一種通過離體塊莖誘導(dǎo)快速繁殖延胡索的方法
【專利摘要】本發(fā)明公布了一種通過離體塊莖誘導(dǎo)快速繁殖延胡索的方法，其特征在于：包括下列步驟：1)取生長(zhǎng)一致的脫毒延胡索試管芽轉(zhuǎn)入培養(yǎng)基中培養(yǎng)；2)將試管芽轉(zhuǎn)移到離體塊莖誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，直接誘導(dǎo)離體塊莖；3)將誘導(dǎo)獲得的5mm以上的離體塊莖進(jìn)行貯存，或直接用于大田生產(chǎn)。本發(fā)明可以獲得較強(qiáng)的抗逆性、耐貯藏，不需特殊馴化即可直接栽種于大田的延胡索塊莖。
【專利說明】一種通過離體塊莖誘導(dǎo)快速繁殖延胡索的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種通過離體塊莖誘導(dǎo)快速繁殖延胡索的方法【背景技術(shù)】
[0002]延胡索為傳統(tǒng)中藥材，主治胸腹疼痛、痛經(jīng)、四肢瘀滯作痛、跌仆傷痛等病癥。由于很多中成藥需要添加延胡索，因而市場(chǎng)上延胡索走勢(shì)很高。但同時(shí)由于過度采挖使延胡索的野生資源瀕臨枯竭，而延胡索的人工栽培繁殖系數(shù)低、耗種量大，導(dǎo)致延胡索生產(chǎn)增長(zhǎng)速度慢且成本增加。植物組織和細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)為從根本上改變傳統(tǒng)延胡索藥材的生產(chǎn)提供了一個(gè)嶄新的方法。組織培養(yǎng)生產(chǎn)延胡索，可為人工栽培提供大量?jī)?yōu)質(zhì)種苗(莖)，進(jìn)而可以解決野生資源缺乏這一日益嚴(yán)重的問題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明提供了一種通過離體塊莖誘導(dǎo)快速繁殖延胡索的方法，可以獲得較強(qiáng)的抗逆性、耐貯藏，不需 特殊馴化可直接移栽于大田的延胡索塊莖。本發(fā)明采用了以下技術(shù)方案:一種通過離體塊莖誘導(dǎo)快速繁殖延胡索的方法，它采用如下步驟:步驟一，取脫毒延胡索的生長(zhǎng)一致的試管芽轉(zhuǎn)入培養(yǎng)基培養(yǎng)；步驟二，將試管芽轉(zhuǎn)移至離體塊莖誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，直接誘導(dǎo)離體塊莖；步驟三，將誘導(dǎo)獲得的2mm以上的離體塊莖進(jìn)行貯存，或直接用于大田生產(chǎn)。
[0004]本發(fā)明步驟一中延胡索長(zhǎng)度為2cm。本發(fā)明步驟一中培養(yǎng)基為以MS為基本的培養(yǎng)基，在培養(yǎng)基中培養(yǎng)的時(shí)間為7天。本發(fā)明步驟二中的誘導(dǎo)培養(yǎng)基是以MS為基本的培養(yǎng)基，再添加 60g/L 蔗糖、0.5mg/L6-BA、0.5mg/LPP333、0.lg/L 的 AC，pH 值為 5.8，瓊脂為 7.5g/L，121°C高壓滅菌20分鐘。本發(fā)明步驟二中的培養(yǎng)條件為光照強(qiáng)度為20001x，光照為12h/d，溫度為25°C。本發(fā)明步驟三中的離體塊莖在4°C的條件下貯存。
[0005]采用了以上技術(shù)方案后，40天左右即可形成直徑1.0cm的離體塊莖，可直接作為脫毒原種莖應(yīng)用于人工栽培生產(chǎn)。
【具體實(shí)施方式】
[0006]本發(fā)明為一種通過離體塊莖誘導(dǎo)快速繁殖延胡索的方法，它采用如下步驟:步驟一，取脫毒延胡索長(zhǎng)為2cm左右生長(zhǎng)一致的試管芽轉(zhuǎn)入以MS為基本的培養(yǎng)基中培養(yǎng)7天；步驟二，將試管芽轉(zhuǎn)移至離體塊莖誘導(dǎo)培養(yǎng)基中直接誘導(dǎo)離體塊莖，培養(yǎng)基為以MS為基本的培養(yǎng)基，再添加 60g/L 蔗糖、0.5mg/L6-BA、0.5mg/LPP333、0.lg/L 的 AC，pH 值為 5.8，瓊脂為7.5g/L，121°C高壓滅菌20分鐘，培養(yǎng)條件為光照強(qiáng)度為20001x，光照為12h/d，溫度為250C ;步驟三，將誘導(dǎo)獲得的2mm以上的離體塊莖于4°C貯存，或直接用于大田生產(chǎn)。
【權(quán)利要求】
1.一種通過離體塊莖誘導(dǎo)快速繁殖延胡索的方法，其特征在于:包括下列步驟: (1)取脫毒延胡索的生長(zhǎng)一致的試管芽轉(zhuǎn)入培養(yǎng)基中培養(yǎng)； (2)將試管芽轉(zhuǎn)移到離體塊莖誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，直接誘導(dǎo)離體塊莖； (3)將誘導(dǎo)獲得的5mm以上的離體塊莖進(jìn)行貯存，或直接用于大田生產(chǎn)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的通過離體塊莖誘導(dǎo)快速繁殖延胡索的方法，其特征是步驟(1)中延胡索的長(zhǎng)度為1cm以上。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的通過離體塊莖誘導(dǎo)快速繁殖延胡索的方法，其特征是步驟(1)中延胡索的培養(yǎng)基為以MS為基礎(chǔ)的培養(yǎng)基，并在培養(yǎng)基中培養(yǎng)的時(shí)間為10天。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的通過離體塊莖誘導(dǎo)快速繁殖延胡索的方法，其特征是所述步驟(2)中延胡索的誘導(dǎo)培養(yǎng)基是以MS為基礎(chǔ)的培養(yǎng)基，MS基本培養(yǎng)基+1~5%蔗糖+0.5~1.0%瓊脂，保持pH為5.5~6.0。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的通過離體塊莖誘導(dǎo)快速繁殖延胡索的方法，其特征是所述步驟(2)中的培養(yǎng)條件為光照強(qiáng)度為20001x，光照時(shí)間為18h/d，溫度為25~30°C。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的通過離體塊莖誘導(dǎo)快速繁殖延胡索的方法，其特征是所述步驟(3)中得到的延胡索離體塊莖在4°C下貯存。
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK104012404SQ201310061812
【公開日】2014年9月3日 申請(qǐng)日期:2013年2月28日 優(yōu)先權(quán)日:2013年2月28日
【發(fā)明者】毛健, 姬中偉, 張敏, 牟穰, 陽(yáng)志銳, 郭燕飛, 黎衛(wèi), 馮東陽(yáng), 鞏丹, 劉蕓雅 申請(qǐng)人:江南大學(xué)