尾赤桉201-2多倍體育種方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種尾赤桉201-2多倍體育種方法，包括以下步驟：1）將尾赤桉201-2組培苗的葉片置于質(zhì)量濃度為0.2%的秋水仙素中浸泡24h；2）將步驟1）得到的經(jīng)過秋水仙素浸泡處理后的葉片接種于增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)，分化出的不定芽繼代培養(yǎng)后接種到生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)，得到尾赤桉201-2多倍體植株。本發(fā)明采用秋水仙素浸泡法誘導(dǎo)處理進行多倍體誘導(dǎo)，再結(jié)合組織培養(yǎng)技術(shù)進行培育，通過研究秋水仙素不同濃度、不同處理時間對多倍體誘導(dǎo)的影響，分析得出合適的誘導(dǎo)方案，培育出尾赤桉201-2多倍體植株。本發(fā)明的方法不僅具有經(jīng)濟方便、誘導(dǎo)作用專一性強、減小毒性等特點，還可以提高多倍體發(fā)生頻率，減少嵌合體出現(xiàn)。
【專利說明】尾赤桉201-2多倍體育種方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于植物組織培養(yǎng)【技術(shù)領(lǐng)域】，涉及一種尾赤桉201-2多倍體育種方法。
【背景技術(shù)】
[0002]桉樹是桃金娘科(Myrtaceae)桉屬(Eucalyptus)植物的統(tǒng)稱，屬常綠高大喬木(少數(shù)種為小喬木)，具有生長快、輪伐期短、材質(zhì)較好、適應(yīng)能力較強、成長空間寬廣等特點。桉樹樹姿優(yōu)美，四季常青，生長迅速，有萌芽更新及改善沼澤地的能力，宜作園林綠化樹種；樹葉含芳香油，有殺菌驅(qū)蚊作用，可提煉香油；嫩枝和樹皮中含有單寧，可以提煉栲膠；樹皮和木材還可用來造紙漿、建筑、家具等。桉樹喜溫暖氣候，但不耐濕熱，氣候過熱生長不良，畏寒，對低溫特別敏感。如果在_5°C以下2-3天就會產(chǎn)生不同程度的凍害，輕者小枝枯死，重者會全株枯死。其次，生長周期比較長，5-8年才能采伐利用。因此可以通過多倍體人工誘導(dǎo)培育優(yōu)良品種。
[0003]林木倍性育種是一種重要的培育林木新品種的途徑。經(jīng)過倍性育種育成的多倍體林木具有“巨大性”，在高產(chǎn)、收獲物優(yōu)質(zhì)及抗逆性強等方面比加倍前有顯著提高的表現(xiàn)。李云、馮大領(lǐng)在《木本植物多倍體育種研究進展》中對國內(nèi)木本植物中的多倍體資源及其誘導(dǎo)途徑及其鑒定方法作了詳細的綜述。秋水仙素是誘導(dǎo)多倍體用的最廣泛又最有效的一種誘導(dǎo)劑，它作用只局限于阻礙處于細胞分裂中期的紡錘絲的形成，而對染色體的結(jié)構(gòu)并無顯著的影響，在遺傳上很少發(fā)生其他不利的變異。羅曉丹、朱延林等總結(jié)了近年來秋水仙素在木本植物多倍體育種中的應(yīng)用情況。根據(jù)Leran的經(jīng)驗，染色體數(shù)目少、以收獲營養(yǎng)器官為主、異花授粉、多年生習(xí)性和可營養(yǎng)繁殖的植物適于通過倍性育種來改良。桉樹在生理特性上符合上述要求，具有通過加倍實現(xiàn)二倍體良種改良的潛力。
[0004]尾赤按201-2 (Eucalyptus urophylla x Eucalyptus cam aldulensis; clone DH_(201-2))是尾葉桉X赤桉的人工雜交種，既具有尾葉桉對土壤的高適應(yīng)性和強抗病能力特點，又具有赤桉早期速生、耐低溫等優(yōu)點。綜合表現(xiàn)為樹冠小，樹干筆直高大，材質(zhì)優(yōu)，有一定抗病蟲能力和抗臺風(fēng)能力，耐-3~_5°C的低溫，作為耐寒速生品種在極低溫條件下廣泛栽培仍具有挑戰(zhàn)性。當前林產(chǎn)工業(yè)對像桉樹這樣短輪伐期的工業(yè)原料林需求量日益增長，苗木供不應(yīng)求，但是，近年發(fā)生的一些病蟲害，像青枯病、流膠病、枯葉病、尺蛾等阻礙桉樹的健康發(fā)展。因此，桉樹的抗性培育研究是目前急需解決的問題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種尾赤桉201-2多倍體育種方法，采用組織培養(yǎng)與秋水仙素加倍處理相結(jié)合的方式來選育尾赤桉201-2多倍體植株，為桉樹多倍體的育種研究奠定基礎(chǔ)。
[0006]為達到上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案:
[0007]本發(fā)明的尾赤桉201-2多倍體育種方法，包括以下步驟:
[0008]I)將尾赤桉201-2組培苗的葉片置于質(zhì)量濃度為0.2%的秋水仙素中浸泡24h ；[0009]2)將步驟I)得到的經(jīng)過秋水仙素浸泡處理后的葉片接種于增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)，分化出的不定芽繼代培養(yǎng)后接種到生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)，得到尾赤桉201-2多倍體植株。
[0010]進一步，所述增殖培養(yǎng)基是以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，并添加有6-芐氨基嘌呤lmg/L、吲哚乙酸lmg/L和吲哚-3- 丁酸0.5mg/L。
[0011]進一步，所述生根培養(yǎng)基是以1/3MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，并添加有吲哚-3-丁酸
0.5mg/L 和 ABT 生根粉 0.5mg/L。
[0012]進一步，所述步驟I)中，葉片置于秋水仙素中浸泡時于搖床中振蕩，轉(zhuǎn)速為120r/
mirio [0013]進一步，所述步驟2)中，培養(yǎng)條件為:溫度25±2°C，光照強度15001x，每天光照12h。
[0014]本發(fā)明中所述的MS培養(yǎng)基和1/3MS培養(yǎng)基為植物組織培養(yǎng)中常用的基本培養(yǎng)基，其具體配方如下表所示:
【權(quán)利要求】
1.尾赤桉201-2多倍體育種方法，其特征在于:包括以下步驟: 1)將尾赤桉201-2組培苗的葉片置于質(zhì)量濃度為0.2%的秋水仙素中浸泡24h ； 2)將步驟I)得到的經(jīng)過秋水仙素浸泡處理后的葉片接種于增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)，分化出的不定芽繼代培養(yǎng)后接種到生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)，得到尾赤桉201-2多倍體植株。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的尾赤桉201-2多倍體育種方法，其特征在于:所述增殖培養(yǎng)基是以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，并添加有6-芐氨基嘌呤lmg/L、吲哚乙酸lmg/L和吲哚-3- 丁酸 0.5mg/L。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的尾赤桉201-2多倍體育種方法，其特征在于:所述生根培養(yǎng)基是以1/3MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，并添加有吲哚-3- 丁酸0.5mg/L和ABT生根粉0.5mg/L0
4.根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的尾赤桉201-2多倍體育種方法，其特征在于:所述步驟I)中，葉片置于秋水仙素中浸泡時于搖床中振蕩，轉(zhuǎn)速為120r/min。
5.根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的尾赤桉201-2多倍體育種方法，其特征在于:所述步驟2)中，培養(yǎng)條件為:溫度25 ±2°C，光照強度15001x，每天光照12h。
【文檔編號】A01H4/00GK103548688SQ201310532940
【公開日】2014年2月5日 申請日期:2013年11月1日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月1日
【發(fā)明者】陳澤雄, 劉奕清 申請人:重慶文理學(xué)院