玫煙色棒束孢與蘇云金桿菌可濕性粉劑的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種玫煙色棒束孢與蘇云金桿菌可濕性粉劑。所述可濕性粉劑由以下質(zhì)量百分含量的成分組成：8%～20%玫煙色棒束孢和蘇云金桿菌，1～8%潤濕劑，1～12%分散劑，0.1～0.5%紫外保護(hù)劑，余量為載體。所述的玫煙色棒束孢和蘇云金桿菌的重量份比為10∶0.4～10∶1。所述玫煙色棒束孢為玫煙色棒束孢菌株SCAU-IFCF02，于2013年11月1日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號為CCTCC?NO：M2013526。所述的蘇云金桿菌為庫斯塔克亞種。該可濕性粉劑快速、高效、無農(nóng)藥殘留、延緩害蟲抗藥性產(chǎn)生，與環(huán)境友好，尤其對小菜蛾等十字花科蔬菜害蟲有很好的防治效果。
【專利說明】玫煙色棒束孢與蘇云金桿菌可濕性粉劑
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及混合生物農(nóng)藥領(lǐng)域。更具體地，涉及一種玫煙色棒束孢與蘇云金桿菌可濕性粉劑。
【背景技術(shù)】
[0002]農(nóng)業(yè)害蟲的抗性問題是全球性熱門話題之一，也一直是農(nóng)業(yè)科技工作者關(guān)注的重點(diǎn)課題。目前對農(nóng)業(yè)害蟲的防治主要以化學(xué)防治為主，農(nóng)藥使用量的增加和不科學(xué)使用，導(dǎo)致害蟲抗藥性日益嚴(yán)重，產(chǎn)生抗性的害蟲種類越來越多，對天敵產(chǎn)生有害影響。同時(shí)，高強(qiáng)度的使用農(nóng)藥，使得農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留超標(biāo)、農(nóng)民用藥成本增加、污染環(huán)境和對人類和家畜產(chǎn)生不良影響等，不利于農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。因此，研究開發(fā)高效環(huán)保、無污染、無殘留的農(nóng)藥對農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展具有重要的意義。
[0003]玫煙色棒束孢(Jsaria /i/fflosoriosea)是一種重要的昆蟲病原真菌,廣泛分布于熱帶、亞熱帶和溫帶地區(qū)；寄主范圍廣，能寄生包括同翅目、雙翅目、鱗翅目、半翅目、鞘翅目和膜翅目等多種蔬菜、果樹及茶樹害蟲。玫煙色棒束孢作為一種活體生物農(nóng)藥，具有不同于現(xiàn)有化學(xué)殺蟲劑的全新的作用機(jī)理、對害蟲高效、對環(huán)境友好、不易產(chǎn)生抗藥性等優(yōu)點(diǎn)，因此成為國內(nèi)外生物防治研究的熱點(diǎn)。而且，用真菌微生物農(nóng)藥防治植物病蟲害是無公害農(nóng)產(chǎn)品可持續(xù)生產(chǎn)中的重要手段之一，具有廣闊的應(yīng)用前景。然而真菌制劑化是其微生物農(nóng)藥應(yīng)用的先決條件，自20世紀(jì)60年代以來，國外有10種玫煙色棒束孢制劑產(chǎn)品被研究出來并獲得注冊登記，近幾年間問世的商品制劑有分生孢子制劑Biocon (荷蘭)、AgoBiocontrolBassiana 50 (哥倫比亞)、Pae-sin (墨西哥)、Bemisin (委內(nèi)瑞拉)，芽生孢子制劑PFR-97以及芽生孢子與菌絲體的混合制劑PreFeRal。雖然這些現(xiàn)有的玫煙色棒束孢制劑對害蟲取得了較好的防治效果，但是，同其他生防真菌一樣，這些制劑殺蟲速度較慢這一缺點(diǎn)嚴(yán)重制約了其在田間的應(yīng)用。
[0004]蘇云金桿菌iBaciIlus thu`ringiensi5.,簡稱Bt)是世界上使用最廣、產(chǎn)量最大的生物殺蟲劑，它的主要活性成分是一種或數(shù)種殺蟲晶體蛋白(insecticidal crystalproteins, ICPs)，又稱δ -內(nèi)毒素，對鱗翅目、鞘翅目、膜翅目、同翅目等昆蟲以及動(dòng)植物線蟲、蜱螨等節(jié)肢動(dòng)物都有較好的特異性毒殺活性，而對非靶標(biāo)生物無有害影響。蘇云金桿菌殺蟲劑高效、專一、對人畜安全、對環(huán)境友好等優(yōu)點(diǎn)使蘇云金桿商品制劑菌成為世界上用量最大，適用范圍最廣、效果良好的微生物殺蟲劑，備受人們關(guān)注。但商品蘇云金桿菌制劑在生產(chǎn)防治上也存在速效性差，對高齡害蟲不敏感、田間持效期短、易產(chǎn)生抗性以及重組工程菌株遺傳性狀不穩(wěn)定等缺點(diǎn)，已成為影響蘇云金桿菌進(jìn)一步推廣使用的制約因素。
[0005]眾所周知，小菜蛾G0ZwidJa xy1ste I la L.)是世界性十字花科蔬菜的重要害蟲之一，其寄主多達(dá)40種以上，主要危害十字花科蔬菜，年發(fā)生世代多，繁殖率高，世代重疊現(xiàn)象嚴(yán)重。目前對小菜蛾的防治仍以化學(xué)防治為主，大量化學(xué)農(nóng)藥的連續(xù)使用，使小菜蛾始終處在較強(qiáng)的藥劑選擇壓下，又加上其繁殖速度快，導(dǎo)致其對藥劑的抗性水平越來越高，現(xiàn)已成為抗藥性最嚴(yán)重的和最難防治的害蟲之一，嚴(yán)重影響蔬菜的產(chǎn)量和質(zhì)量。目前，小菜蛾已經(jīng)對50多種殺蟲劑產(chǎn)生了不同程度的抗性，綜合治理形勢非常嚴(yán)峻。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是克服現(xiàn)有小菜蛾等十字花科蔬菜害蟲防治的技術(shù)不足，提供一種快速、高效的新型復(fù)配殺蟲劑。
[0007]本發(fā)明目的是提供一種玫煙色棒束孢與蘇云金桿菌可濕性粉劑。
[0008]本發(fā)明另一目的是提供所述可濕性粉劑的應(yīng)用。
[0009]本發(fā)明上述目的通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn): 本發(fā)明提供了一種玫煙色棒束孢與蘇云金桿菌可濕性粉劑，所述可濕性粉劑由以下質(zhì)量百分含量的成分組成:8~20%玫煙色棒束孢和蘇云金桿菌，I~8%潤濕劑，I~12%分散劑，0.1~0.5%紫外保護(hù)劑，余量為載體；
所述的玫煙色棒束孢和蘇云金桿菌的重量份比為10:0.4~10:1。更為優(yōu)選地，所述的玫煙色棒束孢和蘇云金桿菌的重量份比為10:0.6~10:0.9。
[0010]優(yōu)選地，所述可濕性粉劑由以下質(zhì)量百分含量的成分組成:10~18%玫煙色棒束孢和蘇云金桿菌，2~6%潤濕劑，2~10%分散劑，0.2~0.4%紫外保護(hù)劑，余量為載體；所述的玫煙色棒束孢和蘇云金桿菌的重量份比為10:0.6~10:0.9。
[0011]所述的玫煙色棒束孢優(yōu)選采用玫煙色棒束孢(/saria fumosorosea (Wize) Brown
&Smith)菌株SCAU-1FCF02，該菌株于2013年11月I日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號為CCTCC NO:M 2013526，保藏地址為中國武漢市武漢大學(xué)。
[0012]所述的玫煙色棒束孢為孢子含量為124億/g的玫煙色棒束孢分生孢子粉。
[0013]所述的蘇云金桿菌為蘇云金桿菌庫斯塔克亞種，質(zhì)量為50000IU/mg，市購。
[0014]所述的潤濕劑為辛烷基苯酚聚氧乙烯醚-10 (0P-10)、潤濕劑Morwet EFff (烷基萘磺酸鹽與陰離子潤濕劑混合物，阿克蘇諾貝爾公司生產(chǎn))、脂肪醇聚氧乙烯醚(AE0-9)中的一種或幾種的混合物。
[0015]所述的分散劑為脂肪醇聚氧乙烯醚、亞甲基二荼磺酸鈉、烷基萘磺酸鹽縮聚物(Morwet D-425，阿克蘇諾貝爾公司生產(chǎn))中的一種或幾種的混合物。
[0016]所述的紫外保護(hù)劑為熒光素鈉、黃原膠、抗壞血酸中的一種或幾種的混合物。
[0017]所述的載體為滑石粉、硅藻土中的一種或兩種的混合物。
[0018]優(yōu)選地,所述的潤濕劑為辛烷基苯酹聚氧乙烯醚-10或Morwet EFW中的一種或兩種的混合物。
[0019]優(yōu)選地所述的分散劑為亞甲基二荼磺酸鈉或Morwet D-425中的一種或兩種的混合物。
[0020]優(yōu)選地所述的紫外保護(hù)劑為抗壞血酸。
[0021]優(yōu)選地所述的載體為滑石粉。
[0022]本發(fā)明還提供了所述玫煙色棒束孢與蘇云金桿菌可濕性粉劑在制備防治同翅目、雙翅目、鱗翅目、半翅目、鞘翅目或膜翅目害蟲的制劑方面的應(yīng)用。
[0023]優(yōu)選地，所述害蟲為十字花科蔬菜害蟲。
[0024]更優(yōu)選地，所述害蟲為小菜蛾，紅火蟻或煙粉虱。
[0025]優(yōu)選地，所述十字花科蔬菜害蟲為小菜蛾、菜青蟲、蚜蟲、煙粉虱。[0026]優(yōu)選地，本發(fā)明所述玫煙色棒束孢分生孢子粉的制備方法如下:
51.一級固體培養(yǎng)，將玫煙色棒束孢菌株SCAU-1FCF02涂布于SDAY固體培養(yǎng)基(SDAY培養(yǎng)基為最適培養(yǎng)基)，于24°C進(jìn)行培養(yǎng)，最佳培養(yǎng)時(shí)間為15天；
52.二級液體振蕩培養(yǎng)，用含有0.03% Tween-80的無菌水洗下上述固體培養(yǎng)基上的孢子，再用滅菌紗布過濾，制成I X IO7個(gè)孢子/mL的懸浮液，IOOuL的上述懸浮液接種于200mL的薩氏培養(yǎng)液(簡稱SDB，為最適接種液)，24°C、170r/min振蕩培養(yǎng)72小時(shí)；
53.三級產(chǎn)孢培養(yǎng)，低值陳米(普通的大米，購于華南農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)貿(mào)市場)加等質(zhì)量蒸餾水，121 °C濕熱滅菌30min后冷卻備用，將S2得到的含有大量菌絲的菌液接入經(jīng)蒸汽滅菌的大米上，菌液與低值陳米充分混合后平鋪于墊有紗布的托盤中，并用保鮮膜覆蓋，24°C黑暗培養(yǎng)6天。待培養(yǎng)基表面長滿菌絲時(shí)揭去保鮮膜繼續(xù)培養(yǎng)4天，使菌絲大量產(chǎn)孢，收獲孢子粉，真空冷凍干燥24小時(shí)，干燥后的孢子粉貯存于無菌容器中，4°C保存?zhèn)溆?。獲得的孢子粉孢子含量為124億/g，活孢率為97.8%，含水量為2.56%，外觀為淡玫煙色粉末。
[0027]其中，SI所述SDAY固體培養(yǎng)基配制方法如下:
葡萄糖40g/L、蛋白胨10g/L、酵母浸膏20g/L、瓊脂15~20g/L、H2O 1L，攪拌混勻，然后分裝，滅菌，備用。
[0028]S2所述薩氏培養(yǎng)液配制方法如下:
葡萄糖40g/L、蛋白胨10g/L、酵母浸膏20g/L、H2OlL,攪拌混勻,然后分裝,滅菌,備用。
[0029]本專利發(fā)明人分離得到的玫煙色棒束孢菌株SCAU-1FCF02，對小菜蛾具有非常低的致死濃度和最快的致死速度，克服了普通真菌微生物農(nóng)藥殺蟲速度慢這一制約因素。因此，本發(fā)明以玫煙色棒束孢菌株SCAU-1FCF02的常見侵染體分生孢子為活性成分，制備成玫煙色棒束孢與蘇云金桿菌可濕性粉劑`，能夠?yàn)槊禑熒羰呔闟CAU-1FCF02的產(chǎn)業(yè)化奠定基礎(chǔ)，為該菌株的田間應(yīng)用提供理論指導(dǎo)，具有良好的應(yīng)用前景。
[0030]玫煙色棒束孢和蘇云金桿菌的搭配使用，并用來防治小菜蛾等十字花科蔬菜害蟲，目前尚無報(bào)道和應(yīng)用。不同農(nóng)藥品種及不同殺蟲物質(zhì)的搭配使用，可以有效地提高防治效果，減少用藥量，降低成本，延緩害蟲抗藥性的產(chǎn)生、延長藥劑的使用壽命，是害蟲綜合治理的重要手段。本發(fā)明人在大量室內(nèi)生物測定和大田藥效試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，發(fā)現(xiàn)蘇云金桿菌與玫煙色棒束孢SCAU-1FCF02菌株具有很好的相容性，而且本發(fā)明提供的玫煙色棒束孢與蘇云金桿菌可濕性粉劑作為一種生物殺蟲劑，對目標(biāo)害蟲的殺蟲速度和效果明顯優(yōu)于單用玫煙色棒束孢和蘇云金桿菌，具有不同的殺蟲方式和殺蟲對象，二者進(jìn)行復(fù)核獲得新型的復(fù)配殺蟲劑，擴(kuò)大了殺蟲譜，提高殺蟲效率，減緩害蟲抗藥性產(chǎn)生，減少化學(xué)農(nóng)藥的使用。所制備的殺蟲劑具有不同于現(xiàn)有殺蟲劑的全新的作用機(jī)理，殺蟲效果顯著，尤其是針對十字花科蔬菜害蟲小菜蛾的毒殺作用顯著，同時(shí)具有環(huán)境友好，對人畜安全的特點(diǎn)。因此，本發(fā)明以玫煙色棒束孢菌株SCAU-1FCF02的常見侵染體分生孢子和蘇云金桿菌為活性成分，制備成玫煙色棒束蘇云金桿菌孢可濕性粉劑，取得了非常好的防治害蟲效果，為玫煙色棒束孢制劑的產(chǎn)業(yè)化奠定基礎(chǔ)，為該制劑的田間應(yīng)用提供理論指導(dǎo)。
[0031]本發(fā)明具有以下有益效果:
本發(fā)明提供的玫煙色棒束孢與蘇云金桿菌可濕性粉劑中，蘇云金桿菌與玫煙色棒束孢孢子具有很好的相容性，增效作用明顯，對目標(biāo)害蟲的殺蟲速度和效果明顯優(yōu)于單用玫煙色棒束孢和蘇云金桿菌，達(dá)到一藥多治、速效保液的效果。殺蟲圖譜擴(kuò)大，除了防治小菜蛾外，還可以防治菜青蟲、蚜蟲、煙粉虱等其他十字花科蔬菜害蟲，并且該可濕性粉劑可重復(fù)侵染，在害蟲的無公害防治和持續(xù)綜合防治上效果明顯。
[0032]另外，本發(fā)明可濕性粉劑生產(chǎn)工藝簡單，能大幅度減少農(nóng)藥的使用量，延緩害蟲抗藥性，減少農(nóng)藥殘留，對人畜安全，對環(huán)境友好，對農(nóng)業(yè)增產(chǎn)增收，改善生態(tài)環(huán)境，發(fā)展綠色環(huán)保農(nóng)業(yè)、對實(shí)現(xiàn)可持續(xù)發(fā)展戰(zhàn)略具有重要的意義。
【具體實(shí)施方式】
[0033]以下結(jié)合具體實(shí)施例來進(jìn)一步說明本發(fā)明，但實(shí)施例并不對本發(fā)明做任何形式的限定。除非特別說明，本發(fā)明采用的試劑、方法和設(shè)備為本【技術(shù)領(lǐng)域】常規(guī)試劑、方法和設(shè)備。
[0034]除非特別說明，以下實(shí)施例所用試劑和原料為常規(guī)方法配制或市購。
[0035]本發(fā)明實(shí)施例所用玫煙色棒束孢為孢子含量為124億/g的玫煙色棒束孢分生孢子粉。
[0036]本發(fā)明對孢子萌發(fā)率的測定方法如下:將孢子懸浮液接種到真菌萌發(fā)液(葡萄糖20g/L、蛋白胨5g/L、H2O 1L)中，24。。，170 r/min，18h后鏡檢統(tǒng)計(jì)活孢率。潤濕時(shí)間按照GB/T5451-2001標(biāo)準(zhǔn)方法測定。懸浮率按GB/T 14825-2006標(biāo)準(zhǔn)方法測定。pH值按GB/T1600-93標(biāo)準(zhǔn)方法測定。細(xì)度通過激光粒徑分布儀測定。數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析:所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)進(jìn)行分析，計(jì)算均值及標(biāo)準(zhǔn)誤，均值差異顯著性通過Duncan新復(fù)極差法進(jìn)行多重分析比較。
[0037]實(shí)施例中所用的含有0.03%吐溫-80的無菌水，所述的0.03%指的是體積比。
[0038]實(shí)施例1玫煙色棒束孢分生孢子粉的制備
本實(shí)施例采用固液雙相發(fā)酵培`養(yǎng)，制備玫煙色棒束孢分生孢子粉，制備步驟如下:
51.一級固體培養(yǎng)，取50uL玫煙色棒束孢菌株SCAU-1FCF02原始菌液涂布于SDAY固體培養(yǎng)基上(SDAY培養(yǎng)基為最適培養(yǎng)基)，于24°C進(jìn)行培養(yǎng)，最佳培養(yǎng)時(shí)間為15天；
52.二級液體振蕩培養(yǎng)，用含有0.03%吐溫-80的無菌水洗下SDAY固體培養(yǎng)基上的孢子，再用雙層紗布過濾，制成I X IO7個(gè)孢子/mL的懸浮液，IOOuL的上述懸浮液接種于200mL的薩氏培養(yǎng)液(簡稱SDB，為最適接種液)，24°C、170r/min振蕩培養(yǎng)72小時(shí)；
53.三級產(chǎn)孢培養(yǎng)，低值陳米(普通的大米，購于華南農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)貿(mào)市場)加等質(zhì)量蒸餾水，121°C濕熱滅菌30min后冷卻備用，將S2得到的含有大量菌絲的菌液接入滅菌的大米上，菌液與低值陳米充分混合后平鋪于墊有紗布的托盤中，并用保鮮膜覆蓋，24°C黑暗培養(yǎng)6天。待培養(yǎng)基表面長滿菌絲時(shí)揭去保鮮膜繼續(xù)培養(yǎng)4天，使菌絲大量產(chǎn)孢，收獲孢子粉，真空冷凍干燥24小時(shí)，干燥后的孢子粉貯存于無菌容器中，4°C保存?zhèn)溆谩?br> [0039]獲得的孢子粉孢子含量為124億/g，活孢率為97.8%，含水量為2.56%，外觀為淡玫煙色粉末。
[0040]步驟SI所述SDAY固體培養(yǎng)基配制方法如下:
葡萄糖40g/L、蛋白胨10g/L、酵母浸膏20g/L、瓊脂15~20g/L、H2O 1L，攪拌混勻，然后分裝，滅菌，備用。
[0041 ] 步驟S2所述薩氏培養(yǎng)液配制方法如下:
葡萄糖40g/L、蛋白胨10g/L、酵母浸膏20g/L、H20 1L,攪拌混勻,然后分裝,滅菌,備用。
[0042]實(shí)施例2玫煙色棒束孢與蘇云金桿菌可濕性粉劑的制備1、制備方法:
51.準(zhǔn)確稱取實(shí)施例1制備的玫煙色棒束孢分生孢子粉與蘇云金桿菌原藥(市購)；
52.將各種助劑加入到低溫氣流粉碎機(jī)中，控制氣流粉碎的溫度在10°C以下，粉碎后備用；優(yōu)選按照325目細(xì)度粉碎，
53.按照比例將S2粉碎得到的各種助劑混合物加入到載體中，攪拌均勻，然后加入SI稱量好的玫煙色棒束孢分生孢子粉和蘇云金桿菌原藥，混合均勻后即得混配的可濕性粉劑。
[0043]2、本實(shí)施例所制備的可濕性粉劑包括以下重量百分比的組成成分:玫煙色棒束孢9.2%、蘇云金桿菌 0.8%、0P-10 3%, Morwet EFff 2%、亞甲基二荼磺酸鈉 3%、Morwet D-4255%、抗壞血酸0.3%、滑石粉76.7%。
[0044]3、本實(shí)施例所制備的可濕性粉劑的性能指標(biāo)測定
檢測結(jié)果表明，產(chǎn)品性能指標(biāo)優(yōu)良，玫煙色棒束孢孢子萌發(fā)率> 85 ;蘇云金桿菌芽孢萌發(fā)率為84.17%，潤濕性〈lmin ;質(zhì)量懸浮率為72.3 ;孢子的懸浮率為85.5，水分含量為
2.56 ;細(xì)度(過325目標(biāo)準(zhǔn)篩)^ 98 ;pH值為6.2。所配制的可濕性粉劑的性能指標(biāo)符合農(nóng)藥制劑商品要求。
[0045]實(shí)施例3玫煙色棒束孢與蘇云金桿菌可濕性粉劑的制備 1、制備方法同實(shí)施例2。
[0046]2、本實(shí)施例所制備的可濕性粉劑包括以下重量百分比的組成成分:玫煙色棒束孢
11.3%、蘇云金桿菌 0.7%、AE0_9 4%>Morwet EFff 2%、脂肪醇聚氧乙烯醚 2%、Morwet D-4257%、熒光素鈉0.3%、硅藻土 45.9%、`滑石粉26.8%。
[0047]3、本實(shí)施例所制備的可濕性粉劑的性能指標(biāo)測定
檢測結(jié)果表明，產(chǎn)品性能指標(biāo)優(yōu)良，玫煙色棒束孢孢子萌發(fā)率> 85 ；Bt芽孢萌發(fā)率為82.17%，潤濕性〈lmin ;質(zhì)量懸浮率為71.9 ;孢子的懸浮率為86.7，水分含量為2.96 ;細(xì)度(過325目標(biāo)準(zhǔn)篩)> 98 ;pH值為6.5。所配制的可濕性粉劑的性能指標(biāo)符合農(nóng)藥制劑商品要求。
[0048]實(shí)施例4玫煙色棒束孢與蘇云金桿菌可濕性粉劑的制備 1、制備方法同實(shí)施例2。
[0049]2、本實(shí)施例所制備的可濕性粉劑包括以下重量百分比的組成成分:玫煙色棒束孢13.8%、蘇云金桿菌1.2%、0P-10 2%、Morwet EFff 2%、脂肪醇聚氧乙烯醚2%、亞甲基二荼磺酸鈉 3%, Morwet D-425 6%、黃原膠 0.5%、滑石粉 69.5%。
[0050]3、本實(shí)施例所制備的可濕性粉劑的性能指標(biāo)測定
檢測結(jié)果表明，產(chǎn)品性能指標(biāo)優(yōu)良，玫煙色棒束孢孢子萌發(fā)率> 85 ；Bt芽孢萌發(fā)率為86.17%，潤濕性〈lmin ;質(zhì)量懸浮率為74.3 ;孢子的懸浮率為87.5，水分含量為3.06 ;細(xì)度(過325目標(biāo)準(zhǔn)篩)>98 ;pH值為6.4。所配制的可濕性粉劑的性能指標(biāo)符合農(nóng)藥制劑商品要求。
[0051]實(shí)施例5玫煙色棒束孢與蘇云金桿菌可濕性粉劑的制備 1、制備方法同實(shí)施例2。
[0052]2、本實(shí)施例所制備的可濕性粉劑包括以下重量百分比的組成成分:玫煙色棒束孢17%、蘇云金桿菌1%、0P-10 5%, Morwet EFff 3%、脂肪醇聚氧乙烯醚2%、亞甲基二荼磺酸鈉4%, Morwet D-425 5%、抗壞血酸(λ 5%、滑石粉 30%、硅藻土 32.5%。
[0053]3、本實(shí)施例所制備的可濕性粉劑的性能指標(biāo)測定
檢測結(jié)果表明，產(chǎn)品性能指標(biāo)優(yōu)良，玫煙色棒束孢孢子萌發(fā)率> 85 ；Bt芽孢萌發(fā)率為
84.17%，潤濕性〈lmin ;質(zhì)量懸浮率為72.3 ;孢子的懸浮率為85.5，水分含量為2.56 ;細(xì)度(過325目標(biāo)準(zhǔn)篩)> 98 ;pH值為6.2。所配制的可濕性粉劑的性能指標(biāo)符合農(nóng)藥制劑商品要求。 [0054]實(shí)施例6玫煙色棒束孢與蘇云金桿菌可濕性粉劑的制備 1、制備方法同實(shí)施例2。
[0055]2、本實(shí)施例所制備的可濕性粉劑包括以下重量百分比的組成成分:玫煙色棒束孢18%、蘇云金桿菌2%、0P-10 4%, Morwet EFff 4%，脂肪醇聚氧乙烯醚2%、亞甲基二荼磺酸鈉5%, Morwet D-425 5%、抗壞血酸 0.4%、滑石粉 59.6%。
[0056]3、本實(shí)施例所制備的可濕性粉劑的性能指標(biāo)測定
檢測結(jié)果表明，產(chǎn)品性能指標(biāo)優(yōu)良，玫煙色棒束孢孢子萌發(fā)率> 85 ；Bt芽孢萌發(fā)率為
85.37%，潤濕性〈lmin ;質(zhì)量懸浮率為74.3 ;孢子的懸浮率為85.5，水分含量為2.78 ;細(xì)度(過325目標(biāo)準(zhǔn)篩)> 98 ;pH值為6.5。所配制的可濕性粉劑的性能指標(biāo)符合農(nóng)藥制劑商品要求。
[0057]實(shí)施例7玫煙色棒束孢與蘇云金桿菌可濕性粉劑的藥效評價(jià)
1、供試材料
(I)供試?yán)ハx:小菜蛾(L.) 2 齡幼蟲。
[0058](2)供試藥劑:實(shí)施例2制備的玫煙色棒束孢與蘇云金桿菌可濕性粉劑。
[0059]發(fā)明人經(jīng)過室內(nèi)毒力測定實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示，上述實(shí)施例2~6所制備的玫煙色棒束孢與蘇云金桿菌可濕性粉劑均對小菜蛾具有非常好的防治效果，當(dāng)可濕性粉劑濃度為稀釋500時(shí)，從接菌后的第I天小菜蛾就開始死亡，第4天小菜蛾的校正死亡率均在90%~100%之間。
[0060]由于數(shù)據(jù)太多，本發(fā)明僅提供實(shí)施例2制備的可濕性粉劑防治小菜蛾的數(shù)據(jù)，足以說明本發(fā)明提供的玫煙色棒束孢與蘇云金桿菌可濕性粉劑對害蟲具有很好的防治效果。
[0061](3)對照藥劑:同實(shí)施例2制備方法制備得到的玫煙色棒束孢可濕性粉劑單劑和蘇云金桿菌可濕性粉劑單劑。
[0062](4)供試作物:芥藍(lán)(漢 alboglabra Bailey)。
[0063]2、玫煙色棒束孢與蘇云金桿菌可濕性粉劑對小菜蛾的室內(nèi)毒力測定 (O實(shí)驗(yàn)方法
玫煙色棒束孢與蘇云金桿菌可濕性粉劑稀釋500倍、1000倍、2000倍和5000倍四個(gè)濃度。
[0064]采用浸蟲法進(jìn)行生物測定:選取個(gè)體大小、活力一致的小菜蛾2齡幼蟲，用軟毛筆將供試幼蟲挑到干凈的芥藍(lán)葉片上，然后將葉片和幼蟲放入不同稀釋倍數(shù)的可濕性粉劑中，浸潰IOs后挑出，將幼蟲置于滅菌的濾紙上吸干多余水分后，移至葉片上，放入底部襯有濕潤濾紙的培養(yǎng)皿(直徑為9cm)內(nèi)，培養(yǎng)皿用保鮮膜封口保濕，在薄膜上扎孔通氣，置于人工智能箱中，24°C，相對濕度(RH)90%，光照周期為光照:黑暗=14:10。每處理20頭幼蟲，重復(fù)5次，共100頭幼蟲。以可濕性粉劑基礎(chǔ)配方(不包含玫煙色棒束孢孢子粉和蘇云金桿菌的可濕性粉劑)為空白對照，以玫煙色棒束孢可濕性粉劑單劑和蘇云金桿菌可濕性粉劑單劑稀釋500倍為藥劑對照。24小時(shí)后開始觀察，視皿內(nèi)葉片被取食情況更換新鮮甘藍(lán)葉片，每天記錄感病癥狀和死亡蟲數(shù)，連續(xù)觀察6天，計(jì)算死亡率和校正死亡率。
[0065]死亡率(％)=死亡蟲數(shù)/每一濃度處理試蟲總數(shù)X 100
校正死亡率(％)=(處理死亡率-對照死亡率)/ (1-對照死亡率)X 100
(2)室內(nèi)毒力測定結(jié)果
玫煙色棒束孢與蘇云金桿菌可濕性粉劑對小菜蛾的室內(nèi)毒力測定結(jié)果如表1所示。
[0066]表1玫煙色棒束孢與蘇云金桿菌可濕性粉劑對小菜蛾2齡幼蟲毒力測定結(jié)果
【權(quán)利要求】
1.一種玫煙色棒束孢與蘇云金桿菌可濕性粉劑，其特征在于，所述可濕性粉劑由以下質(zhì)量百分含量的成分組成:8~20%玫煙色棒束孢和蘇云金桿菌，1~8%潤濕劑，1~12%分散劑，0.1~0.5%紫外保護(hù)劑，余量為載體； 所述的玫煙色棒束孢和蘇云金桿菌的重量比為10:0.4~10:1。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述玫煙色棒束孢與蘇云金桿菌可濕性粉劑，其特征在于，所述可濕性粉劑由以下質(zhì)量百分含量的成分組成:10~18%玫煙色棒束孢和蘇云金桿菌，2~6%潤濕劑，2~10%分散劑，0.2~0.4%紫外保護(hù)劑，余量為載體； 所述的玫煙色棒束孢和蘇云金桿菌的重量比為10:0.6~10:0.9。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述玫煙色棒束孢與蘇云金桿菌可濕性粉劑，其特征在于，所述的玫煙色棒束孢為玫煙色棒束孢菌株SCAU-1FCF02，該菌株于2013年11月I日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號為CCTCC NO:M 2013526。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述玫煙色棒束孢與蘇云金桿菌可濕性粉劑，其特征在于，所述的玫煙色棒束孢為孢子含量為124億/g的玫煙色棒束孢分生孢子粉。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述玫煙色棒束孢與蘇云金桿菌可濕性粉劑，其特征在于，所述的蘇云金桿菌為蘇云金桿菌庫斯塔克亞種。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述玫煙色棒束孢與蘇云金桿菌可濕性粉劑，其特征在于，所述的潤濕劑為辛烷基苯酹聚氧乙烯醚-10、Morwet EFff或脂肪醇聚氧乙烯醚中的一種或幾種的混合物； 所述的分散劑為脂肪醇聚氧乙烯醚、亞甲基二荼磺酸鈉或Morwet D-425中的一種或幾種的混合物； 所述的紫外保護(hù)劑為熒光素鈉、黃原膠或抗壞血酸中的一種或幾種的混合物； 所述的載體為滑石粉或硅藻土中的一種或兩種的混合物。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述玫煙色棒束孢與蘇云金桿菌可濕性粉劑，其特征在于，所述的潤濕劑為辛烷基苯酹聚氧乙烯醚-10或Morwet EFff中的一種或兩種的混合物； 所述的分散劑為亞甲基二荼磺酸鈉或Morwet D-425中的一種或兩種的混合物； 所述的紫外保護(hù)劑為抗壞血酸； 所述的載體為滑石粉。
8.權(quán)利要求1~7任一所述玫煙色棒束孢與蘇云金桿菌可濕性粉劑在制備防治同翅目、雙翅目、鱗翅目、半翅目、鞘翅目或膜翅目害蟲的制劑方面的應(yīng)用。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述應(yīng)用，其特征在于，所述害蟲為十字花科蔬菜害蟲。
10.根據(jù)權(quán)利要求8所述應(yīng)用，其特征在于，所述害蟲為小菜蛾，紅火蟻或煙粉虱。
【文檔編號】A01N63/00GK103749545SQ201310721075
【公開日】2014年4月30日 申請日期:2013年12月24日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月24日
【發(fā)明者】何余容, 念曉歌, 呂利華 申請人:華南農(nóng)業(yè)大學(xué)