一種馬鈴薯組培苗的接種方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種馬鈴薯組培苗的接種方法，其特征在于：嚴格控制馬鈴薯脫毒組培苗生長的影響因子，并對接種器械、培養(yǎng)室、接種室嚴格消毒滅菌后采用整組切段、分散組培再切段的接種方法，實現(xiàn)馬鈴薯脫毒組培繁育高速度、短周期、低污染、簡操作、低成本的目的。
【專利說明】一種馬鈴薯組培苗的接種方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于植物栽培【技術(shù)領(lǐng)域】，尤其涉及一種馬鈴薯組培苗的接種方法。
【背景技術(shù)】
[0002]隨著農(nóng)業(yè)技術(shù)的不斷發(fā)展，馬鈴薯脫毒技術(shù)已廣泛應用。所謂脫毒即是:切取馬鈴薯幼芽莖尖生長錐0.2-0.3毫米，進行組織培養(yǎng)，育成脫毒試管苗，進而結(jié)出無病毒的塊莖，它已成為防治馬鈴薯病毒，提高馬鈴薯產(chǎn)量最好的方法。把莖尖脫毒、組織培養(yǎng)、無病毒種薯繁育結(jié)合起來，形成一個完整的脫毒快繁體系，才能真正實現(xiàn)馬鈴薯繁育速度快、質(zhì)量好的目的。
[0003]然而，現(xiàn)有脫毒組培技術(shù)中，組織培養(yǎng)投資大、經(jīng)濟效益低，嚴重影響了脫毒組培技術(shù)的推廣，主要表現(xiàn)為組培用培養(yǎng)基價格昂貴，組培速度緩慢，組培苗接種時病毒污染大，操作步驟復雜，費時費力。
[0004]CN10182221A專利號文件公開了馬鈴薯莖節(jié)段直接培育微型種薯的育種方法，提供了一種馬鈴薯脫毒組培苗接種技術(shù)，該方法是將組培脫毒苗切成3~5個帶有葉柄腋芽的小段，然后在無菌超凈的工作臺中，將馬鈴薯無毒苗切斷均勻接種到誘導營養(yǎng)基中。該方法提高了組培速度，但 操作時采用單個切段技術(shù)，存在費時費力、操作復雜、易染病毒、周期長的缺陷。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于:采用整組切段、分散組培再切段的接種方法，實現(xiàn)馬鈴薯脫毒組培繁育過程中切段時，病毒感染率更低、繁育速度更快、操作簡單、省時省力的目的。
[0006]為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是:
[0007]本發(fā)明結(jié)合馬鈴薯種薯生長過程中根莖發(fā)育的特性，根據(jù)現(xiàn)代生物學技術(shù)，在控制溫度、濕度、光照、PH值等各項影響因子條件下，以脫毒組培苗為母體，采用克隆技術(shù)進行無性繁殖，達到馬鈴薯脫毒繁育速度快、品質(zhì)高的要求，具體方法如下:
[0008]1、消毒滅菌
[0009](I)培養(yǎng)基的消毒滅菌:本發(fā)明脫毒苗組培用的培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，將配制好的營養(yǎng)基在高溫高壓下消毒滅菌20分鐘，其中，溫度為121 °C，氣壓為1.11 一 1.14kpa ；
[0010](2)接種器械消毒滅菌:對接種室、培養(yǎng)室、配制室等采用紫外燈照射和用0.1%苯扎溴銨拖洗地板，不定時地用甲醅和高錳酸鉀進行薰蒸；接種前用75%的酒精浸泡剪刀、鑷子以及培養(yǎng)皿；浸泡后的剪刀、鑷子再進行高溫處理或在酒精燈上灼燒方可進行接種，培養(yǎng)皿則進行高溫處理或用沾有75%酒精的脫脂棉反復擦拭；牛皮紙用75%的酒精浸泡；用脫脂棉沾75%酒精反復擦手、工作臺。
[0011]2、馬鈴薯脫毒苗組培及接種影響因素的控制
[0012](I)溫度控制:培養(yǎng)室和接種室內(nèi)，晝溫控制20~27 °C，夜溫宜偏低，以減少呼吸作用的物質(zhì)消耗，溫度控制為5~8°C。[0013](2)濕度控制:針對不同地區(qū)的氣候特點，合理控制空氣相對濕度，一般控制濕度為50~70%，濕度過高，引起污染增加的概率增大，不利于脫毒組培苗的繁育。
[0014](3)、光照控制:每天盡可能利用最長時間的自然光照，光照強度為2000~30001x ;若遇陰天，則利用燈光照射，燈光照射可適當延長時間，最宜為12~15小時。
[0015](4)培養(yǎng)基pH值控制:嚴格控制培養(yǎng)基的pH值為5.8。
[0016]3、接種:在馬鈴薯脫毒苗接種的時候，把組培苗從培養(yǎng)瓶中取出，放在經(jīng)所述的高溫滅菌的培養(yǎng)皿里面的牛皮紙上，然后用手術(shù)刀片分段切割接種。其特征在于:首次接種時，培養(yǎng)瓶中為一株脫毒組培苗，從培養(yǎng)瓶中取出后切割成3~4個帶有葉柄腋芽的節(jié)段，然后接種到原培養(yǎng)瓶中，培養(yǎng)15~20天；組培苗可接種的時候，將培養(yǎng)瓶中的組培苗全部取出，每個培養(yǎng)瓶中的組培苗分為一組，采用整體切割的方法，將組培苗切割成2~3個帶有葉柄腋芽的節(jié)段，然后分組接種到備用的培養(yǎng)瓶中組培，按照所述的方法循環(huán)接種、組培，經(jīng)本發(fā)明接種、組培的馬鈴薯脫毒苗生根速度快，根系發(fā)達、根莖健壯，生命力強。
[0017]與現(xiàn)有馬鈴薯接種技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果:
[0018]1、采用整組切割方法，接種速度快、病毒污染幾率低；
[0019]2、采用整組切段、分散組培再切段的接種方法，操作簡單、生長周期短、繁育速度快。 【具體實施方式】
[0020]為了說明本發(fā)明的技術(shù)方案，下面結(jié)合實例進一步說明。
[0021]實施例1
[0022]選擇培養(yǎng)15天苗齡的強壯組培脫毒苗10株，然后采用本發(fā)明技術(shù)方案進行接種。
[0023]1、消毒滅菌
[0024](I)培養(yǎng)基的消毒滅菌:本發(fā)明脫毒苗組培用的培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，將配制好的營養(yǎng)基在高溫高壓下消毒滅菌20分鐘，其中，溫度為121 °C，氣壓為1.11 一 1.14kpa ；
[0025](2)接種器械消毒滅菌:對接種室、培養(yǎng)室、配制室等采用紫外燈照射和用0.1%苯扎溴銨拖洗地板，不定時地用甲醅和高錳酸鉀進行薰蒸；接種前用75%的酒精浸泡剪刀、鑷子以及培養(yǎng)皿；浸泡后的剪刀、鑷子再進行高溫處理或在酒精燈上灼燒方可進行接種，培養(yǎng)皿則進行高溫處理或用沾有75%酒精的脫脂棉反復擦拭；牛皮紙用75%的酒精浸泡；用脫脂棉沾75%酒精反復擦手、工作臺。
[0026]2、溫度控制:培養(yǎng)室和接種室內(nèi)，晝溫控制20~27°C，夜溫宜偏低，以減少呼吸作用的物質(zhì)消耗，溫度控制為5~8°C。
[0027]3、濕度控制:針對不同地區(qū)的氣候特點，合理控制空氣相對濕度，一般控制濕度為50~70%，濕度過高，引起污染增加的概率增大，不利于脫毒組培苗的繁育。
[0028]4、光照控制:每天盡可能利用最長時間的自然光照，光照強度為2000~30001x ；若遇陰天，則利用燈光照射，燈光照射可適當延長時間，最宜為12~15小時。
[0029]5、培養(yǎng)基pH值控制:嚴格控制培養(yǎng)基的pH值為5.8。
[0030]6、接種:將選擇的10株馬鈴薯組培脫毒苗用鑷子從培養(yǎng)瓶中取出，注意防止傷苗，逐個放在經(jīng)所述的高溫滅菌的培養(yǎng)皿里面的牛皮紙上，然后用手術(shù)刀片分段切割成3個帶有葉柄腋芽的節(jié)段，所述的每株母本組培脫毒苗切割得到的3個節(jié)段接種到原培養(yǎng)瓶中，培養(yǎng)15天，即可收獲30株子一代組培脫毒苗；再將培養(yǎng)瓶中的組培苗全部取出，每個培養(yǎng)瓶中的3株子一代組培苗分為一組，整理后采用整體切割的方法，將組培苗切割成3個帶有葉柄腋芽的節(jié)段，即可得到90株子二代組培脫毒苗節(jié)段，然后分組接種到備用的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，每個培養(yǎng)瓶中均勻接種3株子二代馬鈴薯組培脫毒苗節(jié)段，培養(yǎng)15天，即可收獲90株子二代組培脫毒苗；再將培養(yǎng)瓶中的組培苗全部取出，每個培養(yǎng)瓶中的3株子二代組培苗分為一組，整理后采用整體切割的方法，將組培苗切割成3個帶有葉柄腋芽的節(jié)段，即可得到270株子三代組培脫毒苗節(jié)段，然后分組接種到備用的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，培養(yǎng)15天后，可收獲270株組培脫毒苗。
[0031]實施例2
[0032]選擇培養(yǎng)15天苗齡的強壯組培脫毒苗10株，然后采用本發(fā)明技術(shù)方案進行接種。
[0033]1、消毒滅菌
[0034](I)培養(yǎng)基的消毒滅菌:本發(fā)明脫毒苗組培用的培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，將配制好的營養(yǎng)基在高溫高壓下消毒滅菌20分鐘，其中，溫度為121 °C，氣壓為1.11 一 1.14kpa ；
[0035](2)接種器械消毒滅菌:對接種室、培養(yǎng)室、配制室等采用紫外燈照射和用0.1%苯扎溴銨拖洗地板，不定時地用甲醅和高錳酸鉀進行薰蒸；接種前用75%的酒精浸泡剪刀、鑷子以及培養(yǎng)皿；浸泡后的剪刀、鑷子再進行高溫處理或在酒精燈上灼燒方可進行接種，培養(yǎng)皿則進行高溫處理或用沾有75%酒精的脫脂棉反復擦拭；牛皮紙用75%的酒精浸泡；用脫脂棉沾75%酒精反復擦手、工作臺。
[0036]2、溫度控制:培養(yǎng)室和接種室內(nèi)，晝溫控制20~27°C，夜溫宜偏低，以減少呼吸作用的物質(zhì)消耗，溫度控制為5~8°C。
`[0037]3、濕度控制:針對不同地區(qū)的氣候特點，合理控制空氣相對濕度，一般控制濕度為50~70%，濕度過高，引起污染增加的概率增大，不利于脫毒組培苗的繁育。
[0038]4、光照控制:每天盡可能利用最長時間的自然光照，光照強度為2000~30001x ；若遇陰天，則利用燈光照射，燈光照射可適當延長時間，最宜為12~15小時。
[0039]5、培養(yǎng)基pH值控制:嚴格控制培養(yǎng)基的pH值為5.8。
[0040]6、接種:將選擇的10株馬鈴薯組培脫毒苗用鑷子從培養(yǎng)瓶中取出，注意防止傷苗，逐個放在經(jīng)所述的高溫滅菌的培養(yǎng)皿里面的牛皮紙上，然后用手術(shù)刀片分段切割成4個帶有葉柄腋芽的節(jié)段，所述的每株母本組培脫毒苗切割得到的4個節(jié)段接種到原培養(yǎng)瓶中，培養(yǎng)15天，即可收獲40株子一代組培脫毒苗；再將培養(yǎng)瓶中的組培苗全部取出，每個培養(yǎng)瓶中的4株子一代組培苗分為一組，整理后采用整體切割的方法，將組培苗切割成4個帶有葉柄腋芽的節(jié)段，即可得到160株子二代組培脫毒苗節(jié)段，然后分組接種到備用的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，每個培養(yǎng)瓶中均勻接種4株子二代馬鈴薯組培脫毒苗節(jié)段，培養(yǎng)15天，即可收獲160株子二代組培脫毒苗；再將培養(yǎng)瓶中的組培苗全部取出，每個培養(yǎng)瓶中的4株子二代組培苗分為一組，整理后采用整體切割的方法，將組培苗切割成3個帶有葉柄腋芽的節(jié)段，即可得到640株子三代組培脫毒苗節(jié)段，然后分組接種到備用的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，培養(yǎng)15天后，可收獲640株組培脫毒苗。
【權(quán)利要求】
1.一種馬鈴薯組培苗的接種方法，其特征是采用整組切段、分散組培再切段的接種方法，具體步驟為:(I)根據(jù)馬鈴薯脫毒苗的組培條件，嚴格控制培養(yǎng)室和接種室的溫度、濕度、光照、PH值；(2)接種器械和培養(yǎng)基消毒滅菌處理；(3)分段切割接種。
2.如權(quán)利要求1所述的一種馬鈴薯組培苗的接種方法，其特征在于:所述的培養(yǎng)室和接種室的溫度控制為:晝溫20~27V’夜溫5~8°C。
3.如權(quán)利要求1所述的一種馬鈴薯組培苗的接種方法，其特征在于:所述的培養(yǎng)室和接種室的濕度控制為:針對不同地區(qū)的氣候特點，控制相對濕度為50~70%。
4.如權(quán)利要求1所述的一種馬鈴薯組培苗的接種方法，其特征在于:所述的培養(yǎng)室和接種室的光照控制為:利用最長時間的自然光照，光照強度為2000~30001x ;若遇陰天，則利用燈光照射，燈光照射時間控制為12~15小時。
5.一種馬鈴薯組培苗的接種方法，其特征在于:在馬鈴薯脫毒苗接種的時候，把組培苗從培養(yǎng)瓶中取出，放在經(jīng)所述的高溫滅菌的培養(yǎng)皿里面的牛皮紙上，然后用手術(shù)刀片分段切割接種，具體方法是:首次接種時，培養(yǎng)瓶中為一株脫毒組培苗，從培養(yǎng)瓶中取出后切割成3~4個帶有葉柄腋芽的節(jié)段，然后接種到原培養(yǎng)瓶中，培養(yǎng)15~20天；組培苗可接種的時候，將培養(yǎng)瓶中的組培苗全部取出，每個培養(yǎng)瓶中的組培苗分為一組，采用整體切割的方法，將組培苗切割成2~3個帶有葉柄腋芽的節(jié)段，然后分組接種到備用的培養(yǎng)瓶中組培，按照所述的方法循環(huán)接種、組培。
【文檔編號】A01H4/00GK103548684SQ201310530396
【公開日】2014年2月5日 申請日期:2013年10月31日 優(yōu)先權(quán)日:2013年10月31日
【發(fā)明者】李愷, 屠建章, 張才強, 火有仁, 吳成秀 申請人:定西市凱凱生態(tài)園植物快繁有限公司