鐵皮石斛芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種鐵皮石斛芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的制備方法，芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的制備方法，在MS基本培養(yǎng)基中添加誘導(dǎo)成分。
【專利說明】鐵皮石斛芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于鐵皮石斛的培養(yǎng)技術(shù)，更具體涉及鐵皮石斛芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]鐵皮石斛產(chǎn)于安徽西南部以及浙江、福建、廣西、貴州、云南等地，分布于海拔可達(dá)1600 m左右的山地半陰濕巖石上。每個鐵皮石斛蒴果內(nèi)均含有幾萬到十幾萬粒種子，種子細(xì)如粉塵，無胚乳，難存活，導(dǎo)致鐵皮石斛自然繁殖率極低，難以獲得實生苗，加上濫采亂挖和生境破壞，其野生資源已瀕臨滅絕。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]技術(shù)方案
本發(fā)明涉及一種鐵皮石斛的培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于:所述方法的具體步驟包括:芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的制備方法。
[0004]本發(fā)明涉及一種鐵皮石斛的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于:所述方法的具體步驟包括: 1)取材方法:選取當(dāng)年籽粒飽滿的鐵皮石斛種子，采摘后，消毒處理，將消毒過的雞蛋清與鐵皮石斛種子混合均勻；
2)芽誘導(dǎo)培養(yǎng):誘導(dǎo)培養(yǎng):在無菌的條件下取飽滿的胚，去掉培乳，將消毒過的雞蛋清與去掉培乳的胚混合均勻；直接接種于所述芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上；100~150 g的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基接種2-5個去掉培乳的胚；
所述誘導(dǎo)培養(yǎng)的培養(yǎng)條件:培養(yǎng)室溫度為25±2°C,光照時間10~16 h/d,光照強(qiáng)度1000~2000 Lx ;誘導(dǎo)培養(yǎng)的時間3~8天；
3)芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配制:在MS基本培養(yǎng)基中添加:丹參多糖10-20mg/L，甘草多糖10-2 Omg/L,所述芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基,滅菌冷卻后形成固體厚度為1.2~1.6 cm。
【具體實施方式】
[0005]實施例1
1)取材方法:取當(dāng)年籽粒飽滿的鐵皮石斛種子共400粒，平均分為4組供實施例1-4使用，采摘后，消毒處理，將消毒過的雞蛋清與鐵皮石斛種子混合均勻；
2)芽誘導(dǎo)培養(yǎng):誘導(dǎo)培養(yǎng):在無菌的條件下取飽滿的胚，去掉培乳，將消毒過的雞蛋清與去掉培乳的胚混合均勻；直接接種于所述芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上；150 g的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基接種5個去掉培乳的胚；
所述誘導(dǎo)培養(yǎng)的培養(yǎng)條件:培養(yǎng)室溫度為25°C，光照時間10 h/d，光照強(qiáng)度1500Lx ;誘導(dǎo)培養(yǎng)的時間5天；
3)芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配制:在MS基本培養(yǎng)基中添加:丹參多糖10mg/L,甘草多糖10mg/L,所述芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基,滅菌冷卻后形成固體厚度為1.4 cm。
[0006]100個胚,共有73個胚誘導(dǎo)出芽,每個胚的平均誘導(dǎo)芽數(shù)為5個。
[0007]實施例2
1)取材方法:選取當(dāng)年籽粒飽滿的鐵皮石斛種子，采摘后，消毒處理，將消毒過的雞蛋清與鐵皮石斛種子混合均勻；
2)芽誘導(dǎo)培養(yǎng):誘導(dǎo)培養(yǎng):在無菌的條件下取飽滿的胚，去掉培乳，將消毒過的雞蛋清與去掉培乳的胚混合均勻；直接接種于所述芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上；100 g的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基接種3個去掉培乳的胚；
所述誘導(dǎo)培養(yǎng)的培養(yǎng)條件:培養(yǎng)室溫度為23°C，光照時間12 h/d，光照強(qiáng)度1800 Lx ；誘導(dǎo)培養(yǎng)的時間5天；
3)芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配制:在MS基本培養(yǎng)基中添加:丹參多糖20mg/L,甘草多糖20mg/L,所述芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基,滅菌冷卻后形成固體厚度為1.5 cm。
[0008]100個胚，共有80個胚誘導(dǎo)出芽，每個胚的平均誘導(dǎo)芽數(shù)為6個。
[0009]實施例3
1)取材方法:取當(dāng)年籽粒飽滿的鐵皮石斛種子，采摘后，消毒處理；
2)芽誘導(dǎo)培養(yǎng):誘導(dǎo)培養(yǎng):在無菌的條件下取飽滿的胚，直接接種于所述芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上；150 g的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基接種5個胚；
所述誘導(dǎo)培養(yǎng)的培養(yǎng)條件:培養(yǎng)室溫度為25°C，光照時間10 h/d，光照強(qiáng)度1500 Lx ；誘導(dǎo)培養(yǎng)的時間18天；
3)芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配制:在MS基本培養(yǎng)基中添加:NAA(0.lmg/L) +IAA (1.0mg/L)+AgCL (8.5g/L)，所述芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基，滅菌冷卻后形成固體厚度為1.4 cm。
[0010]100個胚，共有24個胚誘導(dǎo)出芽，每個胚的平均誘導(dǎo)芽數(shù)為I個。
[0011]實施例4
1)取材方法:選取當(dāng)年籽粒飽滿的鐵皮石斛種子，采摘后，消毒處理，將消毒過的雞蛋清與鐵皮石斛種子混合均勻；
2)芽誘導(dǎo)培養(yǎng):誘導(dǎo)培養(yǎng):在無菌的條件下取飽滿的胚，直接接種于所述芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上；150 g的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基接種5個胚；
所述誘導(dǎo)培養(yǎng)的培養(yǎng)條件:培養(yǎng)室溫度為25°C，光照時間10 h/d，光照強(qiáng)度1500Lx ;誘導(dǎo)培養(yǎng)的時間18天；
3)芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配制:在MS基本培養(yǎng)基中添加:丹參多糖20mg/L，甘草多糖20mg/L，所述芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基，滅菌冷卻后形成固體厚度為1.5 cm。
[0012]100個胚，共有45個胚誘導(dǎo)出芽，每個胚的平均誘導(dǎo)芽數(shù)為3個。
【權(quán)利要求】
1.一種鐵皮石斛的培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于:所述方法的具體步驟包括:芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的制備方法，在MS基本培養(yǎng)基中添加誘導(dǎo)成分。
2.一種鐵皮石斛的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于:芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配制:在MS基本培養(yǎng)基中添加:丹參多糖10-20 mg/L，甘草多糖10-20 mg/L，所述芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基，滅菌冷卻后 形成固體厚度為1.4~1.6 cm。
【文檔編號】A01H4/00GK103734002SQ201310729834
【公開日】2014年4月23日 申請日期:2013年12月26日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月26日
【發(fā)明者】崔鎧, 李玲玲 申請人:崔鎧