一種冬蟲夏草液體培養(yǎng)基及其應用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種冬蟲夏草液體培養(yǎng)基及其應用，解決冬蟲夏草在液體培養(yǎng)時長勢緩慢、周期長、容易污染等問題。本發(fā)明提供的液體培養(yǎng)基，由玉米粉、黃豆粉、蛋白胨、魚粉、蠶蛹粉、硫酸鎂，磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、復合維生素、水分組成。本發(fā)明的冬蟲夏草液體培養(yǎng)用培養(yǎng)基，豐富了底物營養(yǎng)結(jié)構(gòu)，能夠促進冬蟲夏草液體培養(yǎng)的菌絲生長，縮短培養(yǎng)時間、減少污染機會。在實際生產(chǎn)中，可以為冬蟲夏草發(fā)酵工廠的搖瓶培養(yǎng)、種子罐培養(yǎng)或發(fā)酵罐培養(yǎng)等步驟，提供優(yōu)質(zhì)的液體培養(yǎng)基。
【專利說明】一種冬蟲夏草液體培養(yǎng)基及其應用
【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于一種冬蟲夏草液體培養(yǎng)基及其應用。
【背景技術】
[0002]冬蟲夏草是一種藥用真菌(拉丁學名是Cordyceps sinensis,也寫作Ophiocordyceps sinensis),由一種子囊菌侵入蝙蝠蛾幼蟲體內(nèi)逐漸發(fā)育而成。冬蟲夏草所含的蟲草酸、蟲草素、蟲草多糖等有效成分具有許多藥用功效，在治療貧血虛弱、陽痿遺精、病后久虛、久咳不止等疾病方面效果顯著，特別是對腎臟有顯著的保健作用。由于野生冬蟲夏草越來越稀少，采用液體發(fā)酵方法生產(chǎn)冬蟲夏草菌絲體顯得日益重要。
[0003]冬蟲夏草菌絲體發(fā)酵多采用液體發(fā)酵方法，這比固體發(fā)酵方法周期短，獲得的菌絲量更多。目前科研工作者發(fā)表了一些相關專利和論文，公開了一些冬蟲夏草液體培養(yǎng)基和培養(yǎng)方法，但是大部分都屬于常用的液體培養(yǎng)基，底物中營養(yǎng)成分結(jié)構(gòu)不合理，所以在液體培養(yǎng)中會產(chǎn)生轉(zhuǎn)化效率不高、培養(yǎng)周期長、容易感染雜菌等問題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是提供一種冬蟲夏草液體培養(yǎng)基，具有轉(zhuǎn)化效率高、培養(yǎng)周期短、不易感染雜菌等特點。
[0005]本發(fā)明提供的冬蟲夏草液體培養(yǎng)基，包括下列重量配比的組分:1.00-2.50%玉米粉、3.00-8.00% 黃豆粉、0.20-0.50% 蛋白胨、1.00-5.00% 魚粉、0.50-1.50% 蠶蛹粉、
0.02-0.06% 硫酸鎂，0.01-0 .03% 磷酸二氫鉀、0.01-0.03% 磷酸氫二鉀、0.05-0.10% 復合維生素粉劑，其余為水；
復合維生素粉劑由重量比例為1.0-2.0維生素B1、1.0-2.0維生素B2、0.05-0.15核黃素混勻而成。
[0006]上述的冬蟲夏草液體培養(yǎng)基，其特征在于:玉米粉、黃豆粉由粗糧復合原料替代，重量比例為4.00-10.50%，粗糧復合原料由小米麩皮、高粱殼、蕎麥粗制粉同等比例混合而成；蛋白胨、魚粉、蠶蛹粉由粗蛋白粉替代，重量比例為1.70-7.00%，粗蛋白粉由玉米麩皮、粗蛋白胨、粗豆粉同等比例混合而成。
[0007]本發(fā)明所述的冬蟲夏草液體培養(yǎng)基，在其中加入重量配比1.00-2.00%瓊脂粉，即可用作為冬蟲夏草固體培養(yǎng)基，用于冬蟲夏草的固體培養(yǎng)。
[0008]本發(fā)明提供的冬蟲夏草液體培養(yǎng)基可應用于發(fā)酵工廠中冬蟲夏草搖瓶培養(yǎng)、種子罐培養(yǎng)和發(fā)酵罐培養(yǎng)各種操作步驟。
[0009]本發(fā)明提供的冬蟲夏草培養(yǎng)基特點是玉米粉既可以提供碳源，又含有豐富的亞油酸，還有多種維生素、礦物質(zhì)；黃豆粉可以提供大量氮源；蛋白胨、魚粉也是復合氮源，而且能彌補黃豆粉氨基酸不足的缺陷；冬蟲夏草是侵入昆蟲體內(nèi)生長的，蠶蛹粉可以向冬蟲夏草提供其生長必須的營養(yǎng)物質(zhì)。
[0010]本發(fā)明的積極效果:轉(zhuǎn)化效率高、培養(yǎng)周期短、不易感染雜菌。【具體實施方式】
[0011]實施例1.冬蟲夏草發(fā)酵工廠中的搖瓶培養(yǎng)
培養(yǎng)基成分包括5.0g玉米粉、15.0g黃豆粉、1.0g蛋白胨、5.0g魚粉、2.0g蠶蛹粉、
0.1g硫酸鎂，0.02g磷酸二氫鉀、0.02g磷酸氫二鉀、0.15g復合維生素粉劑。
[0012]復合維生素粉劑由重量比例為1.0-2.0維生素Bl、l.0-2.0維生素B2、0.05-0.15核黃素混勻而成。[0013]在冬蟲夏草發(fā)酵工廠中，采用1000ml的三角瓶進行液體培養(yǎng)冬蟲夏草菌種，每個三角瓶中裝液量200ml，上述物料加入1000ml三角瓶中，用水定容到200ml，攪拌混勻，加熱至100攝氏度，一直到全部均勻溶解到溶液中。
[0014]在三角瓶中接入直徑Icm的母種菌塊I塊，在10-20°C、轉(zhuǎn)速100_200rpm條件下，
培養(yǎng)8天，菌絲體濃度可達到20-30%，即可使培養(yǎng)液的實際狀態(tài)滿足了上種子罐的要求。
[0015]實施例2.冬蟲夏草發(fā)酵工廠中的種子罐培養(yǎng)和發(fā)酵罐培養(yǎng)
在冬蟲夏草發(fā)酵工廠中，采用50L的一級種子罐、500L的二級種子罐、5000L的發(fā)酵罐逐級放大培養(yǎng)冬蟲夏草，所采用的液體培養(yǎng)基成分及比例，與實施例1相比，將玉米粉、黃豆粉替換為等量的粗糧復合原料(其中包含小米麩皮、高粱殼、蕎麥粗制粉，同等比例混合)，蛋白胨、魚粉替換為等量的粗蛋白粉(其中包括玉米麩皮、粗蛋白胨、粗豆粉，同等比例混合)，在保證底物營養(yǎng)結(jié)構(gòu)的前提下，降低生產(chǎn)成本，其余成分與配比同實施例1，只是各成分實際投入量按照實際容器的容量進行等比例放大即可。
[0016]種子罐按照2-8%的接種量進行接種，發(fā)酵培養(yǎng)過程中，攪拌速度80-180rpm，罐壓0.02-0.80Mpa,空氣流量0.60-1.50L/min,培養(yǎng)8天；發(fā)酵罐按照5-10%的接種量進行接種，攪拌速度100-220rpm，罐壓0.05-0.18Mpa，空氣流量0.80-1.80L/min，培養(yǎng)10天。最終獲得的冬蟲夏草干燥菌粉，得率可以超過10%。
[0017]上述的冬蟲夏草液體培養(yǎng)基，在其中加入重量比例1.00-2.00%瓊脂粉，即可用作為冬蟲夏草固體培養(yǎng)基，用于冬蟲夏草的固體培養(yǎng)。
【權利要求】
1.一種冬蟲夏草液體培養(yǎng)基，其特征在于包括下列重量配比的組分:1.00-2.50%玉米粉、3.00-8.00% 黃豆粉、0.20-0.50% 蛋白胨、1.00-5.00% 魚粉、0.50-1.50% 蠶蛹粉、0.02-0.06% 硫酸鎂，0.01-0.03% 磷酸二氫鉀、0.01-0.03% 磷酸氫二鉀、0.05-0.10% 復合維生素粉劑，其余為水； 復合維生素粉劑由重量比例為1.0-2.0維生素B1、1.0-2.0維生素B2、0.05-0.15核黃素混勻而成。
2.根據(jù)權利要求1所述的冬蟲夏草液體培養(yǎng)基，其特征在于:玉米粉、黃豆粉由粗糧復合原料替代，重量比例為4.00-10.50%，粗糧復合原料由小米麩皮、高粱殼、蕎麥粗制粉同等比例混合而成；蛋白胨、魚粉、蠶蛹粉由粗蛋白粉替代，重量比例為1.70-7.00%，粗蛋白粉由玉米麩皮、粗蛋白胨、粗豆粉同等比例混合而成。
3.—種如權利I或2所述的冬蟲夏草液體培養(yǎng)基，其特征在于:在其中加入重量比例1.00-2.00%瓊脂粉，即可用作為冬蟲夏草固體培養(yǎng)基，用于冬蟲夏草的固體培養(yǎng)。
4.一種如權利I或2所述的冬蟲夏草液體培養(yǎng)基的應用，其特征在于可應用于發(fā)酵工廠中冬蟲夏草搖瓶培養(yǎng)、種 子罐培養(yǎng)和發(fā)酵罐培養(yǎng)各種操作步驟。
【文檔編號】C05G1/00GK103483037SQ201310398237
【公開日】2014年1月1日 申請日期:2013年9月5日 優(yōu)先權日:2013年9月5日
【發(fā)明者】李文新, 陳春森, 廖金永 申請人:東方中科生命科學有限責任公司