一株固氮地衣芽孢桿菌及其用途
【專利摘要】本發(fā)明公開了一株固氮地衣芽孢桿菌及其用途。該固氮地衣芽孢桿菌是地衣芽孢桿菌(Bacillus?licheniformis)BF007，其在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心的保藏號為CGMCC?No.8345。本發(fā)明所提供的地衣芽孢桿菌(Bacillus?licheniformis)BF007CGMCC?No.8345安全無害，環(huán)境友好，能夠在作物根際定殖，具有很高的固氮潛能，用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)增產(chǎn)效果顯著，在小麥、水稻、玉米等糧食作物拌種劑，蔬菜工廠化育苗接種劑，果樹抗病葉面噴施菌劑，重茬障礙土壤修復(fù)，中低產(chǎn)田培肥改良，固氮微生物菌劑和生物有機(jī)肥生產(chǎn)應(yīng)用中具有廣闊前景。
【專利說明】一株固氮地衣芽孢桿菌及其用途
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一株固氮地衣芽孢桿菌及其用途。
【背景技術(shù)】 [0002]氮肥是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中最重要的生產(chǎn)資料之一。生產(chǎn)化學(xué)氮肥消耗大量能源，占生產(chǎn)總成本的70 %~80 %。近年來能源日趨緊張，化肥生產(chǎn)用煤價格飚升導(dǎo)致化學(xué)氮肥價格上漲，農(nóng)民難以承受，反響強(qiáng)烈?；瘜W(xué)氮肥在提高作物產(chǎn)量、保障我國糧食安全方面發(fā)揮了巨大作用，但是不合理施氮已經(jīng)形成了嚴(yán)重的面源污染，造成一系列的嚴(yán)重危害，如太湖藍(lán)藻事件令人觸目驚心。城市地下水硝酸鹽污染已經(jīng)對飲用水安全造成了威脅。
[0003]大氣中含有78%的氮素，但其存在形式是分子態(tài)氮?dú)?，動植物不能直接利用，自然界只有某些原核微生物具有直接利用大氣中氮?dú)獾哪芰?，將其還原成氨，這就是生物固氮作用。選用高效固氮微生物菌種工廠化生產(chǎn)制成菌劑，或進(jìn)一步與其它富含植物營養(yǎng)的物料復(fù)合加工成生物制品，應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)，可以提供作物氮素營養(yǎng)，改善作物根際生態(tài)環(huán)境，提高土壤生物肥力性狀，這就是通常所說的固氮微生物菌劑或固氮微生物肥料。生物氮肥具有多種優(yōu)勢:①生物氮肥由可再生的生化制劑和活體微生物組成，可以再生，不存在資源枯竭問題，是可持續(xù)發(fā)展農(nóng)資產(chǎn)品。②生物氮肥是環(huán)境友好型肥料，其生產(chǎn)和使用過程均不產(chǎn)生三廢等污染性物質(zhì)，而且能改善土壤理化性質(zhì)，提高土壤肥力，是生態(tài)農(nóng)業(yè)農(nóng)資產(chǎn)品。③生物氮肥生產(chǎn)耗能少、成本低，其成本僅為等效化學(xué)氮肥的20%~40%，可以為國家節(jié)省大量的煤炭和石油等能源戰(zhàn)略物資。④使用生物氮肥可以顯著降低農(nóng)業(yè)生產(chǎn)成本，提高農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)，提升土壤肥力，使農(nóng)民受益，促進(jìn)社會和諧發(fā)展。
[0004]菌種是微生物肥料生產(chǎn)應(yīng)用的基礎(chǔ)。目前，限制我國微生物肥料行業(yè)發(fā)展的瓶頸就是高效菌種，農(nóng)業(yè)生產(chǎn)迫切需要能夠高效固氮的生產(chǎn)用菌株。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的是提供一株具有固氮作用的細(xì)菌。
[0006]本發(fā)明提供的細(xì)菌是地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)BF007,該菌株在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心的保藏編號為CGMCC N0.8345。
[0007]下述任一種地衣芽抱桿菌(Bacilluslicheniformis)BF007CGMCC N0.8345 的相關(guān)產(chǎn)品也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍:
[0008]A、含有所述地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)BF007CGMCC N0.8345 的菌劑；
[0009]B、含有所述地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis) BF007CGMCC N0.8345 或 A所述菌劑的栽培植物拌種劑，所述栽培植物采用種子繁殖法進(jìn)行繁殖；
[0010]C、含有所述地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis) BF007CGMCC N0.8345 或 A所述菌劑的生物有機(jī)肥；
[0011]D、含有所述地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis) BF007CGMCC N0.8345 或 A所述菌劑的蔬菜工廠化育苗接種劑；
[0012]E、含有所述地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis) BF007CGMCC N0.8345 或 A所述菌劑的果樹葉面噴施劑。
[0013]上述相關(guān)產(chǎn)品中，A所述菌劑的活性成份可為所述的地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis)BF007CGMCC N0.8345，也可還含其他物質(zhì)，如其他固氮菌株。所述菌劑還可包括載體。所述載體可為固體載體或液體載體。所述固體載體為礦物材料、生物材料或高分子化合物；所述礦物材料為粘土、滑石、高嶺土、蒙脫石、白碳、沸石、硅石和硅藻土中的至少一種；所述生物材料為各類作物的秸桿、松殼、稻草、花生殼、玉米粉、豆粉、淀粉、草炭和動物的糞便中的至少一種；所述高分子化合物為聚乙烯醇和/或聚二醇。所述液體載體可為有機(jī)溶劑、植物油、礦物油或水；所述有機(jī)溶劑為癸烷和/或十二烷。所述菌劑中，所述活性成分可以以被培養(yǎng)的活細(xì)胞、活細(xì)胞的發(fā)酵液、細(xì)胞培養(yǎng)物的濾液或細(xì)胞與濾液的混合物的形式存在。所述菌劑的劑型可為多種劑型，如液劑、乳劑、懸浮劑、粉劑、顆粒劑、可濕性粉劑或水分散粒劑。
[0014]上述相關(guān)產(chǎn)品中，A所述菌劑具體可為下述Al) -A6)中任一的菌劑:
[0015]Al)用于生物固氮的菌劑；
[0016]A2)提高栽培植物的產(chǎn)量和/或品質(zhì)的菌劑；
[0017]A3)促進(jìn)植物生長的菌劑；
[0018]A4)產(chǎn)生固氮酶的菌劑；
[0019]A5)生荒地改良培 肥的菌劑；
[0020]A6)防止栽培植物重茬病害和/或土傳病害的菌劑。
[0021]所述地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis)BF007CGMCC N0.8345 在制備上述相關(guān)產(chǎn)品中的應(yīng)用也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0022]所述地衣芽抱桿菌(Bacilluslicheniformis)BF007CGMCC N0.8345 或所述相關(guān)產(chǎn)品的下述任一種應(yīng)用也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍:
[0023]I)在提高栽培植物的產(chǎn)量和/或品質(zhì)中的應(yīng)用；
[0024]2 )在蔬菜工廠化育苗中的應(yīng)用；
[0025]3)在生產(chǎn)固氮酶中的應(yīng)用；
[0026]4)在促進(jìn)植物生長中的應(yīng)用；
[0027]5)在生荒地改良中的應(yīng)用；
[0028]6 )在提高土壤肥力中的應(yīng)用。
[0029]本發(fā)明還提供了利用地衣芽抱桿菌(Bacillus licheniformis)BF007CGMCCN0.8345栽培植物的方法。
[0030]本發(fā)明所提供的栽培植物的方法，為下述NI或N2的方法:
[0031]N1、包括將所述栽培植物的種子用B所述拌種劑進(jìn)行拌種后進(jìn)行種植；
[0032]N2、包括對秧苗或扦插枝條采用地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)BF007CGMCC N0.8345或A所述菌劑進(jìn)行蘸根后進(jìn)行種植。
[0033]本發(fā)明還提供了利用地衣芽抱桿菌(Bacillus licheniformis)BF007CGMCCN0.8345進(jìn)行施肥的方法。
[0034]本發(fā)明所提供的施肥方法，為下述Ml、M2或M3的方法:[0035]Ml、包括向栽培植物的土壤中施入地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)BF007CGMCC N0.8345或所述相關(guān)產(chǎn)品；
[0036]M2、包括向栽培植物的植株表面噴施地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)BF007CGMCC N0.8345或所述相關(guān)產(chǎn)品；
[0037]M3、包括向栽培植物的土壤中隨水沖施地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)BF007CGMCC N0.8345或所述相關(guān)產(chǎn)品。
[0038]上文中，所述栽培植物可為小麥、水稻、玉米、甘蔗或甘薯等農(nóng)作物。
[0039]上述在提高栽培植物的產(chǎn)量和/或品質(zhì)中的應(yīng)用和上述栽培植物的方法中，所述地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)BF007CGMCC N0.8345或所述菌劑的用量可為每畝大于等于 10lclcfu 所述地衣芽抱桿菌(Bacillus licheniformis)BF007CGMCC N0.8345,如每畝 10ncfu-1012cfu 所述地衣芽抱桿菌(Bacillus licheniformis)BF007CGMCCN0.8345。在本發(fā)明的一個實(shí)施方式中，所述地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)BF007CGMCC N0.8345或所述菌劑作為拌種劑對小麥進(jìn)行拌種，所述地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)BF007CGMCC N0.8345 或所述菌劑的用量為每畝 IO11Cfu 所述地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)BF007CGMCC N0.8345。在本發(fā)明的另一個實(shí)施方式中，所述地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)BF007CGMCC N0.8345或所述菌劑在玉米四葉期到六葉期作為追肥施入土壤中，所述地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)BF007CGMCC N0.8345或所述菌劑的用量為每畝施入IO12Cfu所述地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis)BF007CGMCC N0.8345。在本發(fā)明的又一個實(shí)施方式中，所述地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)BF007CGMCC N0.8345或所述菌劑對水稻進(jìn)行拌種并施入土壤中，所述地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)BF007CGMCC N0.8345或所述菌劑的用量為每畝施入 IO11Cfu 所述地衣芽抱桿菌(Bacillus licheniformis)BF007CGMCC N0.8345。在本發(fā)明的再一個實(shí)施方式中，所述地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)BF007CGMCCN0.8345或所述菌劑施入甘鹿土壤中，所述地`衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)BF007CGMCC N0.8345或所述菌劑的用量為每畝施入IO12Cfu所述地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis)BF007CGMCC N0.8345。在本發(fā)明的再一個實(shí)施方式中，所述地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)BF007CGMCC N0.8345或所述菌劑施入甘薯土壤中，所述地衣芽抱桿菌(Bacillus licheniformis)BF007CGMCC N0.8345或所述菌劑的用量為每畝施入IO12Cfu 所述地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)BF007CGMCC N0.8345。
[0040]培養(yǎng)所述地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis)BF007CGMCC N0.8345 的方法和制備所述相關(guān)產(chǎn)品的方法也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0041]本發(fā)明所提供的培養(yǎng)所述地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)BF007CGMCCN0.8345 的方法，包括將地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)BF007CGMCC N0.8345 在用于培養(yǎng)地衣芽孢桿菌的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的步驟。
[0042]本發(fā)明所提供的制備所述相關(guān)產(chǎn)品的方法，包括將所述地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis)BF007CGMCC N0.8345作為所述相關(guān)產(chǎn)品的組分。
[0043]所述地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis)BF007CGMCC N0.8345 是從農(nóng)田土壤中分離的固氮菌，該菌株固氮酶活性為85.583nmol C2H4/h.mg蛋白，統(tǒng)計分析極顯著高于微生物肥料常用生產(chǎn)菌種圓褐固氮菌ACCC11103。本發(fā)明所提供的地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)BF007CGMCC N0.8345安全無害，環(huán)境友好，能夠在作物根際定殖，具有很高的固氮潛能，用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)增產(chǎn)效果顯著，在小麥、水稻、玉米等糧食作物拌種劑，蔬菜工廠化育苗接種劑，果樹抗病葉面噴施菌劑，重茬障礙土壤修復(fù)，中低產(chǎn)田培肥改良，固氮微生物菌劑和生物有機(jī)肥生產(chǎn)應(yīng)用中具有廣闊前景。
[0044]保藏說明
[0045]菌種名稱:地衣芽孢桿菌
[0046]拉丁名:(Bacilluslicheniformis)
[0047]菌株編號:BR)07
[0048]保藏機(jī)構(gòu):中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心
[0049]保藏機(jī)構(gòu)簡稱:CGMCC
[0050]地址:北京市朝陽區(qū)北辰西路I號院3號
[0051]保藏日期:2013年10月16日
[0052]保藏中心登記入冊編號:CGMCC N0.8345
【具體實(shí)施方式】
[0053]下述實(shí)施例中所使用的實(shí)驗方法如無特殊說明，均為常規(guī)方法。
`[0054]下述實(shí)施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。
[0055]下述實(shí)施例中所用的培養(yǎng)基如下，使用前均在115°C條件下滅菌20分鐘:
[0056]固氮菌富集培養(yǎng)液ACCC55:蔗糖 10g、K2HPO4.3Η200.5g、NaCl0.2g、CaCO3Ig,MgSO4.7Η200.2g、用蒸餾水定容至 1000ml、ρΗ7.0 ~7.2。
[0057]改良的ACCC55 固氮菌固體培養(yǎng)基:蔗糖 10g、K2HPO4.3H200.5g、NaCl0.2g、CaCO3Ig^MgSO4.7Η200.2g、酵母膏 0.5g、瓊脂 15_20g，用蒸餾水定容至 1000ml，ρΗ7.0 ~7.2。
[0058]無氮培養(yǎng)基:蔗糖10g, NaCl0.12g，K2HPO4.3Η200.5g，CaCO3Ig, MgSO4.7Η200.2g，用蒸懼水定容至1000ml, pH7.2。
[0059]牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基:牛肉膏5g、蛋白胨10g、NaC15g、瓊脂15_20g，用蒸餾水定容至 1000ml, ρΗ7.2。
[0060]改良固氮培養(yǎng)基:蔗糖10g、K2HPO4.3Η200.5g、NaCl0.2g、CaCO3Ig,MgSO4.7Η200.2g、酵母膏 0.5g、蒸餾水 1000ml、瓊脂 15_20g，ρΗ7.0 ~7.2。
[0061]下述實(shí)施例中所用的圓褐固氮菌(Azotobacter chroococcum) ACCCl 1103(參見“孫建光等.高效固氮芽孢桿菌篩選及其生物學(xué)特性.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，42 (6): 2043-2051”)。公眾可從中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)資源與農(nóng)業(yè)區(qū)劃研究所獲得該菌株，以重復(fù)本申請的實(shí)驗。
[0062]實(shí)施例1、地衣芽抱桿菌(Bacillus licheniformis)BF007CGMCC N0.8345 的分離
與鑒定
[0063]一、作物根際固氮菌BF007的富集與分離
[0064]取IOg土樣(采自中國山西省臨汾市小麥根際)放入90ml無菌水中搖床振蕩20min制成混濁液，吸取5ml放入30ml固氮菌富集培養(yǎng)液ACCC55中，lOOrpm，28°C進(jìn)行搖床振蕩培養(yǎng)，72h后換新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。重復(fù)培養(yǎng)3次后進(jìn)行固氮芽孢菌分離。吸取Iml上述固氮菌富集培養(yǎng)物放到9ml無菌水中制成KT1稀釋度，繼續(xù)稀釋制成10_2、10_3、10_4、10_5稀釋度的菌懸液，在100°c沸水中加熱lOmin，冷卻后每個稀釋度取0.1ml涂布在無氮培養(yǎng)基平板上，29°C靜置培養(yǎng)。2~3d待菌落形成后，在改良的ACCC55固氮菌培養(yǎng)基平板上用平板劃線法進(jìn)行菌種純化。將分離純化所得的其中一個菌株命名為作物根際固氮菌BF007。
[0065]二、作物根際固氮菌BF007的鑒定
[0066]從以下幾個方面鑒定步驟一分離純化并篩選得到的作物根際固氮菌BF007:
[0067]1、形態(tài)學(xué)鑒定
[0068]將處于對數(shù)生長期且菌落大小穩(wěn)定，上述步驟一分離并純化得到的作物根際固氮菌BR)07進(jìn)行單菌落狀態(tài)描述，主要包括菌落的大小、顏色、透明度、濕潤度、菌落表面狀態(tài)(是否平坦、突起、褶皺、凹陷等)、菌落邊緣狀態(tài)(是否整齊、不規(guī)則、放射狀等)。
[0069]對于處于對數(shù)生長期的所述作物根際固氮菌BF007，經(jīng)涂片染色后采用光學(xué)顯微鏡觀察菌體的形態(tài)。
[0070]結(jié)果表明，上述步驟一分離并純化得到的作物根際固氮菌BF007在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上菌落扁平、邊緣不整齊、白色、表面粗糙皺褶，24h后菌落直徑約3mm ;菌體桿狀0.8 μ mX (1.5~3.5) μ m，革蘭氏陽性，形成芽孢，孢囊不膨大。
[0071]2、生理生化特征分析
[0072]參考《常見細(xì)菌系統(tǒng)鑒定手冊》(東秀珠，蔡妙英.常見細(xì)菌系統(tǒng)鑒定手冊.北京:科學(xué)出版社，2011.)和《微生物學(xué)實(shí)驗》(沈萍，范秀容，李廣武.微生物學(xué)實(shí)驗(第三版).北京:高等教育出版社，1999.)測定上述作物根際固氮菌BF007的生理生化特征。
[0073]所述作物根際固氮菌BF007的生理生化特征測定結(jié)果如下表1。
[0074]表1.作物根際固氮菌BF`007的生理生化特征
[0075]
【權(quán)利要求】
1.地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis)BF007,其在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心的保藏編號為CGMCC N0.8345。
2.權(quán)利要求1所述的地衣芽孢桿菌的相關(guān)產(chǎn)品，為下述任一種: A、含有權(quán)利要求1所述的地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis)BF007CGMCCN0.8345的菌劑； B、含有權(quán)利要求1所述的地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis)BF007CGMCCN0.8345或A所述菌劑的栽培植物拌種劑，所述栽培植物采用種子繁殖法進(jìn)行繁殖； C、含有權(quán)利要求1所述的地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis) BF007CGMCCN0.8345或A所述菌劑的生物有機(jī)肥； D、含有權(quán)利要求1所述的地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheni f ormi s) BF007CGMCCN0.8345或A所述菌劑的蔬菜工廠化育苗接種劑； E、含有權(quán)利要求1所述的地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis)BF007CGMCCN0.8345或A所述菌劑的果樹葉面噴施劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的相關(guān)產(chǎn)品，其特征在于:A所述菌劑為下述Al)-A6)中任一的菌劑: Al)用于生物固氮的菌劑； A2)提高栽培植物的產(chǎn)量和/或品質(zhì)的菌劑； A3)促進(jìn)植物生長的菌劑； A4)產(chǎn)生固氮酶的菌劑； A5)生荒地改良培肥的菌劑； A6)防止栽培植物重茬病害和/或土傳病害的菌劑。
4.權(quán)利要求1 所述的地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)BF007CGMCC N0.8345在制備權(quán)利要求2或3所述相關(guān)產(chǎn)品中的應(yīng)用。
5.權(quán)利要求1 所述的地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)BF007CGMCC N0.8345或權(quán)利要求2或3所述相關(guān)產(chǎn)品的下述任一種應(yīng)用: 1)在提高栽培植物的產(chǎn)量和/或品質(zhì)中的應(yīng)用； 2)在蔬菜工廠化育苗中的應(yīng)用； 3)在生產(chǎn)固氮酶中的應(yīng)用； 4)在促進(jìn)植物生長中的應(yīng)用； 5)在生荒地改良中的應(yīng)用； 6 )在提高土壤肥力中的應(yīng)用。
6.栽培植物的方法，為下述NI或N2的方法: N1、包括將所述栽培植物的種子用權(quán)利要求2中B所述的拌種劑進(jìn)行拌種后進(jìn)行種植； N2、包括對秧苗或扦插枝條采用權(quán)利要求1所述的地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis)BF007CGMCC N0.8345或權(quán)利要求2或3中A所述菌劑進(jìn)行蘸根后進(jìn)行種植。
7.施肥方法，為下述Ml、M2或M3的方法: Ml、包括向栽培植物的土壤中施入權(quán)利要求1所述的地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis)BF007CGMCC N0.8345或權(quán)利要求2或3所述相關(guān)產(chǎn)品； M2、包括向栽培植物的植株表面噴施權(quán)利要求1所述的地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis)BF007CGMCC N0.8345或權(quán)利要求2或3所述相關(guān)產(chǎn)品； M3、包括向栽培植物的土壤中隨水沖施權(quán)利要求1所述的地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis)BFOO7CGMCC N0.8345或權(quán)利要求2或3所述相關(guān)產(chǎn)品。
8.培養(yǎng)權(quán)利要求1所述地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis)BF007CGMCCN0.8345 的方法，包括將地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)BF007CGMCC N0.8345 在用于培養(yǎng)地衣芽孢桿菌的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的步驟。
9.制備權(quán)利要求2或3所述相關(guān)產(chǎn)品的方法，包括將權(quán)利要求1所述地衣芽孢桿菌(Bacillus lichenifor`mis)BF007CGMCC N0.8345 作為所述相關(guān)產(chǎn)品的組分。
【文檔編號】A01P1/00GK103555624SQ201310512513
【公開日】2014年2月5日 申請日期:2013年10月25日 優(yōu)先權(quán)日:2013年10月25日
【發(fā)明者】王天喜, 孫建光, 劉青, 李揚(yáng), 楊蘭芳 申請人:王天喜, 孫建光, 劉青, 李揚(yáng), 楊蘭芳