖維局部給予患者(例如在HSV感染的部位或HSV感染癥狀的部位或者在已知感染癥狀發(fā)生的部位)。
[0068]本發(fā)明的發(fā)明人還發(fā)現(xiàn)sNAG納米纖維能夠有效治療炎癥性腸疾病(IBD)。具體地說，本發(fā)明的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)sNAG納米纖維當(dāng)經(jīng)直腸(例如通過栓劑)給予時對治療IBD的動物模型中的IBD是有效的。實(shí)施例9 (參見下文)證明在IBD的小鼠模型中，給予sNAG納米纖維減輕了與IBD相關(guān)的炎癥和纖維化。因此，本文描述的是應(yīng)用sNAG納米纖維治療IBD，例如潰瘍性結(jié)腸炎和克羅恩病。在多個具體的實(shí)施方案中，本文描述的是應(yīng)用sNAG納米纖維治療IBD (例如潰瘍性結(jié)腸炎或克羅恩病)，即將sNAG納米纖維局部給予患者(例如通過栓劑、乳膏劑、混懸劑、液體溶液劑、凝膠劑或軟膏劑給予肛門或直腸)。
[0069]5.1sNAG 納米纖維
[0070]本文描述的是sNAG納米纖維組合物。所述sNAG納米纖維包含聚_N_乙?；咸前泛?或其衍生物的纖維，其中的多數(shù)是長度小于30微米和長度至少I微米，如通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何方法所測量，例如通過掃描電子顯微鏡術(shù)(“SEM”)。這樣的sNAG納米纖維可例如按照本文描述的方法獲得。
[0071]在某些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維的多數(shù)(和在某些實(shí)施方案中，至少60%、70%、80%、90%、95%、98%、99%、99.5%,99.8%,99.9% 或 100%，或介于 55% 至 65%、55% 至 75%、65% 至75%、75%至85%、75%至90%、80%至95%、90%至95%或95%至99%之間)是長度小于約30、25、20、15、12、10、9、8、7、6、5、4或3微米，和長度至少I微米，如通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何方法所測量，例如通過SEM。在多個具體的實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維的多數(shù)(和在某些實(shí)施方案中，至少 60%、70%、80%、90%、95%、98%、99%、99.5%, 99.8%, 99.9% 或 100%，或介于 55% 至 65%、55% 至 75%、65% 至 75%、75% 至 85%、75% 至 90%、80% 至 95%、90% 至 95% 或95%至99%之間)是長度小于約15微米或小于約12微米，和長度至少I微米，如通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何方法所測量,例如通過SHM。在多個具體的實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維的全部(100%)是長度小于約15微米或小于約10微米，和長度至少I微米，如通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何方法所測量，例如通過SEM。在某些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維的多數(shù)(和在某些實(shí)施方案中，至少60%、70%、80%、90%、95%、98%、99%、99.5%,99.8%、99.9% 或 100%,或介于 55% 至 65%、55% 至 75%、65% 至 75%、75% 至 85%、75% 至 90%、80% 至 95%、90%至95%或95%至99%之間)是長度等于或小于14、13、12、11、10、9、8或7微米，和長度至少I微米，如通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何方法所測量，例如通過SEM。在有些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維的多數(shù)(和在某些實(shí)施方案中，至少60%、70%、80%、90%、95%、98%、99%、99.5%,99.8%,99.9% 或 100%,或介于 55% 至 65%、55% 至 75%、65% 至 75%、75% 至 85%、75%至90%、80%至95%、90%至95%或95%至99%之間)是長度介于I至15、2至15、2至14、I至 12、2 至 12、1 至 10、2 至 10、3 至 12、3 至 10、4 至 12、4 至 10、5 至 12、5 至 10、1 至 9、2 至9、3至9、1至8、2至8、3至8、4至8、I至7、2至7、3至7、4至7、I至6、I至5、I至4或I至3微米之間，如通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何方法所測量，例如通過SEM。
[0072]在一個具體的實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維的多數(shù)(和在某些實(shí)施方案中，至少 60%、70%、80%、90%、95%、98%、99%、99.5%,99.8%,99.9% 或 100%,或介于 55% 至 65%、55% 至75%、65% 至 75%、75% 至 85%、75% 至 90%、80% 至 95%、90% 至 95% 或 95% 至 99% 之間)是長度約8、7、6、5、4、3或2微米，如通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何方法所測量，例如通過SEM。在另一個具體的實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維的多數(shù)(和在某些實(shí)施方案中，至少60%、70%、80%、90%、95%、98%、99%、99.5%,99.8%,99.9% 或 100%，或介于 55% 至 65%、55% 至 75%、65%至75%、75%至85%、75%至90%、80%至95%、90%至95%或95%至99%之間)是長度介于約2至約10微米、約3至約8微米、約4至約7微米、約4至約10微米或約5至約10微米之間，如通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何方法所測量，例如通過SEM。在另一個具體的實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維的全部(100%)是長度介于約2至約10微米、約3至約8微米、約4至約7微米、約4至約10微米或約5至約10微米之間，如通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何方法所測量，例如通過SEM。
[0073]在某些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維是厚度和/或直徑范圍介于0.005至5微米之間，如通過電子顯微鏡術(shù)所測定。在多個具體的實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維是厚度和 / 或直徑平均約 0.01,0.02,0.03,0.04,0.05,0.06,0.07,0.08,0.09,0.1,0.2,0.25、
0.3、0.35、0.4、0.45、0.5、0.55、0.6、0.65、0.7、0.75、0.8、0.85、0.9、1、1.1> 1.2> 1.3> 1.4、
1.5、1.6、1.7、1.8、1.9,2,2.2,2.4,2.6,2.8、3 或 4 微米，或介于(例如 0.02 至 2 微米、0.02至I微米、0.02至0.75微米、0.02至0.5微米、0.02至0.5微米、0.05至I微米、0.05至0.75微米、0.05至0.5微米、0.1至I微米、0.1至0.75微米、0.1至0.5微米等)之間的任何范圍。在多個具體的實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維的多數(shù)(和在某些實(shí)施方案中，至少 60%、70%、80%、90%、95%、98%、99%、99.5%,99.8%,99.9% 或 100%,或介于 55% 至 65%、55% 至75%、65% 至 75%、75% 至 85%、75% 至 90%、80% 至 95%、90% 至 95% 或 95% 至 99% 之間)的厚度或直徑為約0.02至I微米。在其它的具體實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維的多數(shù)(和在某些實(shí)施方案中，至少 60%、70%、80%、90%、95%、98%、99%、99.5%,99.8%,99.9% 或 100%,或介于55% 至 65%、55% 至 75%、65% 至 75%、75% 至 85%、75% 至 90%、80% 至 95%、90% 至 95% 或 95% 至99%之間)的厚度或直徑為約0.05至0.5微米。在多個具體的實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維的全部(100%)的厚度或直徑為約0.02至I微米或約0.05至0.5微米。在某些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維的多數(shù)(和在某些實(shí)施方案中，至少60%、70%、80%、90%、95%、98%、99%,99.5%,99.8%,99.9% 或 100%,或介于 55% 至 65%,55% 至 75%,65% 至 75%,75% 至 85%,75%至90%、80%至95%、90%至95%或95%至99%)的厚度或直徑為約0.02至2微米、0.02至I微米、0.02至0.75微米、0.02至0.5微米、0.02至0.5微米、0.05至I微米、0.05至0.75微米、0.05至0.5微米、0.1至I微米、0.1至0.75微米或0.1至0.5微米之間。
[0074]在某些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維的多數(shù)(和在某些實(shí)施方案中，至少60%、70%、80%、90%、95%、98%、`99%、99.5%,99.8%,99.9% 或 100%，或介于 55% 至 65%、55% 至 75%、65%至75%、75%至85%、75%至90%、80%至95%、90%至95%或95%至99%之間)是長度介于I和15微米之間或介于I至10微米、2至10微米、3至10微米、4至10微米、4至7微米、5至10微米或5至15微米之間(或在它們的范圍之內(nèi))并且厚度或直徑為約0.02至I微米。
[0075]在某些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維的分子量為小于100kDa、90kDa、80kDa、75kDa、70kDa、65kDa、60kDa、55kDa、50kDa、45kDa、40kDa、35kDa、30kDa 或 25kDa。在某些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維的多數(shù)(和在某些實(shí)施方案中，至少60%、70%、80%、90%、95%、98%、99%、99.5%,99.8%,99.9% 或 100%,或介于 55% 至 65%、55% 至 75%、65% 至 75%、75% 至85%,75% 至 90%、80% 至 95%、90% 至 95% 或 95% 至 99% 之間)的分子量為小于 100kDa、90kDa、80kDa、75kDa、70kDa、65kDa、60kDa、55kDa、50kDa、45kDa、40kDa、35kDa、30kDa，或 25kDa。在其它的實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維的多數(shù)(和在某些實(shí)施方案中，至少60%、70%、80%、90%、95%、98%、99%、99.5%,99.8%,99.9% 或 100%,或介于 55% 至 65%、55% 至 75%、65% 至 75%、75%至85%、75%至90%、80%至95%、90%至95%或95%至99%之間)的分子量為介于約5kDa至 lOOkDa、約 IOkDa 至 lOOkDa、約 20kDa 至 lOOkDa、約 IOkDa 至 80kDa、約 20kDa 至 80kDa、20kDa 至 75kDa、約 25kDa 至約 75kDa、約 30kDa 至約 80kDa、約 30kDa 至約 75kDa、約 40kda至約 80kDa、約 40kDa 至約 75kDa、約 40kDa 至約 70kDa、約 50kDa 至約 70kDa 或約 55kDa 至約65kDa之間。在一個實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維的多數(shù)(和在某些實(shí)施方案中，至少 60%、70%、80%、90%、95%、98%、99%、99.5%,99.8%,99.9% 或 100%,或介于 55% 至 65%、55% 至75%、65% 至 75%、75% 至 85%、75% 至 90%、80% 至 95%、90% 至 95% 或 95% 至 99% 之間)的分子量為約60kDa。
[0076]在某些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維的1%至5%、5%至10%、5%至15%、20%至30%或25%至30%是脫乙?；?。在有些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維的1%、5%、10%、15%、20%、25%或30%是脫乙?；摹Ｔ谄渌膶?shí)施方案中，所述sNAG納米纖維的小于30%、25%、20%、15%、10%、5%、4%、3%、2%或1%是脫乙?；摹Ｔ谟行?shí)施方案中，所述sNAG納米纖維的等于或超過 1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或99%或全部(100%)是脫乙?；摹Ｔ谄渌膶?shí)施方案中，所述sNAG納米纖維的小于 1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、99%或100%是脫乙?；?。
[0077]在某些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維的70%至80%、75%至80%、75%至85%、85%至95%、90%至95%、90%至99%或95%至100%是乙酰化的。在有些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維的70%、75%、80%、85%、90%、95%、98%、99%或100%是乙酰化的。在其它的實(shí)施方案中，所述 sNAG 納米纖維的超過 70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%、98%、99%、99.5% 或 99.9%是乙酰化的。在有些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維的等于或超過1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%、98% 或 99% 或全部(100%)是乙?；摹Ｔ谄渌膶?shí)施方案中，所述sNAG納米纖維的小于1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%、98%、99% 或100%是乙?；摹?br> [0078]在有些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維的多數(shù)(和在某些實(shí)施方案中，至少60%、70%、80%、90%、95%、98 %、99%、99.5%,99.9% 或 100%)是介于 2 至 12 微米、2 至 10 微米、4 至15微米、4至10微米、5至15微米或5至10微米之間(或在它們的范圍之內(nèi))，并且這樣的 sNAG 納米纖維是至少 70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%、98%、99% 或 100% 乙?；摹?br> [0079]在有些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維包含至少一種葡糖胺單糖，并且可以還包含至少10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%或99%的所述N-乙酰基葡糖胺單糖。在其它的實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維包含至少一種N-乙?；咸前穯翁牵⑶铱梢赃€包含至少 10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95% 或 99% 的葡糖胺單糖。
[0080]在一個方面，所述sNAG納米纖維在MTT測定中增加血清饑餓的人臍帶靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(“EC”)的代謝率。MTT測定是一種實(shí)驗室試驗和標(biāo)準(zhǔn)的比色測定法(一種測量顏色變化的測定法)，用于測量細(xì)胞增殖(細(xì)胞生長)。簡而言之，黃色MTT (溴化3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-2，5-二苯基四唑鎗，四唑)在活的細(xì)胞的線粒體中被還原成紫色甲臜(formazan)。這種還原作用只有在線粒體還原酶有活性的時候才會發(fā)生，因此轉(zhuǎn)化可與活的(有生命的)細(xì)胞數(shù)量正相關(guān)。MTT測定在實(shí)施例6中有描述(參見下文)，在此它被用來評價sNAG納米纖維對EC細(xì)胞的代謝率的影響。細(xì)胞的代謝率也可以通過技術(shù)人員公知的其它技術(shù)來測定。
[0081]在另一個方面，所述sNAG納米纖維在錐蟲藍(lán)排除試驗中不拯救血清饑餓的EC的凋亡。錐蟲藍(lán)排除試驗是一種染料排除試驗法，用于測定細(xì)胞懸液中存在的活細(xì)胞數(shù)量。它基于活細(xì)胞具有完整的細(xì)胞膜可以排除諸如錐蟲藍(lán)、伊紅或丙錠(propidium)等某些染料而死細(xì)胞卻不行的原理。錐蟲藍(lán)測定在實(shí)施例6中有描述(參見下文)，在此它被用來評價sNAG納米纖維對EC細(xì)胞的細(xì)胞活力的影響。細(xì)胞的活力也可以通過技術(shù)人員公知的其它技術(shù)來測定。
[0082]在某些實(shí)施方案中，描述了包含所述sNAG納米纖維的組合物，其中所述sNAG納米纖維在MTT測定中增加血清饑餓的人臍帶靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的代謝率和/或在錐蟲藍(lán)排除試驗中不拯救血清饑餓的人臍帶靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡。在有些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維在MTT測定中增加血清饑餓的人臍帶靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的代謝率和在錐蟲藍(lán)排除試驗中不拯救血清饑餓的人臍帶靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡。
[0083]在一個具體的實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維是生物相容的。生物相容性可通過各種技術(shù)，包括但不限于諸如洗脫試驗、肌內(nèi)植入或皮內(nèi)或系統(tǒng)注射到動物對象等程序來測定。這樣的試驗描述于美國專利第6，686，342號(參見例如實(shí)施例10)，該美國專利通過引用其全部結(jié)合到本文中。一些生物相容性試驗在實(shí)施例7中有描述(參見下文)，表明sNAG納米纖維在這樣的試驗中都是無反應(yīng)的。
[0084]在某些實(shí)施方案中，在本文描述的方法中使用的sNAG納米纖維在一個或多個生物相容性試驗中是無反應(yīng)的。例如，在本文描述的方法中使用的sNAG納米纖維當(dāng)在洗脫試驗、肌內(nèi)植入試驗、皮內(nèi)試驗和/或全身試驗中測試時可以是無反應(yīng)的。在其它的實(shí)施方案中，在本文描述的方法中使用的sNAG納米纖維當(dāng)在洗脫試驗、肌內(nèi)植入試驗、皮內(nèi)試驗或全身試驗中測試時具有等級0或等級I試驗評分。在又一個實(shí)施方案中，在本文描述的方法中使用的sNAG納米纖維當(dāng)在洗脫試驗、肌內(nèi)植入試驗、皮內(nèi)試驗和/或全身試驗中測試時最多是輕度反應(yīng)的。在某些實(shí)施方案中，本文描述的組合物不引起變應(yīng)原性反應(yīng)或刺激性。在其它的實(shí)施方案中，本文描述的組合物最多引起輕度變應(yīng)原性反應(yīng)或輕度刺激性，例如在施藥的部位。有關(guān)試驗和試驗結(jié)果的評估描述于例如美國專利第6，686，342號(該美國專利通過引用其全部結(jié)合到本文中)和描述于第6.8節(jié)，參見下文。
[0085]在一個具體的實(shí)施`方案中，所述sNAG納米纖維當(dāng)在肌內(nèi)植入試驗中測試時是無反應(yīng)的。在一個方面，肌內(nèi)植入試驗是肌內(nèi)植入試驗-1S04周植入，如在第6.8.3節(jié)中描述的，參見下文。在某些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維表現(xiàn)出無生物學(xué)反應(yīng)性，如通過洗脫試驗所測定(洗脫試驗等級=0)。在有些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維的試驗評分等于“0”和/或最多具有可忽略的刺激性，如通過皮內(nèi)注射試驗所測定。在有些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維在Kligman試驗中不誘發(fā)真皮內(nèi)反應(yīng)(即，I級反應(yīng))和/或具有弱的變應(yīng)原性潛力，如通過Kligman試驗所測定。實(shí)施例7 (參見下文)顯示sNAG納米纖維在肌內(nèi)植入試驗、皮內(nèi)注射試驗和Kligman試驗中是無反應(yīng)的。
[0086]在某些方面，所述sNAG納米纖維是免疫中性的(即，它們不誘發(fā)免疫應(yīng)答)。
[0087]在有些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維是生物可降解的。所述sNAG納米纖維在給予或植入患者之后優(yōu)選在約I天、2天、3天、5天、7天(I周)、8天、10天、12天、14天(2周)、17天、21天(3周)、25天、28天(4周)、30天、I個月、35天、40天、45天、50天、55天、60天、2個月、65天、70天、75天、80天、85天、90天、3個月、95天、100天或4個月以內(nèi)能降解掉。
[0088]在某些實(shí)施方案中,所述sNAG納米纖維不引起可檢測的異物(foreign body)反應(yīng)。異物反應(yīng)，可發(fā)生在傷口愈合期間，包括在損傷部位的滲出物的累積、炎性細(xì)胞的浸潤以清創(chuàng)該區(qū)域或肉芽組織的形成。異物的持續(xù)存在可抑制完全愈合。與在傷口愈合中發(fā)生的重吸收和重塑不同，異物反應(yīng)是以異物性巨細(xì)胞的形成、外來物體(foreign object)的包囊化和慢性炎癥為特征。包囊化是指圍繞異物沉積下來的堅硬的一般無血管的膠原殼體(collagen shell),把它與宿主組織分有效地隔離開。在一個實(shí)施方案中,用所述sNAG納米纖維治療某個部位(例如傷口或傷口中細(xì)菌感染的部位)，治療后在I天、3天、5天、7天、10天或14天以內(nèi)不誘發(fā)可檢測的異物反應(yīng)。在一個這樣的實(shí)施方案中，用所述sNAG納米纖維治療某個部位(例如傷口)，治療后在I天、3天、5天、7天、10天或14天以內(nèi)不誘發(fā)異物包囊化。
[0089]在有些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維(i)包含纖維，其中所述纖維的多數(shù)是長度介于約I和15微米之間，和(ii) (a)在MTT測定中增加血清饑餓的EC的代謝率和/或在錐蟲藍(lán)排除試驗中不拯救血清饑餓的EC的凋亡，和(b)當(dāng)在肌內(nèi)植入試驗中測試時是無反應(yīng)的。在某些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維(i)包含纖維，其中所述纖維的多數(shù)是長度介于約I和12微米之間，和(ii) (a)在MTT測定中增加血清饑餓的EC的代謝率和/或在錐蟲藍(lán)排除試驗中不拯救血清饑餓的EC的凋亡，和(b)當(dāng)在肌內(nèi)植入試驗中測試時是無反應(yīng)的。在有些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維(i)包含纖維，其中所述纖維的多數(shù)是長度介于I至10微米、2至10微米、4至10微米、5至10微米或5至15微米之間(或在它們的范圍之內(nèi))，和(ii) (a)在MTT測定中增加血清饑餓的EC的代謝率和/或在錐蟲藍(lán)排除試驗中不拯救血清饑餓的EC的凋亡，和(b)當(dāng)在肌內(nèi)植入試驗中測試時是無反應(yīng)的。在有些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維(i)包含纖維，其中所述纖維的多數(shù)是長度介于約4和10微米之間，和(ii) (a)在MTT測定中增加血清饑餓的EC的代謝率和/或在錐蟲藍(lán)排除試驗中不拯救血清饑餓的EC的凋亡，和(b)當(dāng)在肌內(nèi)植入試驗中測試時是無反應(yīng)的。在某些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維(i)包含纖維，其中所述纖維的多數(shù)是長度介于約4和7微米之間，和(ii) (a)在MTT測定中增加血清饑餓的EC的代謝率和/或在錐蟲藍(lán)排除試驗中不拯救血清饑餓的EC的凋亡，和(b)當(dāng)在肌內(nèi)植入試驗中測試時是無反應(yīng)的。
[0090]在某些實(shí)施方案中`，所述sNAG納米纖維對細(xì)菌(例如金黃色葡萄球菌)的生長或存活不具有直接作用，如本領(lǐng)域技術(shù)人員所測定的。在其它的實(shí)施方案中，sNAG納米纖維對細(xì)菌(例如金黃色葡萄球菌)的生長或存活不具有直接作用，如在第6.2.2.5節(jié)中敘述的方法所測定的，參見下文。在有些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維在體外對細(xì)菌生長或存活不具有直接作用。在一個實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維對革蘭氏陰性菌的生長或存活不具有直接作用(例如在體外)。在另一個實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維對革蘭氏陽性菌的生長或存活不具有直接作用(例如在體外)。在又一個實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維對革蘭氏陽性菌或革蘭氏陰性菌的生長或存活不具有直接作用(例如在體外)。
[0091]在有些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維(i)包含纖維，其中所述纖維的多數(shù)是長度介于約I和15微米、I和12微米、I和10微米、4和10微米、4和15微米、5和10微米、5和15微米或4和7微米之間(或在它們的范圍之內(nèi))，(ii)在體外對金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)細(xì)菌培養(yǎng)物的細(xì)菌生長或存活沒有作用，和(iii)當(dāng)在生物相容性試驗(例如肌內(nèi)植入試驗)中測試時都是無反應(yīng)的。
[0092]在某些實(shí)施方案中，在用sNAG納米纖維組合物治療的或暴露于sNAG納米纖維組合物的細(xì)胞、組織或器官中，所述sNAG納米纖維誘導(dǎo)某一種模式的基因表達(dá)(RNA或蛋白質(zhì)表達(dá)，如通過例如RT-PCR、微陣列(microarray)或ELISA所測定的)。準(zhǔn)確地講，在有些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維或包含所述sNAG納米纖維的組合物誘導(dǎo)一種或多種防御素蛋白、一種或多種防御素樣蛋白和/或一種或多種Toll樣受體的表達(dá)。在又一些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維或包含所述sNAG納米纖維的組合物誘導(dǎo)一種或多種已知具有抗菌作用的蛋白質(zhì)的表達(dá)。 [0093]在某些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維或包含所述sNAG納米纖維的組合物誘導(dǎo)一種或多種a -防御素(例如DEFAl (即a -防御素I)、DEFA1B、DEFA3、DEFA4、DEFA5、DEFA6)、一種或多種 P -防御素(例如 DEFBl (即 3 -防御素 I)、DEFB2、DEFB4、DEFB103A、DEFB104A、DEFB10 5B、DEFB10 7B、DEFB108B、DEFB110、DEFB112、DEFB114、DEFB118、DEFB119、DEFB123、DEFB124、DEFB125、DEFB126、DEFB127、DEFB128、DEFB129、DEFB131、DEFB136)和/或一種或多種0-防御素(例如DEFT1P)的表達(dá)。在有些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維或包含所述sNAG納米纖維的組合物誘導(dǎo)EFAl、DEFA3、DEFA4、DEFA5、DEFBl、DEFB3、DEFB103A、DEFB104A、DEFB108B、DEFBl 12、DEFBl 14、DEFBl 18、DEFBl 19、DEFB123, DEFB124,DEFB125、DEFB126、DEFB128、DEFB129和DEFB131中的一種或多種的表達(dá)。在某些實(shí)施方案中,所述sNAG納米纖維或包含所述sNAG納米纖維的組合物誘導(dǎo)一種或多種Toll受體(例如，TLR1、TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR6、TLR7、TLR8、TLR9、TLR10、TLRll 和 / 或 TLR12)的表達(dá)。在其它的實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維或包含所述sNAG納米纖維的組合物誘導(dǎo)IL-1、CEACAM3、SPAGl 1、SIGIRR (ILl 樣受體)、IRAK1、IRAK2、IRAK4、TBKl、TRAF6 和 IKKi 中的一種或多種的表達(dá)。在有些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維或包含所述sNAG納米纖維的組合物誘導(dǎo) IRAK2、SIGIRR、TLR1、TLR2、TLR4、TLR7、TLR8、TLRlO 和 TRAF6 中的一種或多種的表達(dá)。在一個實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維或包含所述sNAG納米纖維的組合物誘導(dǎo)以上列舉的基因產(chǎn)物中的至少一種的表達(dá)。
[0094]在有些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維或包含所述sNAG納米纖維的組合物誘導(dǎo)以上列舉的基因中的一種或多種的表達(dá)，與用所述sNAG納米纖維治療之前在對象的細(xì)胞、組織或器官中以上列舉的基因中的一種或多種的表達(dá)水平(例如以上列舉的基因中的一種或多種的表達(dá)的已知平均水平)相比，其表達(dá)量等于或超過約0.25倍、0.5倍、I倍、1.5倍、2倍、2.5倍、3倍、3.5倍、4倍、4.5倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍、10倍、12倍、15倍或20倍。在有些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維或包含所述sNAG納米纖維的組合物誘導(dǎo)以上列舉的基因中的一種或多種的表達(dá)，與用所述sNAG納米纖維治療之前在對象的細(xì)胞、組織或器官中以上列舉的基因中的一種或多種的表達(dá)水平(例如以上列舉的基因中的一種或多種的表達(dá)的已知平均水平)相比，其表達(dá)量等于或超過約10%、25%、50%、75%、100%、125%、I50%、I75%、200%、225%、250%、275%、300%、350%、400%、450%、500%、550%、600%、650%、700%、750%、800%、900% 或 1000%。
[0095]在有些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維但不是長的聚-N-乙?；咸前?、殼多糖(chitin)和/或脫乙酰殼多糖(chitosan)誘導(dǎo)以上列舉的一種或多種基因的表達(dá)，如通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的或本文描述的方法所測定的。在這些實(shí)施方案中的有些中，長的聚-N-乙?；咸前?、殼多糖和/或脫乙酰殼多糖不誘導(dǎo)以上列舉的一種或多種基因的表達(dá)，或者與被所述sNAG納米纖維誘導(dǎo)的以上列舉的一種或多種基因的表達(dá)水平相比，誘導(dǎo)以上列舉的一種或多種基因的表達(dá)的較低水平(例如低超過1.25倍、1.5倍、2倍、2.5倍、3倍、3.5倍、4倍、4.5倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍或10倍)，如通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的或本文描述的方法所測定的。
[0096]在某些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維或包含所述sNAG納米纖維的組合物誘導(dǎo)的基因表達(dá)譜(gene expression profile)與表 1、I1、II1、V、VIII 和 IX,第 6.2-6.5 節(jié)(參見下文)中證明的一種或多種基因表達(dá)譜相一致、相類似、大致相同或等同。在有些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維或包含所述sNAG納米纖維的組合物誘導(dǎo)在表1、I1、II1、V、VIII和IX，第6.2-6.5節(jié)(參見下文)中顯示被sNAG治療上調(diào)的基因中的一種或多種的表達(dá)。在有些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維或包含所述sNAG納米纖維的組合物誘導(dǎo)在表1、I1、II1、V、VIII和IX，第6.2-6.5節(jié)(參見下文)中顯示被sNAG治療上調(diào)的基因的多數(shù)或所有的表達(dá)。在這些實(shí)施方案中的有些中，基因表達(dá)水平是按照本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的或本文描述的方法在用sNAG納米纖維組合物治療細(xì)胞、組織或器官之后I小時、2小時、4小時、5小時、6小時、8小時、10小時、12小時、14小時、16小時、18小時、20小時、24小時、48小時、3天或5天時測出的。
[0097]在某些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維或包含所述sNAG納米纖維的組合物誘導(dǎo)的基因表達(dá)譜不同于被長的聚-N-乙?；咸前肪酆衔锘蚶w維誘導(dǎo)的基因表達(dá)譜。在多個具體的實(shí)施方案中，被所述sNAG納米纖維誘導(dǎo)的基因表達(dá)譜與表1、I1、II1、V、VIII和IX，第6.2-6.5節(jié)(參見下文)中顯示的相一致、相類似、大致相同或等同，而被長的聚-N-乙?；咸前肪酆衔锘?纖維誘導(dǎo)的基因表達(dá)譜與表VIII和/或IX，第6.5節(jié)(參見下文)中顯示的相一致、相類似、大致相同或等同。在其它的實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維或包含所述sNAG納米纖維的組合物誘導(dǎo)的基因表達(dá)譜不同于被殼多糖或脫乙酰殼多糖誘導(dǎo)的基因表達(dá)譜。
[0098]在一個具體的實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維是通過輻照聚-N-乙?；咸前泛?或其衍生物獲得的。參見第5.1.1節(jié)(參見下文)關(guān)于聚-N-乙?；咸前芳捌溲苌镆约暗?.2節(jié)(參見下文)關(guān)于利用輻照生產(chǎn)sNAG納米纖維的方法。輻照可以用來降低聚-N-乙?；咸前防w維和/或聚-N-乙酰基葡糖胺衍生物纖維的長度，形成縮短的聚-0 -1 — 4-N-乙酰基葡糖胺纖維和/或縮短的聚-N-乙?；咸前费苌锢w維，即sNAG納米纖維。準(zhǔn)確地講，輻照可以用來降低聚-N-乙酰基葡糖胺或其衍生物的長度和分子量，而不會破壞它的微結(jié)構(gòu)。sNAG納米纖維的紅外光譜(IR)與非輻照的聚-1 — 4-N-乙?；咸前坊蚱溲苌锏南囝愃?、大致相同或等同。
[0099]在一個實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維不是從殼多糖或脫乙酰殼多糖中獲取的。而在另一個實(shí)施方案中，本文描述的組合物可以從殼多糖或脫乙酰殼多糖中獲取，或者所述sNAG納米纖維可以從殼多糖或脫乙酰殼多糖中獲取。
[0100]5.1.1聚-N-乙?；咸前芳捌溲苌?br> [0101]美國專利號5，622，834、5，623，064、5，624，679、5，686，115、5，858，350、6，599，720,6, 686，342,7, 115，588和美國專利公布2009/0117175 (所述各美國專利和美國
專利公布都通過引用結(jié)合到本文中)描述了聚-N-乙?；咸前芳捌溲苌锖蜕a(chǎn)它們的方法。在有些實(shí)施方案中，所述聚-N-乙?；咸前肪哂?-1 —4構(gòu)型。在其它的實(shí)施方案中，所述聚-N-乙?；咸前肪哂衋 -1 — 4構(gòu)型。聚-N-乙?；咸前芳捌溲苌锟梢猿示酆衔锏男问交蛘叱世w維的形式。[0102]聚-N-乙?；咸前房梢岳缋梦⒃濉?yōu)選硅藻(diatoms)生產(chǎn)或者從微藻、優(yōu)選硅藻中純化?？勺鳛槠鹗紒碓从糜谏a(chǎn)聚-N-乙酰基葡糖胺的硅藻包括但不限于圓篩藻屬(Coscinodiscus genus)、小環(huán)藻屬(Cyclotella genus)和海鏈藻屬(Thalassiosiragenus)的多個成員。聚-N-乙?；咸前房赏ㄟ^許多不同的方法從硅藻培養(yǎng)物中獲得，所述方法包括本領(lǐng)域已知的機(jī)械力方法和化學(xué)/生物學(xué)方法(參見例如美國專利號 5，622，834,5, 623，064,5, 624，679,5, 686，115,5, 858，350,6, 599，720,6, 686，342 和7，115，588，所述各美國專利都通過引用其全部結(jié)合到本文中)。在某些實(shí)施方案中，所述聚-N-乙酰基葡糖胺不是從下述生物中的一種或多種獲取的:貝殼類動物(shell fish)、甲殼綱動物、昆蟲、真菌或酵母類。
[0103]在一個實(shí)施方案中，聚-(6-1 — 4-N-乙?；咸前肥菑囊韵鹿に囘^程中獲取的:包括a)用能夠從細(xì)胞體中分離出N-乙酰基葡糖胺聚合物纖維的生物制劑(例如氫氟酸)處理包含細(xì)胞體和聚-1 — 4-N-乙?；咸前肪酆衔锢w維的微藻達(dá)足夠的時間，使得聚-1 — 4-N-乙?；咸前肪酆衔锢w維從細(xì)胞體中釋放出來；b)從細(xì)胞體分離出聚-0 -1 — 4-N-乙?；咸前肪酆衔锢w維；和c)去除來自分離的聚-P -1 — 4-N-乙?；咸前肪酆衔锢w維的污染物，使得聚-3 -1 — 4-N-乙酰基葡糖胺聚合物被分離和純化。
[0104]在其它的實(shí)施方案中，聚-P -1 — 4-N-乙?；咸前房蓮囊韵律矬w中的一種或多種中獲取:貝殼類動物、甲殼綱動物、昆蟲、真菌或酵母類。在某些實(shí)施方案中，本文描述的組合物不包含殼多糖或脫乙酰殼多糖。
[0105]所述聚-N-乙?；咸前返膯翁菃卧械囊粋€或多個可以是脫乙?；摹Ｔ谀承?shí)施方案中，所述聚-N-乙酰基葡糖胺的1%至5%、5%至10%、5%至15%、20%至30%或25%至30%是脫乙?；?。在有些實(shí)施方案中，所述聚-N-乙酰基葡糖胺的1%、5%、10%、15%、20%、25%或30%是脫乙?；摹Ｔ谄渌膶?shí)施方案中，所述聚-N-乙酰基葡糖胺的小于30%、25%、20%、15%、10%、5%、4%、3%、2%或1%是脫乙?；摹Ｔ谟行?shí)施方案中，所述聚-N-乙?；咸前返牡扔诨虺^ `1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或99%或全部(100%)是脫乙?；摹Ｔ谄渌膶?shí)施方案中，所述聚-N-乙?；咸前返男∮?1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、99% 或 100% 是脫乙?；摹?br> [0106]在某些實(shí)施方案中，聚-N-乙?；咸前方M合物包含70%至80%、75%至80%、75%至85%、85%至95%、90%至95%、90%至99%或95%至100%的乙?；咸前?即，N-乙?；咸前?單糖。在有些實(shí)施方案中，聚-N-乙酰基葡糖胺組合物包含70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%、98%、99%或100%的乙?；咸前?即，N-乙酰基葡糖胺)單糖。在其它的實(shí)施方案中，聚-N-乙?；咸前方M合物包含超過70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%、98%、99%、99.5%或99.9%的所述乙?；咸前?。在有些實(shí)施方案中，聚-N-乙酰基葡糖胺組合物包含等于或超過 1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%、98%或99%或全部(100%)的所述乙?；咸前?。在其它的實(shí)施方案中，聚-N-乙?；咸前方M合物包含小于 1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、99% 或 100% 的所述乙酰化葡糖胺。
[0107]在有些實(shí)施方案中，聚-N-乙?；咸前方M合物包含至少一種葡糖胺單糖，并且可以還包含至少10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%或99%的N-乙?；咸前穯翁?。在其它的實(shí)施方案中，聚-N-乙酰基葡糖胺組合物包含至少一種N-乙?；咸前穯翁牵⑶铱梢赃€包含至少10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%或99%的葡糖胺單糖。
[0108]聚-N-乙?；咸前返难苌镆部捎糜诒疚拿枋龅慕M合物。聚-N-乙?；咸前返难苌锖椭圃齑祟愌苌锏姆椒枋鲇诿绹鴮＠?，623，064號(參見例如第5.4節(jié))，所述美國專利通過引用其全部結(jié)合到本文中。聚-N-乙?；咸前返难苌锟砂ǖ幌抻诓糠只蛲耆撘阴；木?N-乙?；咸前坊蚱涿撘阴；苌?。此外，聚-N-乙?；咸前房赏ㄟ^硫酸化、磷酸化和/或硝酸化進(jìn)行衍生化。聚-N-乙?；咸前费苌锇ɡ缌蛩峄?N-乙?；咸前费苌?、磷酸化聚-N-乙?；咸前费苌锘蛳跛峄?N-乙?；咸前费苌?。另外，聚-N-乙?；咸前返膯翁菃卧械囊粋€或多個可含有一個或多個磺酰基一個或多個0-酰基。另外，脫乙酰化聚-N-乙?；咸前返膯翁侵械囊粋€或多個可含有N-?；＞?N-乙?；咸前坊蚱涿撘阴；苌锏膯翁侵械囊粋€或多個可含有0-烷基。聚-N-乙?；咸前返膯翁菃卧械囊粋€或多個可以是堿性衍生物。聚-N-乙?；咸前返拿撘阴；苌锏膯翁菃卧械囊粋€或多個可含有N-烷基。聚-N-乙?；咸前返拿撘阴；苌锏膯翁菃卧械囊粋€或多個可含有至少一種脫氧鹵素衍生物。聚-N-乙?；咸前返拿撘阴；苌锏膯翁菃卧械囊粋€或多個可形成鹽。聚-N-乙酰基葡糖胺的脫乙?；苌锏膯翁菃卧械囊粋€或多個可形成金屬螯合物。在一個具體的實(shí)施方案中，所述金屬是鋅。聚-N-乙?；咸前返拿撘阴；苌锏膯翁菃卧械囊粋€或多個可含有N-亞烷基或N-亞芳基。在一個實(shí)施方案中，所述衍生物是乙酸鹽衍生物。在另一個實(shí)施方案中，所述衍生物不是乙酸鹽衍生物。在一個實(shí)施方案中，聚-N-乙?；咸前坊蛎撘阴；?N-乙?；咸前肥怯萌樗嵫苌摹Ｆ渲?，在另一個實(shí)施方案中，所述衍生物不是用乳酸衍生化的。
[0109]5.2sNAG納米纖維的牛產(chǎn)方法
[0110]聚-N-乙?；咸前肪酆衔锘蚶w維，及上述聚-N-乙?；咸前肪酆衔锘蚶w維的任何衍生物，作為干的聚合物或纖維或聚合物或纖維膜時可經(jīng)過輻射?；蛘?，聚-N-乙酰基葡糖胺聚合物或纖維，及上述聚-N-乙酰基葡糖胺聚合物或纖維的任何衍生物，當(dāng)濕的時候可經(jīng)過輻射。通過輻照制造sNAG納米纖維的方法及如此生產(chǎn)的sNAG納米纖維已描述于美國專利公布第2009/0117175號，所述美國專利公布通過引用其全部結(jié)合到本文中。
[0111]在某些實(shí)施方案中，所述聚-N-乙酰基葡糖胺聚合物或纖維被配制成混懸劑/漿狀物或濕餅進(jìn)行輻照。輻照可以在將所述聚合物或纖維配制成它的最終制劑(例如敷料)之前、同時或之后進(jìn)行。一般而言，混懸劑/漿狀物和濕餅中的所述聚合物或纖維含量可以變動，例如，對于漿狀物，使用每Iml蒸餾水約0.5mg至約50mg聚合物或纖維,和對于濕餅制劑，使用每Iml蒸懼水約50mg至約1000mg聚合物或纖維?？蓪⑺鼍酆衔锘蚶w維先凍干，在液氮中冷凍，再粉碎，使其更易制成混懸劑/漿狀物或濕餅。另外，可將混懸劑/漿狀物過濾以除去水，使得濕餅得以制成。在某些方面，所述聚合物或纖維作為混懸劑時經(jīng)過福射，所述混懸劑包含每ml蒸懼水約0.5mg、lmg、2mg、3mg、4mg、5mg、6mg、7mg、8mg、9mg、10mg、12mg、15mg、18mg、20mg、25mg或50mg的聚合物或纖維，或介于上述實(shí)施方案之間的任何范圍(例如l-10mg/ml、5-15mg/ml、2-8mg/ml、20-50mg/ml等)。在其它的方面,所述聚合物或纖維作為濕餅時經(jīng)過輻射，所述濕餅包含每Iml蒸餾水約50-1，OOOmg聚合物或纖維。在多個具體的實(shí)施方案中，所述濕餅包含每Iml蒸餾水約50、100、200、300、400、500、600、700、800、900 或 1000mg 的聚合物或纖維，或介于(例如 100-500mg/ml、300-600mg/ml、50-1000mg/ml等)之間的任何范圍內(nèi)。
[0112]輻照是優(yōu)選呈Y輻射、電子束(e-beam)輻射或x_射線的形式。優(yōu)選輻照的兩種來源:放射性核素和電。在具體的實(shí)施方案中，放射性核素是鈷-60和銫-137。這些核素均發(fā)射Y射線，Y射線是不含質(zhì)量的光子。Y射線具有0.66至1.3MeV的能量。利用電產(chǎn)生電子，再加速到高達(dá)IOMeV或更高的能量。當(dāng)輻照聚合物或纖維降低它們的大小時，需要考慮的是利用IOMeV電子用類似于水的密度穿透材料的深度限于單側(cè)暴露約3.7cm或雙側(cè)暴露約8.6cm。穿透深度在較低電子能時減少。將金屬(通常是鎢或鉭)靶置于電子束路徑中，可將電子能轉(zhuǎn)換成X-射線。轉(zhuǎn)換成X-射線局限于能量高達(dá)5MeV的電子。X-射線是沒有質(zhì)量的光子，可穿透聚合物或纖維，這類似于Y射線。在電子能轉(zhuǎn)換成X-射線能的過程中，效率僅有約8%。在X-射線產(chǎn)生裝置中需要高能電子束機(jī)器來彌補(bǔ)低轉(zhuǎn)換效率。
[0113]在一個具體的實(shí)施方案中，所述輻照是Y射線輻照。
[0114]輻射的吸收劑量是每單位重量的產(chǎn)品所吸收的能量，單位為戈瑞(gray) (gy)或千戈瑞(kilogray) (kgy)。對于干的聚合物或纖維,優(yōu)選的吸收劑量為約500-2，OOOkgy福射，最優(yōu)選為約750-1，250kgy或約900-1，IOOkgy福射。對于濕的聚合物或纖維,優(yōu)選的吸收劑量為約100-500kgy輻射，最優(yōu)選為約150-250kgy或約200_250kgy輻射。
[0115]輻射的劑量可以用其作用于所述聚合物或纖維的長度來描述。在多個具體的實(shí)施方案中，所使用輻射的劑量優(yōu)選使所述聚合物或纖維的長度分別降至所述聚合物或纖維起始長度的約10%至90%的任 何地方。在多個具體的實(shí)施方案中，平均長度被降低約10%、約20%、約 30%、約 40%、約 50%、約 60%、約 70%、約 80% 或約 90%,或介于(例如 20-40%、30-70%等等)之間的任何范圍?；蛘?，所使用輻射的劑量優(yōu)選使所述聚合物或纖維的長度被降至I至100微米的任何地方。在多個具體的實(shí)施方案中，并且取決于起始纖維長度，所述聚合物或纖維的平均長度被降至小于約15微米、小于約14微米、小于約13微米、小于約12微米、小于約11微米、小于約10微米、小于約8微米、小于約7微米、小于約5微米、小于約4微米、小于約3微米、小于2微米或小于I微米。在某些實(shí)施方案中，所述聚合物或纖維的多數(shù)(和在某些實(shí)施方案中，至少 60%、70%、80%、90%、95%、98%、99%、99.5%,99.8%,99.9% 或100%,或介于 55% 至 65%、55% 至 75%、65% 至 75%、75% 至 85%、75% 至 90%、80% 至 95%、90% 至95%或95%至99%之間)的長度被降至不大于約20微米、不大于約15微米、不大于約12微米、不大于約10微米、不大于約8微米、不大于約7微米或不大于約5微米。在某些實(shí)施方案中，所述聚合物或纖維的輻照使所述纖維的多數(shù)(和在某些實(shí)施方案中，至少60%、70%、80%、90%、95%、98%、99%、99.5%,99.8%,99.9% 或 100%,或介于 55% 至 65%、55% 至 75%、65% 至75%,75%至85%、75%至90%、80%至95%、90%至95%或95%至99%之間)的長度被降至介于約I至20微米之間、介于約I至15微米之間、介于約2至15微米之間、介于約I至12微米之間、介于約2至12微米之間、介于約I至10微米之間、介于約2至10微米之間、介于約I至8微米之間、介于約2至8微米之間、介于約I至7微米之間、介于約2至7微米之間、介于約3至8微米之間、介于約4至10微米之間、介于約4至7微米之間、介于約5至10微米之間、介于約I至5微米之間、介于約2至5微米之間、介于約3至5微米之間、介于約4至10微米之間的任何地方，或介于上述長度之間的任何范圍，其也都被涵蓋。[0116]輻射的劑量可以用其作用于所述聚合物或纖維的分子量來描述。在多個具體的實(shí)施方案中，所使用輻射的劑量優(yōu)選優(yōu)選使所述聚合物或纖維的分子量降至所述聚合物或纖維起始重量的約10%至90%的任何地方。在多個具體的實(shí)施方案中，平均分子量被降低約10%、約20%、約30%、約40%、約50%、約60%、約70%、約80%或約90%或介于(例如20-40%、30-70%等等)之間的任何范圍?；蛘撸褂幂椛涞膭┝績?yōu)選使所述聚合物或纖維的分子量降至1，000至1，000，000道爾頓的任何地方。在多個具體的實(shí)施方案中，并取決于起始分子量，聚合物或纖維的平均分子量被降至小于1，000, 000道爾頓、小于750，000道爾頓、小于500，000道爾頓、小于300，000道爾頓、小于200，000道爾頓、小于100，000道爾頓、小于90，000道爾頓、小于80，000道爾頓、小于70，000道爾頓、小于60，000道爾頓、小于50，000道爾頓、小于25，000道爾頓、小于10，000道爾頓，或小于5，000道爾頓。在某些實(shí)施方案中，所述平均分子量被降至不小于500道爾頓、不小于1，000道爾頓、不小于2，000道爾頓、不小于(no less) 3，500道爾頓、不小于5，000道爾頓、不小于7，500道爾頓、不小于10，000道爾頓、不小于25，000道爾頓、不小于50，000道爾頓、不小于60，000道爾頓或不小于100，000道爾頓。介于上述平均分子量之間的任何范圍也都被涵蓋；例如，在某些實(shí)施方案中，所述聚合物或纖維的輻照使平均分子量降至介于10，000至100，000道爾頓之間、介于I, 000和25，000道爾頓之間、介于50，000和500，000道爾頓之間、介于25，000和100，000道爾頓之間、介于30，000和90，000道爾頓之間、介于約40，000和80，000道爾頓之間、介于約25，000和75，000道爾頓之間、介于約50，000和70，000道爾頓之間或介于約55，000和65，000道爾頓之間等等的任何地方。在某些實(shí)施方案中，所述聚合物或纖維的輻照使所述纖維的多數(shù)(和在某些實(shí)施方案中，至少60%、70%、80%、90%、95%、98%、99%、99.5%,99.8%,99.9% 或 100%,或介于 55% 至 65%、55% 至 75%、65% 至 75%、75% 至 85%、75% 至90%,80%至95%,90%至95%或95%至99%之間)的分子量降至介于約20，000和100，000道爾頓、約25，000和75，000道爾頓、約30，000和90，000道爾頓、約40，000和80，000道爾頓、約50，000和70，000道爾頓或約55，000和65，000道爾頓之間的任何地方。在某些實(shí)施方案中，所述聚合物或纖維的輻照使所述纖維的多數(shù)(和在某些實(shí)施方案中，至少60%、70%、80%、90%、95%、98%、99%、99.5%,99.8%,99.9% 或 100%，或介于 55% 至 65%、55% 至 75%、65%至75%、75%至85%、75`%至90%、80%至95%、90%至95%或95%至99%之間)的分子量降至約60, 000道爾頓。
[0117]輻照后，可將漿料過濾后干燥，并且可將濕餅干燥，制成可用于將本發(fā)明付諸實(shí)施的組合物(例如本文描述的敷料和其它的組合物)。
[0118]5.3包含sNAG納米纖維的纟目合物
[0119]所述sNAG納米纖維可配制在各種各樣的組合物中用于局部給藥，如本文所描述的。
[0120]包含所述sNAG納米纖維的組合物可配制成乳膏劑、膜劑、薄膜劑(film)、液體溶液劑、混懸劑(例如粘稠混懸劑)、粉劑、糊劑、軟膏劑、栓劑、明膠狀組合物、氣霧劑、凝膠劑或噴霧劑。在一個實(shí)施方案中，包含所述sNAG納米纖維的組合物被配制成超薄型膜劑。在有些實(shí)施方案中，包含所述sNAG納米纖維的組合物被配制成敷料、墊子或繃帶。在特別的實(shí)施方案中，包含sNAG納米纖維的組合物不是固體或形成屏障的。也考慮了固體制劑，其適合于在給藥前在液體中制成溶液劑或混懸劑。將這樣的組合物摻入可植入裝置例如整形手術(shù)植入物(對髖關(guān)節(jié)、膝、肩；針(pins)、螺絲釘(screws)等)、心血管植入物(支架，導(dǎo)管等)等或在所述可植入裝置上涂覆，其中抗菌活性將是有益的。
[0121]包含所述sNAG納米纖維的組合物可包括藥學(xué)上可接受的賦形劑中的一種或多種。合適的賦形劑可包括水、鹽水、鹽溶液、右旋糖、甘油、乙醇等或其組合。合適的賦形劑也包括淀粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明膠、麥芽、稻、面粉、白堊、硅膠、硬脂酸鈉、甘油一硬脂酸酯、油(包括石油、動物、植物或合成來源的那些，例如花生油、大豆油、礦物油、芝麻油等)、滑石粉、氯化鈉、脫脂奶粉、丙烯、二醇類等。另外，包含所述sNAG納米纖維的組合物可包括潤濕劑、乳化劑、PH緩沖劑和其它試劑中的一種或多種。所述sNAG納米纖維組合物也可摻進(jìn)生理學(xué)上可接受的載體(例如適合于局部施藥用的生理學(xué)上可接受的載體)中。術(shù)語“藥學(xué)上可接受的”意指被聯(lián)邦政府或州政府管理機(jī)構(gòu)批準(zhǔn)的或者在美國藥典或其它一般公認(rèn)的藥典中列舉的用于動物和更特別是用于人的。合適藥用載體的實(shí)例描述于“Remington’sPharmaceutical Sciences，，(E.ff.Martin 編著)。 [0122]在組合物中，所述sNAG納米纖維的最終量可以變動。例如，在組合物(例如準(zhǔn)備給予患者的)中，所述sNAG納米纖維的量可以為大于或等于約50%、約60%、約70%、約75%、約80%、約85%、約90%、約95%、約98%或約99% (重量/體積)。在一個實(shí)施方案中，在組合物中，所述sNAG納米纖維的量為約95%、約98%、約99或約100%。另外，在組合物(例如準(zhǔn)備給予患者的)中，所述sNAG納米纖維的量可以為約50%~100%、約60%~100%、約70%~100%、約 75% ~100%、約 80% ~100%、約 90% ~100%、約 95% ~100%、約 70% ~95%、約 75% ~95%、約80%~95%、約90%~95%、約70%~90%、約75%~90%或約80%~90%重量/體積。組合物可包含所述sNAG納米纖維的超過30%、40%、50%、60%、70%、75%、80%、90%、95%或99%溶液。
[0123]sNAG納米纖維組合物可以被配制成創(chuàng)口敷料。在某些實(shí)施方案中，sNAG納米纖維組合物被配制成呈屏障、膜劑或薄膜形式的創(chuàng)口敷料。或者，可以將sNAG納米纖維組合物加到敷料背襯(backings)，例如屏障、膜劑或薄膜。屏障、膜劑或薄膜可按不同的標(biāo)準(zhǔn)大小供應(yīng)，其可以被進(jìn)一步切割和縮小成待治療的區(qū)域。背襯可以是常規(guī)的敷料材料，例如繃帶或紗布，以在應(yīng)用到患者之前，添加或涂覆聚合物或纖維?；蛘?，所述sNAG納米纖維可被配制成屏障、膜劑或薄膜，制成條帶(strings)、微珠、微球或微纖維,或者所述組合物可被配制成形成屏障的墊子(mat)。在某些實(shí)施方案中，敷料的至少75%、至少85%、至少90%或至少95%是由所述sNAG納米纖維組成。在某些方面，敷料不含有常規(guī)的敷料材料例如紗布或繃帶。在這樣的實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維本身被配制成創(chuàng)口敷料。
[0124]包含所述sNAG納米纖維的組合物可以還包含任何合適的天然或合成的聚合物或纖維。合適聚合物或纖維的實(shí)例包括纖維素聚合物類、黃原膠、聚芳酰胺類、聚酰胺類、聚酰亞胺類、聚酰胺/酰亞胺類、聚酰胺酰肼類、聚酰肼類、聚咪唑類、聚苯并噁唑類、聚酯/酰胺、聚酯/酰亞胺、聚碳酸酯/酰胺類、聚碳酸酯/酰亞胺類、聚砜/酰胺類、聚砜酰亞胺類等、其共聚物和共混物。其它合適種類的聚合物或纖維包括聚偏(二)氟乙烯和聚丙烯腈類。這些聚合物或纖維的實(shí)例包括在美國專利號RE30, 351 ;4，705，540，4，717，393 ；4，717，394 ;4，912，197 ;4，838，900 ;4，935，490 ;4，851，505 ;4，880，442 ;4，863，496 ；4，961，539 ;和歐洲專利申請0219878中描述的那些，它們?nèi)纪ㄟ^引用作為參考。所述聚合物或纖維可包括任一纖維素聚合物、聚酰胺類、聚芳酰胺類、聚酰胺/酰亞胺類或聚酰亞胺類中的至少一種。在某些實(shí)施方案中，所述聚合物或纖維包括聚芳酰胺類、聚酯、聚氨酯(urethan)和聚四氟乙烯。在一個實(shí)施方案中,本文描述的組合物包含超過一種類型的聚合物(例如所述sNAG納米纖維和纖維素)。
[0125]在某些方面，所述sNAG納米纖維是組合物中唯一的活性成分。
[0126]在其它的實(shí)施方案中，組合物包含一種或多種另外的活性成分，例如抗病毒劑、抗真菌劑、抗酵母劑、化療劑或任何其它藥劑。在有些實(shí)施方案中，所述另外的活性成分是抗病毒劑、抗真菌劑、抗酵母劑、防御素肽、防御素樣肽或Toll-受體樣肽)中的一種或多種，或生長因子。在多個具體的實(shí)施方案中，所述另外的活性成分是生長因子，例如TOGF-AA、PDGF-AB、PDGF-BB、PDGF-CC, PDGF-DD, FGF-1、FGF-2、FGF-5、FGF-7、FGF-10, EGF、TGF- a、(HB-EGF)、雙向調(diào)節(jié)蛋白(amphiregulin)、腎上腺調(diào)節(jié)蛋白(epiregulin)、3細(xì)胞調(diào)節(jié)蛋白(betacellulin)、神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白(neuregulins)、epigen> VEGF-A > VEGF-B > VEGF-C >VEGF-D、VEGF-E、胎盤生長因子(PLGF)、血管生成素-1、血管生成素_2、IGF-1、IGF-11、肝細(xì)胞生長因子(HGF)和巨噬細(xì)胞刺激蛋白(MSP)中的一種或多種。在其它的實(shí)施方案中，所述另外的活性成分是使免疫系統(tǒng)加強(qiáng)的藥劑、止痛劑或退熱劑。
[0127]在某些實(shí)施方案中，所述另外的活性成分是抗病毒劑。本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的任何抗病毒劑都可用于sNAG納米纖維組合物中?？共《緞┑姆窍拗菩詫?shí)例包括蛋白質(zhì)、多肽、肽、融合蛋白、抗體、核酸分子、有機(jī)分子、無機(jī)分子和小分子，它們抑制和/或降低病毒附著到其受體上，病毒內(nèi)化進(jìn)入細(xì)胞中，病毒的復(fù)制或病毒從細(xì)胞中釋放出來。具體地說，抗病毒劑包括但不限于核苷類似物(例如齊多夫定(zidovudine)、阿昔洛韋(acyclovir)、更昔洛韋(gangcyclovir)、阿糖腺苷(vidarabine)、碘苷(idoxuridine)、曲氟尿苷(trifIuridine)和利巴韋林(ribavirin))、膦甲酸(foscarnet)、金剛燒胺(amantadine)、培拉米韋 (peramivir)、金剛乙胺(rimantadine)、沙奎那韋(saquinavir)、卻地那韋(indinavir)、利托那韋(ritonavir)、a -干擾素和其它干擾素、AZT、扎那米韋(zanamivir) (Relenza_)和奧塞米韋 (oseltamivir) (Tamiflu?)o其它的抗病毒劑包括流感病毒疫苗，例如Fluarix? (GlaxoSmithKline)、FluMist? (MedImmune Vaccines)、Fluvirin? (Chiron Corporation) > Fllllaval ⑩(GlaxoSmithKline)、Afluria? (CSLBiotherapies Inc.)、Agriflu? (Novartis)或Hlizone? (Aventis Pasteur)。
[0128]在某些實(shí)施方案中，所述另外的活性成分是抗癌劑。在一個具體的實(shí)施方案中，所述抗癌劑是化療劑。本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何抗癌劑都可用于sNAG納米纖維組合物中。示例性的抗癌劑包括:阿西維辛(acivicin);蒽環(huán)霉素(anthracyclin);安曲霉素(anthramycin);阿扎胞苷(azacitidine) (Vidaza) ;二膦酸鹽類(例如帕米膦酸(pamidronate) (Aredria)、sodium clondronate (Bonefos)、唑來勝酸(zoledronic acid)(Zometa)、阿侖膦酸鹽(alendronate) (Fosamax)、依替膦酸鹽(etidronate)、伊班膦酸鹽(ibandornate)、西馬膦酸鹽(cimadronate)、利塞膦酸鹽(risedromate)和替魯膦酸鹽(tiIudromate));卡怕(carboplatin);苯丁酸氣芥(chlorambucil);順怕(cisplatin)；阿糖胞苷(cytarabine) (Ara-C);鹽酸柔紅霉素(daunorubicin hydrochloride)；地西他濱(decitabine) (Dacogen);去甲基化劑、多西他賽(docetaxel);多柔比星(doxorubicin) ;EphA2 抑制劑；依托泊苷(etoposide);法扎拉濱(fazarabine);氟尿B密唳；吉西他濱(gemcitabine);組蛋白脫乙酰酶抑制劑(HDACs);白介素II (包括重組白介素II或rIL2)、干擾素a ;干擾素0 ;干擾素Y ;來那度胺(Ienalidomide) (Revlimid);抗CD2抗體(例如西利珠單抗(siplizumab) (Medlmmune Inc.;國際公布號W002/098370,所述文獻(xiàn)通過引用其全部結(jié)合到本文中))；美法侖(melphalan);甲氨蝶呤(methotrexate)；絲裂霉素(mitomycin);奧沙利鉬(oxaliplatin);紫杉醇(paclitaxel);嘌呤霉素(puromycin);利波腺苷(riboprine);螺鉬(spiroplatin);替加氟(tegafur);替尼泊苷(teniposide);硫酸長春喊(vinblastine sulfate);硫酸長春新喊(vincristinesulfate);伏氯唑(vorozole);折尼鉬(zeniplatin);凈司他丁(zinostatin);和鹽酸佐柔t(yī)匕星(zorubicin hydrochloride)。
[0129]可用于sNAG納米纖維組合物中的另外的活性成分的其它實(shí)例包括但不限于血管生成抑制劑；反義寡核苷酸；凋亡基因調(diào)制劑(modulators);凋亡調(diào)節(jié)劑；BCR/ABL拮抗劑 4內(nèi)酰胺衍生物；酪蛋白激酶抑制劑(ICOS);雌激素激動劑；雌激素拮抗劑；谷胱甘肽抑制劑；HMG CoA還原酶抑制劑；免疫刺激肽；胰島素樣生長因子-1受體抑制劑；干擾素激動劑；干擾素；白介素；親脂性鉬化合物；基質(zhì)溶素(matrilysin)抑制劑；基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑；錯配雙鏈RNA 氧化氮調(diào)節(jié)劑；寡核苷酸；鉬化合物；蛋白激酶C抑制劑、蛋白酪氨酸磷酸酶抑制劑；嘌呤核苷磷酸化酶抑制劑；raf拮抗劑；信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑；信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)劑；翻譯抑制劑；酪氨酸激酶抑制劑；和尿激酶受體拮抗劑。
[0130]在有些實(shí)施方案中，所述另外的活性成分是抗血管生成劑?？寡苌蓜┑姆窍拗菩詫?shí)例包括降低或抑制血管生成的蛋白質(zhì)、多肽、肽、綴合物(conjugates)、抗體(例如人的、人源化的、嵌合的、單克隆的、多克隆的，F(xiàn)vs、ScFvs、Fab片段、F(ab)2片段及其抗原結(jié)合片段)例如特異性結(jié)合TNF-a的抗體、核酸分子(例如反義分子或三股螺旋體(triplehelices))、有機(jī)分子、無機(jī)分子和小分子?？寡苌蓜┑钠渌鼘?shí)例可在例如美國公布號2005/0002934A1第277-282段落中找到，所述參考文獻(xiàn)通過引用其全部結(jié)合到本文中。在其它的實(shí)施方案中，所述另外的活性成分不是抗血管生成劑。
[0131]在有些實(shí)施方`案中，所述另外的活性成分是抗炎劑?？寡讋┑姆窍拗菩詫?shí)例包括非甾體抗炎藥物(NSAIDs)(例如塞來考昔(celecoxib) (CELEBREX?)、雙氯芬酸(diclofenac) (VOLTAREN?)、依托度酸(etodolac) (L0DI NE?)、非諾洛芬(fenoprofen)(NALF0N?)、吲哚美辛(indomethacin) (IND0CIN?)、酮咯酸(ketoralac) (T0RAD0L?)、奧沙普秦(oxaprozin)(DAYPR0?)、蔡丁美麗(nabumentone)(RELAFEN?)、舒林酸(sulindac)(CLIN0RIL?)、托美丁 (tolmentin)(T0LECTIN?)、羅非考昔(rofecoxib)(V10XX?)、萘普生(naproxen) (ALEVE?, NAPROSYN?)、酮洛芬(ketoprofen) (ACTR0N?)和萘丁美酮(nabumetone) (RELAFEN?))、甾體抗炎藥物(例如糖皮質(zhì)激素類、地塞米松(dexamethasone) (DECADR0N?)、皮質(zhì)激素類(例如甲潑尼龍(methylprednisolone)(MEDR0L?))、可的松(cortisone)、氧化可的松(hydrocortisone)、潑尼松(prednisone)(PREDNISONE? 和 DELTASONE?)和潑尼松龍(prednisolone) (PREL0NE? 和 PEDIAPRED?))、抗膽堿能類(例如硫酸阿托品(atropine sulfate)、甲基硝酸阿托品(atropinemethylnitrate)和異丙托溴銨(ipratropium bromide) (ATR0VENT?))、0 2-激動劑(例如沙丁胺醇(abuterol) (VENTOLIN? 和 PR0VENTIL?)、比托特羅(bitolterol) (T0RNALATE?)、左沙丁胺醇(Ievalbuterol) (X0P0NEX?)、奧西那林(metaproterenol) (ALUPENT?)、吡布特羅(pirbuterol) (MAXAIR?)、特布他林(terbutlaine) (BRETHAIRE? 和 BRETHINE?)、沙丁胺醇(albuterol) (PROVENTIL?, REPETABS? 和 V0LMAX?)、福莫特羅(formoterol) (F0RADILAEROLIZER?)和沙美特羅(salmeterol) (SEREVENT?和 SEREVENT DISKUS?))和甲基黃嘌呤類(例如茶堿(theophylline) (UNIPHYL?, THEO-DUR?, SL0-BID? 和 TEH0-42?))。
[0132]在某些實(shí)施方案中，所述另外的活性成分是烷化劑、亞硝基脲、抗代謝物、蒽環(huán)霉素、拓?fù)洚悩?gòu)酶II抑制劑或有絲分裂抑制劑。烷化劑類包括但不限于白消安(busulfan)、順鉬(cisplatin)、卡鉬(carboplatin)、苯丁酸氮芥(cho1rmbuciI)、環(huán)憐酰胺(cyclophosphamide)、異環(huán)磷酰胺(ifosfamide)、氨烯咪胺(decarbazine)、氮芥(mechlorethamine)、美法侖(mephalen)和themozolomide。亞硝基服類包括但不限于卡莫司汀(carmustine) (BCNU)和洛莫司汀(1mustine) (CCNU)?？勾x物類包括但不限于5-氟尿嘧唳(5-fluorouracil)、卡培他濱(capecitabine)、甲氨蝶呤(methotrexate)、吉西他濱(gemcitabine)、阿糖胞苷(cytarabine)和氟達(dá)拉濱(fIudarabine)。蒽環(huán)霉素類包括但不限于柔紅霉素(daunorubicin)、多柔比星(doxorubicin)、表柔比星(epirubicin)、伊達(dá)比星(idarubicin)和米托蒽醌(mitoxantrone)。拓?fù)洚悩?gòu)酶II抑制劑類包括但不限于托泊替康(topotecan)、伊立替康(irinotecan)、依托泊苷(etopiside) (VP-16)和替尼泊苷(teniposide)。有絲分裂抑制劑類包括但不限于紫杉燒類(taxanes)(紫杉醇(paclitaxel)、多西他賽(docetaxel))和長春花屬生物堿(長春堿(vinblastine)、長春新喊(vincristine)和長春瑞濱(vinorelbine))。
[0133]sNAG納米纖維組合物可含有膠原蛋白，雖然在某些方面，sNAG納米纖維組合物不含有月父原蛋白。
[0134]在某些實(shí)施方案中，sNAG納米纖維組合物不包含任何另外的療法。在某些實(shí)施方案中，sNAG納米纖維組合物不包含任何另外的抗病毒劑、抗癌劑、抗真菌劑、抗酵母劑、抗炎劑、化療劑、抗血管生成劑、防御素肽、防御素樣肽、Toll-受體樣肽或生長因子。
[0135]在有些實(shí)施方案中，所述另外的活性成分不是抗菌劑(例如抗生素、防御素肽、防御素樣肽或Toll-受體樣肽)或生長因子。在多個具體的實(shí)施方案中，所述另外的活性成分不是生長因子，例如 PDGF-AA、PDGF-AB, PDGF-BB, PDGF-CC, PDGF-DD, FGF-1、FGF-2、FGF-5、FGF-7、FGF-1O, EGF、TGF-a、(HB-EGF)、雙向調(diào)節(jié)蛋白(amphiregulin)、腎上腺調(diào)節(jié)蛋白(epiregulin) > 3 細(xì)胞調(diào)節(jié)蛋白(betacellulin)、神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白(neuregulins)、epigen、VEGF-A, VEGF-B, VEGF-C, VEGF-D, VEGF-E、胎盤生長因子(PLGF)、血管生成素-1、血管生成素-2、IGF-1、IGF-11、肝細(xì)胞生長因子(HGF)和巨噬細(xì)胞刺激蛋白(MSP)。在某些實(shí)施方案中，所述另外的活性成分不是使免疫系統(tǒng)加強(qiáng)的藥劑、止痛劑或退熱劑。
[0136]在某些實(shí)施方案中，所述另外的活性成分不是選自下列抗生素類之一的抗生素:大環(huán)內(nèi)酯類(microlides)(例如紅霉素(erythromycin)、阿奇霉素(azithromycin))、氨基糖苷類(aminoglycosides)(例如阿米卡星(amikacin)、慶大霉素(gentamicin)、新霉素(neomycin)、鏈霉素(streptomycin))、頭孢菌素類(例如頭孢輕氨節(jié)(cefadroxil)、頭孢克洛(cefaclor)、頭孢噻月虧(cefotaxime)、頭孢批月虧(cefepime))、氟喹諾酮類(fluoroquinolones)(例如環(huán)丙沙星(ciprofloxacin)、左氧氟沙星(levof1xacin))、青霉素類(例如青霉素、氨節(jié)西林(ampicillin)、阿莫西林(amoxicilli)n)、四環(huán)素類(例如四環(huán)素(tetracycline)、多西環(huán)素(doxycycline))和碳青霉烯類(例如美羅培南(meropenem)、亞胺培南(imipenem))。在有些實(shí)施方案中，所述另外的活性成分不是萬古霉素(vancomycin)、磺胺類藥(例如復(fù)方新諾明/甲氧節(jié)唳-磺胺甲噁唑(co_trimoxazole/trimethoprim-sulfamethoxazole))、四環(huán)素類(例如多西環(huán)素(doxycycline)、米諾環(huán)素(minocycline))、克林霉素(clindamycin)、惡唑燒酮類(例如利奈唑胺(Iinezolid))、達(dá)托霉素(daptomycin)、替考拉寧(teicoplanin)、喹奴普丁(quinupristin) / 達(dá)福普丁(dalfopristin)(共殺素(synercid))、替吉環(huán)素(tigecycline)、蒜素(allicin)、桿菌肽(bacitracin)、呋喃妥因(nitrofurantoin)、過氧化氫、新生霉素(novobiocin)、奈替米星(netilmicin)、甲基乙二醒(methylglyoxal)、蜜蜂防御素-1、妥布霉素(tobramycin)、二葡萄糖酸氯己定(chlorhexidine digluconate)、葡萄糖酸氯己定(chlorhexidinegluconate)、左氧氟沙星(Ievofloxacin)、鋅和 / 或銀。
[0137]在其它的方面、sNAG納米纖維組合物不包含大量的蛋白質(zhì)材料。在多個具體的實(shí)施方案中，sNAG納米纖維組合物中的蛋白質(zhì)含量不大于0.1%、0.5%或1%(重量)。在其它的實(shí)施方案中，所述組合物中的蛋白質(zhì)含量通過考馬斯(Coomassie)染色是檢測不到的。 [0138]在一個實(shí)施方案中，在sNAG納米纖維組合物中也包括鋅。除了它的抗微生物特性以外，鋅也在傷口愈合中起作用(參見Andrews等，1999，Adv Wound Carel2:137-8)。鋅優(yōu)選以鹽(例如氧化鋅、硫酸鋅、醋酸鋅或葡萄糖酸鋅)的形式添加。
[0139]5.4預(yù)防和治療用途
[0140]在某些實(shí)施方案中，本文描述的組合物可用于預(yù)防和/或治療防御素產(chǎn)生和/或分泌的增加是有益的感染和/或疾病。這樣的疾病可能是防御素缺乏的結(jié)果或者可能驅(qū)動來自防御素存在增加的益處。
[0141]在一個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于治療和/或預(yù)防與一種或多種防御素肽的無表達(dá)或低水平表達(dá)相關(guān)的疾?。换蚺c編碼一種或多種防御素肽的一個或多個基因中的突變/缺失/低基因拷貝數(shù)(“GCN”)相關(guān)的疾病。可突變/缺失/具有低GCN/不表達(dá)或其表達(dá)可能是低的或改變的示例性的防御素基因包括任何已知的a-防御素(例如DEFA1、DEFA1B、DEFA3、DEFA4、DEFA5、DEFA6)、任何已知的 P -防御素(例如，DEFB1、DEFB2、DEFB4、DEFB103A、DEFB104A、DEFB105B、DEFB107B、DEFB108B、DEFBl 10、DEFBl 12、DEFBl 14、DEFB118、DEFBl 19, DEFB123、DEFB124, DEFB125, DEFB126, DEFB127, DEFB128, DEFB129,DEFB131、DEFB136)和任何已知的0 -防御素(例如DEFT1P)。在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于治療或預(yù)防與以上列舉的基因中的一種或多種的無表達(dá)、低水平表達(dá)或以改變的水平表達(dá)或突變/缺失/低GCN相關(guān)的疾病或感染。在一個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于治療或預(yù)防與DEFAl、DEFA3、DEFA4、DEFA5、DEFBl、DEFB3、DEFB103A、DEFB104A、DEFB108B、DEFBl 12、DEFBl 14、DEFBl 18、DEFBl 19、DEFB123, DEFB124, DEFB125,DEFB126, DEFB128, DEFB129和DEFB131中的一種或多種的無表達(dá)、低水平表達(dá)或以改變的水平表達(dá)或突變/缺失/低GCN相關(guān)的疾病或感染。在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于治療或預(yù)防與一種或多種To 11受體(例如，TLRl、TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR6、TLR7、TLR8、TLR9、TLRlO、TLRlI和/或TLR12)的無表達(dá)、低水平表達(dá)或以改變的水平表達(dá)或突變/缺失/低GCN相關(guān)的疾病或感染。在又一些實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于治療或預(yù)防與 IL-1、CEACAM3、SPAGl1、SIGIRRdLl 樣受體)、IRAK1、IRAK2、IRAK4、TBK1、TRAF6 和IKKi中的一種或多種的無表達(dá)、低水平表達(dá)或以改變的水平表達(dá)或突變/缺失/低GCN相關(guān)的疾病或感染。在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于治療或預(yù)防與IRAK2、SIGIRR、TLRU TLR2、TLR4、TLR7、TLR8、TLRlO和TRAF6中的一種或多種的無表達(dá)、低水平表達(dá)或以改變的水平表達(dá)或突變/缺失/低GCN相關(guān)的疾病或感染。
[0142]基因表達(dá)的低水平是比表達(dá)的“正常”水平低的水平(例如低超過1.25倍、1.5倍、2倍、2.5倍、3倍、3.5倍、4倍、4.5倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍、10倍)?；虮磉_(dá)的改變水平是不同于表達(dá)的“正?！彼降乃?例如相差超過20%、25%、30%、50%、75%、100%、150%、200%、250%、300%)。在某些實(shí)施方案中，一種或多種防御素基因(例如以上列舉的防御素基因)在待給予本文描述的組合物的患者體內(nèi)的表達(dá)可以是比一種或多種防御素基因的“正?！北磉_(dá)少小于90%、小于75%、小于60%、小于50%、小于30%或小于20%。其中，一種或多種防御素基因的“正?！北磉_(dá)是:(i)已知在沒有表現(xiàn)出癥狀或沒有被診斷出待治療疾病或感染的對象中發(fā)現(xiàn)的平均表達(dá)水平；(ii)在沒有表現(xiàn)出癥狀或沒有被診斷出待治療疾病或感染的三、五、十、二十、二十五、五十個或更多的對象中檢測出的平均表達(dá)水平；和/或(iii)在疾病或感染的發(fā)作之前，在待給予本文描述的組合物的患者中檢測出的表達(dá)水平。
[0143]在另一個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于治療實(shí)體腫瘤癌癥。不受任何作用機(jī)制的束縛，sNAG納米纖維誘導(dǎo)a和0防御素(例如(6-防御素I)的能力可對所述sNAG納米纖維的抗癌活性作出貢獻(xiàn)。已經(jīng)表明，人a和P防御素(例如(6-防御素I)具有抗癌活性?？捎帽疚拿枋龅慕M合物治療的示例性實(shí)體腫瘤癌癥包括但不限于骨和結(jié)締組織肉瘤、腦癌、乳癌、卵巢癌、腎癌、胰腺癌、食管癌、胃癌、卵巢癌、肺癌(例如小細(xì)胞肺癌(SCLC)、非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)、喉癌和間皮瘤)、肝癌和前列腺癌。在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于治療由病毒感染引起的或與病毒感染相關(guān)的癌癥。在一個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于治療卡波西肉瘤(Kaposi’s sarcoma)。在某些實(shí)施方案中，通過給予本文描述的 組合物治療患有實(shí)體腫瘤的對象導(dǎo)致產(chǎn)生下述效果中的一種或多種:實(shí)體腫瘤的大小縮小；防止實(shí)體腫瘤的轉(zhuǎn)移；防止實(shí)體腫瘤的復(fù)發(fā)；與實(shí)體腫瘤相關(guān)的一個或多個癥狀的持續(xù)時間和/或嚴(yán)重程度降低；與實(shí)體腫瘤相關(guān)的癥狀數(shù)量減少；防止實(shí)體腫瘤的大小增加；減少/抑制實(shí)體腫瘤的癌細(xì)胞的增殖；與實(shí)體腫瘤相關(guān)的器官衰竭減少；對象住院的發(fā)生率減少；對象的住院長度減少；對象的生存期增加；和/或在對象中另一種療法的預(yù)防或治療效果被增強(qiáng)或改善。
[0144]在另一個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于治療皮膚癌?？捎帽疚拿枋龅慕M合物治療的示例性皮膚癌包括但不限于黑素瘤、基底細(xì)胞癌和鱗狀細(xì)胞癌。在某些實(shí)施方案中，通過給予本文描述的組合物治療患有皮膚癌的對象導(dǎo)致產(chǎn)生下述效果中的一種或多種:皮膚癌的大小縮??；防止皮膚癌的轉(zhuǎn)移；防止皮膚癌的復(fù)發(fā)；與皮膚癌相關(guān)的一個或多個癥狀的持續(xù)時間和/或嚴(yán)重程度降低；與皮膚癌相關(guān)的癥狀數(shù)量減少；與皮膚癌相關(guān)的器官裳竭減少；對象住院的發(fā)生率減少；對象的住院長度減少；對象的生存期增加；和/或在對象中另一種療法的預(yù)防或治療效果被增強(qiáng)或改善。
[0145]在另一個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于治療炎癥性腸疾病(IBD)。不受任何作用機(jī)制的束縛，sNAG納米纖維誘導(dǎo)a和0防御素的能力可對所述sNAG納米纖維的抗IBD活性作出貢獻(xiàn)。已經(jīng)表明，a和0防御素具有抗IBD活性。IBD包括但不限于克羅恩病和潰瘍性結(jié)腸炎。在某些實(shí)施方案中，通過給予本文描述的組合物治療患有IBD的對象導(dǎo)致產(chǎn)生下述效果中的一種或多種:防止IBD的復(fù)發(fā)；與IBD相關(guān)的一個或多個癥狀的持續(xù)時間和/或嚴(yán)重程度降低；與IBD相關(guān)的癥狀數(shù)量減少；對象住院的發(fā)生率減少；對象的住院長度減少；和/或在對象中另一種療法的預(yù)防或治療效果被增強(qiáng)或改善。IBD的一些癥狀包括腹痛、嘔吐、腹瀉、直腸出血、嚴(yán)重的內(nèi)痙攣/骨盆區(qū)中的肌肉痙攣、體重減輕和各種相關(guān)的主訴或疾病如關(guān)節(jié)炎、壞疽性膿皮病和/或原發(fā)性硬化性膽管炎。在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物預(yù)防以上列舉的癥狀中的一個或多個或本領(lǐng)域已知的其它癥狀的發(fā)作或發(fā)展，或者降低這些癥狀中的一個或多個的持續(xù)時間和/或嚴(yán)重程度。在一個實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于治療潰瘍性結(jié)腸炎。潰瘍性結(jié)腸炎的癥狀可包括IBD的以上列舉的癥狀，并且可以還包括經(jīng)常排粘液樣膿血便、里急后重和/或發(fā)熱。實(shí)施例9 (參見下文)顯示基于在IBD的動物模型中獲得的數(shù)據(jù)，sNAG納米纖維對治療IBD是有效的?？捎糜谥委烮BD的包含sNAG納米纖維的組合物可以是本文描述的任何sNAG組合物。在一個實(shí)施方案中，可用于治療IBD的包含sNAG納米纖維的組合物是與實(shí)施例9中描述的組合物相同或相類似。
[0146]在一個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于治療克羅恩病(例如回腸性克羅恩病)。不受任何作用機(jī)制的束縛，sNAG納米纖維誘導(dǎo)a和P防御素的能力可對所述sNAG納米纖維的抗克羅恩病活性作出貢獻(xiàn)。已經(jīng)表明，a和P防御素具體抗克羅恩病活性。在某些實(shí)施方案中，通過給予本文描述的組合物治療患有克羅恩病的對象導(dǎo)致產(chǎn)生下述效果中的一種或多種:防止克羅恩病的復(fù)發(fā)；與克羅恩病相關(guān)的一個或多個癥狀的持續(xù)時間和/或嚴(yán)重程度降低；與克羅恩病相關(guān)的癥狀數(shù)量減少；對象住院的發(fā)生率減少；對象的住院長度減少；和/或在對象中另一種療法的預(yù)防或治療效果被增強(qiáng)或改善。克羅恩病的一些癥狀包括腹痛、嘔吐、腹瀉、直腸出血、嚴(yán)重的內(nèi)痙攣/骨盆區(qū)中的肌肉痙攣、體重減輕和各種相關(guān)的主訴或疾病如關(guān)節(jié)炎、壞疽性膿皮病和/或原發(fā)性硬化性膽管炎?？肆_恩病的癥狀還可包括經(jīng)常排出粥樣稀便和有時脂肪瀉、發(fā)熱、瘺管、腸胃脹氣、腹脹、肛周不適如瘙癢和疼痛、大便失禁、口腔的口瘡性潰瘍和/或體重減輕。在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物預(yù)防以上列舉的癥狀中的一個或多個或本領(lǐng)域已知的其它癥狀的發(fā)作或發(fā)展，或者降低這些癥狀中的一個或多個的持續(xù)時間和/或嚴(yán)重程度。
`[0147]在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于預(yù)防和/或治療粘膜炎。粘膜炎是襯在消化道里面的粘膜的疼痛性炎癥和潰瘍(例如為癌癥的化學(xué)療法或放射療法治療的副作用)。粘膜炎可發(fā)生在沿著胃腸道的任何地方，例如，在口腔(即，口腔粘膜炎)。因此，在有些實(shí)施方案中，將本文描述的組合物局部地給予患者(例如被診斷患有或表現(xiàn)出粘膜炎癥狀的患者)以治療粘膜炎(例如，在口腔的發(fā)炎或潰瘍區(qū)域上局部給藥，或者局部地給予肛門或直腸區(qū)域，例如通過乳膏劑、栓劑、混懸劑、液體溶液劑、凝膠劑或軟膏劑)。在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物是在由粘膜炎引起的或與粘膜炎相關(guān)的炎癥或潰瘍部位(例如在口腔中)或者靠近該部位給予。在多個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物可以每天給予(例如每日一次或兩次)直到粘膜炎的癥狀消退(例如持續(xù)2、3、4、5、6、7、8、9、10、
11、12天、2周、3周、4周或超過4周)。在某些實(shí)施方案中，通過給予本文描述的組合物治療患有粘膜炎的對象導(dǎo)致產(chǎn)生下述效果中的一種或多種:防止粘膜炎的復(fù)發(fā)或減少粘膜炎復(fù)發(fā)的頻率；與粘膜炎相關(guān)的一個或多個癥狀(例如疼痛、潰瘍)的持續(xù)時間和/或嚴(yán)重程度降低；與粘膜炎相關(guān)的癥狀數(shù)量減少；對象住院的發(fā)生率減少；對象的住院長度減少；和/或在對象中另一種療法的預(yù)防或治療效果被增強(qiáng)或改善。
[0148]在另一個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于預(yù)防和/或治療病毒感染或由其引起的或與其相關(guān)的疾病。不受任何作用機(jī)制的束縛，sNAG納米纖維誘導(dǎo)P防御素(例如(6-防御素I)的能力可對所述sNAG納米纖維的抗病毒活性作出貢獻(xiàn)。已經(jīng)表明，^防御素(例如(6-防御素I)具有抗病毒活性。可引起可用本文描述的組合物預(yù)防和/或治療的感染或疾病的示例性的病毒包括但不限于呼吸道合胞病毒(RSV)、流感病毒(甲型流感病毒、乙型流感病毒或丙型流感病毒)、人偏肺病毒(HMPV)、鼻病毒、副流感病毒、SARS冠狀病毒、人免疫缺陷病毒(HIV)、肝炎病毒(甲、乙、丙型)、埃博拉病毒(ebola virus)、單純皰疹病毒(例如HSV-1、HSV-2、HSV-6、HSV-7)、水痘病毒、水痘-帶狀皰疹病毒、人乳頭狀瘤病毒(HPV)、副痕病毒、麻疫病毒、?？刹《?echovirus)、腺病毒、ElB病毒(Epstein Barrvirus)、柯薩奇病毒(Coxsackie virus)、腸道病毒、風(fēng)疫病毒、重型天花病毒(variolamajor)和小天花病毒(variola minor)。在某些實(shí)施方案中,通過給予本文描述的組合物預(yù)防對象的病毒感染或由其引起的或與其相關(guān)的疾病導(dǎo)致產(chǎn)生下述效果中的一種或多種:防止由病毒感染引起的或與病毒感染相關(guān)的疾病的發(fā)展或發(fā)作；和/或防止病毒感染或由其引起的或與其相關(guān)的疾病從一個對象傳播到另一個對象或?qū)ο笕后w。在某些實(shí)施方案中，通過給予本文描述的組合物治療患有病毒感染或由其引起的或與其相關(guān)的疾病的對象導(dǎo)致產(chǎn)生下述效果中的一種或多種:防止病毒感染或由其引起的或與其相關(guān)的疾病的復(fù)發(fā)；與病毒感染或由其引起的或與其相關(guān)的疾病的癥狀數(shù)量減少；與病毒感染或由其引起的或與其相關(guān)的疾病相關(guān)的器官裳竭減少；病毒感染或由其引起的或與其相關(guān)的疾病的嚴(yán)重程度和/或持續(xù)時間降低；與病毒感染或由其引起的或與其相關(guān)的疾病的一個或多個癥狀的嚴(yán)重程度和/或持續(xù)時間 降低；病毒負(fù)荷或計數(shù)(例如超過約0.251og、0.51og、0.751og、llog>1.51og、21ogs、2.5logs>3logs>41ogs>5logs>6logs>7logs>8logs>9logs 或 IOlogs)減少；對象住院的發(fā)生率減少；對象的住院長度減少；對象的生存期增加；在對象中另一種療法的預(yù)防或治療效果被增強(qiáng)或改善；防止病毒從對象的一個細(xì)胞、組織、器官傳播到對象的另一個細(xì)胞、組織、器官；防止由病毒感染引起的或與病毒感染相關(guān)的疾病或其一個或多個癥狀的發(fā)展或發(fā)作；和/或防止病毒感染或由其引起的或與其相關(guān)的疾病從一個對象傳播到另一個對象或?qū)ο笕后w。
[0149]在一個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物不用于預(yù)防和/或治療HIV感染或由HIV感染引起的或與HIV感染相關(guān)的疾病。
[0150]病毒感染的癥狀可包括但不限于發(fā)熱、寒顫、頭痛、斜頸、易怒、腺體腫大、腹瀉、惡心、嘔吐、與病毒感染相關(guān)的皮膚或粘膜異常(例如皮疹、潰瘍、感冒瘡、損害、紅腫、發(fā)紅、瘙癢、丘疹、囊泡、膿皰、水皰、痂)和/或與這種異常相關(guān)的疼痛、腹痛、咽喉腫痛、耳朵痛、咳嗽、體重減輕、疲勞、渾身疼痛和/或其它的流感樣癥狀。在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物預(yù)防以上列舉的癥狀中的一個或多個或本領(lǐng)域已知的其它癥狀的發(fā)作或發(fā)展；或者降低這些癥狀中的一個或多個的持續(xù)時間和/或嚴(yán)重程度。
[0151]在另一個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于預(yù)防和/或治療傷口(例如開放性傷口，例如切口、撕裂傷、穿透傷、擦傷或燒傷)的病毒感染。在另一個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物不用于預(yù)防和/或治療傷口的病毒感染。傷口有兩種類型，開放性和閉合性。開放性傷口是按照引起傷口的物體進(jìn)行分類。例如，切口或切口型傷口(包括手術(shù)傷口)是由潔凈的邊緣鋒利的物體例如刀、旋轉(zhuǎn)器(razor)或玻璃碎片引起的。裂口是由鈍物撞擊位于硬組織之上的軟組織引起的不規(guī)則傷口(例如覆蓋顱骨的皮膚的裂口)或皮膚和其它組織的撕裂，例如由分娩引起的。磨損或擦傷是淺表傷，其中皮膚的最頂層(表皮)被刮掉了。刺傷是由刺穿皮膚的物體例如釘或針引起的。穿透傷是由進(jìn)入身體的物體例如刀引起的。槍彈傷是子彈或類似的射彈射進(jìn)(例如射入傷)和/或通過身體(例如穿出傷)引起的。在醫(yī)學(xué)范圍內(nèi)，所有的戳傷和槍彈傷都被認(rèn)為是開放性傷。開放性傷也包括由熱、化學(xué)或電損傷誘發(fā)的燒傷。閉合性傷包括挫裂傷(更常稱為碰撞傷，由于損害皮膚下組織的鈍力外傷引起的)、血腫(亦稱血腫瘤，由于傷及血管進(jìn)而引起血液淤積在皮膚下面引起的)和擠壓傷(在長的時間周期內(nèi)施加的巨大或極端的力量引起的)。
[0152]在某些實(shí)施方案中，本文描述的sNAG組合物用于預(yù)防和/或治療患者(例如被診斷患有病毒感染或表現(xiàn)出病毒感染的癥狀的患者)的局部病毒感染。在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于預(yù)防和/或治療在皮膚、粘膜(例如眼、耳、咽喉、陰道、肛門)或其它組織的表面上的病毒感染或病毒感染的癥狀。在某些實(shí)施方案中，將本文描述的組合物直接給予皮膚、粘膜(例如眼、耳、咽喉、口腔、陰道、肛門)或其它組織的表面。在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于治療病毒感染(例如單純皰疹病毒感染或水痘-帶狀皰疹感染)的囊皰(例如囊泡、膿皰或水皰)、潰瘍或瘡痂期。在其它的實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于治療病毒感染(例如單純皰疹病毒感染或水痘-帶狀皰疹感染)的前驅(qū)癥狀、紅斑/黃斑或丘疹/水腫期。在某些實(shí)施方案中，本文描述的組合物是在病毒感染的部位或靠近病毒感染的部位或者在病毒感染癥狀的部位或靠近病毒感染癥狀的部位(例如與病毒感染相關(guān)的感冒瘡、損害、水皰、膿皰、潰瘍、皮疹、紅腫或痂殼(crust)的部位)給予。在有些實(shí)施方案中，通過給予本文描述的組合物治療患有局部病毒感染的對象導(dǎo)致產(chǎn)生下述效果中的一種或多種:局部病毒感染的癥狀(例如瘙癢、損害、潰瘍、水皰、丘疹、皮疹、痂殼或本文描述的或本領(lǐng)域已知的局部病毒感染的任何其它癥狀)的嚴(yán)重程度和/或持續(xù)時間降低；與局部病毒感染的癥狀相關(guān)的疼痛減輕；與局部病毒感染相關(guān)的癥狀數(shù)量減少；防止局部病毒感染的癥狀的 復(fù)發(fā)或降低其復(fù)發(fā)的頻率；防止局部病毒感染從一個對象傳播到另一個對象；防止本文描述的或本領(lǐng)域已知的局部病毒感染的癥狀中的一個或多個的發(fā)作或發(fā)展；和/或在對象中另一種療法(例如另一種抗病毒療法)的預(yù)防或治療效果被增強(qiáng)或改善。在特別的實(shí)施方案中，本文描述的sNAG組合物被配制成非屏障形式用于治療局部病毒感染。例如，本文描述的組合物被配制成液體溶液劑、混懸劑(例如粘稠的混懸劑)、乳膏劑或軟膏劑的形式用于治療局部病毒感染。在一個實(shí)施方案中，本文描述的sNAG組合物當(dāng)用于治療局部病毒感染時不是呈固體形式。在又一些實(shí)施方案中，本文描述的sNAG組合物是形成屏障的和/或固體的，用于治療局部病毒感染。實(shí)施例8 (參見下文)顯示根據(jù)在人患者上獲得的數(shù)據(jù)說明sNAG納米纖維對治療局部病毒感染是有效的。具體地說，實(shí)施例8顯示sNAG納米纖維對治療人患者的HSV感染(例如由HSV感染引起的或與HSV感染相關(guān)的感冒瘡)是有效的?？捎糜谥委熅植坎《靖腥镜陌瑂NAG納米纖維的組合物可以是本文描述的任何sNAG組合物。在一個實(shí)施方案中，可用于治療局部病毒感染(例如HSV)的包含sNAG納米纖維的組合物可以與實(shí)施例8中描述的組合物相同或類似。
[0153]可用本文描述的組合物局部治療的病毒感染和與病毒感染相關(guān)的皮膚疾病/病癥包括但不限于麻疫(麻疫病毒)、德國麻疫(風(fēng)疫病毒)、雞痘(水痘)、五號病(傳染性紅斑，由細(xì)小病毒引起)、玫瑰疹、傳染性單核細(xì)胞增多癥或腺熱(EB病毒)、腸道病毒感染、玫瑰糠疹(可能由皰疹6型或7型引起)、手足口病(由柯薩奇病毒感染引起)、Gianotto-Crosti綜合征(兒童中發(fā)生的丘疫性肢端皮炎；最常由EB病毒或乙型肝炎所致的傳染性單核細(xì)胞增多癥引起)、胸側(cè)皮疫(Laterothoracic exanthem)(兒童的不對稱性屈側(cè)周皮疫或APEC)、天花、牛痘、撫狀表皮發(fā)育不良(epidermodysplasiaverruciformis)、由HIV感染引起的或與HIV感染相關(guān)的皮膚病和/或卡波西肉瘤(Kaposi’ s sarcoma)、立克次氏體病(Rickettsial diseases)、黃熱病(由黃病毒感染所致)、單純皰疹(感冒瘡和生殖器皰疹)、皰疹性濕疹、帶狀皰疹(shingles)、皰疹性咽峽炎/水皰性口炎(口腔潰瘍)、傳染性軟疣、病毒性疣(例如肉疣(verrucas)、生殖器疣或濕疣、鱗狀細(xì)胞乳頭狀瘤)、皰疹性甲溝炎、斗士皰疹、羊痘(Orf)和擠奶者結(jié)節(jié)(Milker’snodules)。
[0154]在一個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于預(yù)防和/或治療單純皰疹病毒(例如HSV-1、HSV-2)的感染或由單純皰疹病毒(例如HSV-1、HSV-2)引起的疾病或病癥。單純皰疹病毒I型(HSV-1)的癥狀可包括口腔、咽喉、嘴唇的水皰或損害(例如口周感冒瘡)，而單純皰疹病毒2型(HSV-2)的癥狀可包括生殖器的外表面上的水皰或損害(例如丘疹和/或囊泡)。這兩種類型的HSV均以潛伏狀態(tài)定居于皮膚的感覺神經(jīng)中。在攻擊期間，該病毒從神經(jīng)中擴(kuò)散出來并侵入皮膚或粘膜并在此復(fù)制，引起臨床損害。在每次攻擊之后，它退回神經(jīng)纖維，并變成再次休眠。在活躍期期間，有相當(dāng)多的病毒脫落，這些損害是有高度傳染性的。I型的原發(fā)感染主要發(fā)生在嬰幼兒，通常輕微或亞臨床。在世界的人口稠密的欠發(fā)達(dá)地區(qū)，高達(dá)100%的兒童在5歲前都被感染過。2型通常是性獲得性的，在青春期之后，不常是無癥狀(less often asymptomatic)。該病毒在唾液和生殖分泌物中脫落,在臨床攻擊期間和此后長達(dá)數(shù)天或數(shù)周。來自有活性損傷的脫落量是當(dāng)它呈無活性時的100到1，000倍。HSV的傳播通常是通過直接接觸受感染的分泌物。在免疫缺乏時，感染往往更易發(fā)生并且更明顯和更持久。復(fù)發(fā)可能因為小的創(chuàng)傷而觸發(fā)；其它的感染包括傷風(fēng)、紫外輻射(日光暴露)；激素因子(經(jīng)前耀斑發(fā)生)；情緒緊張；在面部(包括牙科)實(shí)施的操作或手術(shù)。因此，在有些實(shí)施方案`中，本文描述的組合物經(jīng)局部給予以治療HSV-1感染或損害或與HSV-1感染相關(guān)的感冒瘡(例如經(jīng)口或口周給予)。在其它的實(shí)施方案中，本文描述的組合物經(jīng)局部給予以治療HSV-2感染或與HSV-2感染相關(guān)的生殖器損害(例如在生殖器區(qū)域(例如陰道)內(nèi)局部給予)。在有些實(shí)施方案中，通過給予本文描述的組合物治療患有HSV感染或由其引起的或與其相關(guān)的疾病的對象導(dǎo)致產(chǎn)生下述效果中的一種或多種:HSV感染的癥狀(例如感冒瘡、損害或本文描述的或本領(lǐng)域已知的HSV感染的任何其它癥狀)的嚴(yán)重程度和/或持續(xù)時間降低；與HSV感染相關(guān)的癥狀數(shù)量減少，與HSV感染的癥狀(例如感冒瘡或損害)相關(guān)的疼痛減輕；防止HSV感染的癥狀的復(fù)發(fā)或者降低其復(fù)發(fā)的頻率；防止HSV感染從一個對象傳播到另一個對象；防止HSV感染的一個或多個癥狀的發(fā)作或(of)發(fā)展；和/或在對象中另一種療法的預(yù)防或治療效果被增強(qiáng)或改善。在特別的實(shí)施方案中，將本文描述的組合物給予患有HSV感染或已有HSV感染的癥狀的人類嬰兒、人類幼兒、人類兒童、人類成年人和/或老年人。在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物是當(dāng)表面區(qū)域開始感到刺痛、瘙癢或腫脹的時間(表面區(qū)域上的刺痛、瘙癢或腫脹與HSV感染(例如HSV-1或HSV-2)相關(guān))經(jīng)局部給予表面區(qū)域(例如皮膚或粘膜的口周、口或生殖器區(qū)域)。在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物是在感冒瘡或損害的部位或靠近感冒瘡或損害的部位(例如在皮膚上或在粘膜上的口周、口或生殖器損害)局部給予(其中所述感冒瘡或損害是與HSV感染(例如HSV-1或HSV-2)相關(guān)的)。實(shí)施例8顯示sNAG納米纖維組合物對治療人患者的與HSV感染相關(guān)的感冒瘡是有效的，當(dāng)在患者的感冒瘡部位局部施用時，并且用sNAG納米纖維組合物治療HSV相關(guān)的感冒瘡導(dǎo)致感冒瘡和與感冒瘡相關(guān)的疼痛的嚴(yán)重程度和持續(xù)時間降低。在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于治療HSV (例如HSV-1或HSV-2)感染的囊皰(例如囊泡、膿皰或水皰)、潰瘍或瘡痂期。在其它的實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于治療HSV (例如HSV-1或HSV-2)感染的前驅(qū)癥狀、紅斑/黃斑或丘疹/水腫期。在某些實(shí)施方案中，在HSV感染的治療中，將本文描述的組合物與抗病毒藥物(例如阿昔洛韋或本文描述的或本領(lǐng)域已知的任何其它抗病毒藥物)聯(lián)合給予。在多個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物可以每天給予(例如每日一次或兩次)直到HSV感染的癥狀消退(例如持續(xù)2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12天、2周、3周、4周或超過4周)。
[0155]在一個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于預(yù)防和/或治療水痘病毒的感染或由水痘病毒引起的疾病或病癥(帶狀皰疫(herpes zoster, shingles)或水痘(chickenpox))。在水痘感染(參見 Shingles, Clinical Knowledge Summaries (2008)),它通常在兒童中發(fā)生，病毒接種到神經(jīng)細(xì)胞，通常是感覺細(xì)胞。帶狀皰疫(herpes zoster或shingles)是以在單一皮節(jié)中分布為特征。它可能不影響整個皮節(jié)，而通常是它限于一個皮節(jié)的區(qū)域并因此不跨過中間線。帶狀皰疹的癥狀包括但不限于皮疹(它由黃斑和丘疹組成)并在皮節(jié)分布中發(fā)展成為囊皰損害(最常見于胸部)和疼痛。皮疹往往持續(xù)7-10天，全愈可能需要2-4周。更廣泛的疾病可能發(fā)生在免疫受損的患者(例如，患有淋巴瘤和HIV)中。帶狀皰疹可發(fā)生在任何年齡，但在老年人中更常見，更通常在女性中輕微(雖然水痘同等地影響兩性)。皮膚并發(fā)癥可包括繼發(fā)性感染、瘢痕形成和色素沉著改變。老年人患上并發(fā)癥的可能性更大，這是由于帶狀皰疹(尤其是皰疹后神經(jīng)痛)所致。因此，在有些實(shí)施方案中，本文描述 的組合物經(jīng)局部給予以治療帶狀皰疹感染或雞痘(例如在皮膚上給予)。在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物是在皮疹的部位或靠近皮疹的部位(例如皮膚上的黃斑或丘疹)給予(其中所述皮疹是與帶狀皰疹感染相關(guān)的)。在有些實(shí)施方案中，通過給予本文描述的組合物治療患有帶狀皰疹感染或由其引起的或與其相關(guān)的疾病的對象導(dǎo)致產(chǎn)生下述效果中的一種或多種:帶狀皰疹感染的癥狀(例如皮疹或本文列舉的或本領(lǐng)域已知的帶狀皰疹感染的任何其它癥狀)的嚴(yán)重程度和/或持續(xù)時間降低；與帶狀皰疹感染相關(guān)的癥狀數(shù)量減少；與帶狀皰疹感染癥狀相關(guān)的疼痛減輕；防止帶狀皰疹感染癥狀的復(fù)發(fā)或減少其復(fù)發(fā)的頻率；防止帶狀皰疹感染從一個對象傳播到另一個對象；防止帶狀皰疹感染癥狀的發(fā)作或發(fā)展；和/或在對象中另一種療法(例如另一種抗病毒療法)的預(yù)防或治療效果被增強(qiáng)或改善。在特別的實(shí)施方案中，將本文描述的組合物給予患有帶狀皰疹感染或已有帶狀皰疹感染的癥狀的人類嬰兒、人類幼兒、人類兒童、人類成年人和/或老年人。在某些實(shí)施方案中，在帶狀皰疹感染的治療中，本文描述的組合物聯(lián)合抗病毒藥物(例如阿昔洛韋或本文描述的或本領(lǐng)域已知的任何其它抗病毒藥物)給予。在多個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物可以每天給予(例如每日一次或兩次)直到帶狀皰疹感染的癥狀消退(例如持續(xù)2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12天、2周、3周、4周或超過4周)。
[0156]在另一個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于預(yù)防和/或治療傳染性軟疣(moIluscum contagiosum)感染。傳染性軟撫是常見的并通常累及嬰幼兒,僅在很少情況下累及成年人(參見 Molluscum contagiosum.Clinical Knowledge Summaries (2008))。傳染性軟疣的癥狀包括但不限于成簇的小丘疹，特別是在溫暖潮濕的地方，例如腋窩、腹股溝或膝后面。丘疹大小范圍在l_6mm，并且可以呈白色、粉紅色或褐色。它們通常具有蠟狀、粉紅色外觀且為臍形(表面的中間凹陷)。隨著它們解體，它們可變得發(fā)炎、結(jié)痂或長瘡(scabby)。它們在任何個體身上都可以有幾個或數(shù)百個。該病可持續(xù)數(shù)月或偶爾持續(xù)一兩年。罕見地，它可留下小坑狀疤痕(硬結(jié))。傳染性軟疣可從人傳播到人，通常在兒童中，通過直接皮膚接觸；和在成年人中性接觸可傳染。在患有特應(yīng)性濕疹的兒童中和在感染HIV的患者中，損害往往會更多更持久。在兒童中，損害常見于面部和軀干。因此，在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物經(jīng)局部給予以治療傳染性軟疣感染(例如在皮膚上給予)。在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物是在皮疹的部位或靠近皮疹的部位(例如皮膚上的黃斑或丘疹)給予(其中所述皮疹是與傳染性軟疣感染相關(guān)的)。在有些實(shí)施方案中，通過給予本文描述的組合物治療患有傳染性軟疣或由其引起的或與其相關(guān)的疾病的對象導(dǎo)致產(chǎn)生下述效果中的一種或多種:傳染性軟疣的癥狀(例如皮疹或本文列舉的或本領(lǐng)域已知的傳染性軟疣的任何其它癥狀 )的嚴(yán)重程度和/或持續(xù)時間降低；傳染性軟疣的癥狀數(shù)量減少；與傳染性軟疣癥狀相關(guān)的疼痛減輕；防止傳染性軟疣癥狀的復(fù)發(fā)或減少其復(fù)發(fā)的頻率；防止傳染性軟疣從一個對象傳播到另一個對象；防止傳染性軟疣癥狀的發(fā)作或發(fā)展；和/或在對象中另一種療法的預(yù)防或治療效果被增強(qiáng)或改善。在特別的實(shí)施方案中，將本文描述的組合物給予患有傳染性軟疣或已有傳染性軟疣的癥狀的人類嬰兒、人類幼兒、人類兒童、人類成年人和/或老年人。在某些實(shí)施方案中，在傳染性軟疣感染的治療中，本文描述的組合物聯(lián)合已知的療法(例如擠壓法、刺穿法、刮除法、冷凍療法、除疣劑(wart paints)例如水楊酸和鬼白樹脂(podophyllin);免疫調(diào)節(jié)劑例如咪喹莫特乳膏；1%氫化可的松乳膏；或梭鏈孢酸乳膏2%)給予。在多個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物可以每天給予(例如每日一次或兩次)直到傳染性軟疣感染的癥狀消退(例如持續(xù)2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12天、2周、3周、4周或超過4周)。
[0157]在另一個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于預(yù)防和/或治療人乳頭狀瘤病毒或與人乳頭狀瘤病毒相關(guān)的疣或瘊。超過80種HPV亞型是已知的(參見Warts andverrucae, Clinical Knowledge Summaries (2009 年 6 月))，其中有 20 種可累及生殖道。HPV感染的表現(xiàn)和外觀可以視感染部位的不同而異。例如，跖疣常發(fā)生在受壓區(qū)域且是扁平而非隆起的。疣最常見于兒童并通過直接接觸或自身接種傳播；它可能需要多達(dá)12個月才會有疣出現(xiàn)。HPV疣與免疫抑制相關(guān)時更常見更棘手，并且當(dāng)它們?yōu)闈竦臅r或當(dāng)它們因創(chuàng)傷(例如刮擦)出血時更有傳染性。HPV感染在成年人中比在兒童中更加持久。因此，在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物經(jīng)局部給予以治療HPV感染或與HPV感染相關(guān)的疣或瘊(例如在皮膚上給予)。在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物是在疣或瘊的部位或靠近疣或瘊的部位給予(其中所述疣或瘊是由HPV引起的或與HPV相關(guān)的)。在有些實(shí)施方案中，通過給予本文描述的組合物治療患有HPV感染或由其引起的或與其相關(guān)的疾病的對象導(dǎo)致產(chǎn)生下述效果中的一種或多種:HPV感染的癥狀(例如，疣、瘊或本文描述的或本領(lǐng)域已知的HPV感染的任何其它癥狀)的嚴(yán)重程度和/或持續(xù)時間降低；與HPV感染相關(guān)的癥狀數(shù)量減少；與HPV感染癥狀相關(guān)的疼痛減輕；防止HPV感染癥狀的復(fù)發(fā)或減少其復(fù)發(fā)的頻率；防止HPV感染從一個對象傳播到另一個對象；防止HPV感染癥狀的發(fā)作或發(fā)展；和/或在對象中另一種療法的預(yù)防或治療效果被增強(qiáng)或改善。在特別的實(shí)施方案中，將本文描述的組合物給予患有HPV感染或已有HPV感染的癥狀的人類嬰兒、人類幼兒、人類兒童、人類成年人和/或老年人。在多個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物可以每天給予(例如每日一次或兩次)直到HPV感染的癥狀消退(例如持續(xù)2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12天、2周、3周、4周或超過4周)。
[0158]在另一個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于預(yù)防和/或治療羊痘。羊痘局限于綿羊和山羊(參見Orf, Health Protection Agency (2010))。它是由副痘病毒引起的，主要感染羊羔和山羊，互相接觸感染(或者可能來自病毒在牧場上的長期存在)。人損害是由被感染材料的直接接種引起的。它可以發(fā)生在農(nóng)場人員、肉販、獸醫(yī)、人工喂羊奶的兒童，可能甚至在綿羊被放牧的牧場上玩耍的小孩中。副痘病毒的潛伏期為5或6天。羊痘損害通常是孤立性的，但多發(fā)性損害確實(shí)會發(fā)生。羊痘損害通常是小的、堅硬的紅色或紅藍(lán)色，形成腫塊，增大后形成頂上扁平，帶血絲的膿皰或水皰。發(fā)育完全的損害通常直徑為2或3cm，但可能大到5cm ;和雖然在白色皮膚下似乎可見有膿，切開將揭示位于其下的堅硬紅色組織。損害在早期有時是刺激性的并經(jīng)常有觸痛。它們常常發(fā)生在指、手或前臂，但也可能會發(fā)生在面部。紅色淋巴系可發(fā)生在肘內(nèi)側(cè)直到腋窩處?？赡軙信c羊痘相關(guān)的低熱。因此，在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物經(jīng)局部給予以治療羊痘(例如在皮膚上給予)。在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物是在損害、膿皰或水皰的部位或靠近損害、膿皰或水皰的部位給予(其中所述損害、膿皰或水皰是由羊痘引起的或與羊痘相關(guān)的)。在有些實(shí)施方案中，通過給予本文描述的組合物治療患有羊痘的對象導(dǎo)致產(chǎn)生下述效果中的一種或多種:羊痘的癥狀(例如，損害、膿皰、水皰或本文描述的或本領(lǐng)域已知的羊痘的任何其它癥狀)的嚴(yán)重程度和/或持續(xù)時間降低；與羊痘相關(guān)的癥狀數(shù)量減少；與羊痘癥狀相關(guān)的疼痛減輕；防止羊痘癥狀的復(fù)發(fā)或減少其復(fù)發(fā)的頻率；防止羊痘從一個對象傳播到另一個對象；防止羊痘癥狀的發(fā)作或發(fā)展；和/或在對象中另一種療法的預(yù)防或治療效果被增強(qiáng)或改善。在特別的實(shí)施方案中，將本文描述的組合物給予患有羊痘或已有羊痘的癥狀的人類嬰兒、人類幼兒、人類兒童、人類成年人和/或老年人。在多個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物可以每天給予(例如每日一次或兩次)直到羊痘的癥狀消退(例如持續(xù)
2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12 天、2 周、3 周、4 周或超過 4 周)。
[0159]在某些實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于治療產(chǎn)生皮疹的病毒感染。產(chǎn)生皮疹的病毒感染的實(shí)例包括但不限于麻疹(麻疹病毒)、德國麻疹(風(fēng)疹病毒)、雞痘(水痘病毒)、五號病(傳染性紅斑，由于細(xì)小病毒所致)、玫瑰疹(幼兒紅斑急疹(erythemasubitum)，由于皰疫病毒6型所致)、玫瑰糠疫(原因未知，但它可能由皰疫病毒6型和7型引起的)、?？刹《?echovirus)和腺病毒感染、傳染性單核細(xì)胞增多癥或腺熱的EB病毒(Epstein Barr virus)和原發(fā)性HIV感染。在某些實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于治療與病毒感染相關(guān)的非特異性皮疫(例如紅色皮疫，例如紅斑疫(erythematous blotchyeruption))。在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物是在由病毒感染引起的或與病毒感染相關(guān)的皮疹的部位，或靠近由病毒感染引起的或與病毒感染相關(guān)的皮疹的部位給予。在某些實(shí)施方案中，本文描述的組合物降低由病毒感染引起的皮疹的嚴(yán)重程度、所述皮疹的持續(xù)時間和/或與所述皮疹相關(guān)的疼痛。[0160]在另一個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于預(yù)防和/或治療由柯薩奇病毒(Coxsackie virus)或腸道病毒(enterovirus)引起的手足口病或感染。手足口病是常見的，輕微和短暫的，最常在夏天幾個月內(nèi)累及幼童(參見，Hand, foot and mouthdisease, Clinical Knowledge Summaries (2010 年 3 月))。手足口病是由柯薩奇病毒 A16引起的，雖然它也可以由于腸道病毒71導(dǎo)致。這類病毒的潛伏期為3-5天。手足口病的癥狀包括在手和腳上的小扁平水皰、口腔潰瘍，有時有疼痛，該病可能伴有低熱或屁股上出疹子(在幼童中)。因此，在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物經(jīng)局部給予以治療由柯薩奇病毒或腸道病毒感染引起的或與柯薩奇病毒或腸道病毒感染相關(guān)的手足口疾病或病癥(例如在皮膚上給予)。在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物是在水皰、潰瘍或皮疹的部位，或靠近水皰、潰瘍或皮疹的部位給予(其中所述水皰、潰瘍或皮疹是與由柯薩奇病毒或腸道病毒感染引起的或與柯薩奇病毒或腸道病毒感染相關(guān)的手足口疾病或病癥相關(guān)的)。在有些實(shí)施方案中，通過給予本文描述的組合物治療患有手足口病的對象導(dǎo)致產(chǎn)生下述效果中的一種或多種:手足口病的癥狀(例如，皮疹、水皰、潰瘍或本文描述的或本領(lǐng)域已知的手足口病的任何其它癥狀)的嚴(yán)重程度和/或持續(xù)時間降低；手足口病的癥狀數(shù)量減少；與手足口病癥狀相關(guān)的疼痛減輕；防止手足口病癥狀的復(fù)發(fā)或減少其復(fù)發(fā)的頻率；防止手足口病從一個對象傳播到另一個對象；防止手足口病癥狀的發(fā)作或發(fā)展；和/或在對象中另一種療法的預(yù)防或治療效果被增強(qiáng)或改善。在特別的實(shí)施方案中，將本文描述的組合物給予患有手足口病或已有手足口病的癥狀的人類嬰兒、人類幼兒、人類兒童、人類成年人和/或老年人。在多個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物可以每天給予(例如每日一次或兩次)直到手足口病的癥狀消退(例如持續(xù)2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12天、2周、3周、4周或超過4周)。
[0161]在另一個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于預(yù)防和/或治療Crost1-Gianotti綜合 征。Crost1-Gianotti綜合征是皮膚對具有丘疫性皮疫的病毒感染的一種反應(yīng)，持續(xù)數(shù)周。該病癥也被稱為兒童丘疫性水皰性肢端皮炎、兒童丘疫性肢端皮炎和嬰兒肢端皮炎性丘疹。Crost1-Gianotti綜合征可由乙型肝炎病毒、EB病毒、柯薩奇病毒、埃可病毒或呼吸道合胞病毒引起。它累及6到12個月之間的兒童。在這種病癥中，暗紅斑點(diǎn)的大量出疫(profuse eruption)可在3或4天內(nèi)發(fā)生。它們通常首先出現(xiàn)在大腿和臀部，然后出現(xiàn)在雙臂外側(cè)，最后出現(xiàn)在面部，經(jīng)常以不對稱圖式出現(xiàn)(參見Chuh, Cutis68 (3): 207-13 (2001))。這些斑點(diǎn)直徑可為5_10mm，可具有深紅顏色或紫顏色(尤其是在腿部，由于血液從毛細(xì)血管滲漏所致)并可發(fā)展成充滿液體的水皰。因此，在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物經(jīng)局部給予以治療Crost1-Gianotti綜合征(例如在皮膚上給予)。在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物是在紅斑點(diǎn)、出疹或皮疹的部位，或靠近紅斑點(diǎn)、出疹或皮疹的部位給予(其中所述紅斑點(diǎn)、出疹或皮疹是與由乙型肝炎病毒、EB病毒、柯薩奇病毒、?？刹《净蚝粑篮习《疽鸬腃rost1-Gianotti綜合征或感染相關(guān)的)。在有些實(shí)施方案中，通過給予本文描述的組合物治療患有Crost1-Gianotti綜合征的對象導(dǎo)致產(chǎn)生下述效果中的一種或多種:Crost1-Gianotti綜合征的癥狀(例如紅斑點(diǎn)、出疫、皮疫或本文描述的或本領(lǐng)域已知的Crost1-Gianotti綜合征的任何其它癥狀)的嚴(yán)重程度和/或持續(xù)時間降低；與Crost1-Gianotti綜合征相關(guān)的癥狀數(shù)量減少；與Crost1-Gianotti綜合征癥狀相關(guān)的疼痛減輕；防止Crost1-Gianotti綜合征癥狀的復(fù)發(fā)或減少其復(fù)發(fā)的頻率；防止Crost1-Gianotti綜合征從一個對象傳播到另一個對象；防止Crost1-Gianotti癥狀的發(fā)作或發(fā)展；和/或在對象中另一種療法的預(yù)防或治療效果被增強(qiáng)或改善。在特別的實(shí)施方案中，將本文描述的組合物給予患有Crost1-Gianotti綜合征或其癥狀的人類嬰兒(特別是，給予年齡介于6和12個月之間的嬰兒)、人類幼兒、人類兒童、人類成年人和/或老年人。在多個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物可以每天給予(例如每日一次或兩次)直到Crost1-Gianotti綜合征的癥狀消退(例如持續(xù)2、3、4、5、6、
7、8、9、10、11、12天、2周、3周、4周或超過4周)。
[0162]在另一個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于預(yù)防和/或治療斗士皰疫(herpes gladiatorum)或“膿皰痘(scrum pox)”。斗士皰疫主要通過皮膚與皮膚直接接觸傳播的并且擦傷處可產(chǎn)生進(jìn)入口(參見Becker等，Am J SportsMed.16(6):665-9(1988))。斗士皰疹所致的多數(shù)損害發(fā)生在頭或面部，然后是軀干和四肢。斗士皰疹的癥狀包括但不限于先兆性瘙癢或燒灼感，可能隨之而來的是紅斑基質(zhì)上的成簇囊皰，瘡痂愈合大約在I~2周內(nèi)。斗士皰疹的其它不常見的癥狀包括但不限于頭痛、不適、咽喉腫痛和發(fā)熱。復(fù)發(fā)性發(fā)作可能跟在初始感染后。準(zhǔn)確的診斷可通過病毒免疫熒光做出，并通過輕輕刺破完整囊泡并用拭子尖沿?fù)p害基部用力磨擦來獲取培養(yǎng)物。因此，在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物經(jīng)局部給予以治療斗士皰疹感染(例如在皮膚上給予)。在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物是在瘙癢、損害、囊泡或瘡痂的部位，或靠近瘙癢、損害、囊泡或瘡痂的部位給予(其中瘙癢、損害、囊泡或瘡痂的部位是由斗士皰疹感染引起的或與斗士皰疹感染相關(guān)的)。在某些實(shí)施方案中，在斗士皰疹感染的治療中，本文描述的組合物聯(lián)合抗病毒藥物(例如阿昔洛韋或本文描述的或本領(lǐng)域已知的任何其它抗病毒藥物)給予。在有些實(shí)施方案中，通過給予本文描述的組合物治療患有斗士皰疹的對象導(dǎo)致產(chǎn)生下述效果中的一種或多種:斗士皰疹的癥狀(例如瘙癢、損害、囊泡、瘡痂或本文描述的或本領(lǐng)域已知的HPV感染的任何其它癥狀)的嚴(yán)重程度和/或持續(xù)時間降低；與斗士皰疹相關(guān)的癥狀數(shù)量減少；與斗士 抱疫的癥狀相關(guān)的疼痛減輕；防止斗士抱疫癥狀的復(fù)發(fā)；防止斗士皰疹從一個對象傳播到另一個對象；防止斗士皰疹的癥狀的發(fā)作或發(fā)展；和/或在對象中另一種療法的預(yù)防或治療效果被增強(qiáng)或改善。在特別的實(shí)施方案中，將本文描述的組合物給予患有斗士皰疹或已有斗士皰疹的癥狀的人類嬰兒、人類幼兒、人類兒童、人類成年人和/或老年人。在多個具體的實(shí)施方案中，將本文描述的組合物給予運(yùn)動員(例如職業(yè)運(yùn)動員)用于預(yù)防和/或治療目的。在多個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物可以每天給予(例如每日一次或兩次)直到斗士皰疹感染的癥狀消退(例如持續(xù)2、3、4、5、6、7、8、
9、10、11、12天、2周、3周、4周或超過4周)。
[0163]在另一個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于預(yù)防和/或治療與病毒感染相關(guān)的尋常疣(例如跖疣、胼胝(calluses)中的疣)。在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物是在由病毒感染引起的或與病毒感染相關(guān)的疣的部位或靠近由病毒感染引起的或與病毒感染相關(guān)的疣的部位給予。在某些實(shí)施方案中，本文描述的組合物降低疣的數(shù)量、疣的嚴(yán)重程度、疣的持續(xù)時間和/或與疣相關(guān)的疼痛，所述疣是由病毒感染引起的。
[0164]在某些實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于預(yù)防和/或治療免疫受損(immunocompromised)患者(例如感染HIV的患者)的病毒感染。
[0165]在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于治療胃腸炎(例如由病毒感染引起的或與病毒感染相關(guān)的胃腸炎，或由原生動物感染引起的或與原生動物感染相關(guān)的胃腸炎)?？梢鹞改c炎的病毒的實(shí)例包括但不限于輪狀病毒(rotavirus)、諾瓦病毒(Noravirus)、腺病毒(adenovirus)和星狀病毒(astrovirus)?？梢鹞改c炎的原生動物的實(shí)例包括但不限于蘭氏賈第鞭毛蟲(Giardia Iamblia)、隱孢子蟲(Cryptosporidium)和溶組織內(nèi)阿米巴(Entamoeba histolytica)。在一個實(shí)施方案中，本文描述的組合物是通過直腸(例如作為乳膏劑或栓劑)給予以治療胃腸炎。在某些實(shí)施方案中，通過給予本文描述的組合物治療患有胃腸炎的對象導(dǎo)致產(chǎn)生下述效果中的一種或多種:防止胃腸炎的復(fù)發(fā)；與胃腸炎相關(guān)的一個或多個癥狀的持續(xù)時間和/或嚴(yán)重程度降低；與胃腸炎相關(guān)的癥狀數(shù)量減少；對象住院的發(fā)生率減少；對象的住院長度減少；和/或在對象中另一種療法的預(yù)防或治療效果被增強(qiáng)或改善。 [0166]在另一個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于預(yù)防和/或治療真菌感染或由其引起的或與其相關(guān)的疾病。不受任何作用機(jī)制的束縛，sNAG納米纖維誘導(dǎo)@防御素(例如(6-防御素I)的能力可對所述sNAG納米纖維的抗真菌活性作出貢獻(xiàn)。已經(jīng)表明，P防御素(例如(6-防御素I)具有抗真菌活性?？捎帽疚拿枋龅慕M合物預(yù)防和/或治療的可引起感染或疾病的示例性真菌包括但不限于芽生菌屬(Blastomyces)、副球抱子菌屬(Paracoccidiodes)、抱子絲菌屬(Sporothrix)、隱球菌屬(Cryptococcus)、念珠菌屬(Candida)、曲霉屬(Aspergillus)、組織胞衆(zhòng)菌屬(Histoplasma)、隱球菌屬(Cryptococcus)、雙極霉屬(Bipolaris)、枝孢瓶霉屬(Cladophialophora)、枝孢屬(Cladosporium)、德氏霉屬(Drechslera)、外瓶霉屬(Exophiala)、著色霉屬(Fonsecaea)、瓶霉屬(Phialophora)、木絲霉屬(Xylohypha)、赭霉屬(Ochroconis)、鼻毛癬菌屬(Rhinocladiella)、線狀擔(dān)子菌屬(Scolecobasidium)和萬吉拉菌屬(Wangiella)。在某些實(shí)施方案中，通過給予本文描述的組合物預(yù)防對象的真菌感染或由其引起的或與其相關(guān)的疾病導(dǎo)致產(chǎn)生下述效果中的一種或多種:防止由真菌感染引起的或與真菌感染相關(guān)的疾病的發(fā)展或發(fā)作；和/或防止真菌感染或由其引起的或與其相關(guān)的疾病從一個對象傳播到另一個對象或?qū)ο笕后w。在某些實(shí)施方案中，通過給予本文描述的組合物治療患有真菌感染或由其引起的或與其相關(guān)的疾病的對象導(dǎo)致產(chǎn)生下述效果中的一種或多種:防止真菌感染或由其引起的或與其相關(guān)的疾病的復(fù)發(fā)；與真菌感染或由其引起的或與其相關(guān)的疾病相關(guān)的癥狀數(shù)量減少；與真菌感染或由其引起的或與其相關(guān)的疾病相關(guān)的器官衰竭減少；真菌感染或由其引起的或與其相關(guān)的疾病的持續(xù)時間和/或嚴(yán)重程度降低；真菌感染或由其引起的或與其相關(guān)的疾病的一個或多個癥狀的持續(xù)時間和/或嚴(yán)重程度降低；真菌細(xì)胞計數(shù)減少；對象住院的發(fā)生率減少；對象的住院長度減少；對象的生存期增加；在對象中另一種療法的預(yù)防或治療效果被增強(qiáng)或改善；防止真菌從對象的一個細(xì)胞、組織、器官傳播到對象的另一個細(xì)胞、組織、器官；防止由真菌感染引起的或與真菌感染相關(guān)的疾病或其一個或多個癥狀的發(fā)展或發(fā)作；和/或防止真菌感染或由其引起的或與其相關(guān)的疾病從一個對象傳播到另一個對象或?qū)ο笕后w。
[0167]具有約克瘙癢(Jock itch)的真菌感染癥狀可包括腹股溝中的瘙癢和/或紅色鱗屑性皮疫。香港腳(athlete’ s foot)的癥狀可包括起鱗屑(scaling)、皮膚的剝落、腳癢和/或帶有黃色的腳趾甲。陰道感染的癥狀可包括瘙癢和刺激性、排尿燒灼感和/或粘稠的陰道分泌物。真菌性胃腸炎的癥狀可包括嘔吐和/或腹瀉。肺部的真菌感染的癥狀可包括發(fā)熱、咳嗽和/或肺炎癥狀?？谇唤湍感愿腥?鵝口瘡、念珠菌病)的癥狀可包括在口腔或舌頭上的黃白色斑塊病變/疼痛。生殖器(例如陰道、外陰、陰莖)的念珠菌病的癥狀包括瘙癢、燒灼感、腫痛、刺激性和/或分泌物。在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物預(yù)防以上列舉的癥狀中的一個或多個或本領(lǐng)域已知的其它癥狀的發(fā)作或發(fā)展，或降低這些癥狀中的一個或多個的持續(xù)時間和/或嚴(yán)重程度。
[0168]在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于預(yù)防和/或治療香港腳(Athlete’ sfoot)、約克瘙癢(jock itch)、金錢癬(ringworm)或指(趾)甲、頭皮或毛發(fā)的真菌感染。這些真菌感染可引起發(fā)紅、脫皮、起水皰和皮膚起鱗屑、瘙癢、受累指(趾)甲的畸變和脆變和/或毛發(fā)焦枯。它們是由皮膚真菌引起的，皮膚真菌是一組真菌，包括毛癬菌屬(Trichophyton)、小抱子菌屬(Microsporum)和表皮癖菌屬(Epidermophyton)的菌種(species)。皮膚真菌以角質(zhì)為食，罕見穿透進(jìn)入皮下。香港腳(足癬)存在于腳趾間，有時覆蓋整個腳底。約克瘙癢(股癬)可從腹股溝延伸到大腿內(nèi)側(cè)。頭皮或毛發(fā)感染(頭癬)累及毛干，主要在兒童中。指甲或趾甲感染(甲癬)典型地累及趾甲，但也可以累及指甲。身體的金錢癬(體癬)可存在于身體的任何地方。巴伯瘙癢(Barber’s itch)(須癬)累及臉上有胡子的部位。在特別的實(shí)施方案中，本文描述的組合物經(jīng)局部給予以治療任何以上列舉的真菌感染(例如香港腳、約克瘙癢，甲、頭皮或毛發(fā)感染)。在一個實(shí)施方案中，本文描述的組合物是在發(fā)紅、脫皮、起水皰或皮膚起鱗屑或瘙癢、指(趾)甲的畸變或脆變的部位或靠近它們的部位給予(其中這樣的癥狀是與真菌感染相關(guān)的)。在有些實(shí)施方案中，通過給予本文描述的組合物治療患有以上列舉的真菌感染之一的對象導(dǎo)致產(chǎn)生下述效果中的一種或多種:真菌感染的癥狀(例如瘙癢、發(fā)紅、脫皮、起水皰或本文描述的或本領(lǐng)域已知的真菌感染的任何其它癥狀)的嚴(yán)重程度和/或持續(xù)時間降低；真菌感染的癥狀數(shù)量減少；與真菌感染癥狀相關(guān)的疼痛減輕；防止真菌感染癥狀的復(fù)發(fā)；防止真菌感染從一個對象傳播到另一個對象；防止真菌感染癥狀的發(fā)作或發(fā)展；和/或在對象中另一種療法(例如抗真菌療法)的預(yù)防或治療效果被增強(qiáng)或改善。在特別的實(shí)施方案中，將本文描述的組合物給予患有以上列舉的真菌感染或其癥狀之一的人類嬰兒、人類幼兒、人類兒童、人類成年人和/或老年人。在多個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物可以每天給予(例如每日一次或兩次)直到真菌感染的癥狀消退(例如持續(xù)2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12天、2周、3周、4周或超過4周)。
[0169]在有些實(shí)施方案中， 本文描述的組合物用于預(yù)防和/或治療孢子絲菌病(Sporotrichosis)。抱子絲菌病是一種由真菌申克抱子絲菌(Sporothrix schenckii)(它不是一種皮膚真菌)引起的病癥。它是皮膚和皮下組織的一種感染，皮膚和皮下組織已經(jīng)被這種真菌在正常情況下定居的多刺植物、松針和泥炭蘚刺破了或擦傷了。在特別的實(shí)施方案中，本文描述的組合物經(jīng)局部給予以治療孢子絲菌病(Aporotrichosis)。在一個實(shí)施方案中，本文描述的組合物是在孢子絲菌病感染的部位，或靠近孢子絲菌病感染的部位給予。在有些實(shí)施方案中，通過給予本文描述的組合物治療患有孢子絲菌病的對象導(dǎo)致產(chǎn)生下述效果中的一種或多種:孢子絲菌病的癥狀的嚴(yán)重程度和/或持續(xù)時間降低、孢子絲菌病的癥狀數(shù)量減少；與孢子絲菌病癥狀相關(guān)的疼痛減輕；防止孢子絲菌病癥狀的復(fù)發(fā)或減少其復(fù)發(fā)的頻率；防止孢子絲菌病從一個對象傳播到另一個對象；防止孢子絲菌病癥狀的發(fā)作或發(fā)展；和/或在對象中另一種療法(例如抗真菌療法)的預(yù)防或治療效果被增強(qiáng)或改善。在多個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物可以每天給予(例如每日一次或兩次)直到孢子絲菌病的癥狀消退(例如持續(xù)2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12天、2周、3周、4周或超過4周)。
[0170]在另一個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于預(yù)防和/或治療傷口(例如開放性傷口，例如切口、撕裂傷、穿透傷、擦傷或燒傷)的真菌感染。在另一個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物不用于預(yù)防和/或治療傷口的真菌感染。
[0171]在另一個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于預(yù)防和/或治療酵母感染或由其引起的或與其相關(guān)的疾病。不受任何作用機(jī)制的束縛，sNAG納米纖維誘導(dǎo)P防御素的能力可對所述sNAG納米纖維的抗酵母活性作出貢獻(xiàn)。已經(jīng)表明，P防御素具有抗酵母活性?？梢鹩帽疚拿枋龅慕M合物預(yù)防和/或治療的感染或疾病的示例性酵母包括但不限于芽抱酵母屬(Aciculoconidium)、Botryoascus、酒香酵母屬(Brettanomyces)、布勒擲抱酵母屬(Bullera)、Bulleromyces、念珠菌屬(Candida)、固囊酵母屬(Citeromyces)、棍抱屬(Clavispora)、隱球菌屬(Cryptococcus)、Cystofilobasidium^ Debaromyces^德巴利酵母屬(Debaryomyces)、德克酵母屬(Dekkera)、雙足囊菌屬(Dipodascus)、內(nèi)抱霉屬(Endomyces)、擬內(nèi)抱霉屬(Endomycopsis)、擔(dān)抱酵母屬(Erythrobasidium)、Fellomyces^ 網(wǎng)抱菌屬(Filobasidium)、小季酵母屬(Guilliermondella)、有抱漢遜酵母屬(Hanseniaspora)、漢遜酵母屬(Hansenula)、Hasegawaea、生絲畢赤酵母屬(Hyphopichia)、伊薩酵母屬(Issatchenkia)、克勒克酵母屬(Kloeckera)、克魯維酵母屬(Kluyveromyces)、Komagataella^ 白冬抱酵母屬(Leucosporidium)、油脂酵母屬(Lipomyces)、洛德酵母屬(1dderomyces)、馬拉色霉菌屬一鞭毛菌屬(Malassezia-Mastigom yces)、梅奇酵母屬(Metschnikowia)、木拉克酵母屬(Mrakia)、拿遜酵母屬(Nadsonia)、八抱酵母屬(Octosporomyces)、卵抱酵母屬(Oosporidium)、管囊酵母屬(Pachysolen)、Petasospora、法夫酵母屬(Phaffia)、畢赤酵母屬(Pichia)、Pseudozyma^ 紅冬抱酵母屬(Rhodosporidium)、紅酵母屬(Rhodotorula)、酵母屬(Saccharomyces)、類酵母屬(Saccharomycodes)、復(fù)膜抱酵母屬(Saccharomycopsis)、裂芽酵母抱子菌屬(Schizoblastosporion)、裂殖酵母屬(Schizosaccharomyces)、許旺酵母屬(Schwanniomyces)、新月酵母屬(Selenotila)、鏈擔(dān)耳屬(Sirobasidium)、鎖擲酵母屬(Sporidiobolus)、擲抱酵母屬(Sporobolomyces)、射盾子囊霉屬(Stephanoascus)、梗抱酵母屬(Sterigmatomyces)、Syringospora、有抱圓酵母屬(Torulaspora)、球擬酵母屬(Torulopsis)、Tremelloid、毛抱子菌屬(Trichosporon)、三角酵母屬(Trigonopsis)、Udeniomyces^ Waltomyces、威克酵母屬(Wickerhamia)、擬威爾酵母屬(Williopsis)、溫酵母屬(Wingea)、西洋蓍霉屬(Yarrowia)、接合腎孢酵母屬(Zygofabospora)、接合油脂酵母屬(Zygolipomyces)或接合酵母屬(Zygosaccharomyces)。在某些實(shí)施方案中，通過給予本文描述的組合物預(yù)防對象的酵母感染或由其引起的或與其相關(guān)的疾病導(dǎo)致產(chǎn)生下述效果中的一種或多種:防止由酵母感染引起的或與酵母感染相關(guān)的疾病的發(fā)展或發(fā)作；和/或防止酵母感染或由其引起的或與其相關(guān)的疾病從一個對象傳播到另一個對象或?qū)ο笕后w。在某些實(shí)施方案中，通過給予本文描述的組合物治療患有酵母感染或由其引起的或與其相關(guān)的疾病的對象導(dǎo)致產(chǎn)生下述效果中的一種或多種:防止酵母感染或由其引起的或與其相關(guān)的疾病的復(fù)發(fā)；與酵母感染或由其引起的或與其相關(guān)的疾病相關(guān)的癥狀數(shù)量減少；與酵母感染或由其引起的或與其相關(guān)的疾病相關(guān)的器官衰竭減少；酵母感染或由其引起的或與其相關(guān)的疾病的持續(xù)時間和/或嚴(yán)重程度降低；酵母感染或由其引起的或與其相關(guān)的疾病的一個或多個癥狀的持續(xù)時間和/或嚴(yán)重程度降低；酵母細(xì)胞計數(shù)減少；對象住院的發(fā)生率減少；對象的住院長度減少；對象的生存期增加；在對象中另一種療法的預(yù)防或治療效果被增強(qiáng)或改善；防止酵母從對象的一個細(xì)胞、組織、器官傳播到對象的另一個細(xì)胞、組織、器官；防止由酵母感染引起的或與酵母感染相關(guān)的疾病或其一個或多個癥狀的發(fā)展或發(fā)作；和/或防止酵母感染或由其引起的或與其相關(guān)的疾病從一個對象傳播到另一個對象或?qū)ο笕后w。
[0172]在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于預(yù)防和/或治療念珠菌病。念珠菌病是一種常見的酵母感染，主要是由白色念珠菌(Candida albicans)和念珠菌屬的其它菌種的生長過度所致，它們是正常菌群(flora)的組成部分。在口腔中，念珠菌病引起發(fā)紅和白斑，稱為“鵝口瘡”。在兒童中，念珠菌屬可引起尿布皮疹。在婦女中，它可引起生殖器瘙癢和陰道分泌物，稱之為“酵母感染”。念珠菌病也可引起各種各樣的其它感染，包括指(趾)甲感染并可變成全身性的-尤其是在免疫受損的那些患者中。目前，在美國，它是排在第四位的最常引起醫(yī)院獲得性敗血癥的原因。在特別的實(shí)施方案中，本文描述的組合物經(jīng)局部給予以治療念珠菌病(例如經(jīng)局部給予皮膚或局部給予生殖器區(qū)域，例如陰道內(nèi))。在一個實(shí)施方案中，本文描述的組合物是在發(fā)紅、白斑或生殖器瘙癢的部位，或靠近發(fā)紅、白斑或生殖器瘙癢的部位給予(其中這樣的癥狀是與念珠菌病相關(guān)的)。在有些實(shí)施方案中，通過給予本文描述的組合物治療患有念珠菌病的對象導(dǎo)致產(chǎn)生下述效果中的一種或多種:念珠菌病的癥狀的嚴(yán)重程度和/或持續(xù)時間降低、念珠菌病的癥狀數(shù)量減少；與念珠菌病的癥狀相關(guān)的疼痛減輕；防止念珠菌病的癥狀的復(fù)發(fā)或減少其復(fù)發(fā)的頻率；防止念珠菌病從一個對象傳播到另一個對象；防止念珠菌病癥狀的發(fā)作或發(fā)展；和/或在對象中另一種療法(例如抗酵母療法)的預(yù)防或治療效果被增強(qiáng)或改善。在多個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物可以每天 給予(例如每日一次或兩次)直到念珠菌屬感染的癥狀消退(例如持續(xù) 2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12 天、2 周、3 周、4 周或超過 4 周)。
[0173]在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于預(yù)防和/或治療花斑癬(Tineaversicolor)。花斑癬的癥狀包括但不限于皮膚上的五彩斑或損害。它是青年人中常見的一種病癥。在特別的實(shí)施方案中，本文描述的組合物經(jīng)局部給予以治療花斑癬。在一個實(shí)施方案中，本文描述的組合物是在花斑癬感染的部位，或靠近花斑癬感染的部位給予。在有些實(shí)施方案中，通過給予本文描述的組合物治療患有花斑癬的對象導(dǎo)致產(chǎn)生下述效果中的一種或多種:花斑癬的癥狀的嚴(yán)重程度和/或持續(xù)時間降低、花斑癬的癥狀數(shù)量減少;與花斑癬的癥狀相關(guān)的疼痛減輕；防止花斑癬癥狀的復(fù)發(fā)或減少其復(fù)發(fā)的頻率；防止花斑癬從一個對象傳播到另一個對象；防止花斑癬癥狀的發(fā)作或發(fā)展；和/或在對象中另一種療法(例如抗酵母療法)的預(yù)防或治療效果被增強(qiáng)或改善。在多個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物可以每天給予(例如每日一次或兩次)直到花斑癬感染的癥狀消退(例如持續(xù)
2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12 天、2 周、3 周、4 周或超過 4 周)。
[0174]在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于預(yù)防和/或治療骨髓炎。骨髓炎是骨或骨髓的一種感染，它可由細(xì)菌或真菌引起。骨髓炎可基于放射學(xué)結(jié)果顯示有硬化癥環(huán)的溶解中心來診斷，材料的培養(yǎng)物可取自骨活檢樣品以鑒定出具體的病原體。因此，在有些實(shí)施方案中，將本文描述的組合物給予患有(例如被診斷患有)骨髓炎的患者以治療骨髓炎。在多個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于治療由真菌感染引起的骨髓炎。在一個特別的實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于治療感染，其中所述感染不是由細(xì)菌引起的。又在其它的實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于治療由任何感染(包括但不限于細(xì)菌感染)引起的骨髓炎。在多個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物(compostions)在患者手術(shù)后經(jīng)局部給予其組織的表面(例如給予骨的表面或靠近骨的表面)。例如，本文描述的組合物可以給予膝關(guān)節(jié)置換手術(shù)后的膝關(guān)節(jié)區(qū)域、髖關(guān)節(jié)置換手術(shù)后的髖關(guān)節(jié)區(qū)域或肘關(guān)節(jié)置換手術(shù)后的肘關(guān)節(jié)區(qū)域。在某些實(shí)施方案中，通過給予本文描述的組合物治療患有骨髓炎的對象導(dǎo)致產(chǎn)生下述效果中的一種或多種:與骨髓炎相關(guān)的一個或多個癥狀(例如疼痛、炎癥)的持續(xù)時間和/或嚴(yán)重程度降低；與骨髓炎相關(guān)的癥狀數(shù)量減少；防止骨髓炎的復(fù)發(fā)或減少其復(fù)發(fā)的頻率；對象住院的發(fā)生率減少；對象的住院長度減少；和/或在對象中另一種療法的預(yù)防或治療效果被增強(qiáng)或改善。
[0175]在另一個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于預(yù)防和/或治療傷口(例如開放性傷口，例如切口、撕裂傷、穿透傷、擦傷或燒傷)的酵母感染。在另一個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物不用于預(yù)防和/或治療傷口的酵母感染。
[0176]在多個具體的實(shí)施方案中，使用本文描述的sNAG組合物治療病毒感染、真菌感染或酵母感染(例如本文描述的任何病毒性、真菌性或酵母性感染)的對象不具有細(xì)菌感染。在其它的實(shí)施方案中，使用本文描述的sNAG組合物治療病毒性、真菌性或酵母性感染(例如本文描述的任何病毒性、真菌性或酵母性感染)的對象既具有細(xì)菌性感染又具有病毒性、真菌性或酵母性感染。在有些實(shí)施方案中，這樣的感染是在對象生物體的同一個位置。在其它的實(shí)施方案中，這樣的感染是在對象生物體的不同位置。
[0177]在某些實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于治療皮膚病。不受任何作用機(jī)制的束縛，在皮膚病的治療中， sNAG納米纖維誘導(dǎo)P防御素的能力可對所述sNAG納米纖維的活性作出貢獻(xiàn)。已經(jīng)表明，^防御素在皮膚病中具有活性。在一個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于治療皮炎(例如特應(yīng)性皮炎)。在一個具體的實(shí)施方案中，所述組合物用于預(yù)防和/或治療早產(chǎn)的人類嬰兒、人類嬰兒、人類幼兒或人類兒童的特應(yīng)性皮炎。在另一個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物用于治療銀屑病(例如尋常銀屑病、銀屑病性紅皮病、膿皰性銀屑病、指(趾)甲銀屑病或滴狀銀屑病)。在一個具體的實(shí)施方案中，所述組合物用于治療早產(chǎn)的人類嬰兒、人類嬰兒、人類幼兒或人類兒童的銀屑病。在某些實(shí)施方案中，通過給予本文描述的組合物治療患有皮膚病的對象導(dǎo)致產(chǎn)生下述效果中的一種或多種:防止皮膚病的復(fù)發(fā)；與皮膚病相關(guān)的癥狀數(shù)量減少；與皮膚病相關(guān)的一個或多個癥狀的嚴(yán)重程度或持續(xù)時間降低；對象住院的發(fā)生率減少；對象的住院長度減少；和/或在對象中另一種療法的預(yù)防或治療效果被增強(qiáng)或改善。
[0178]皮炎的癥狀包括但不限于皮疫(例如隆起皮疫(bumpy rash))、水皰、皮膚發(fā)紅、紅腫、瘙癢、皮膚損害、膿血滲出(oozing)和/或瘢痕形成。這樣的癥狀通常出現(xiàn)在頸部、腕部、前臂、腿部或踝部；但也可以出現(xiàn)在生殖器區(qū)域。特應(yīng)性皮炎的常見癥狀包括但不限于干燥、瘙癢和/或紅色皮膚。銀屑病的癥狀包括但不限于斑塊(例如被銀白色鱗狀皮膚覆蓋的發(fā)炎皮膚的凸起區(qū)域)、瘙癢、紅腫、疼痛、膿皰(例如被非傳染性膿充滿的凸塊)、皮膚的光滑發(fā)炎斑塊、小的鱗狀病變和/或指(趾)甲增厚和褪色。在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物預(yù)防以上列舉的癥狀中的一個或多個或本領(lǐng)域已知的其它癥狀的發(fā)作或發(fā)展，或者降低這些癥狀中的一個或多個的持續(xù)時間和/或嚴(yán)重程度。
[0179]在一個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物不用于預(yù)防和/或治療細(xì)菌感染或由其引起的或與其相關(guān)的疾病。在一個實(shí)施方案中，本文描述的組合物不用于預(yù)防和/或治療金黃色葡萄球菌感染或由這種感染引起的或與這種感染相關(guān)的疾病。在另一個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物不用于預(yù)防和/或治療傷口(例如開放性傷口，例如切口、撕裂傷、穿透傷、擦傷或燒傷)的細(xì)菌感染。
[0180]在一個具體的實(shí)施方案中，通過給予本文描述的組合物治療和/或預(yù)防的疾病不是傷口(例如開放性傷口，例如切口、撕裂傷、穿透傷、擦傷或燒傷)。
[0181]5.5患者群體
[0182]在某些實(shí)施方案中,本文描述的組合物可以給予原初對象(naiVe subject)，即沒
有疾病或感染的對象。在一個實(shí)施方案中，將本文描述的組合物給予處于獲得某種疾病或感染危險之中的原初對象。
[0183]在一個實(shí)施方案中，本文描述的sNAG納米纖維組合物可以給予已被診斷出患上疾病或感染的患者。在另一個實(shí)施方案中，本文描述的組合物可以給予表現(xiàn)出疾病或感染的一個或多個癥狀的患者。在某些實(shí)施方案中，在給予本文描述的組合物之前，患者被確診為患上疾病或感染。
[0184]在某些實(shí)施方案中，將本文描述的組合物給予被診斷為患上感染的患者。例如，本文描述的組合物可以給予患者，當(dāng)從該患者獲取的生物學(xué)樣品中檢測出病原體(例如病毒、真菌或酵母)時。在一個實(shí)施方案中，生物學(xué)樣品是從要用本文描述的組合物治療的部位或區(qū)域或要給予本文描述的組合物的區(qū)域獲得的。在一個實(shí)施方案中，用拭子從疑似感染的部位收集細(xì)胞或膿以檢測感染。在另一個實(shí)施方案中，從感染的疑似部位(例如創(chuàng)口)吸出液體以檢測感染。在又一個實(shí)施方案中，進(jìn)行組織活檢以檢測感染。在感染的疑似部位是創(chuàng)口的一個實(shí)施方案中，可進(jìn)行創(chuàng)口組織培養(yǎng)以檢測感染。在另一個實(shí)施方案中，生物學(xué)樣品得自患者的血液、尿液、痰或糞便。在有些實(shí)施方案中，進(jìn)行血檢或尿檢以檢測感染(例如當(dāng)感染被懷疑已擴(kuò)散到血液或其它組織/器官中時)。在有些實(shí)施方案中，所收集的樣品(例如細(xì)胞、組織或體液)使用DNA檢測方法例如PCR測試一種或多種細(xì)菌類型的存在。在其它的實(shí)施方案中，對于感染的實(shí)驗室診斷，可以采用免疫熒光分析、血清學(xué)、培養(yǎng)(例如血液瓊脂培養(yǎng))或本領(lǐng)域已知的和/或?qū)嵺`的任何其它試驗
[0185]在其它的具體實(shí)施方案中，本文描述的組合物可以給予被診斷為患上疾病例如癌癥、IBD、克羅恩病、皮炎、銀屑病或感染(例如病毒性、酵母性或真菌性感染)或表現(xiàn)出它們的一 個或多個癥狀的患者。在某些實(shí)施方案中，在給予本文描述的組合物之前，患者就被診斷為患上疾病(例如所述以上列舉的疾病之一)或表現(xiàn)出疾病的一個或多個癥狀。疾病可通過技術(shù)人員已知的任何方法，包括評估患者的癥狀和/或檢測患者生物學(xué)樣品中的病原體(例如如上所述)做出診斷。在一個實(shí)例中，本文描述的組合物可以給予被主治醫(yī)師或別的職業(yè)醫(yī)師診斷為患上疾病的患者。在另一個實(shí)例中，患者在檢測出疾病的一個或多個癥狀的時候就可以使用本文描述的組合物。
[0186]在某些實(shí)施方案中，將要給予本文描述的組合物的對象是具有一種或多種防御素肽的無表達(dá)或低水平表達(dá)或在編碼一種或多種防御素肽的一個或多個基因中有突變/缺失的對象。在有些實(shí)施方案中，將要給予本文描述的組合物的對象是具有一種或多種a-防御素(例如0￡?41、0￡?418、0￡?43、0￡?44、0￡?45、0￡?八6)、一種或多種 P -防御素(例如，DEFBU DEFB2、DEFB4、DEFB103A、DEFB104A、DEFB105B、DEFB107B、DEFB108B、DEFBl 10,DEFBl 12, DEFB114、DEFBl 18, DEFB119、DEFB123, DEFB124, DEFB125, DEFB126, DEFB127、DEFB128,DEFB129,DEFB131,DEFB136)和 / 或一種或多種 9 _ 防御素(例如 DEFT1P)的無表達(dá)或低水平表達(dá)或以改變的水平表達(dá)的對象。在有些實(shí)施方案中、將要給予本文描述的組合物的對象是 DEFAl、DEFA3、DEFA4、DEFA5、DEFBl、DEFB3、DEFB103A、DEFB104A、DEFB108B、DEFB112、DEFBl 14, DEFB118、DEFBl 19, DEFB123, DEFB124, DEFB125, DEFB126, DEFB128,DEFB129和DEFB131中的一種或多種的無表達(dá)或低水平表達(dá)或以改變的水平表達(dá)的對象。在某些實(shí)施方案中，將要給予本文描述的組合物的對象是具有一種或多種Toll受體(例如，TLR1、TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR6、TLR7、TLR8、TLR9、TLR10、TLR11 和 / 或 TLR12)的無表達(dá)或低水平表達(dá)或以改變的水平表達(dá)的對象。在又一些實(shí)施方案中，將要給予本文描述的組合物的對象是具有 IL-1、CEACAM3、SPAGl1、SIGIRR(ILl 樣受體)、IRAK1、IRAK2、IRAK4、TBKU TRAF6和IKKi中的一種或多種的無表達(dá)或低水平表達(dá)或以改變的水平表達(dá)的對象。在有些實(shí)施方案中，將要給予本文描述的組合物的對象是具有IRAK2、SIGIRR、TLRl、TLR2、TLR4、TLR7、TLR8、TLRlO和TRAF6中的一種或多種的無表達(dá)或低水平表達(dá)或以改變的水平表達(dá)的對象?；虮磉_(dá)的 低水平是比正常表達(dá)水平低(例如低超過1.25倍、1.5倍、2倍、
2.5倍、3倍、3.5倍、4倍、4.5倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍、10倍)的水平?；虮磉_(dá)的改變的水平是與正常表達(dá)水平不同(例如相差超過20%、25%、30%、50%、75%、100%、150%、200%、250%,300%)的水平。其中，一種或多種防御素基因的“正常”表達(dá)是:(i)已知在沒有表現(xiàn)出癥狀或沒有被被診斷為患上待治療的疾病或感染的對象中發(fā)現(xiàn)的平均表達(dá)水平；(ii)在沒有表現(xiàn)出癥狀或沒有被被診斷為患上待治療的疾病或感染的三、五、十、二十、二十五、五十名或更多對象中檢測出的平均表達(dá)水平；和/或(iii)在疾病或感染的發(fā)作之前，在待給予本文描述的組合物的患者中檢測出的表達(dá)水平。
[0187]在某些實(shí)施方案中，將本文描述的組合物給予已被診斷為患上實(shí)體腫瘤癌癥例如骨和結(jié)締組織肉瘤、腦癌、乳癌、卵巢癌、腎癌、胰腺癌、食管癌、胃癌、肺癌(例如小細(xì)胞肺癌(SCLC)、非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)、喉癌和間皮瘤)、肝癌和前列腺癌的患者。在一個具體的實(shí)施方案中，將本文描述的組合物給予已被診斷為患上卡波西肉瘤的患者。
[0188]在某些實(shí)施方案中，將本文描述的組合物給予已被診斷為患上皮膚癌例如黑素瘤、基底細(xì)胞癌和鱗狀細(xì)胞癌的患者。
[0189]在某些實(shí)施方案中，將本文描述的組合物給予患有(例如已被診斷患有)炎癥性腸疾病(例如潰瘍性結(jié)腸炎)或表現(xiàn)出炎癥性腸疾病的一個、兩個或更多個癥狀的患者。
[0190]在某些實(shí)施方案中，將本文描述的組合物給予患有(例如已被診斷患有)克羅恩病(例如回腸性克羅恩病)或表現(xiàn)出克羅恩病的一個或多個癥狀的患者。
[0191]在某些實(shí)施方案中，將本文描述的組合物給予患有(例如已被診斷患有)由病毒引起的疾病或與病毒相關(guān)的感染(例如本文描述的由病毒引起的任何疾病或與病毒相關(guān)的感染)的患者，例如所述患者已經(jīng)被呼吸道合胞病毒(RSV)、流感病毒(甲型流感病毒、乙型流感病毒或丙型流感病毒)、人偏肺病毒(HMPV)、鼻病毒、副流感病毒、SARS冠狀病毒、人免疫缺陷病毒(HIV)、肝炎病毒(甲、乙、丙型)、埃博拉病毒、單純皰疫病毒(例如HSV-1、HSV-2)、風(fēng)疹病毒、重型天花病毒和/或小天花病毒感染。在某些實(shí)施方案中，將本文描述的組合物給予表現(xiàn)出由病毒引起的疾病或與病毒相關(guān)的感染(例如本文描述的由病毒引起的任何疾病或與病毒相關(guān)的感染)的一個、兩個或更多個癥狀的患者。
[0192]在某些實(shí)施方案中，將本文描述的組合物給予具有(例如已被診斷患有)已經(jīng)被病毒感染的傷口(例如開放性傷口，例如切口、撕裂傷、穿透傷、擦傷或燒傷)的患者。在一個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物不給予已被診斷為具有已被病毒感染的傷口的患者。
[0193]在某些實(shí)施方案中，將本文描述的組合物給予患有(例如已被診斷患有)由真菌引起的疾病或與真菌相關(guān)的感染(本文描述的由真菌引起的任何疾病或與真菌相關(guān)的感染)的患者，例如所述患者已經(jīng)被芽生菌屬(Blastomyces)、副球孢子菌屬(Paracoccidiodes)、抱子絲菌屬(Sporothrix)、隱球菌屬(Cryptococcus)、念珠菌屬(Candida)、曲霉屬(Aspergillus)、組織胞衆(zhòng)菌屬(Histoplasma)、隱球菌屬(Cryptococcus)、雙極霉屬(Bipolaris)、枝孢瓶霉屬(Cladophialophora)、枝孢屬(Cladosporium)、德氏霉屬(Drechslera)、外瓶霉屬(Exophiala)、著色霉屬(Fonsecaea)、瓶霉屬(Phialophora)、木絲霉屬(Xylohypha)、赭霉屬(Ochroconis)、鼻毛癬菌屬(Rhinocladiella)、線狀擔(dān)子菌屬(Scolecobasidium)和 / 或萬吉拉菌屬(Wangiella)感染。在某些實(shí)施方案中，將本文描述的組合物給予表現(xiàn)出由真菌引起的疾病或與真菌相關(guān)的感染(例如本文描述的由病毒引起的任何疾病或與真菌相關(guān)的感染)的一個、兩個或更多個癥狀的患者。
[0194]在某些實(shí)施方案中，將本文描述的組合物給予患有(例如已被診斷患有)已經(jīng)被真菌感染的傷口(例如開放性傷口，例如切口、撕裂傷、穿透傷、擦傷或燒傷)的患者。在一個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物不給予已被診斷為具有已被真菌感染的傷口的患者。
[0195]在某些實(shí)施方案中，將本文描述的組合物給予患有(例如已被診斷患有)由酵母引起的疾病或與酵母相關(guān)的感染的患者，例如所述患者已經(jīng)被芽孢酵母屬(Aciculoconidium)、Botryoascus、酒香酵母屬(Brettanomyces)、布勒擲抱酵母屬(Bullera)、Bulleromyces、念珠菌屬(Candida)、固囊酵母屬(Citeromyces)、棍抱屬(Clavispora)、隱球菌屬(Cryptococcus)、Cystofilobasidium、Debaromyces、德巴利酵母屬(Debaryomyces)、德克酵母屬(Dekkera)、雙足囊菌屬(Dipodascus)、內(nèi)抱霉屬(Endomyces)、擬內(nèi)抱霉屬(Endomycopsis)、擔(dān)抱酵母屬(Erythrobasidium)、Fellomyces、網(wǎng)抱菌屬(Filobasidium)、小季酵母屬(Guilliermondella)、有抱漢遜酵母屬(Hanseniaspora)、漢遜酵母屬(Hansenula)、Hasegawaea、生絲畢赤酵母屬(Hyphopichia)、伊薩酵母屬(Issatchenkia)、克勒克酵母屬(Kloeckera)、克魯維酵母屬(Kluyveromyces)、KomagataeIla> 白冬抱酵母屬(Leucosporidium)、油脂酵母屬(Lipomyces)、洛德酵母屬(1dderomyces)、馬拉色霉菌屬一鞭毛菌屬(Malassezia-Mastigomyces)、梅奇酵母屬(Metschnikowia)、木拉克酵母屬(Mrakia)、拿遜酵母屬(Nadsonia)、八抱酵母屬(Octosporomyces)、卵抱酵母屬(Oosporidium)、管囊酵母屬(Pachysolen)、Petasospora、法夫酵母屬(Phaffia)、畢赤酵母屬(Pichia)、Pseudozyma、紅冬抱酵母屬(Rhodosporidium)、紅酵母屬(Rhodotorula)、酵母屬(Saccharomyces)、類酵母屬(Saccharomycodes)、復(fù)膜抱酵母屬(Saccharomycopsis)、裂芽酵母抱子菌屬(Schizoblastosporion)、裂殖酵母屬(Schizosaccharomyces)、許旺酵母屬(Schwanniomyces)、新月酵母屬(Selenotila)、鏈擔(dān)耳屬(Sirobasidium)、鎖擲酵母屬(Sporidiobolus)、擲抱酵母屬(Sporobolomyces)、射盾子囊霉屬(Stephanoascus)、梗抱酵母屬(Sterigmatomyces)、Syringospora、有抱圓酵母屬(Torulaspora)、球擬酵母屬(Torulopsis)、TremelloicU毛抱子菌屬(Trichosporon)、三角酵母屬(Trigonopsis)、Udeniomyces、Waltomyces、威克酵母屬(Wickerhamia)、擬威爾酵母屬(Williopsis)、溫酵母屬(Wingea)、西洋蓍霉屬(Yarrowia)、接合腎孢酵母屬(Zygofabospora)、接合油脂酵母屬(Zygolipomyces)和 / 或接合酵母屬(Zygosaccharomyces)感染。
[0196]在某些實(shí)施方案中，將本文描述的組合物給予具有(例如已被診斷患有)已經(jīng)被酵母感染的傷口(例如開放性傷口，例如切口、撕裂傷、穿透傷、擦傷或燒傷)的患者。在一個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物不給予已被診斷為具有已被酵母感染的傷口的患者。 [0197]在某些實(shí)施方案中，將本文描述的組合物給予患有(例如已被診斷患有)皮膚病或表現(xiàn)出皮膚病的一個、兩個或更多個癥狀的患者。在一個具體的實(shí)施方案中，將本文描述的組合物給予已被診斷患有皮炎(例如特應(yīng)性皮炎)或表現(xiàn)出皮炎的一個、兩個或更多個癥狀的患者。在另一個具體的實(shí)施方案中，將本文描述的組合物給予已被診斷患有銀屑病或表現(xiàn)出銀屑病的一個、兩個或更多個癥狀的患者。
[0198]在有些實(shí)施方案中，將本文描述的組合物給予免疫抑制患者和/或?qū)毙曰蚵约膊』蚋腥久舾械幕颊?例如HIV陽性患者或由于癌癥治療或移植手術(shù)所致的免疫抑制患者)。在一個實(shí)施方案中，將本文描述的組合物給予被診斷患有囊性纖維化的患者。
[0199]在有些實(shí)施方案中，將本文描述的組合物給予患上疾病或感染的患者,在所述疾病或感染的癥狀出現(xiàn)之前或在所述疾病或感染的癥狀變得嚴(yán)重之前(例如在患者需要治療或住院之前)。在有些實(shí)施方案中，將本文描述的組合物給予患上疾病或感染的患者，在所述疾病或感染的癥狀出現(xiàn)之后或在所述疾病或感染的癥狀變得嚴(yán)重之后(例如在患者需要治療或住院之后)。
[0200]在有些實(shí)施方案中，將要給予本文描述的組合物的對象是動物。在某些實(shí)施方案中，所述動物是鳥。在某些實(shí)施方案中，所述動物是犬。在某些實(shí)施方案中，所述動物是貓。在某些實(shí)施方案中，所述動物是馬。在某些實(shí)施方案中，所述動物是牛。在某些實(shí)施方案中，所述動物是哺乳動物，例如馬、豬、小鼠或靈長類動物，優(yōu)選人。
[0201]在某些實(shí)施方案中，將要給予本文描述的組合物的對象是人類成年人。在某些實(shí)施方案中，將要給予本文描述的組合物的對象是超過50歲的人類成年人。在某些實(shí)施方案中，將要給予本文描述的組合物的對象是老年人對象。
[0202]在某些實(shí)施方案中，將要給予本文描述的組合物的對象是人類幼兒。在某些實(shí)施方案中，將要給予本文描述的組合物的對象是人類兒童。在某些實(shí)施方案中，將要給予本文描述的組合物的對象是人類嬰兒。在某些實(shí)施方案中，將要給予本文描述的組合物的對象是早產(chǎn)的人類嬰兒。
[0203]在一個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物不給予對象以預(yù)防和/或治療細(xì)菌感染或由其引起的或與其相關(guān)的疾病。在一個實(shí)施方案中，本文描述的組合物不給予對象以預(yù)防和/或治療金黃色葡萄球菌感染或由這種感染引起的或與這種感染相關(guān)的疾病。在另一個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物不給予對象以預(yù)防和/或治療傷口(例如開放性傷口，例如切口、撕裂傷、穿透傷、擦傷或燒傷)的細(xì)菌感染。
[0204]在一個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物不給予對象以治療傷口(例如開放性傷口，例如切口、撕裂傷、穿透傷、擦傷或燒傷)。
[0205]5.6給藥方式
[0206]在某些實(shí)施方案中，本文描述的方法是用于治療或預(yù)防感染和/或疾病或其癥狀的，其中將包含所述sNAG納米纖維的組合物局部給予需要這種治療的患者。在有些實(shí)施方案中，將sNAG納米纖維組合物局部施用到具有感染或疾病風(fēng)險增加的組織或器官。
[0207]在有些實(shí)施方案中，將所述sNAG納米纖維和/或sNAG納米纖維組合物的有效量給予對象。
[0208]在有些實(shí)施方案中，將包含所述sNAG納米纖維的組合物局部給予患者的感染或疾病的部位或給予受累于感染或疾病的部位。在又一些實(shí)施方案中，將包含所述sNAG納米纖維的組合物局部給予患者的感染或疾病的部位及其周圍或給予受累于感染或疾病的部位。在又一些實(shí)施方案中，將包含sNAG納米纖維的組合物施用到患者的感染或疾病的部位或靠近受累于感染或疾病的部位。在又一個實(shí)施方案中，將包含所述sNAG納米纖維的組合物局部給予處于感染或與這種感染相關(guān)的疾病高風(fēng)險之中的部位。
[0209]本文描述的sNAG納米纖維組合物可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的許多合適局部給藥方式中的任意一種給予，包括但不限于局部給予皮膚、局部給予身體的任何其它表面(例如粘膜表面)，通過吸入、鼻內(nèi)、陰道、直腸、頰或舌下給藥。局部給藥方式可以根據(jù)待治療或預(yù)防的感染或疾病而變化。所述sNAG納米纖維組合物可被配制成用于各種類型的局部給藥。
[0210]在一個具體的實(shí)施方案中，本文公開的組合物被局部施用到例如需要這種治療的患者的皮膚上或需要這種治療的患者的另一個組織上。在有些實(shí)施方案中，所述組合物可以直接施用到疾病或感染的部位和/或靠近疾病或感染的部位。在有些實(shí)施方案中，所述組合物可以直接施用到疾病或感染可能會潛在發(fā)展的部位(例如開放性傷口處)。
[0211]在一個實(shí)施方案中，將包含sNAG納米纖維的組合物施用到患者的皮膚。例如，這種一種組合物可以局部施用到患者的皮膚用于治療或預(yù)防皮膚的疾病或感染。
[0212]在另一個實(shí)施方案中， 本文描述的組合物可以局部施用到患者的粘膜表面。例如，這種一種組合物可以局部施用到口腔粘膜用于治療或預(yù)防口腔或牙齦的疾病或感染。
[0213]在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物可以局部施用到患者的生殖器、泌尿道或肛門表面/區(qū)域。例如，這種一種組合物可以局部施用到生殖器、泌尿道或肛門表面/區(qū)域用于治療或預(yù)防生殖器、泌尿道或肛門疾病或感染。
[0214]以上列舉的用于局部給藥物的方法可包括以混懸劑(例如粘稠的混懸劑)、乳膏劑、軟膏劑、凝膠劑、液體溶液劑、膜劑、噴霧劑、糊劑、散劑或本文描述的或本領(lǐng)域已知的任何其它制劑的形式給予SNAG納米纖維。SNAG納米纖維也可以施用在敷料或繃帶中，例如以治療患者皮膚上的局限性疾病或感染。在特別的實(shí)施方案中，包含sNAG納米纖維的組合物不是固體或形成屏障的。
[0215]在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物可作為噴霧劑施用到患者的口腔和/或呼吸系統(tǒng)。例如，這種一種組合物可以作為噴霧劑施用用于治療或預(yù)防口、鼻、牙齦、咽喉或肺部的疾病或感染。在一個這樣的實(shí)施方案中，所述組合物可以被配制作為吸入劑給予。
[0216]在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物可以作為栓劑施用到患者的直腸、陰道或尿道。例如，這樣的組合物可以作為栓劑施用用于治療或預(yù)防消化道、泌尿道或生殖道的疾病或感染。
[0217]在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物可以用適合于將所述組合物局部遞送給患者的注射器或另一種類型的施用器(applicator)(例如刮鏟、棉拭子、管子例如擠壓管(squeeze tube))進(jìn)行局部施用。例如，被配制成混懸劑(例如濃稠的混懸劑)、液體溶液劑、乳膏劑、軟膏劑或凝膠劑的本文描述的組合物可通過施用器(例如注射器)經(jīng)局部給予患者的皮膚、粘膜或其它表面組織。
[0218]在另一個實(shí)施方案中，本文描述的組合物可以施用在外科手術(shù)的部位。例如，這樣的組合物可以作為乳膏劑、混懸劑(例如粘稠的混懸劑)、液體溶液劑、軟膏劑、凝膠劑、膜劑或散劑噴霧、施用或涂覆在待進(jìn)行外科手術(shù)或已進(jìn)行過外科手術(shù)的組織或器官的表面上。在一個實(shí)施方案中，本文描述的組合物是在外科手術(shù)切口的部位，在被切除組織的部位或在外科手術(shù)縫跡或縫線的部位施用。本文描述的組合物的這類給藥可預(yù)防手術(shù)后感染或可預(yù)防外科手術(shù)指明的疾病的復(fù)發(fā)。例如，本文描述的組合物可以在已知具有病毒性、酵母性或真菌性感染高風(fēng)險的外科手術(shù)期間或之后使用。已知具有感染高風(fēng)險的外科手術(shù)包括腸切除、胃腸外科手術(shù)、腎臟外科手術(shù)等。本文描述的組合物可以在任何上述外科手術(shù)或其它外科手術(shù)的部位施用。
[0219]在又一些實(shí)施方案中，本文描述的組合物可以涂覆在裝置(device)例如口腔衛(wèi)生產(chǎn)品、導(dǎo)管、手術(shù)器械或用于或置入患者體內(nèi)的其它產(chǎn)品上，以便治療或預(yù)防患者的疾病或感染。
[0220]在一個具體的實(shí)施方案中，本文公開的組合物局部施用到實(shí)體腫瘤或皮膚癌的部位。在有些實(shí)施方案中，所述組`合物直接施用到實(shí)體腫瘤或皮膚癌本身。在有些實(shí)施方案中，所述組合物直接施用到實(shí)體腫瘤或皮膚癌的部位，其中腫瘤或皮膚癌的全部或一部分已被去除(例如經(jīng)手術(shù)切除)。在有些實(shí)施方案中，本文公開的組合物經(jīng)局部給予已被切除或去除實(shí)體腫瘤或皮膚癌的部位和/或該部位的周圍。在這些實(shí)施方案中的有些中，這樣的組合物可作為混懸劑、液體溶液劑、乳膏劑、軟膏劑、凝膠劑、膜劑或散劑噴霧、施用或涂覆在來自實(shí)體腫瘤被切除的器官或組織的表面上。在多個具體的實(shí)施方案中，將本文描述的組合物噴霧或涂覆在已去除或切除的實(shí)體腫瘤或皮膚癌的一個或多個部位及其周圍。
[0221]在有些實(shí)施方案中，本文考慮的方法包括步驟，該步驟包括檢測/診斷患者的疾病或感染。在有些實(shí)施方案中，檢測/診斷涉及在患者的生物學(xué)樣品中對一種或多種病原體(例如病毒、真菌或酵母)的檢驗或測定。在其它的實(shí)施方案中，診斷涉及評價患者是否有疾病(例如IBD、克羅恩病、癌癥、皮炎、銀屑病或與病毒性、真菌性或酵母性感染相關(guān)的疾病)的一個或多個癥狀。
[0222]本文描述的組合物可表現(xiàn)出持續(xù)釋放特性和/或可以在導(dǎo)致此類組合物持續(xù)釋放的制劑中給予。在有些實(shí)施方案中，所述sNAG納米纖維隨時間的流逝進(jìn)行生物降解，如第5.1節(jié)中所描述的(參見上文)，并且sNAG納米纖維的這些特性可以導(dǎo)致或促進(jìn)本文描述的組合物的持續(xù)釋放。在又一些實(shí)施方案中，采用本領(lǐng)域已知的任何方法將本文描述的組合物配制成展示持續(xù)釋放能力。本文描述的組合物在將所述組合物給予患者之后的等于或超過約6小時、12小時、18小時、24小時(I天)、2天、3天、5天、7天(I周)、10天、14天(2周)、3周或4周的時間周期內(nèi)表現(xiàn)出持續(xù)釋放。
[0223]考慮的治療方案包括sNAG納米纖維組合物的單個劑量或單次施用；sNAG納米纖維組合物的兩個劑量或兩次施用；或sNAG納米纖維組合物的多個劑量或多次施用的方案。一個劑量或一次施用可以是每小時、每天、每周或每月給予。例如，sNAG納米纖維組合物的劑量可以是給予每日一次、每日兩次、每日三次、每日四次、每周一次、每周2次、每周3次、每隔一天一次、每2周一次、每3周一次、每4周一次、每個月一次或兩個月一次。
[0224]sNAG納米纖維組合物可以給予等于或大于2天、3天、4天、5天、I周、2周、3周、I個月、2個月、3個月、4個月、5個月、6個月、9個月、I年、1.5年、2年、2.5年、3年、4年、5年、7年、10年或更長的持續(xù)時間。在有些實(shí)施方案中，sNAG纖維組合物給予患者每日一次或兩次，長達(dá)等于或大于2天、3天、4天、5天、I周、2周、3周、I個月、2個月、3個月、4個月、5個月、6個月、9個月或I年的持續(xù)時間。在一個這樣的實(shí)施方案中，sNAG納米纖維組合物在治療的持續(xù)時間期間不引起任何副作用或僅引起輕微的副作用。在另一個實(shí)施方案中，sNAG納米纖維組合物不引起刺激性(例如中度或嚴(yán)重刺激性)或變態(tài)反應(yīng)(例如中度或嚴(yán)重變態(tài)反應(yīng))。
[0225]sNAG納米纖維在組合物中的濃度可以變化。一般而言，在本文描述的組合物中使用sNAG納米纖維的有效量，以治療本文描述的疾病。有效量可以是足以達(dá)到本文描述的效果中的一種或多種的量，例如有效治療疾病或減少或根除疾病的一個或多個癥狀的量。例如，組合物可包含每劑量/施用的所述組合物約0.2至20mg/cm2的sNAG納米纖維，以適合于局部遞送給患者的形式。在某些實(shí)施方案中，本文描述的組合物包含每劑量/施用的所述組合物約 0.25 至 20m g/cm2、約 0.5 至 20mg/cm2、約 I 至 20mg/cm2、約 I 至 15mg/cm2、約 I 至12mg/cm2、約 I 至 10mg/cm2、約 I 至 8mg/cm2、約 I 至 5mg/cm2、約 2 至 8mg/cm2 或約 2 至 6mg/cm2的sNAG納米纖維，以適合于局部遞送給患者的形式。在有些實(shí)施方案中，本文描述的組合物可包含每劑量/施用的所述組合物約5至50mg/ml的sNAG納米纖維，以適合于局部遞送給患者的形式。在某些實(shí)施方案中，本文描述的組合物包含每劑量/施用的所述組合物約 5 至 40mg/ml、約 5 至 35mg/ml、約 10 至 50mg/ml、約 10 至 40mg/ml、約 10 至 35mg/ml、約 10 至 30mg/ml、約 15 至 40mg/ml、約 15 至 35mg/ml、約 15 至 30mg/ml 或約 20 至 30mg/ml的sNAG納米纖維，以適合于局部遞送給患者的形式。在多個具體的實(shí)施方案中，本文描述的組合物包含每劑量/施用的所述組合物約10mg/ml、12mg/ml、15mg/ml、20mg/ml、25mg/ml或30mg/ml的sNAG納米纖維，以適合于局部遞送給患者的形式。在某些實(shí)施方案中，本文描述的組合物可包含總的溶液劑或混懸劑(包含sNAG納米纖維)的量在每患者待治療表面(例如皮膚、粘膜表面或其它組織表面)的0.5cm2或Icm2約50至100 iil、50至200 yl、50 至 250 ii 1,50 至 300 ii 1,50 至 350 y 1,50 至 400 y 1,50 至 450 y 1,50 至 500 y 1,100 至200iil、100至300ii 1、100至400111、100至500111的范圍內(nèi)。總的溶液劑或混懸劑可包含鹽水、緩沖液、溶液(例如Hank氏緩沖溶液)或任何其它生理相容的溶液。
[0226]5.7聯(lián)合療法
[0227]在各種實(shí)施方案中，本文描述的sNAG納米纖維或其組合物可以聯(lián)合一種或多種其它療法給予對象。所述的一種或多種其它療法在疾病的治療或預(yù)防中可能是有益的或可以緩解與疾病相關(guān)的癥狀或病癥。在某些實(shí)施方案中，所述療法在間隔少于5分鐘、間隔少于30分鐘、間隔1小時、在間隔約1小時、在間隔約1小時至約2小時、在間隔約2小時至約3小時、在間隔約3小時至約4小時、在間隔約4小時至約5小時、在間隔約5小時至約6小時、在間隔約6小時至約7小時、在間隔約7小時至約8小時、在間隔約8小時至約9小時、在間隔約9小時至約10小時、在間隔約10小時至約11小時、在間隔約11小時至約12小時、在間隔約12小時至18小時、間隔18小時至24小時、間隔24小時至36小時、間隔36小時至48小時、間隔48小時至52小時、間隔52小時至60小時、間隔60小時至72小時、間隔72小時至84小時、間隔84小時至96小時或間隔96小時至120小時時給予。在多個具體的實(shí)施方案中，兩種或兩種以上的療法是在同一次有效的訪視(patent visit)之內(nèi)給予。
[0228]在某些實(shí)施方案中，所述的一種或多種療法是外科手術(shù)。在一個具體的實(shí)施方案中，進(jìn)行外科手術(shù)以去除實(shí)體腫瘤或皮膚癌的全部或一部分，并且在手術(shù)之前、期間和/或之后，將本文描述的組合物給予腫瘤的部位。在某些實(shí)施方案中，所述的一種或多種療法是放射療法。
[0229]在某些實(shí)施方案中，所述的一種或多種療法是抗病毒劑。本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的任何抗病毒劑都可與本文描述的sNAG納米纖維或其組合物聯(lián)合使用?？共《緞┑姆窍拗菩詫?shí)例包括蛋白質(zhì)、多肽、肽、融合蛋白抗體、核酸分子、有機(jī)分子、無機(jī)分子和小分子，它們抑制和/或降低病毒附著到其受體上，病毒內(nèi)化進(jìn)入細(xì)胞中，病毒的復(fù)制或病毒從細(xì)胞中釋放出來。具體地說，抗病毒劑包括但不限于核苷類似物(例如齊多夫定(zidovu dine)、阿昔洛韋(acyclovir)、更昔洛韋(gangcyclovir)、阿糖腺苷(vidarabine)、碘苷(idoxuridine)、曲氟尿苷(trifIuridine)和利巴韋林(ribavirin))、勝甲酸(foscarnet)、金剛燒胺(amantadine)、培拉米韋(peramivir)、金剛乙胺(rimantadine)、沙奎那韋(saquinavir)、卻地那韋(indinavir)、利托那韋(ritonavir)、a -干擾素和其它干擾素、AZT >扎那米韋(zanamivir) (Re Ici I/a?)
和奧塞米韋(oseltamivir) f'i ainillu^)..其它抗病毒劑包括流感病毒疫苗，例如Fluarix? (GlaxoSmithKline)、FluMist? (Med Immune Vaccines)、Fluvirin? (ChironCorporation)、Fllllaval? (GlaxoSmithKline)、Afluria? (CSL Biotherapies Inc.)、Agriflu? (Novartis)或 Fluzone? (Aventis Pasteur)。
[0230]在某些實(shí)施方案中，所述的一種或多種療法是抗癌劑。在一個具體的實(shí)施方案中，所述抗癌劑是化療劑。本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何抗癌劑都可與本文描述的sNAG納米纖維或其組合物聯(lián)合使用。示例性的抗癌劑包括:阿西維辛(acivicin);蒽環(huán)霉素(anthracyclin);安曲霉素(anthramycin);阿扎胞苷(azacitidine) (Vidaza) ； 二勝酸鹽(例如帕米勝酸鹽(pamidronate) (Aredria)、sodium clondronate (Bonefos)、唑來勝酸(zoledronic acid) (Zometa)、阿侖勝酸鹽(alendronate) (Fosamax)、依替勝酸鹽(etidronate)、伊班膦酸鹽(ibandornate)、西馬膦酸鹽(cimadronate)、利塞膦酸鹽(risedromate)和替魯勝酸鹽(tiIudromate));卡鉬(carboplatin);苯丁酸氮芥(chlorambucil);順鉬(cisplatin);阿糖胞苷(cytarabine) (Ara-C);鹽酸柔紅霉素(daunorubicin hydrochloride);地西他濱(decitabine) (Dacogen);去甲基化劑、多西他賽(docetaxel);多柔比星(doxorubicin) ;EphA2 抑制劑；依托泊苷(etoposide)；法扎拉濱(fazarabine);氟尿嘧唳；吉西他濱(gemcitabine);組蛋白脫乙酰酶抑制劑(HDACs);白介素II (包括重組白介素II或rIL2)、干擾素a ;干擾素0 ;干擾素Y ；來那度胺(Ienalidomide) (Revlimid)；抗0)2抗體(例如西利珠單抗(siplizumab)(Medlmmune Inc.;國際公布號W002/098370，所述文獻(xiàn)通過引用其全部結(jié)合到本文中))；美法侖(melphalan)；甲氨蝶呤(methotrexate);絲裂霉素(mitomycin);奧沙利鉬(oxaliplatin);紫杉醇(paclitaxel);嘌呤霉素(puromycin);利波腺苷(riboprine);螺鉬(spiroplatin);替加氟(tegafur);替尼泊苷(teniposide);硫酸長春堿(vinblastinesulfate);硫酸長春新堿(vincristine sulfate);伏氯唑(vorozole);折尼鉬(zeniplatin);凈司他丁 (zinostatin);和鹽酸佐柔比星(zorubicin hydrochloride)。
[0231]癌癥療法的其它實(shí)例包括但不限于血管生成抑制劑；反義寡核苷酸；凋亡基因調(diào)節(jié)劑(apoptosis gene modulators);凋亡調(diào)節(jié)劑(apoptosis regulators) ;BCR/ABL拮抗劑內(nèi)酰胺衍生物；酪蛋白激酶抑制劑(ICOS);雌激素激動劑；雌激素拮抗劑；谷胱甘肽抑制劑；HMG CoA還原酶抑制劑；免疫刺激肽；胰島素樣生長因子-1受體抑制劑；干擾素激動劑；干擾素；白介素；親脂性鉬化合物；基質(zhì)溶素抑制劑；基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑；錯配雙鏈RNA 氧化氮調(diào)節(jié)劑；寡核苷酸；鉬化合物；蛋白激酶C抑制劑、蛋白酪氨酸磷酸酶抑制劑；嘌呤核苷磷酸化酶抑制劑；raf拮抗劑；信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑；信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)劑；翻譯抑制劑；酪氨酸激酶抑制劑；和尿激酶受體拮抗劑。
[0232]在有些實(shí)施方案中，與本文描述的sNAG納米纖維或其組合物聯(lián)用的療法是抗血管生成劑。抗血管生成劑的非限制性實(shí)例包括降低或抑制血管生成的蛋白質(zhì)、多肽、肽、綴合物(conjugates)、抗體(例如人的、人源化的、嵌合的、單克隆的、多克隆的、Fvs、ScFvs、Fab片段、F (ab)2片段及其抗原-結(jié)合片段)例如特異性結(jié)合TNF_a的抗體、核酸分子(例如反義分子或三聯(lián)螺旋體(triple helices))、有機(jī)分子、無機(jī)分子小分子。抗血管生成劑的其它實(shí)例可以在例如美國公布號2005/0002934A1第277-282段落中找到，所述文獻(xiàn)通過引用其全部結(jié)合到本文中。在其`它的實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明所述使用的療法不是抗血管生成劑。
[0233]在有些實(shí)施方案中，與本文描述的sNAG納米纖維或其組合物聯(lián)用的療法是抗炎劑?？寡讋┑姆窍拗菩詫?shí)例包括非留體抗炎藥物(NSAIDs)(例如塞來考昔(celecoxib)(CELEBREX?)、雙氯芬酸(diclofenac) (VOLTAREN?)、依托度酸(etodolac) (L0DINE?)、非諾洛芬(fenoprofen) (NALF0N?)、吲哚美辛(indomethacin) (IND0CIN?)、酮咯酸(ketoralac)(T0RAD0L?)、奧沙普秦(oxaprozin) (DAYPR0?)、萘丁美酮(nabumentone) (RELAFEN?)、舒林酸(sulindac) (CLIN0RIL?)、托美丁 (tolmentin) (T0LECTIN?)、羅非考昔(rofecoxib)(V10XX?)、萘普生(naproxen) (ALEVE?, NAPROSYN?)、酮洛芬(ketoprofen) (ACTR0N?)和萘丁美酮(nabumetone) (RELAFEN?))、甾體抗炎藥物(例如糖皮質(zhì)激素類、地塞米松(dexamethasone) (DECADR0N?)、皮質(zhì)激素類(例如甲潑尼龍(methylprednisolone)(MEDR0L?))、可的松(cortisone)、氧化可的松(hydrocortisone)、潑尼松(prednisone)(PREDNISONE? 和 DELTASONE?)和潑尼松龍(prednisolone) (PREL0NE? 和 PEDIAPRED?))、抗膽堿能類(例如硫酸阿托品(atropine sulfate)、甲基硝酸阿托品(atropinemethylnitrate)和異丙托溴銨(ipratropium bromide) (ATROVENT?))、0 2-激動劑(例如沙丁胺醇(abuterol) (VENTOLIN? 和 PROVENTIL?)、比托特羅(bitolterol) (TORNALATE?)、左沙丁胺醇(Ievalbuterol) (XOPONEX?)、奧西那林(metaproterenol) (ALUPENT?)、吡布特羅(pirbuterol) (MAXAIR?)、特布他林(terbutlaine) (BRETHAIRE? 和 BRETHINE?)、沙丁胺醇(albuterol) (PROVENTIL?, REPETABS? 和 VOLMAX?)、福莫特羅(formoterol) (FORADILAEROLIZER?)和沙美特羅(salmeterol) (SEREVENT?和 SEREVENT DISKUS?))和甲基黃嘌呤類(例如茶堿(theophylline) (UNIPHYL?, THEO-DUR?, SLO-BID? 和 TEH0-42?))。[0234]在某些實(shí)施方案中，與本文描述的sNAG納米纖維或其組合物聯(lián)用的療法是烷化劑、亞硝基脲、抗代謝物、蒽環(huán)霉素、拓?fù)洚悩?gòu)酶II抑制劑或有絲分裂抑制劑。烷化劑類包括但不限于白消安(busulfan)、順鉬(cisplatin)、卡鉬(carboplatin)、cholormbuci1、環(huán)磷酰胺(cyclophosphamide)、異環(huán)磷酰胺(ifosfamide)、氨烯咪胺(decarbazine)、氮芥(mechlorethamine)、美法侖(mephalen)和themozolomide。亞硝基服類包括但不限于卡莫司汀(carmustine) (BCNU)和洛莫司汀(1mustine) (CCNU)?？勾x物類包括但不限于5-氟尿嘧唳、卡培他濱(capecitabine)、甲氨蝶呤(methotrexate)、吉西他濱(gemcitabine)、阿糖胞苷(cytarabine)和氟達(dá)拉濱(fludarabine)。蒽環(huán)類抗生素類包括但不限于柔紅霉素(daunorubicin)、多柔比星(doxorubicin)、表柔比星(epirubicin)、伊達(dá)比星(idarubicin)和米托蒽醌(mitoxantrone)。拓?fù)洚悩?gòu)酶II抑制劑類包括但不限于托泊替康(topotecan)、伊立替康(irinotecan)、依托泊苷(etopiside) (VP-16)和替尼泊苷(teniposide)。有絲分裂抑制劑類包括但不限于紫杉燒類(taxanes)(紫杉醇(paclitaxel)、多西他賽(docetaxel))和長春花屬生物堿(長春堿(vinblastine)、長春新喊(vincristine)和長春瑞濱(vinorelbine))。
[0235]在有些實(shí)施方案中，與本文描述的sNAG納米纖維或其組合物聯(lián)用的療法是止痛藥(例如鎮(zhèn)痛藥)。在有些實(shí)施方案中，與本文描述的sNAG納米纖維或其組合物聯(lián)用的療法是退熱藥。
[0236]5.8試劑盒
[0237]本文還提供的是包含本文描述的sNAG納米纖維組合物中的一種或多種的藥物包裝或試劑盒。所述包裝或試劑盒可包含一個或多個容器，該容器盛裝一種或多種成分，所述成分包含本文描述的組合物。所述組合物優(yōu)選裝在密封、防水、無菌包裝里面，所述包裝便于取出所述組合物而不會污染?？杀恢瞥扇萜鞯牟牧习ㄤX箔、塑料或其它容易滅菌的常規(guī)材料。所述試劑盒可含有用于所述組合物單次給藥或多次給藥的材料，優(yōu)選用于每次給藥的材料都在獨(dú)立的、防水、無菌包裝中提供。
[0238]在另一個實(shí)施方案中，提供一種具有兩個區(qū)室的容器。第一個區(qū)室裝有本文描述的上述sNAG納米纖維組合物中的任一種，而第二個區(qū)室裝有另一種活性劑，例如與所述sNAG納米纖維組合物聯(lián)合使用的另一種藥劑。在野外或診所里，第一個區(qū)室中的所述組合物可以容易地與第二個區(qū)室中的所述藥劑組合用于對患者的隨后給藥。
[0239]所述試劑盒也可以裝有施用器，該施用器用于本文描述的sNAG納米纖維組合物中的一種或多種的給藥和/或用于給予另一種活性劑例如與所述sNAG納米纖維組合物聯(lián)合使用的另一種藥劑的給藥。在一個實(shí)施方案中，所述試劑盒包含sNAG納米纖維組合物局部給藥用的施用器。sNAG納米纖維組合物局部給藥用的施用器的實(shí)例包括但不限于注射器、刮鏟、管(擠壓管和棉拭子。[0240]另外，設(shè)計用于急救用或軍用的試劑盒也可裝有一次性預(yù)消毒器械，例如剪子、手術(shù)刀、手術(shù)鉗、止血帶、有彈性或無彈性的繃帶等。
[0241]任選地，這樣的試劑盒或包裝中附有管理藥品或生物制品生產(chǎn)、使用或銷售的政府機(jī)構(gòu)規(guī)定的形式的通知，該通知反映出得到了人用藥物的生產(chǎn)、使用或銷售的機(jī)構(gòu)的批準(zhǔn)。舉例來說，試劑盒可裝有關(guān)于FDA批準(zhǔn)和/或使用說明書的通知。
[0242]本文涵蓋的試劑盒可用于以上的應(yīng)用和方法中。
[0243]6實(shí)施例
[0244]6.1實(shí)施例1:來自海洋桂藻.的sNAG納米纖維促.講通過Aktl/Etsl依賴件涂徑的傷口愈合和防御素表達(dá)
[0245]本實(shí)施例證明sNAG納米纖維促進(jìn)皮膚傷口愈合和防御素的表達(dá)，并且證明Aktl — Etsl途徑在通過sNAG納米纖維調(diào)節(jié)皮膚傷口愈合中起重要的作用。
[0246]6.1.1材料與方法
[0247]sNAG 納米纖維(特別是 Taliderm)由 Marine Polymer Technologies 公司生產(chǎn)和供應(yīng)，并制成創(chuàng)口治療的合適貼劑。野生型C57黑色和Aktl無效小鼠被關(guān)養(yǎng)在南卡羅來納醫(yī)科大學(xué)的動物房(the Medical University of South Carolina animal facilities)內(nèi)。將年齡范圍為8-12周齡的野生型和Aktl無效小鼠，用50%純氧和50%異氟烷氣體麻醉。臨施行創(chuàng)傷前，把Nair牌脫毛液(Nair Hair Removal Lotion)施用在小鼠背部以脫去任何不需要的毛。用切口活檢鉆孔器(excision biopsy punch)鉆取皮膚的背側(cè)4mm圓形區(qū)域。在第0天把Taliderm放在各創(chuàng)口上并留下一些創(chuàng)口不做治療。在第1、3、5和7天，對創(chuàng)口拍照、測量，并用8mm活檢鉆孔器切取以確保創(chuàng)口和周圍皮膚被完全取出。將用和不用Taliderm治療的野生型和Aktl無效創(chuàng)口包埋于石蠟中準(zhǔn)備進(jìn)行H&E和免疫熒光染色。
[0248]石蠟包埋的切片進(jìn)行切片后放在顯微鏡載玻片上進(jìn)行染色。各載玻片用二甲苯洗滌以脫去石蠟，再通過一系列不同級別的酒精水合。然后將切片放入0.l%Triton xl00中保溫進(jìn)行透化處理。將切片放入煮沸中的抗原挽回溶液(boiling Antigen Retrivalsolution)中保溫。在一次山羊抗體、(6-防御素31:400稀釋液中孵育之前，用1%動物血清進(jìn)行封閉。然后把切片加入一次抗體中置于恒濕箱內(nèi)于4°C孵育過夜。使用免疫熒光二次驢a -山羊488抗體1:200稀釋液，然后用T0PR0-3進(jìn)行核染色。圖像用共焦顯微鏡術(shù)捕獲。
[0249]用蘇木精-伊紅染色顯現(xiàn)基礎(chǔ)結(jié)構(gòu)例如表皮、真皮、肌肉和血管并測定在創(chuàng)口中的取向和大致方位。H&E染色也用來開始鑒定那些細(xì)胞類型被Taliderm以不依賴Aktl的方式刺激。
[0250]其它的材料與方法在【專利附圖】

【附圖說明】和結(jié)果小節(jié)中予以說明并按照本領(lǐng)域已知的方法進(jìn)行。
[0251]6.1.2 結(jié)果
[0252]sNAG納米纖維刺激Aktl活化，Etsl的一種上游調(diào)節(jié)物。圖1A顯示磷酸-Akt在對血清饑餓的EC的NAG和sNAG刺激應(yīng)答時的蛋白質(zhì)印跡分析。圖1B顯示用雜亂對照或AktlshRNA慢病毒感染的EC的RT-PCR分析并評價了 Etsl和S26作為加載對照的表達(dá)。圖1C說明信號從sNAG納米纖維傳導(dǎo)到AktUEtsl和防御素上的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。[0253]Aktl無效動物中延遲的傷口愈合被Taliderm(sNAG)治療部分地拯救。圖2A顯示受創(chuàng)傷的WT和AKTl無效小鼠用和不用Taliderm治療的代表性圖像。圖2B顯示來自第三天創(chuàng)傷的代表性小鼠皮膚切片的H&E染色。野生型和Aktl創(chuàng)傷切口的H&E染色表明角質(zhì)化細(xì)胞增殖和遷移中的Taliderm依賴性增加。虛線表示跨創(chuàng)口邊緣的角質(zhì)化細(xì)胞增殖的區(qū)域。在野生型和Aktl治療的兩種創(chuàng)口中，同野生型(wildytpe)和Aktl對照相比,跨創(chuàng)口邊緣的重新上皮形成(reepithelization)明顯增加。這表明Taliderm以不依賴于Aktl途徑的方式增加角質(zhì)化細(xì)胞(kertainoctye)的募集。雖然Taliderm誘導(dǎo)跨創(chuàng)口邊緣的表皮的重新上皮形成(reepithlization),但是與野生型相比,在基礎(chǔ)組織中再血管化仍然有明顯的缺乏。在Aktl動物(aminals)中，這是紅細(xì)胞的明顯出血和浸潤的證據(jù)。
[0254]sNAG納米纖維刺激原代內(nèi)皮細(xì)胞中的細(xì)胞因子和防御素表達(dá)。圖3A顯示使用抗a -防御素的抗體，用或不用sNAG治療的EC的免疫組織化學(xué)。圖3B呈現(xiàn)ELISA，顯示EC的納米纖維治療導(dǎo)致a -防御素1-3分泌。
[0255]sNAG納米纖維以Aktl依賴性方式刺激原代內(nèi)皮細(xì)胞中的防御素表達(dá)。圖4A和圖4B顯示用或不用sNAG、用或不用PD98059 (MAPK抑制劑)、渥曼青霉素(PI3K抑制劑)治療的或用雜亂對照或AktlshRNA慢病毒感染的血清饑餓的EC的定量RT-PCR分析并評價了所指基因的表達(dá)。
[0256]sNAG納米纖維刺激小鼠角質(zhì)化細(xì)胞中的P -防御素3表達(dá)。圖5A顯示在第3天來自WT和Aktl無效動物的石蠟包埋的小鼠皮膚傷口切片的(6-防御素3和外皮蛋白抗體的免疫熒光染色。在WT和Aktl無效兩種小鼠中開發(fā)了皮膚傷口愈合模型以評價Tal iderm在體內(nèi)的作用。這些發(fā)現(xiàn)表明，在Taliderm治療的動物中P -防御素3表達(dá)以依賴Aktl的方式增加。在愈合創(chuàng)口中，Taliderm增加防御素表達(dá)的能力在治療和控制傷口感染中具有重要的意義。圖5B顯示使用NIHImageJ軟件定量測定P -防御素3免疫熒光染色。圖5C顯示用P -防御素3和T0PR0-3的WT和Aktl無效治療的和未治療的角質(zhì)化細(xì)胞的免疫熒光染色。注意到在WT和AktlTaliderm治療的創(chuàng)口中綠色(6-防御素3染色有增加。創(chuàng)口切片的免疫熒光標(biāo)記說明Taliderm治療的傷口顯示P -防御素3表達(dá)以Aktl依賴性方式增加。雖然Aktl治療的傷口顯示在P -防御素3中有合理增加，但是野生型治療的創(chuàng)口說明有更明顯的增加。這表明(6-防御素3表達(dá)不僅因為所述納米纖維的應(yīng)用增加，而且至少部分依賴于Aktl途徑。P -防御素3表達(dá)似乎局限于角質(zhì)化細(xì)胞，說明這種表達(dá)是角質(zhì)化細(xì)胞特異性的。
[0257]Aktl-依賴的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)。 圖6顯示依賴Aktl的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)的示意圖。利用Genomatix軟件分析了轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)的500bp上游在DEFl、4和5的mRNA上的保守位點(diǎn)。
[0258]6.1.3 結(jié)論
[0259]所提供的數(shù)據(jù)顯示Etsl的sNAG納米纖維刺激是由Aktl被這些納米纖維活化所引起的。納米纖維治療導(dǎo)致參與細(xì)胞募集的基因的表達(dá)明顯增加，例如IL-1( 一種已知的Etsl靶)、VEGF和幾種防御素(0 3、a 1、a 4和a 5)( —些小的抗微生物肽，目前顯示作為化學(xué)引誘物起作用)。使用shRNAs在藥理學(xué)上抑制PI3K/Aktl途徑和Aktl敲減(knockdown)導(dǎo)致這些趨化因子表達(dá)減少。Aktl無效小鼠表現(xiàn)出被Taliderm納米纖維部分地拯救的傷口愈合表型延遲。Taliderm治療的傷口也顯示Aktl依賴性的防御素表達(dá)增加。
[0260]在Taliderm治療的傷口中，P -防御素3表達(dá)和角質(zhì)化細(xì)胞增殖的增加證明了Taliderm作為有效傷口愈合產(chǎn)品的有益用途。Taliderm起到以Aktl依賴性方式增加角質(zhì)化細(xì)胞中的抗微生物肽表達(dá)，提示Aktl在sNAG納米纖維的功能中的至關(guān)重要的作用。這與實(shí)驗室(Buff, Muise-Helmericks,未發(fā)表)中使用shRNAs抑制PI3K/Aktl途徑和Aktl敲減導(dǎo)致這些趨化因子的表達(dá)減少等其它研究的結(jié)果有聯(lián)系。
[0261]雖然P -防御素3的表達(dá)增加是Aktl依賴性的，但是8mm創(chuàng)面切口的H&E染色(圖2B)表明在創(chuàng)面重新上皮形成中,Taliderm以不依賴Aktl的方式起作用。即使新的角質(zhì)化細(xì)胞跨過完整的創(chuàng)口邊緣，處于下層的組織并沒有證明在血管生長中的相同刺激作用。這表明Aktl的不存在是造成真皮中滲漏的(leaky)血管和大量漂浮紅細(xì)胞的原因。這提示對于血管化中的增加，Taliderm是依賴于Aktl途徑的。
[0262]總之，(i)sNAG納米纖維(例如Taliderm)增加傷口愈合，部分因刺激血管生成引起；(ii)內(nèi)皮細(xì)胞的sNAG納米纖維治療激活A(yù)ktl/Etsl依賴性途徑，導(dǎo)致細(xì)胞游動性和細(xì)胞因子分泌發(fā)生變化；(iii)Taliderm治療的傷口顯示P -防御素3的表達(dá)以Aktl依賴性方式增加；(iv)用Taliderm治療Aktl無效動物部分地拯救了表型，導(dǎo)致角質(zhì)化細(xì)胞增殖/遷移明顯增加；和(v)生物信息學(xué)分析表明ETSl很可能參與sNAG活化的途徑，導(dǎo)致傷口愈合和細(xì)胞因子分泌增加。
[0263]總的來說,這些發(fā)現(xiàn)提示Aktl — Etsl途徑在通過sNAG納米纖維調(diào)節(jié)皮膚傷口愈合中的關(guān)鍵作用，并支持應(yīng)用這些納米纖維作為一種新的有效方法來增強(qiáng)傷口愈合。
[0264]6.2實(shí)施例2:sNAG納米纖維增加防御素表達(dá)，增加傷口閉合的動力學(xué)并具有間接的依賴防御素的抗菌作用。
[0265]本實(shí)施例證明sNA`G納米纖維對體內(nèi)金黃色葡萄球菌具有強(qiáng)效的抗菌作用，這種抗菌作用是間接的和防御素依賴性的。本實(shí)施例也顯示sNAG納米纖維誘導(dǎo)在體外在角質(zhì)化細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞中和在體內(nèi)在皮膚傷口中防御素以依賴Akt-1的方式的表達(dá)，并且增加傷口閉合的動力學(xué)。
[0266]6.2.1材料與方法
[0267]組織培養(yǎng)，藥理學(xué)抑制，ELISA:將人臍帶靜脈EC (Lonza)在37°C和5%C02下維持在內(nèi)皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基2 (Lonza)中。內(nèi)皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基2 (EBM2)補(bǔ)充了 EC生長培養(yǎng)基2SingleQuots (如Lonza程序所描述)和1%青霉素/鏈霉素(Invitrogen)。在補(bǔ)充了 0.1%胎牛血清(Valley Biomedical)的EBM2中，在80-90%匯合時進(jìn)行血清饑餓達(dá)24小時，然后用在無菌水中的高度純化的pGlcNAc (50 u g/ml)納米纖維(sNAG)(由Marine Polymer Technologies, Inc., Danvers, Mass.,USA提供)進(jìn)行刺激。在本研究中使用的pGlcNAc娃藻源性納米纖維都是來源于較長形式(NAG)的短的生物可降解的纖維，其平均長度為4-7 ym，聚合物分子量約為60，OOODa。對于用ro098059 (50 ii M)或渥曼青霉素(IOOnM)抑制來說，在用sNAG(50 u g/ml)進(jìn)行3小時刺激之前，將細(xì)胞預(yù)處理45分鐘。
[0268]統(tǒng)計學(xué)分析:每個定量實(shí)驗都進(jìn)行至少一式三份，至少獨(dú)立的三次。所有的統(tǒng)計學(xué)分析都用Microsoft Excel來進(jìn)行以計算出平均值、標(biāo)準(zhǔn)差和斯圖登t檢驗(studentt—test)。
[0269]慢病毒感染:針對Aktl的Mission shRNA慢病毒構(gòu)建體(constructs)購自Sigma/Aldrich公司。雜亂pLK0.1shRNA載體購自Addgene公司。慢病毒在293T細(xì)胞中繁殖，在按上述補(bǔ)充的DMEM中維持。采用生產(chǎn)來自Addgene公司的慢病毒顆粒的方案，使用購自Addgene公司的psPAX2和pMD2.G包裝載體進(jìn)行慢病毒生產(chǎn)。對于靶細(xì)胞的感染，將7.5X105細(xì)胞接種到IOOmm2平板上并讓其孵育過夜。第二天，細(xì)胞用終濃度為I U g/mlpolybrene (I, 5_二甲基_1，5_二氮^ 亞甲基聚甲溴化物)和雜亂對照或AktlshRNA慢病毒進(jìn)行轉(zhuǎn)導(dǎo)。轉(zhuǎn)導(dǎo)后，內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行血清饑餓過夜，再用sNAG(50g/ml)刺激3小時。所有的感染都通過RT-PCR監(jiān)測適當(dāng)?shù)那脺p。
[0270]RT-PCR:對于半定量RT-PCR，按照生產(chǎn)商的說明書，用RNAsol (Teltest，Inc.)提取RNA。按照生產(chǎn)商的說明書，用Superscript第一鏈合成試劑盒(Invitrogen)并使用Oligo (dT)自2 ii g總RNA合成cDNA。PCR反應(yīng)液含有等量的cDNA和1.25 y M的適宜的引物對(Sigma-Proligo, St.Louis, MO, USA)。在這些分析中使用的所有引物序列如下所示:
[0271]
【權(quán)利要求】
1.用于治療人對象的病毒性感染的方法，包括將包含sNAG納米纖維的組合物局部給予患有病毒性感染的人對象，其中所述sNAG納米纖維的超過50%是長度介于約I至15 ii m之間，和其中所述sNAG納米纖維(a)當(dāng)在肌內(nèi)植入試驗中測試時是無反應(yīng)的；和(b)在MTT測定中增加血清饑餓的人臍帶靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的代謝率和/或在錐蟲藍(lán)排除試驗中不拯救血清饑餓的人臍帶內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡。
2.用于預(yù)防人對象的病毒性疾病的方法，包括將包含sNAG納米纖維的組合物局部給予處于發(fā)生病毒性疾病危險之中的人對象，其中所述sNAG納米纖維的超過50%是長度介于約I至15pm之間，和其中所述sNAG納米纖維(a)當(dāng)在肌內(nèi)植入試驗中測試時是無反應(yīng)的；和(b)在MTT測定中增加血清饑餓的人臍帶靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的代謝率和/或在錐蟲藍(lán)排除試驗中不拯救血清饑餓的人臍帶內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡。
3.權(quán)利要求1或2的方法，其中所述病毒性感染或所述病毒性疾病是局部的病毒性感染或局部的病毒性疾病。
4.權(quán)利要求1或2的方法，其中所述病毒性感染是HSV感染。
5.權(quán)利要求1-4中任一項的方法，其中將所述的包含sNAG納米纖維的組合物給予所述對象的皮膚或粘膜。
6.權(quán)利要求1-5中任一項的方法，其中所述的包含sNAG納米纖維的組合物是在所述病毒性感染或所述病毒性疾病的癥狀的部位，或靠近所述病毒性感染或所述病毒性疾病的癥狀的部位經(jīng)局部給予。
7.權(quán)利要求6的方法，其中所述病毒性感染或所述病毒性疾病的癥狀是紅疹、損害、感冒瘡、水皰、丘疹、囊泡或瘡痂。
8.用于治療人對象的實(shí)體腫瘤的方法，包括將包含sNAG納米纖維的組合物局部給予被診斷患有實(shí)體腫瘤的人對象，其中所述sNAG納米纖維的超過50%是長度介于約I至15pm之間，和其中所述sNAG納米纖維(a)當(dāng)在肌內(nèi)植入試驗中測試時是無反應(yīng)的；和(b)在MTT測定中增加血清饑餓的人臍帶靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的代謝率和/或在錐蟲藍(lán)排除試驗中不拯救血清饑餓的人臍帶內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡。
9.用于治療人對象的克羅恩病的方法，包括將包含sNAG納米纖維的組合物局部給予患有克羅恩病的人對象，其中所述sNAG納米纖維的超過50%是長度介于約I至15 ii m之間，和其中所述sNAG納米纖維(a)當(dāng)在肌內(nèi)植入試驗中測試時是無反應(yīng)的；和(b)在MTT測定中增加血清饑餓的人臍帶靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的代謝率和/或在錐蟲藍(lán)排除試驗中不拯救血清饑餓的人臍帶內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡。
10.用于治療人對象的炎癥性腸疾病的方法，包括將包含sNAG納米纖維的組合物局部給予患有炎癥性腸疾病的人對象，其中所述sNAG納米纖維的超過50%是長度介于約I至15pm之間，和其中所述sNAG納米纖維(a)當(dāng)在肌內(nèi)植入試驗中測試時是無反應(yīng)的；和(b)在MTT測定中增加血清饑餓的人臍帶靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的代謝率和/或在錐蟲藍(lán)排除試驗中不拯救血清饑餓的人臍帶內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡。
11.權(quán)利要求10的方法，其中所述炎癥性腸疾病是潰瘍性結(jié)腸炎。
12.權(quán)利要求9-11中任一項的方法，其中將所述的包含sNAG納米纖維的組合物給予所述對象的肛門或直腸。
13.用于治療人對象中疾病的方法，其中所述疾病是皮炎或銀屑病，所述方法包括將包含sNAG納米纖維的組合物局部給予患有皮炎或銀屑病的人對象，其中所述sNAG納米纖維的超過50%是長度介于約I至15 ii m之間,和其中所述sNAG納米纖維(a)當(dāng)在肌內(nèi)植入試驗中測試時是無反應(yīng)的；和(b)在MTT測定中增加血清饑餓的人臍帶靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的代謝率和/或在錐蟲藍(lán)排除試驗中不拯救血清饑餓的人臍帶內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡。
14.權(quán)利要求13的方法，其中所述的包含sNAG納米纖維的組合物是在皮炎或銀屑病的癥狀的部位經(jīng)局部給予。
15.權(quán)利要求1-14中任一項的方法，其中所述sNAG納米纖維被配制成膜劑、粉劑、混懸劑、液體溶液劑、軟膏劑、乳膏劑、噴霧劑或凝膠劑。
16.權(quán)利要求8的方法，其中所述實(shí)體腫瘤的全部或一部分已經(jīng)過手術(shù)切除。
17.權(quán)利要求16的方法，其中將所述sNAG納米纖維在手術(shù)之前、期間和/或之后給予所述實(shí)體腫瘤的部位。
18.權(quán)利要求9-12中任一項的方法，其中所述sNAG納米纖維被配制成栓劑。
19.權(quán)利要求1-18中任一項的方法，其中所述sNAG納米纖維的超過50%是長度介于約2至IOiim之間。
20.權(quán)利要求1-18中任一項的方法，其中所述sNAG納米纖維的超過50%是長度介于約4至7 y m之間。
21.權(quán)利要求1-18中任一 項的方法，其中所述sNAG納米纖維的100%是長度介于約IM 15 u m之間。
22.權(quán)利要求1-21中任一項的方法，其中所述sNAG納米纖維是通過聚-N-乙?；咸前泛?或其衍生物的Y射線輻照生產(chǎn)的，和其中所述聚-P -N-乙酰基葡糖胺和/或其衍生物是以干纖維的形式在500-2，OOOkgy下進(jìn)行輻照，或所述聚-N-乙?；咸前泛?或其衍生物是以濕纖維的形式在100-500kgy下進(jìn)行輻照。
23.權(quán)利要求1-22中任一項的方法，其中所述sNAG納米纖維是由微藻的聚-N-乙?；咸前飞a(chǎn)的。
24.權(quán)利要求1-23中任一項的方法，其中所述sNAG納米纖維包含N-乙?；咸前穯翁呛?或葡糖胺單糖，和其中所述sNAG納米纖維的所述單糖的超過70%是N-乙酰基葡糖胺單糖。
25.權(quán)利要求1-23中任一項的方法，其中所述sNAG納米纖維包含N-乙酰基葡糖胺單糖和/或葡糖胺單糖，和其中所述sNAG納米纖維的所述單糖的超過90%是N-乙?；咸前穯翁?。
26.權(quán)利要求1-23中任一項的方法，其中所述sNAG納米纖維包含N-乙?；咸前穯翁呛?或葡糖胺單糖，和其中所述sNAG納米纖維的所述單糖的超過95%是N-乙?；咸前穯翁恰?br> 【文檔編號】A01N43/04GK103648279SQ201280029555
【公開日】2014年3月19日 申請日期:2012年4月16日 優(yōu)先權(quán)日:2011年4月15日
【發(fā)明者】約翰·N·沃納吉斯, 塞爾吉奧·芬基爾斯坦 申請人:海洋聚合物技術(shù)公司