一種馬尾藻再生植株的誘導(dǎo)方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種馬尾藻再生植株的誘導(dǎo)方法，包括制備無菌外植體和將外植體接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基上誘導(dǎo)愈傷組織形成，誘導(dǎo)溫度為15-20℃、光強(qiáng)為4000-5000Lx，光周期為8h；馬尾藻假根于0.2%的聚維酮處理3min，然后于3%的次氯酸鈉溶液中消毒5min，在于0.1%的升汞中消毒3min可以獲得無菌成活的外植體；1LPES培養(yǎng)基中添加ZT0.1-1mg、IAA1-2mg、抗壞血酸1-3g、蔗糖30g、瓊脂7g，高溫高壓滅菌10-20min后有利于馬尾藻形成芽。
【專利說明】一種馬尾藻再生植株的誘導(dǎo)方法【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及植物組織培養(yǎng)【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種馬尾藻組織培養(yǎng)的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]馬尾藻是一種大型經(jīng)濟(jì)褐藻，藻體長度最大可達(dá)7 m以上，馬尾藻形成的自然藻場蘊(yùn)藏著豐富的生物資源，是魚類、蝦蟹類良好的繁育場所，是海洋生產(chǎn)力最高的生態(tài)系統(tǒng)之一。馬尾藻富含糖類、脂類、蛋白質(zhì)、維生素、礦物質(zhì)和多種人體必需的微量元素，其開發(fā)利用前景非常廣闊。馬尾藻是一種多年生海藻，由于生長速度快、生物量大以及在淺海生態(tài)環(huán)境中重要的生態(tài)服務(wù)功能，可作為“藍(lán)色碳匯”、藻場重建、生態(tài)系統(tǒng)環(huán)境修復(fù)、人工魚礁和海洋牧場重要的構(gòu)建物種之一，具有巨大的經(jīng)濟(jì)效益、生態(tài)效益和社會效益。馬尾藻的種質(zhì)資源比較匱乏，目前主要通過有性繁殖途徑進(jìn)行人工育種，繁殖時間比較長，且需要大量的種藻作為采孢子的來源，目前馬尾藻的商業(yè)養(yǎng)殖尚不普及，主要以自然資源作為種質(zhì)來源，不能為人工育種提供穩(wěn)定、充足的種藻來源。
[0003]植物組織培養(yǎng)技術(shù)不但可以在短時間內(nèi)繁殖出大量的愈傷組織或者叢生芽，且再生的植株與原始植株沒有遺傳差異性；而愈傷組織可以繼代增殖形成新的愈傷組織，愈傷組織也可以誘導(dǎo)形成芽或根從而形成新的植株，此種繁殖方法的繁殖系數(shù)很高，可以達(dá)到事半功倍的效果，是最有效的植物培養(yǎng)方法。而馬尾藻的組織培養(yǎng)技術(shù)目前還不成熟，還沒有成功的方法可以穩(wěn)定的形成大量的愈傷組織或者叢生芽。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]針對現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷，本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種馬尾藻再生植株的誘導(dǎo)方法，通過在假根上誘導(dǎo)馬尾藻形成芽的途徑達(dá)到無性育種的目的。
[0005]為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明的技術(shù)方案如下:
一種馬尾藻再生植株的誘導(dǎo)方法，包括如下步驟:以馬尾藻的假根作為外植體，清洗干凈后，于0.2%的聚維酮處理3min，然后于3%的次氯酸鈉溶液中消毒5min，在于0.1%的升汞中消毒3min ;將消毒后的外植體用無菌過濾海水清洗干凈后切成長度為0.3-0.5mm的切段，將切段接種于添加激素的固體PES培養(yǎng)基中，于光照強(qiáng)度為4000-5000LX、光照時間為8h、溫度為15-20°C的條件下培養(yǎng)20-30d至芽形成。
[0006]進(jìn)一步的，所述的培養(yǎng)基的配置方法為，IL PES培養(yǎng)基中添加ZT 0.1-lmg、IAAl-2mg、抗壞血酸l_3g、鹿糖30g、瓊脂7g,高溫高壓滅菌20min。
[0007]進(jìn)一步的，所述的培養(yǎng)基的配置方法為，IL PES培養(yǎng)基中添加ZT 0.lmg, IAAlmg,抗壞血酸lg、鹿糖30g、瓊脂7g,高溫高壓滅菌20min。
[0008]進(jìn)一步的，所述的培養(yǎng)基的配置方法為，IL PES培養(yǎng)基中添加ZT lmg, IAA2mg、抗壞血酸3g、鹿糖30g、瓊脂7g,高溫高壓滅菌20min。
[0009]進(jìn)一步的，所述的培養(yǎng)基的配置方法為，IL PES培養(yǎng)基中添加ZT 0.5mg、IAAlmg,抗壞血酸2g、鹿糖30g、瓊脂7g,高溫高壓滅菌20min。[0010]進(jìn)一步的，所述的培養(yǎng)基的配置方法為，IL PES培養(yǎng)基中添加ZT lmg, IAAlmg、抗壞血酸3g、鹿糖30g、瓊脂7g,高溫高壓滅菌20min。
[0011]進(jìn)一步的，所述的培養(yǎng)基的配置方法為，IL PES培養(yǎng)基中添加ZT 0.5mg、IAA1.5mg、抗壞血酸3g、鹿糖30g、瓊脂7g,高溫高壓滅菌20min。
[0012]本發(fā)明的有益效果是:
首次成功的以馬尾藻假根作為外植體誘導(dǎo)芽形成，且芽的誘導(dǎo)率可以達(dá)到42%，芽可以進(jìn)一步發(fā)育形成馬尾藻植株，為馬尾藻藻場提供豐富的種質(zhì)資源。
【具體實(shí)施方式】
[0013]以下通過實(shí)施例進(jìn)一步闡述本發(fā)明的有益效果:
實(shí)施例1:
以馬尾藻的假根作為外植體，清洗干凈后，于0.2%的聚維酮處理3min，然后于3%的次氯酸鈉溶液中消毒5min，在于0.1%的升汞中消毒3min ;將消毒后的外植體用無菌過濾海水清洗干凈后切成長度為0.3-0.5mm的切段；將切段接種于固體PES培養(yǎng)基中，IL PES培養(yǎng)基中添加ZT 0.1mg> IAAlmg、抗壞血酸lg、鹿糖30g、瓊脂7g ;于光照強(qiáng)度為4000_5000Lx、光照時間為8h、溫度為18°C的條件下繼續(xù)培養(yǎng)28d至芽形成；共接種100塊假根切塊，100塊組織塊中有20塊外植體上有芽形成,芽的誘導(dǎo)率為20%。
[0014]實(shí)施例2:
以馬尾藻的假根作為外植體，清洗干凈后，于0.2%的聚維酮處理3min，然后于3%的次氯酸鈉溶液中消毒5min，在于0.1%的升汞中消毒3min ;將消毒后的外植體用無菌過濾海水清洗干凈后切成長度為0.3-0.5mm的切段；將切段接種于固體PES培養(yǎng)基中，IL PES培養(yǎng)基中添加ZT lmg, IAA2mg、抗壞血酸3g、蔗糖30g、瓊脂7g ;于光照強(qiáng)度為4000-5000Lx、光照時間為8h、溫度為18°C的條件下繼續(xù)培養(yǎng)28d至芽形成；共接種100塊假根切塊，100塊組織塊中有40塊外植體上有芽形成,芽的誘導(dǎo)率為42%。
[0015]實(shí)施例3:
以馬尾藻的假根作為外植體，清洗干凈后，于0.2%的聚維酮處理3min，然后于3%的次氯酸鈉溶液中消毒5min，在于0.1%的升汞中消毒3min ;將消毒后的外植體用無菌過濾海水清洗干凈后切成長度為0.3-0.5mm的切段；將切段接種于固體PES培養(yǎng)基中，IL PES培養(yǎng)基中添加ZT 0.5mg、IAAlmg、抗壞血酸2g、鹿糖30g、瓊脂7g ;于光照強(qiáng)度為4000_5000Lx、光照時間為8h、溫度為18°C的條件下繼續(xù)培養(yǎng)28d至芽形成；共接種100塊假根切塊，100塊組織塊中有30塊外植體上有芽形成，芽的誘導(dǎo)率為30%。
[0016]實(shí)施例4:
以馬尾藻的假根作為外植體，清洗干凈后，于0.2%的聚維酮處理3min，然后于3%的次氯酸鈉溶液中消毒5min，在于0.1%的升汞中消毒3min ;將消毒后的外植體用無菌過濾海水清洗干凈后切成長度為0.3-0.5mm的切段；將切段接種于固體PES培養(yǎng)基中，IL PES培養(yǎng)基中添加ZT lmg, IAAlmg、抗壞血酸3g、蔗糖30g、瓊脂7g ;于光照強(qiáng)度為4000-5000Lx、光照時間為8h、溫度為18°C的條件下繼續(xù)培養(yǎng)28d至芽形成；共接種100塊假根切塊，100塊組織塊中有38塊外植體上有芽形成，芽的誘導(dǎo)率為38%。
[0017]實(shí)施例5:以馬尾藻的假根作為外植體，清洗干凈后，于0.2%的聚維酮處理3min，然后于3%的次氯酸鈉溶液中消毒5min，在于0.1%的升汞中消毒3min ;將消毒后的外植體用無菌過濾海水清洗干凈后切成長度為0.3-0.5mm的切段；將切段接種于固體PES培養(yǎng)基中，IL PES培養(yǎng)基中添加ZT 0.5mg、IAA1.5mg、抗壞血酸3g、鹿糖30g、瓊脂7g ;于光照強(qiáng)度為4000_5000Lx、光照時間為8h、溫度為18°C的條件下繼續(xù)培養(yǎng)28d至芽形成；共接種100塊假根切塊，100塊組織塊中有42塊外植體上有芽形成,芽的誘導(dǎo)率為42%。 [0018]上述實(shí)例只是為說明本發(fā)明的技術(shù)構(gòu)思以及技術(shù)特點(diǎn)，并不能以此限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。凡根據(jù)本發(fā)明的實(shí)質(zhì)所做的等效變換或修飾，都應(yīng)該涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種馬尾藻再生植株的誘導(dǎo)方法，其特征在于，包括如下步驟:以馬尾藻的假根作為外植體，清洗干凈后，于0.2%的聚維酮處理3min，然后于3%的次氯酸鈉溶液中消毒5min，在于0.1%的升汞中消毒3min ;將消毒后的外植體用無菌過濾海水清洗干凈后切成長度為0.3-0.5mm的切段，將切段接種于添加激素的固體PES培養(yǎng)基中，于光照強(qiáng)度為4000-5000LX、光照時間為8h、溫度為15_20°C的條件下培養(yǎng)20_30d至芽形成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的馬尾藻再生植株的誘導(dǎo)方法，其特征在于，所述的培養(yǎng)基的配置方法為，IL PES培養(yǎng)基中添加ZT 0.1-lmg, IAAl_2mg、抗壞血酸l_3g、蔗糖30g、瓊脂7g，高溫高壓滅菌20min。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或權(quán)利要求2所述的馬尾藻再生植株的誘導(dǎo)方法，其特征在于，所述的培養(yǎng)基的配置方法為，IL PES培養(yǎng)基中添加ZT 0.11^、^^11!^、抗壞血酸18、蔗糖3(^、瓊脂7g,高溫高壓滅菌20min。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或權(quán)利要求2所述的馬尾藻再生植株的誘導(dǎo)方法，其特征在于，所述的培養(yǎng)基的配置方法為，IL PES培養(yǎng)基中添加ZT 11^、^^21!^、抗壞血酸38、蔗糖3(^、瓊脂7g，高溫高壓滅菌20min。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或權(quán)利要求2所述的馬尾藻再生植株的誘導(dǎo)方法，其特征在于，所述的培養(yǎng)基的配置方法為，IL PES培養(yǎng)基中添加ZT 0.5mg、IAAlmg、抗壞血酸2g、蔗糖30g、瓊脂7g,高溫高壓滅菌20min。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或權(quán)利要求2所述的馬尾藻再生植株的誘導(dǎo)方法，其特征在于，所述的培養(yǎng)基的配置方法為，IL PES培養(yǎng)基中添加ZT 11^、^^11!^、抗壞血酸38、蔗糖3(^、瓊脂7g，高溫高壓滅菌20min。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或權(quán)利要求2所述的馬尾藻再生植株的誘導(dǎo)方法，其特征在于，所述的培養(yǎng)基的配置方法為，IL PES培養(yǎng)基中添加ZT 0.5mg、IAA1.5mg、抗壞血酸3g、蔗糖30g、瓊脂7g,高溫高壓滅菌20min。
【文檔編號】A01H4/00GK103621402SQ201310525496
【公開日】2014年3月12日 申請日期:2013年10月31日 優(yōu)先權(quán)日:2013年10月31日
【發(fā)明者】張亞峰 申請人:張亞峰