專利名稱：一種促進(jìn)馬鈴薯組培苗快速生長的培養(yǎng)基的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種培養(yǎng)基，具體涉及一種能促進(jìn)馬鈴薯組培苗快速生長的培養(yǎng)基。
背景技術(shù)：
目前，國內(nèi)外進(jìn)行馬鈴薯組培苗快速生長所使用是MS培養(yǎng)基，但是一般情況下在MS培養(yǎng)基上生長的組培苗需30天左右株高才能夠長至8厘米，且主莖較細(xì)弱，分枝細(xì)長且較多，交織在一起，不利于剪切轉(zhuǎn)接操作，導(dǎo)致轉(zhuǎn)接時工作效率低，同時由于組培苗長勢較弱，假植或移栽時緩苗時間較長，成活率相對也較低。由于傳統(tǒng)的MS培養(yǎng)基存在以上缺點，國內(nèi)外的研究人員也對其配方進(jìn)行了各種改良，但是效果并不明顯。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的 在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種促進(jìn)馬鈴薯組培苗快速生長的
培養(yǎng)基。為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明通過以下技術(shù)方案實現(xiàn):一種促進(jìn)馬鈴薯組培苗快速生長的培養(yǎng)基，以IL培養(yǎng)基計，由以下組分組成:NH4NO31567.5 1732.5mg，KN031805 1995mg, CaCl2.2Η20418 462mg, MgSO4.7Η20400 440mg，KH2P04162 178mg，K10.79 0.87mg，Η3Β035.9 6.5mg, MnSO4.4Η2016.I 17.7mg,ZnSO4.7H208.2 9.0mg, Na2MnO4.2H200.24 0.26mg, CuSO4.5H200.024 0.026mg,CoCl2.6H200.024 0.026mg, FeNa2EDTA.H2072 78mg，C6H120695 105mg，C6H5NO20.48 0.52mg, C8H11NO3.HC10.48 0.52mg, C12H17ClN4OS.HC10.09 0.llmg, C12H220n28500 31500mg，瓊脂 3800 4200mg，phytagel 植物凝膠 1425 1575mg，余量為水。優(yōu)選的是:以IL培養(yǎng)基計，由以下組分組成:NH4N031650mg，KN031900mg,CaCl2.2H20440mg, MgSO4.7H20420mg, KH2P04170mg, KI0.83mg, H3B036.2mg,MnSO4.4H2016.9mg，ZnSO4.7H208.6mg，Na2MnO4.2H200.25mg，CuSO4.5H200.025mg，CoCl2.6H200.025mg，F(xiàn)eNa2EDTA.H2075mg，C6H12O6IOOmg, C6H5NO20.5mg，C8H11NO3.HC10.5mg，C12H17ClN4OS.HC10.lmg，C12H220n30000mg，瓊脂 4000mg，phytagel 植物凝膠 1500mg，余量為水。—種促進(jìn)馬鈴薯組培苗快速生長的培養(yǎng)基的制備方法，包含以下步驟:a、準(zhǔn)確稱取除瓊脂和phytagel植物凝膠外的培養(yǎng)基其余組分,加蒸懼水充分溶解后，定容；b、加入瓊脂和phytagel植物凝膠,加熱至70 90°C至瓊脂和phytagel植物凝膠完全溶解；C、分別用lmol/1的硝酸或lmol/1的氫氧化鈉溶液將培養(yǎng)基的pH值調(diào)節(jié)至
5.5-5.7 ；d、將步驟b中的培養(yǎng)基分裝至組織瓶中，于121 125°C、103.43kPa下滅菌20 30分鐘，制得本發(fā)明的固體培養(yǎng)基。
進(jìn)一步地:步驟a后不加入瓊脂和phytagel植物凝膠，制得本發(fā)明的液體培養(yǎng)基。一種促進(jìn)馬鈴薯組培苗快速生長的培養(yǎng)基的使用方法，其使用方法為:在無菌操作臺上，每60ml固體培養(yǎng)基扦插入10-12個馬鈴薯組培苗莖段，在環(huán)境溫度20_22°C、24小時光照的組培室內(nèi)培養(yǎng)10天后再加入IOml液體培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)10天。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的培養(yǎng)基，能快繁馬鈴薯組培苗，在24小時光照、室內(nèi)溫度20-22°C的條件下，組培苗生長迅速，從接種之日起到株高長至8厘米所需要的時間為20天，植株生長健壯，葉色濃綠，莖桿粗壯，分枝少，大大提高了組培苗剪切、轉(zhuǎn)接的工作效率，同時也大幅提高了其假植、移栽的成活率。
具體實施例方式下面結(jié)合實施例對本發(fā)明的具體實施方式
做進(jìn)一步說明。本發(fā)明提供一種促進(jìn)馬鈴薯組培苗快速生長的培養(yǎng)基，以IL培養(yǎng)基計，由以下組分組成:NH4N031567.5· 1732.5mg, KN031805 1995mg, CaCl2.2H20418 462mg,MgSO4.7H20400 440mg，KH2P04162 178mg，KI0.79 0.87mg, H3B035.9 6.5mg,MnSO4.4H2016.1 17.7mg, ZnSO4.7H208.2 9.0mg, Na2MnO4.2H200.24 0.26mg,CuSO4.5H200.024 0.·026mg, CoCl2.6H200.024 0.026mg, FeNa2EDTA.H2072 78mg, C6H120695 105mg, C6H5NO20.48 0.52mg, C8H11NO3.HC10.48 0.52mg,C12H17ClN4OS *HC10.09 0.llmg, C12H220n28500 31500mg，瓊月旨 3800 4200mg, phytagel植物凝膠1425 1575mg，余量為水。其制備方法為:a、準(zhǔn)確稱取除瓊脂和phytagel植物凝膠外的培養(yǎng)基其余組分,加蒸懼水充分溶解后，定容；b、加入瓊脂和phytagel植物凝膠,加熱至70 90°C至瓊脂和phytagel植物凝膠完全溶解；C、分別用lmol/1的硝酸和lmol/1的氫氧化鈉溶液將培養(yǎng)基的pH值調(diào)節(jié)至
5.5-5.7 ；d、將步驟b中的培養(yǎng)基分裝至組織瓶中，于121 125°C、103.43kPa下滅菌20 30分鐘，制得本發(fā)明的固體培養(yǎng)基。進(jìn)一步地:步驟a后不加入瓊脂和phytagel植物凝膠，制得本發(fā)明的液體培養(yǎng)基。實施例1:一種促進(jìn)馬鈴薯組培苗快速生長的培養(yǎng)基，以IL培養(yǎng)基計，由以下組分組成:NH4N031650mg, KN031900mg, CaCl2.2H20440mg, MgSO4.7H20420mg, KH2P04170mg,KI0.83mg, H3BO36.2mg, MnSO4.4H2016.9mg, ZnSO4.7H208.6mg, Na2MnO4.2H200.25mg,CuSO4.5H200.025mg, CoCl2.6H200.025mg, FeNa2EDTA.H2075mg, C6H12O6IOOmg, C6H5NO20.5mg,C8H11NO3.HC10.5mg, C12H17ClN4OS.HC10.lmg, C12H220n30000mg，瓊月旨 4000mg, phytagel 植物凝膠1500mg，余量為水。上述培養(yǎng)基的制備方法，包含以下步驟:a、準(zhǔn)確稱取除瓊脂和phytagel植物凝膠外的培養(yǎng)基其余組分,加蒸懼水充分溶解后，定容；
b、加入瓊脂和phytagel植物凝膠,加熱至80°C至瓊脂和phytagel植物凝膠完全溶解；C、分別用lmol/1的硝酸和lmol/1的氫氧化鈉溶液將培養(yǎng)基的pH值調(diào)節(jié)至5.7 ；d、將步驟b中的培養(yǎng)基分裝至組織瓶中，于121 °C，103.43kPa下，滅菌20分鐘，制
得固體培養(yǎng)基。進(jìn)一步地，上述制備方法中，不加入瓊脂和phytagel植物凝膠，制得液體培養(yǎng)基。將上述制備方法制得的培養(yǎng)基，用于繁殖馬鈴薯組培苗，其方法為:在無菌操作臺上，每60ml固體培養(yǎng)基扦插入10-12個馬鈴薯組培苗莖段，在環(huán)境溫度20_22°C、24小時光照的組培室內(nèi)培養(yǎng)10天后再加入IOml液體培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)10天。使用本實施例中的培養(yǎng)基，對不同的馬鈴薯組培苗進(jìn)行培養(yǎng)，其典型結(jié)果如下:1、宣威市馬鈴薯種薯研發(fā)中心組培室利用本實施例的培養(yǎng)基和方法快繁馬鈴薯組培苗，2011年3月17日剪切接種，室內(nèi)溫度設(shè)定為22°C，24小時光照，2011年4月6日組培苗株高長至8厘米，生長時間是20天，組培苗生長健壯，葉色濃綠，莖桿粗壯，平均莖粗
0.19厘米，平均每株苗莖節(jié)數(shù)4.5個。2、云南農(nóng)業(yè)大學(xué)薯類作物研究所組培室利用本實施例的培養(yǎng)基和方法快繁馬鈴薯組培苗，2011年3月6日剪切接種，室內(nèi)溫度設(shè)定為20°C，24小時光照，2011年3月27日組培苗株高長至8厘米，生長時間是21天，組培苗生長健壯，葉色濃綠，莖桿粗壯，平均莖粗0.17厘米，平均每株苗莖節(jié)數(shù)4.7個。3、云南農(nóng)業(yè) 大學(xué)農(nóng)學(xué)與生物技術(shù)學(xué)院組培室利用本實施例的培養(yǎng)基和方法快繁馬鈴薯組培苗，2011年4月7日剪切接種，室內(nèi)溫度設(shè)定為21°C，24小時光照，2011年4月27日組培苗株高長至8厘米，生長時間是20天，組培苗生長健壯，葉色濃綠，莖桿粗壯，平均莖粗0.18厘米，平均每株苗莖節(jié)數(shù)4.6個。相同條件下，使用MS培養(yǎng)基保存的馬鈴薯組培苗，2011年4月7日剪切接種，2011年5月7日組培苗株高長至8厘米，生長時間是31天，組培苗生長較弱，葉色淡綠，莖桿細(xì)弱彎曲，分枝較多且細(xì)弱，平均莖粗0.12厘米，平均每株苗莖節(jié)數(shù)4.1個。本發(fā)明所描述的具體實施例只用于對該培養(yǎng)基的具體實現(xiàn)過程的詳細(xì)描述，而不是對該培養(yǎng)基的限定。任何對此產(chǎn)品進(jìn)行的修飾與改良，在專利范圍或范疇內(nèi)同類或相近物質(zhì)的替代與使用，均屬于本發(fā)明專利范圍，受此專利保護。
權(quán)利要求
1.一種促進(jìn)馬鈴薯組培苗快速生長的培養(yǎng)基，其特征在于:以IL培養(yǎng)基計，由以下組分組成:NH4N031567.5 1732.5mg, KN031805 1995mg, CaCl2.2H20418 462mg,MgSO4.7H20400 440mg，KH2P04162 178mg，KI0.79 0.87mg, Η3Β035.9 6.5mg,MnSO4.4H2016.1 17.7mg, ZnSO4.7H208.2 9.0mg, Na2MnO4.2H200.24 0.26mg,CuSO4.5H200.024 0.026mg, CoCl2.6H200.024 0.026mg, FeNa2EDTA.H2072 78mg, C6H120695 105mg, C6H5NO20.48 0.52mg, C8H11NO3.HC10.48 0.52mg,C12H17ClN4OS *HC10.09 0.llmg, C12H220n28500 31500mg，瓊月旨 3800 4200mg, phytagel植物凝膠1425 1575mg，余量為水。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)基，其特征在于，以IL培養(yǎng)基計，由以下組分組成:NH4N031650mg, KN031900mg, CaCl2.2H20440mg, MgSO4.7H20420mg, KH2P04170mg,KI0.83mg, H3BO36.2mg, MnSO4.4H2016.9mg, ZnSO4.7H208.6mg, Na2MnO4.2H200.25mg,CuSO4.5H200.025mg, CoCl2.6H200.025mg, FeNa2EDTA.H2075mg, C6H12O6IOOmg, C6H5NO20.5mg,C8H11NO3.HC10.5mg, C12H17ClN4OS.HC10.lmg, C12H220n30000mg，瓊月旨 4000mg, phytagel 植物凝膠1500mg，余量為水。
3.一種促進(jìn)馬鈴薯組培苗快速生長的培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于，包含以下步驟: a、準(zhǔn)確稱取除瓊脂和phytagel植物凝膠外的培養(yǎng)基其余組分，加蒸餾水充分溶解后，定容； b、加入瓊脂和phytagel植物凝膠,加熱至70 90°C至瓊脂和phytagel植物凝膠完全溶解； C、分別用lmol/1的硝酸或lmol/1的氫氧化鈉溶液將培養(yǎng)基的pH值調(diào)節(jié)至5.5-5.7 ； d、將步驟b中的培養(yǎng)基分裝 至組織瓶中，于121 125°C、103.43kPa下滅菌20 30分鐘，制得本發(fā)明的固體培養(yǎng)基。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于:步驟a后不加入瓊脂和phytagel植物凝膠，制得本發(fā)明的液體培養(yǎng)基。
5.一種促進(jìn)馬鈴薯組培苗快速生長的培養(yǎng)基的使用方法，其特征在于:其使用方法為:在無菌操作臺上，每60ml固體培養(yǎng)基扦插入10-12個馬鈴薯組培苗莖段，在環(huán)境溫度20-220C>24小時光照的組培室內(nèi)培養(yǎng)10天后再加入IOml液體培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)10天。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種促進(jìn)馬鈴薯組培苗快速生長的培養(yǎng)基，由以下組分組成NH4NO3，KNO3，CaCl2·2H2O，MgSO4·7H2O，KH2PO4，KI，H3BO3，MnSO4·4H2O，ZnSO4·7H2O，Na2MnO4·2H2O，CuSO4·5H2O，CoCl2·6H2O，F(xiàn)eNa2EDTA·H2O，C6H12O6，C6H5NO2，C8H11NO3·HCl，C12H17ClN4OS·HCl，C12H22O11，瓊脂，phytagel植物凝膠，余量為水。能促使馬鈴薯組培苗的生長速度，從接種之日起到株高長至8厘米所需要的時間僅為20天，大大提高了組培苗剪切、轉(zhuǎn)接的工作效率。
文檔編號A01H4/00GK103168696SQ201310137928
公開日2013年6月26日 申請日期2013年4月19日 優(yōu)先權(quán)日2013年4月19日
發(fā)明者張新永, 郭華春, 包媛媛 申請人:云南農(nóng)業(yè)大學(xué)