一種調(diào)控傘裙追寄蠅滯育的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種調(diào)控傘裙追寄蠅滯育的方法。該方法包括如下步驟：1）將待進行滯育誘導的傘裙追寄蠅置于溫度17±1℃、光周期L8:D16至L12:D12的條件下進行誘導，使所述傘裙追寄蠅進入滯育態(tài)；2）將步驟1）得到的進入滯育態(tài)的所述傘裙追寄蠅轉(zhuǎn)入溫度4℃、黑暗的條件下貯存；3）步驟2）貯存結(jié)束后，將所述傘裙追寄蠅轉(zhuǎn)入溫度23±1℃、光周期L14:D10至L16:D8的條件下，恢復發(fā)育。該方法滯育誘導率100%，滯育后的貯存期可達120天，滯育解除后20天可得到羽化的成蠅。本發(fā)明對傘裙追寄蠅的大規(guī)模擴繁，延長其產(chǎn)品貨架期及在田間的防控作用時間，提高害蟲防治效率，加深對天敵昆蟲發(fā)育機制的認識，探索昆蟲對環(huán)境的適應機制及進化途徑等均具有重要意義。
【專利說明】一種調(diào)控傘裙追寄蠅滯育的方法【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于生物【技術(shù)領(lǐng)域】，涉及一種調(diào)控傘裙追寄蠅滯育的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]天敵昆蟲是一類寄生或捕食其他昆蟲的昆蟲，它們在農(nóng)田、林區(qū)和牧場中控制著害蟲的發(fā)展和蔓延。我國天敵昆蟲資源十分豐富，具有強有力的開發(fā)應用的物質(zhì)基礎(chǔ)。通過發(fā)展天敵昆蟲規(guī)?；a(chǎn)技術(shù)，采用室內(nèi)大量繁殖天敵昆蟲方法和大量釋放的技術(shù)，可增加田間初始天敵的種群數(shù)量，結(jié)合生物農(nóng)藥和生態(tài)技術(shù)，形成較為完整的病蟲害防治技術(shù)體系，替代或減少化學農(nóng)藥的使用次數(shù)與用量，保護環(huán)境和生物多樣性，確保農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)安全。因此，研究天敵昆蟲人工飼養(yǎng)規(guī)?；?、商品化生產(chǎn)等具有重要的應用和推廣價值。開展昆蟲滯育的深人研究，可為人類能夠了解昆蟲發(fā)育和消長的規(guī)律，最終為無公害治理害蟲、利用益蟲提供科學理論依據(jù)。
[0003]草地螟Loxostege sticticalis L.屬鱗翅目，螟蛾科類昆蟲,是一種世界性分布的農(nóng)牧業(yè)害蟲，由于其寄主植物種類繁多，是一種間歇性暴發(fā)和具有毀滅性的遷飛性害蟲。在草地螟寄生昆蟲中，寄生蠅對草地螟的寄生率要高于寄生蜂，對寄主種群起到重要調(diào)控作用。草地螟的天敵類群中以寄生蠅最為豐富，是控制草地螟發(fā)生危害及種群動態(tài)的重要因素。
[0004]傘裙追寄妮(Exoristacivilis Rond.)屬雙翅目寄妮科(Diptera:Tachinidae),是完全變態(tài)類寄生蠅，發(fā)育過程中共有卵、幼蟲、蛹和成蟲這四個蟲態(tài)(發(fā)育階段)，每個蟲態(tài)的發(fā)育特點各有不同，如卵、蛹不食不動；低齡幼蟲只能在寄主體內(nèi)取食，老熟幼蟲則從蟲寄主體內(nèi)爬出，12h—24h內(nèi)即化蛹，進入不食不動狀態(tài)。成蟲則具飛行能力翅膀，可以靈活飛翔。
·[0005]傘裙追寄蠅是我國草地螟幼蟲上的重要優(yōu)勢寄生性天敵之一。雖然已經(jīng)克服了傳統(tǒng)人工繼代繁育的弊端，可以使傘裙追寄蠅能進行周年性累積繁育。但是采用傳統(tǒng)連代繁殖的方法，蠅容易退化，而且不易長期保存，給田間釋放帶來了很大的困難。通過改進繁殖技術(shù)，人為誘導該蠅進入滯育狀態(tài)，可使保存期大大延長，因此利用低溫儲藏滯育蟲繭技術(shù)，控制天敵發(fā)育時間，這對于周年擴繁天敵昆蟲意義極其重要。通過把握各世代的繁育進程以及準確的預測目標害蟲的發(fā)生時間和發(fā)生數(shù)量，在害蟲發(fā)生時，能及時的釋放天敵昆蟲，從而達到害蟲防治的效果。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的是提供一種調(diào)控傘裙追寄蠅滯育的方法。
[0007]本發(fā)明所提供的調(diào)控傘裙追寄蠅滯育的方法，具體包括如下步驟:
[0008](I)將待進行滯育誘導的傘裙追寄蠅置于溫度17±1°C、光周期L8:D16至L12:D12的條件下進行誘導，使所述傘裙追寄蠅進入滯育態(tài)；
[0009](2)將步驟(1)得到的進入滯育態(tài)的所述傘裙追寄蠅轉(zhuǎn)入溫度4°C、黑暗的條件下貯存；
[0010](3)步驟(2)貯存結(jié)束后，將所述傘裙追寄蠅轉(zhuǎn)入溫度23±1°C、光周期L14:D10至L16:D8的條件下，恢復發(fā)育。
[0011 ] 本發(fā)明的再一個目的是提供一種傘裙追寄蠅滯育誘導及貯存方法。
[0012]本發(fā)明所提供的傘裙追寄蠅滯育誘導及貯存方法，具體可包括如下步驟:
[0013](I)將傘裙追寄蠅置于溫度17±11:、光周期1^8:016至1^12:012的條件下進行誘導，使所述傘裙追寄蠅進入滯育態(tài)；
[0014](2)將步驟(1)得到的進入滯育態(tài)的所述傘裙追寄蠅轉(zhuǎn)入溫度4°C、黑暗的條件下貯存。
[0015]本發(fā)明的另一個目的是提供一種傘裙追寄蠅滯育誘導方法。
[0016]本發(fā)明所提供的傘裙追寄蠅滯育誘導方法，具體可包括如下步驟:將傘裙追寄蠅置于溫度17±1°C、光周期L8:D16至L12:D12的條件下進行誘導，使所述傘裙追寄蠅進入滯育態(tài)。
[0017]對于上述本發(fā)明所提供的三種方法，在本發(fā)明中，步驟(1)中，所述溫度具體為16°C、17°C或 180C ;所述光周期具體為 L8:D16、L10:D14 或 L12:D12。
[0018]對于上述本發(fā)明所提供的三種方法，步驟(1)中，所述條件中的光照強度為4000-5000LX ;所述條件中的空氣相對濕度為60%-70%。
[0019]對于上述本發(fā)明所提供`的三種方法，步驟(1)中，所述待進行滯育誘導的傘裙追寄蠅為傘裙追寄蠅的卵或幼蟲；對所述傘裙追寄蠅進行滯育誘導的時間至少涵蓋所述傘裙追寄蠅的幼蟲期。
[0020]具體的，在本發(fā)明中，步驟(1)中，所述“將待進行滯育誘導的傘裙追寄蠅置于溫度17±1°C、光周期L8:D16至L12:D12的條件下進行誘導”為:將卵期的所述傘裙追寄蠅置于溫度17±1°C、光周期L8:D16至L12:D12的條件下進行誘導，于蛹期或成蟲期將所述傘裙追寄蠅從所述溫度17±11:、光周期1^8:016至1^12:012的條件下取出。
[0021]在上述方法的步驟(2)中，所述貯存的時間可為120天以內(nèi)，最好為60天以內(nèi)，如30-60天。所述條件中的空氣相對濕度為60%-70%，如70%。
[0022]在上述方法的步驟(3)中，所述恢復發(fā)育的時間可為20天，20天后所述傘裙追寄蠅即可羽化為成蟲。所述條件中的光照強度為5000LX ;所述條件中的空氣相對濕度為60%-70%，如 70%ο
[0023]在本發(fā)明中，對所述傘裙追寄蠅進行滯育誘導、滯育維持或滯育解除時的寄主為草地螟,如4齡末~5齡初的草地螟。
[0024]本發(fā)明所提供的調(diào)控傘裙追寄蠅滯育的方法，滯育誘導率近100%，滯育后的貯存期可達120天，滯育解除后20后天可得到羽化的成蠅。本發(fā)明不僅有助于生產(chǎn)實踐中促進傘裙追寄蠅的大規(guī)模擴繁，延長其產(chǎn)品貨架期及在田間的防控作用時間，也有助于掌握天敵昆蟲的發(fā)育特點，提高害蟲防治效率。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0025]圖1為溫度和光周期對傘裙追寄蠅滯育的影響。
[0026]圖2為16°C和18°C時傘裙追寄蠅的滯育誘導的臨界光周期。【具體實施方式】
[0027]下述實施例中所使用的實驗方法如無特殊說明，均為常規(guī)方法。
[0028]下述實施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。
[0029]供試蟲源:
[0030]傘裙追寄蠅:記載于“相紅燕，劉愛萍，高書晶，徐林波，劉長仲.草地螟優(yōu)勢寄
生性天敵-傘裙追寄蠅生物學特性研究[J].草業(yè)學報，2013，22(3):92-98”一文中，
公眾可從中國農(nóng)業(yè)科學院草原研究所獲得。傘裙追寄蠅成蟲在240ml的一次性透明水杯中飼養(yǎng)，杯口用紗網(wǎng)覆蓋，紗網(wǎng)上縫有脫脂棉球，并且用15% (體積分數(shù))蜂蜜水浸濕。
[0031]草地螟:記載于“吳晉華、劉愛萍等.人工飼料對草地螟消化酶活性及羧酸酯酶mRNA表達量的影響[J],草地學報，2012，20 (6):: 169-1174” 一文中，公眾可從中國農(nóng)業(yè)科學院草原研究所獲得。將草地螟卵置于置有濾紙的半徑為15cm的玻璃培養(yǎng)皿中，其中濾紙應保持濕潤。待草地螟孵化后，用新鮮灰菜葉或苜蓿葉飼喂草地螟，直至草地螟幼蟲為3齡時，將幼蟲轉(zhuǎn)于 長X寬=15cmX Ilcm的塑料盒中飼養(yǎng)，3-5齡幼蟲所處環(huán)境保持在60%左右。每天飼喂1-2次，并及時更換飼料并篩除蟲糞。為了減少幼蟲的死亡，應盡量減少更換葉片時對幼蟲的刷傷或撥動，采用輕輕抖動或震蕩葉片使幼蟲自行脫落到新鮮葉片上。
[0032]試驗儀器及材料
[0033]溫度和光周期對傘裙追寄蠅滯育誘導的影響試驗均在人工氣候箱(SPX-3001-G型，上海博訊實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠)內(nèi)進行，人工氣候箱溫度設(shè)置誤差為± 1°C，相對濕度設(shè)置誤差為±5%。草地螟幼蟲及傘裙追寄蠅的飼養(yǎng)均在自制養(yǎng)蟲籠中進行。另需平底試管(6cmX 1.5cm)，水銀溫度計，毛筆，脫脂棉，橡皮圈，托盤、培養(yǎng)皿、保鮮膜、蛭石等若干。
[0034]下述實施例中所使用的實驗方法如無特殊說明，均為常規(guī)方法。
[0035]下述實施例實施數(shù)據(jù)分析時，均利用DPS進行方差分析，差異顯著性檢驗采用Duncans新復極差法。
[0036]下述實施例中，光周期Lx:Dy表示每天光照時長X小時,黑暗時長y小時，x+y=24。光周期LL表示每天光照時長24小時，黑暗時長O小時；光周期DD表示每天光照時長O小時，黑暗時長24小時。
[0037]下述實施例均采用國際通用的寄生蠅滯育判斷標準，基本原理是基于有效積溫法貝U，當某寄生蠅的某蟲態(tài)在最短發(fā)育歷期的三倍時間內(nèi)仍未完成發(fā)育，即認定是進入滯育狀態(tài)。更加具體的，本發(fā)明中判定傘裙追寄蠅是否進入滯育狀態(tài)是按照如下方法確定的:若傘裙追寄蠅“幼蟲”這一蟲態(tài)在最短發(fā)育歷期的三倍時間(即27天)內(nèi)仍未完成發(fā)育，即自卵孵化成幼蟲時起，在27天內(nèi)傘裙追寄蠅的幼蟲未能進入“蛹”這一蟲態(tài)，則認定傘裙追寄蠅進入滯育狀態(tài)。
[0038]實施例1、傘裙追寄蠅的滯育誘導
[0039]一、傘裙追寄蠅滯育溫度和光周期的確定
[0040]設(shè)置4個不同溫度(14°〇、171:、211:和25 °C )和5個不同光周期(L8:D16、L10:D14、L12:D12、L14:D10、L16:D8)，共20個處理，每個處理30頭4齡末~5齡初的健壯
草地螟幼蟲(寄主)，重復3次。將交尾Id后的傘裙追寄蠅雌蠅和草地螟幼蟲一同置于養(yǎng)蟲盒中，放入不同光周期和溫度處理的人工氣候箱中(其中，光照時的光照強度為4000~5000LX、空氣相對濕度為60%-70%)，對傘裙追寄蠅進行滯育誘導(滯育誘導自“卵”這一蟲態(tài)開始)，誘導10-12天。誘導完成后，轉(zhuǎn)入正常的飼養(yǎng)條件，即23°C、L16:D8、空氣相對濕度為60%的光照培養(yǎng)箱中進行飼養(yǎng)，觀察記錄各處理組傘裙追寄蠅的滯育情況，以及蟲體發(fā)育情況。
[0041]結(jié)果如表1和圖1所示，光周期和溫度是傘裙追寄蠅滯育誘導的主要環(huán)境影響因子。無論是溫度還是光周期對傘裙追寄蠅滯育率都有顯著的影響。17°C時滯育率最高，SP17°C為最佳滯育溫度。低于17°C，幼蟲活動遲緩、僵硬。死亡數(shù)增加。在21°C時，隨著光照時間的增加，滯育率逐漸下降；在251:時，不能誘導滯育?？梢姡蜏?、短光照是誘導傘裙追寄蠅滯育的主要因素，溫度起主導作用，光周期只在一定的溫度范圍內(nèi)起作用。
[0042]表1室內(nèi)條件下溫度和光周期對傘裙追寄蠅滯育的影響
【權(quán)利要求】
1.一種調(diào)控傘裙追寄蠅滯育的方法，包括如下步驟: (1)將待進行滯育誘導的傘裙追寄蠅置于溫度17± I °C、光周期L8: D16至L12: D12的條件下進行誘導，使所述傘裙追寄蠅進入滯育態(tài)； (2)將步驟(1)得到的進入滯育態(tài)的所述傘裙追寄蠅轉(zhuǎn)入溫度4°C、黑暗的條件下貯存； (3)步驟(2)貯存結(jié)束后，將所述傘裙追寄蠅轉(zhuǎn)入溫度23±1°C、光周期L14:D10至L16:D8的條件下，恢復發(fā)育。
2.一種傘裙追寄蠅滯育誘導及貯存方法，包括如下步驟: (1)將傘裙追寄蠅置于溫度17±1°C、光周期L8:D16至L12:D12的條件下進行誘導，使所述傘裙追寄蠅進入滯育態(tài)； (2)將步驟(1)得到的進入滯育態(tài)的所述傘裙追寄蠅轉(zhuǎn)入溫度4°C、黑暗的條件下貯存。
3.一種傘裙追寄蠅滯育誘導方法，包括如下步驟:將傘裙追寄蠅置于溫度17土1°C、光周期L8:D16至L12:D12的條件下進行誘導，使所述傘裙追寄蠅進入滯育態(tài)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于:步驟(1)中，所述待進行滯育誘導的傘裙追寄蠅為傘裙 追寄蠅的卵或幼蟲；對所述傘裙追寄蠅進行滯育誘導的時間至少涵蓋所述傘裙追寄蠅的幼蟲期。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于:步驟(2)中，所述貯存的時間在120天以內(nèi)。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于:步驟(2)中，所述貯存的時間在60天以內(nèi)。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6中任一所述的方法，其特征在于:步驟(3)中，所述恢復發(fā)育的時間為20天。
【文檔編號】A01K67/033GK103704178SQ201310703160
【公開日】2014年4月9日 申請日期:2013年12月19日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月19日
【發(fā)明者】劉愛萍, 王育青, 徐林波, 高書晶, 劉雅學, 王建梅, 繆麗梅, 王寧, 夏明 , 康愛囯 申請人:中國農(nóng)業(yè)科學院草原研究所