一種白芨的組織培養(yǎng)繁育方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種白芨的組織培養(yǎng)繁育方法，包括準備兩組培養(yǎng)基、無菌苗的獲得、繼代培養(yǎng)、壯苗和生根。
【專利說明】一種白荒的組織培養(yǎng)繁育方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及組織繁育領(lǐng)域，確切地說是一種白芨的組織培養(yǎng)繁育方法。
【背景技術(shù)】
[0002]白芨，又名紫蘭、苞舌蘭、連及草，屬多年生草本球根植物(塊根)，主要分布在中國、中國臺灣地區(qū)、日本以及緬甸北部?；肋m合觀賞之用，其球莖曬干后的名稱為白及(又名白芨、明白芨、紫蘭根、甘根、白給)，屬于中草藥，其它亦有當作糊料之用途。一般品種的花色呈紫紅色，所以別稱紫蘭；另有一個變種的花為白色，稱為白花白芨(B.s.var.alba)。其它亦有黃色、粉紅色、紅色以及藍色的園藝栽培種。主要花期在春季，但依各地氣候之不同，晚冬至夏初都可能開花。如果種植，夏季因為葉尖容易曬焦，宜采半日照射的方式，盡量避免西曬。
【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的在于提供一種白芨的組織培養(yǎng)繁育方法。
[0004]上述目的通過以下方案實現(xiàn):
[0005]一種白芨的組織培養(yǎng)繁育方法，其特征在于:包括以下步驟:
[0006](I)準備兩組培養(yǎng)基:
[0007]第一組為培養(yǎng)初期誘導(dǎo)分生組織和增殖同步培養(yǎng)基(A):1/2MS+6-BA1.0—
2.0mg/L+NAA0.3—0.5mg/L,外加食糖 20—30g/L,瓊脂 7.5g 左右 /L，香蕉 80— 100g/L，PH5.5—5.8 ；
[0008]第二組為培養(yǎng)后期壯苗和生根同步培養(yǎng)基(B):MS+NAA1.0—2.0mg/L+IBA0.3—
0.5mg/L,外加食糖30g左右/L，瓊脂7.5g左右/L，香蕉100g — 120g/L，蘋果20—25g/L，胡蘿卜 20—25g/L，PH5.5—5.8，溫度 24— 28°C ；
[0009](2)無菌苗的獲得:
[0010]以野生白芨蒴果為外植體，當蒴果外表剛轉(zhuǎn)為褐色，達到形態(tài)成熟而尚未開裂時采收，帶入實驗室用洗衣粉液清洗Imin左右，漂洗干凈后，在超凈工作臺中用0.1%左右的HgCl，消毒20— 25min，無菌水沖洗3— 4次，每次約2min，隨后將所得滅菌后的果莢用刀片切開，把白芨種子均勻播撒在培養(yǎng)基(A)上，約70d后分化為白芨小苗；
[0011](3)繼代培養(yǎng):
[0012]把上述獲得的白芨小苗繼續(xù)轉(zhuǎn)接在培養(yǎng)基(A)上，IOOd左右可發(fā)育成1.0 — 1.5cm高的小苗，每隔40— 50d繼代I次，得叢生苗；
[0013](4)壯苗和生根:
[0014]將小于3cm的叢生苗轉(zhuǎn)接在培養(yǎng)基(A)上繼續(xù)增殖培養(yǎng)，依次循環(huán)；高于3cm的叢生苗轉(zhuǎn)入培養(yǎng)基(B)上進行生根培養(yǎng)，每穴I株，約60d后，當苗高5 — 8cm、根長4一6cm，即可出瓶煉苗栽培。
[0015]所述的一種白芨的組織培養(yǎng)繁育方法，其特征在于:所述的繼代培養(yǎng)每次可增殖2—6 倍。
[0016]所述的一種白芨的組織培養(yǎng)繁育方法，其特征在于:生根培養(yǎng)的生根率達到
100% O
[0017]所述的一種白芨的組織培養(yǎng)繁育方法，其特征在于:把白芨種子均勻播撒在培養(yǎng)基(A)上后，培養(yǎng)20— 30d可看到種胚明顯膨大，由黃色變?yōu)榫G色。
[0018]本發(fā)明的有益效果為:白芨屬于蘭科植物，種子無胚乳，所以自然萌發(fā)率極低，自然繁殖極差，采取此世界先進的組培技術(shù)可以使其萌發(fā)率達到60%以上，大大增加了白芨的發(fā)育能力。我公司獨創(chuàng)白芨的發(fā)芽和生根培養(yǎng)基配方可有效的提高白芨的自然萌發(fā)率以及增強白芨的發(fā)芽和生根能力。因此，此繁育方法對瀕危蘭科植物白芨的種群保護起到很大的促進作用以及對名貴中藥材的價值實現(xiàn)奠定了基礎(chǔ)。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0019]圖1為白芨的種苗播種；
[0020]圖2為白芨的增殖過程；
[0021]圖3為白芨的生根過程。
【具體實施方式】
[0022]一種白芨的組織培養(yǎng)繁育方法，包括以下步驟:
[0023](I)準備兩組培養(yǎng)基:
[0024]第一組為培養(yǎng)初期誘導(dǎo)分生組織和增殖同步培養(yǎng)基㈧:I/2MS+6-BA1.0—
2.0mg/L+NAA0.3—0.5mg/L，外加食糖 30g/L，瓊脂 7.5g/L，香蕉 100g/L, PH5.5—5.8 ；
[0025]第二組為培養(yǎng)后期壯苗和生根同步培養(yǎng)基(B):MS+NAA1.0—2.0mg/L+IBA0.3—
0.5mg/L,外加食糖30g左右/I,瓊脂7.5g/L,香蕉120g/L,蘋果25g/L,胡蘿卜25g/L,PH5.5—5.8，溫度 26 0C ；
[0026](2)無菌苗的獲得:
[0027]以野生白芨蒴果為外植體，當蒴果外表剛轉(zhuǎn)為褐色，達到形態(tài)成熟而尚未開裂時采收，帶入實驗室用洗衣粉液清洗lmin，漂洗干凈后，在超凈工作臺中用0.1%的HgCl，消毒25min，無菌水沖洗4次，每次2min，隨后將所得滅菌后的果莢用刀片切開，把白芨種子均勻播撒在培養(yǎng)基(A)上，培養(yǎng)30d可看到種胚明顯膨大，由黃色變?yōu)榫G色，70d后分化為白芨小苗；
[0028](3)繼代培養(yǎng):
[0029]把上述獲得的白芨小苗繼續(xù)轉(zhuǎn)接在培養(yǎng)基(A)上，IOOd左右可發(fā)育成1.5cm高的小苗，每隔50d繼代I次，得叢生苗；
[0030](4)壯苗和生根:
[0031]將小于3cm的叢生苗轉(zhuǎn)接在培養(yǎng)基(A)上繼續(xù)增殖培養(yǎng)，依次循環(huán)；高于3cm的叢生苗轉(zhuǎn)入培養(yǎng)基(B)上進行生根培養(yǎng)，每穴I株，60d后，當苗高8cm、根長6cm，即可出瓶煉苗栽培。
[0032]所述的繼代培養(yǎng)每次可增殖4倍。
[0033]生根培養(yǎng)的生根率達到100%。
【權(quán)利要求】
1.一種白芨的組織培養(yǎng)繁育方法，其特征在于:包括以下步驟: (1)準備兩組培養(yǎng)基: 第一組為培養(yǎng)初期誘導(dǎo)分生組織和增殖同步培養(yǎng)基(A):l/2MS+6-BA1.0—2.0mg/L+NAA0.3—0.5mg/L,外加食糖 20— 30g/L，瓊脂 1.5g 左右 / L，香蕉 80— 100g/L, PH5.5—5.8 ； 第二組為培養(yǎng)后期壯苗和生根同步培養(yǎng)基⑶:MS+NAA1.0—2.0mg/L+IBA0.3—0.5mg/L,外加食糖30g左右/L，瓊脂7.5g左右/L，香蕉100g — 120g/L，蘋果20—25g/L，胡蘿卜 20—25g/L，PH5.5—5.8，溫度 24— 28°C ； (2)無菌苗的獲得: 以野生白芨蒴果為外植體，當蒴果外表剛轉(zhuǎn)為褐色，達到形態(tài)成熟而尚未開裂時采收，帶入實驗室用洗衣粉液清洗Imin左右，漂洗干凈后，在超凈工作臺中用0.1%左右的HgCl，消毒20— 25min，無菌水沖洗3— 4次，每次約2min，隨后將所得滅菌后的果莢用刀片切開，把白芨種子均勻播撒在培養(yǎng)基(A)上，約70d后分化為白芨小苗； (3)繼代培養(yǎng): 把上述獲得的白芨小苗繼續(xù)轉(zhuǎn)接在培養(yǎng)基(A)上，IOOd左右可發(fā)育成1.0—1.5cm高的小苗，每隔40— 50d繼代I次，得叢生苗； (4)壯苗和生根: 將小于3cm的叢生苗轉(zhuǎn)接在培養(yǎng)基(A)上繼續(xù)增殖培養(yǎng)，依次循環(huán)；高于3cm的叢生苗轉(zhuǎn)入培養(yǎng)基(B)上進行生根培養(yǎng)，每穴I株，約60d后，當苗高5 — 8cm、根長4一6cm，即可出瓶煉苗栽培。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種白芨的組織培養(yǎng)繁育方法，其特征在于:所述的繼代培養(yǎng)每次可增殖2—6倍。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種白芨的組織培養(yǎng)繁育方法，其特征在于:生根培養(yǎng)的生根率達到100%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種白芨的組織培養(yǎng)繁育方法，其特征在于:把白芨種子均勻播撒在培養(yǎng)基(A)上后，培養(yǎng)20— 30d可看到種胚明顯膨大，由黃色變?yōu)榫G色。
【文檔編號】A01H4/00GK103828715SQ201310632169
【公開日】2014年6月4日 申請日期:2013年11月29日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月29日
【發(fā)明者】謝成卓 申請人:安徽中升生物科技有限公司