一種蛋雞飼用微生態(tài)制劑的制備方法及其應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種蛋雞飼用微生態(tài)制劑的制備方法及其應(yīng)用，屬于微生態(tài)制劑領(lǐng)域。該微生態(tài)制劑是將植物乳桿菌和枯草芽孢桿菌菌種經(jīng)發(fā)酵罐增菌培養(yǎng)后，與含有果膠、吐溫80、甘油、甘露醇、海藻糖和碳酸氫鈉的水溶液混合均勻，通過噴霧干燥技術(shù)制成微膠囊化活菌粉，將此菌粉與硒化卡拉膠、蛋氨酸鋅及輔料混合均勻后制成。上述微生態(tài)制劑可在常溫條件下儲(chǔ)存，產(chǎn)品具有良好的腸溶性與生物粘附性。蛋雞在飼喂正常日糧的基礎(chǔ)上，添加該微生態(tài)制劑，不僅可以提高機(jī)體的抗氧化能力，使產(chǎn)蛋后期蛋雞的輸卵管受損程度降低，還可以抑制組織內(nèi)炎性因子的過度釋放，減輕炎癥反應(yīng)造成的損傷，從而保證機(jī)體組織與細(xì)胞的活力與完整性，維持機(jī)體健康并提高生產(chǎn)性能。
【專利說明】—種蛋雞飼用微生態(tài)制劑的制備方法及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明具體涉及一種蛋雞飼用微生態(tài)制劑及其制備方法，屬于微生態(tài)制劑領(lǐng)域?！颈尘凹夹g(shù)】
[0002]雞蛋是人類獲得蛋白質(zhì)的重要來源，深受國內(nèi)外消費(fèi)者的喜愛。長期以來，蛋雞飼養(yǎng)者為提高雞蛋產(chǎn)量，實(shí)現(xiàn)經(jīng)濟(jì)效益最大化，普遍采用高密度的籠養(yǎng)飼喂方式，使蛋雞缺乏運(yùn)動(dòng)、免疫抵抗力下降、應(yīng)激增加，且日糧的能量、蛋白比例不平衡，極易使蛋雞組織器官發(fā)生病理性變化。而蛋雞的健康是其發(fā)揮生產(chǎn)性能、實(shí)現(xiàn)效益最大化的根本。
[0003]相關(guān)研究表明，在蛋雞產(chǎn)蛋過程中常會(huì)發(fā)生過氧化作用，如脂質(zhì)過氧化破壞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能的完整，不良應(yīng)激刺激機(jī)體產(chǎn)生大量的活性氧，引發(fā)脂質(zhì)過氧化、蛋白質(zhì)及DNA的氧化損傷等。同時(shí)炎癥反應(yīng)也是開產(chǎn)蛋雞臨床中常見的一種病理變化，在機(jī)體不同部位的組織和器官均可發(fā)生，尤以輸卵管等部位發(fā)生最為常見。炎性相關(guān)因子的過度釋放會(huì)導(dǎo)致組織細(xì)胞的損傷，進(jìn)而破壞相應(yīng)組織器官的完整性，使之無法發(fā)揮其正常生理功能，嚴(yán)重影響蛋雞的健康，并降低其生產(chǎn)性能。
[0004]針對(duì)上述蛋雞生產(chǎn)中存在的問題，目前國內(nèi)外均無較好的解決方案。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明為了控制蛋雞生產(chǎn)中存在的上述難題，從健康家禽腸道內(nèi)分離篩選出具有提高蛋雞的抗氧化能力，抑制組織內(nèi)炎性因子的過度釋放，減輕炎癥反應(yīng)的益生菌菌種，通過復(fù)配加工制成高效活菌制劑，達(dá)到有效維護(hù)蛋雞健康安全，提高生產(chǎn)性能的目的。本發(fā)明的目的是提供一種蛋雞飼用微生態(tài)制劑的制備方法及其應(yīng)用，用于提高蛋雞的抗氧化能力，使產(chǎn)蛋后期的輸卵管受損程度降低，提高生產(chǎn)性能；用于抑制組織細(xì)胞內(nèi)炎性相關(guān)因子的過度釋放，減輕炎癥反應(yīng)，維護(hù)蛋雞健康，提高禽產(chǎn)品的品質(zhì)和產(chǎn)量。
[0006]本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的，一種蛋雞飼用微生態(tài)制劑的制備方法，包括以下步驟:
(1)將植物乳桿菌和枯草芽孢桿菌菌種分別經(jīng)發(fā)酵罐增菌培養(yǎng)后混合，得到混合菌
液；
(2)將所述混合菌液與含有果膠、吐溫80、甘油、甘露醇、海藻糖和碳酸氫鈉的水溶液按相同體積充分混合均勻，經(jīng)噴霧干燥后制成微膠囊化活菌粉；所述水溶液中果膠、吐溫80、甘油、甘露醇、海藻糖、碳酸氫鈉的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為0.5-1%,0.8-1.5%、0.8-1.2%、0.5-1%,3-6%、2-3.5% ；
(3)將所述微膠囊化活菌粉與硒化卡拉膠、蛋氨酸鋅及輔料均勻混合，制得蛋雞飼用微生態(tài)制劑。
[0007]禽源植物乳桿菌CCTCC 2012079 (LP1002)、禽源枯草芽孢桿菌CCTCC 2012078(BS0903)，是從歷年來收集、保存的若干株益生菌菌種中，經(jīng)多年反復(fù)篩選后獲得的。禽源植物乳桿菌CCTCC 2012079(LP1002)已于2012年3月14日送中國典型培養(yǎng)物保藏中心(中國.武漢.武漢大學(xué))保藏，名稱及鑒別特征:植物乳桿菌(Lacto如CiBy1S p Iemtarum) ,I號(hào):LP1002，保藏編號(hào) CCTCC NO:M2012079 ;禽源枯草芽孢桿菌 CCTCC 2012078 (BS0903)已于2012年3月14日送中國典型培養(yǎng)物保藏中心(中國.武漢.武漢大學(xué))保藏，名稱及鑒別特征:枯草芽孢桿菌(ガsubtilis\l號(hào):BS0903，保藏編號(hào) CCTCC NO:M2012078。
[0008]每克所述蛋雞飼用微生態(tài)制劑含有植物乳桿菌的個(gè)數(shù)為2.5-5億。
[0009]每克所述蛋雞飼用微生態(tài)制劑含有枯草芽孢桿菌的個(gè)數(shù)為10-25億。
[0010]所述蛋雞飼用微生態(tài)制劑中硒化卡拉膠的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為0.05-0.12%。
[0011]所述蛋雞飼用微生態(tài)制劑中蛋氨酸鋅的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為0.15-0.3%。
[0012]步驟(3)中所述輔料為葡萄糖。
[0013]上述蛋雞飼用微生態(tài)制劑的應(yīng)用，將所述蛋雞飼用微生態(tài)制劑按1%的比例加入蛋雞基礎(chǔ)日糧中，經(jīng)充分?jǐn)嚢韬蠼o開產(chǎn)蛋雞飼喂。
[0014]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果:
第一，該微生態(tài)制劑所采用的禽源植物乳桿菌和枯草芽孢桿菌為家禽益生菌，具有抑制病原菌生長、刺激機(jī)體的免疫反應(yīng)、增強(qiáng)機(jī)體抗應(yīng)激能力和為機(jī)體提供營養(yǎng)等作用。另夕卜，枯草芽孢桿菌還具有預(yù)防和治療急性痢疾、降低膽固醇、抗輻射和抗氧化等益生活性。
[0015]第二，該微生態(tài)制劑采用果膠、甘露醇、海藻糖、碳酸氫鈉等作為包被材料，利用微膠囊技術(shù)使所制得的活菌制劑能夠保持其生物活性，并且更加穩(wěn)定，可在常溫下貯存，同時(shí)提高了資源的利用率。另外，選用碳酸氫鈉作為包被劑，同時(shí)可提高胃內(nèi)PH值，促進(jìn)消化吸收并改善胃腸內(nèi)微生物正常內(nèi)環(huán)境；也具有抑制或殺害腸道致病菌，増殖益生菌，改善腸道內(nèi)微生物菌群，促進(jìn)動(dòng)物生長。上述包被材料具有良好的生物相容性和生物黏附性，不受體內(nèi)因素影響、具有控釋緩釋等優(yōu)點(diǎn)。微生態(tài)制劑采用了碳酸氫鈉與果膠作為腸溶性包被材料及海藻糖與甘露醇作為耐高溫穩(wěn)定劑，有效提高了益生菌的活性與穩(wěn)定性。
[0016]第三，本發(fā)明的微生態(tài)制劑采用硒化卡拉膠作為硒源。研究發(fā)現(xiàn)無機(jī)硒(如亞硒酸鈉)具有過氧化特性、毒性較大而生物利用率較低，對(duì)動(dòng)物和環(huán)境可造成不良影響，而生物源性有機(jī)硒的活性超過無機(jī)硒，且動(dòng)物胃腸道對(duì)有機(jī)硒的吸收效率要高于無機(jī)硒。
[0017]第四，本發(fā)明的微生態(tài)制劑在制備時(shí)將有機(jī)硒和有機(jī)鋅與益生菌通過包被技術(shù)隔離開，可使硒、鋅進(jìn)入機(jī)體后既可作為益生元與益生菌相配合，又能直接被機(jī)體吸收，發(fā)揮其作用。
[0018]第五，通過實(shí)驗(yàn)與應(yīng)用發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明微生態(tài)制劑應(yīng)用于蛋雞飼料添加劑中，可有效提高蛋雞的抗氧化能力，使產(chǎn)蛋后期蛋雞的輸卵管受損程度降低，同時(shí)抑制組織內(nèi)炎性細(xì)胞因子的過度釋放，減輕炎癥反應(yīng)造成的損傷，從而保證組織與細(xì)胞的活力與完整性，維護(hù)蛋雞的健康并提高生產(chǎn)性能。
[0019]第六，本發(fā)明微生態(tài)制劑含有的益生元物質(zhì)不僅可以提高蛋雞的抗氧化能力，使產(chǎn)蛋后期輸卵管受損程度降低，還可以抑制組織內(nèi)炎性因子的過度釋放，減輕炎癥反應(yīng)造成的損傷，從而保證機(jī)體組織與細(xì)胞的活力與完整性，維持機(jī)體健康并提高生產(chǎn)性能。
[0020]第七，本發(fā)明微生態(tài)制劑可在常溫條件下儲(chǔ)存，產(chǎn)品具有良好的腸溶性與生物粘附性。蛋雞在飼喂正常日糧的基礎(chǔ)上，添加該微生態(tài)制劑，不僅可以提高機(jī)體的抗氧化能力，使產(chǎn)蛋后期蛋雞的輸卵管受損程度降低，還可以抑制組織內(nèi)炎性因子的過度釋放，減輕炎癥反應(yīng)造成的損傷，從而保證機(jī)體組織與細(xì)胞的活力與完整性，維持機(jī)體健康并提高生產(chǎn)性能。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0021]圖1是實(shí)施例3停喂微生態(tài)制劑15天對(duì)產(chǎn)蛋后期蛋雞籠養(yǎng)蛋雞各組織IL-1 ^表達(dá)的影響對(duì)比圖；
圖2是實(shí)施例3停喂微生態(tài)制劑15天對(duì)產(chǎn)蛋后期蛋雞籠養(yǎng)蛋雞各組織IL-2表達(dá)的影響對(duì)比圖；
圖3是實(shí)施例3停喂微生態(tài)制劑15天對(duì)產(chǎn)蛋后期蛋雞籠養(yǎng)蛋雞各組織TNF- a表達(dá)的影響對(duì)比圖；
圖4是實(shí)施例3停喂微生態(tài)制劑45天對(duì)產(chǎn)蛋后期蛋雞籠養(yǎng)蛋雞各組織IL-1 3表達(dá)的影響對(duì)比圖；
圖5是實(shí)施例3停喂微生態(tài)制劑45天對(duì)產(chǎn)蛋后期蛋雞籠養(yǎng)蛋雞各組織IL-2表達(dá)的影響對(duì)比圖；
圖6是實(shí)施例3停喂微生態(tài)制劑45天對(duì)產(chǎn)蛋后期蛋雞籠養(yǎng)蛋雞組織IL-4表達(dá)的影響對(duì)比圖；
圖7是實(shí)施例3停喂微生態(tài)制劑45天對(duì)產(chǎn)蛋后期蛋雞籠養(yǎng)蛋雞組織TNF- a表達(dá)的影響對(duì)比圖；
圖8是實(shí)施例3停喂微生態(tài)制劑45天對(duì)產(chǎn)蛋后期蛋雞籠養(yǎng)蛋雞組織INF-r表達(dá)的影響對(duì)比圖；
圖9是本發(fā)明制得的微膠囊化 活菌粉掃描電鏡照片圖。
【具體實(shí)施方式】
[0022]實(shí)施例1
一種蛋雞飼用微生態(tài)制劑的制備方法，包括以下步驟:
(1)將植物乳桿菌和枯草芽孢桿菌菌種分別經(jīng)發(fā)酵罐增菌培養(yǎng)后混合，得到混合菌
液；
(2)將所述混合菌液與含有果膠、吐溫80、甘油、甘露醇、海藻糖和碳酸氫鈉的水溶液按相同體積充分混合均勻，經(jīng)噴霧干燥后制成微膠囊化活菌粉(見圖9);所述水溶液中果膠、吐溫80、甘油、甘露醇、海藻糖、碳酸氫鈉的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為0.5-1%、0.8-1.5%、
0.8-1.2%、0.5-1%, 3-6%, 2-3.5% ；
(3)將所述微膠囊化活菌粉與硒化卡拉膠、蛋氨酸鋅及輔料均勻混合，制得蛋雞飼用微生態(tài)制劑。
[0023]每克所述蛋雞飼用微生態(tài)制劑含有植物乳桿菌的個(gè)數(shù)為2.5-5億。
[0024]每克所述蛋雞飼用微生態(tài)制劑含有枯草芽孢桿菌的個(gè)數(shù)為10-25億。
[0025]所述蛋雞飼用微生態(tài)制劑中硒化卡拉膠的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為0.05-0.12%。
[0026]所述蛋雞飼用微生態(tài)制劑中蛋氨酸鋅的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為0.15-0.3%。
[0027]步驟(3)中所述輔料為葡萄糖。
[0028]上述蛋雞飼用微生態(tài)制劑的應(yīng)用，將所述蛋雞飼用微生態(tài)制劑按1%的比例加入蛋雞基礎(chǔ)日糧中，經(jīng)充分?jǐn)嚢韬蠼o開產(chǎn)蛋雞飼喂。[0029]實(shí)施例2 將發(fā)酵罐培養(yǎng)后的植物乳桿菌和枯草芽孢桿菌的液體發(fā)酵物按比例混合后，與含有
0.5%果膠、0.8%吐溫80、0.8%甘油、0.5%甘露醇、6%海藻糖和3.5%碳酸氫鈉的溶液按相同體積充分混勻后，經(jīng)噴霧干燥后制成活菌粉，再將菌粉與硒化卡拉膠、蛋氨酸鋅及葡萄糖混合均勻，得到蛋雞飼用微生態(tài)制劑。檢測(cè)后表明，每克微生態(tài)制劑含有植物乳桿菌2.5億，枯草芽孢桿菌10億，硒化卡拉膠和蛋氨酸鋅的含量分別為0.5%和3%。將制備得到的微生態(tài)制劑按1%的比例加入基礎(chǔ)日糧中，經(jīng)充分?jǐn)嚢韬蠼o開產(chǎn)蛋雞飼喂。
[0030]實(shí)驗(yàn)選取兩棟籠養(yǎng)開產(chǎn)蛋雞，每棟10000只，分為對(duì)照組(C)和實(shí)驗(yàn)組(E)，兩組在飼喂正常日糧的基礎(chǔ)上添加微生態(tài)制劑。450日齡時(shí)C組停喂微生態(tài)制劑。停喂15、45d后兩組分別隨機(jī)選取十只，處死并收集血液及器官等樣品進(jìn)行相關(guān)指標(biāo)的測(cè)定。
[0031]MDA即丙二醛，是脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的主要產(chǎn)物，MDA的測(cè)定常常與SOD的測(cè)定相互配合，SOD活力的高低間接反應(yīng)了機(jī)體清除氧自由基的能力，而MDA的高低又間接反應(yīng)了機(jī)體細(xì)胞受自由基攻擊的嚴(yán)重程度。SOD (超氧化物歧化酶)對(duì)機(jī)體的氧化與抗氧化平衡起著至關(guān)重要的作用，其可以清除超氧陰離子自由基，保護(hù)細(xì)胞免受傷害。
[0032]總抗氧化能力(T-AOC)是對(duì)機(jī)體抗氧化能力評(píng)價(jià)的一個(gè)總體指標(biāo)。機(jī)體防御體系的抗氧化能力的強(qiáng)弱與健康程度存在著密切聯(lián)系，該防御體系有酶促與非酶促兩個(gè)體系，許多酶是以微量元素為活性中心，例如:超氧化物歧化酶(S0D)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)、過氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GST)等，非酶促反應(yīng)體系中主要為維生素、氨基酸和金屬蛋白質(zhì)。例如:VE、胡蘿卜素、V。、半胱氨酸、蛋氨酸、色氨酸、組氨酸、葡萄糖、酮蘭蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白、乳鐵蛋白等。對(duì)抗氧化而言，上述體系通過消除自由基和活性氧以免引發(fā)脂質(zhì)過氧化；并分解過氧化物，阻斷過氧化鏈；同時(shí)除去起催化作用的金屬離子。
[0033]對(duì)15天兩組蛋雞血清和各組織進(jìn)行抗氧化能力檢測(cè)，結(jié)果如下表所示:
表1停喂微生態(tài)制劑15天對(duì)產(chǎn)蛋后期蛋雞血清和組織抗氧化能力的影響
【權(quán)利要求】
1.一種蛋雞飼用微生態(tài)制劑的制備方法，其特征是，包括以下步驟: (1)將植物乳桿菌和枯草芽孢桿菌菌種分別經(jīng)發(fā)酵罐增菌培養(yǎng)后混合，得到混合菌液； (2)將所述混合菌液與含有果膠、吐溫80、甘油、甘露醇、海藻糖和碳酸氫鈉的水溶液按相同體積充分混合均勻，經(jīng)噴霧干燥后制成微膠囊化活菌粉；所述水溶液中果膠、吐溫80、甘油、甘露醇、海藻糖、碳酸氫鈉的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為0.5-1%,0.8-1.5%、0.8-1.2%、0.5-1%,3-6%、2-3.5% ； (3)將所述微膠囊化活菌粉與硒化卡拉膠、蛋氨酸鋅及輔料均勻混合，制得蛋雞飼用微生態(tài)制劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛋雞飼用微生態(tài)制劑的制備方法，其特征是，每克所述蛋雞飼用微生態(tài)制劑含有植物乳桿菌的個(gè)數(shù)為2.5-5億。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛋雞飼用微生態(tài)制劑的制備方法，其特征是，每克所述蛋雞飼用微生態(tài)制劑含有枯草芽孢桿菌的個(gè)數(shù)為10-25億。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛋雞飼用微生態(tài)制劑的制備方法，其特征是，所述蛋雞飼用微生態(tài)制劑中硒化卡拉膠的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為0.05-0.12%。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛋雞飼用微生態(tài)制劑的制備方法，其特征是，所述蛋雞飼用微生態(tài)制劑中蛋氨酸鋅的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為0.15-0.3%。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛋雞飼用微生態(tài)制劑的制備方法，其特征是，步驟(3)中所述輔料為葡萄糖。
7.權(quán)利要求1所述的蛋雞飼用微生態(tài)制劑的應(yīng)用，將所述蛋雞飼用微生態(tài)制劑按1%的比例加入蛋雞基礎(chǔ)日糧中，經(jīng)充分?jǐn)嚢韬蠼o開產(chǎn)蛋雞飼喂。
【文檔編號(hào)】A23K1/00GK103518980SQ201310188155
【公開日】2014年1月22日 申請(qǐng)日期:2013年5月21日 優(yōu)先權(quán)日:2013年5月21日
【發(fā)明者】苗晉鋒, 龔建森, 石明明, 馬子力, 鄭六海, 代斌 申請(qǐng)人:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)