德保蘇鐵芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種德保蘇鐵芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的制備方法,芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的制備方法,在MS基本培養(yǎng)基中添加誘導(dǎo)成分。
【專利說明】德保蘇鐵芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于德保蘇鐵的培養(yǎng)技術(shù),更具體涉及德保蘇鐵芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]德保蘇鐵為蘇鐵科蘇鐵屬植物,中國特有種。零星分布于廣西西南部的靖西、德保、那坡、百色以及云南東南部的富寧等縣市,資源量極少,被列為國家一級(jí)重點(diǎn)保護(hù)野生植物。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003]技術(shù)方案
本發(fā)明涉及一種德保蘇鐵的培養(yǎng)基的制備方法,其特征在于:所述方法的具體步驟包括:芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的制備方法。
[0004]本發(fā)明涉及一種德保蘇鐵的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的制備方法,其特征在于:所述方法的具體步驟包括:
1)取材方法:選取當(dāng)年籽粒飽滿的德保蘇鐵種子,采摘后,消毒處理,將消毒過的雞蛋清與德保蘇鐵種子混合均勻;
2)芽誘導(dǎo)培養(yǎng):誘導(dǎo)培養(yǎng):在無菌的條件下取飽滿的胚,去掉培乳,將消毒過的雞蛋清與去掉培乳的胚混合均勻;直接接種于所述芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上;100~150 g的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基接種2-5個(gè)去掉培乳的胚;
所述誘導(dǎo)培養(yǎng)的培養(yǎng)條件:培養(yǎng)室溫度為25±2°C,光照時(shí)間10~16 h/d,光照強(qiáng)度1000~2000 Lx ;誘導(dǎo)培養(yǎng)的時(shí)間3~8天;
3)芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配制:在MS基本培養(yǎng)基中添加:黃芪多糖10-20mg/L,黨參多糖10-20 mg/L,所述芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基,滅菌冷卻后形成固體厚度為1.2~1.6 cm。
【具體實(shí)施方式】
[0005]實(shí)施例1
1)取材方法:取當(dāng)年籽粒飽滿的德保蘇鐵種子共400粒,平均分為4組供實(shí)施例1-4使用,采摘后,消毒處理,將消毒過的雞蛋清與德保蘇鐵種子混合均勻;
2)芽誘導(dǎo)培養(yǎng):誘導(dǎo)培養(yǎng):在無菌的條件下取飽滿的胚,去掉培乳,將消毒過的雞蛋清與去掉培乳的胚混合均勻;直接接種于所述芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上;150 g的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基接種5個(gè)去掉培乳的胚;
所述誘導(dǎo)培養(yǎng)的培養(yǎng)條件:培養(yǎng)室溫度為25°C,光照時(shí)間10 h/d,光照強(qiáng)度1500 Lx ;誘導(dǎo)培養(yǎng)的時(shí)間5天;
3)芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配制:在MS基本培養(yǎng)基中添加:黃芪多糖10mg/L,黨參多糖10mg/L,所述芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基,滅菌冷卻后形成固體厚度為1.4 cm。[0006]100個(gè)胚,共有76個(gè)胚誘導(dǎo)出芽,每個(gè)胚的平均誘導(dǎo)芽數(shù)為6個(gè)。
[0007]實(shí)施例2
1)取材方法:選取當(dāng)年籽粒飽滿的德保蘇鐵種子,采摘后,消毒處理,將消毒過的雞蛋清與德保蘇鐵種子混合均勻;
2)芽誘導(dǎo)培養(yǎng):誘導(dǎo)培養(yǎng):在無菌的條件下取飽滿的胚,去掉培乳,將消毒過的雞蛋清與去掉培乳的胚混合均勻;直接接種于所述芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上;100 g的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基接種3個(gè)去掉培乳的胚;
所述誘導(dǎo)培養(yǎng)的培養(yǎng)條件:培養(yǎng)室溫度為23°C,光照時(shí)間12 h/d,光照強(qiáng)度1800 Lx ;誘導(dǎo)培養(yǎng)的時(shí)間5天;
3)芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配制:在MS基本培養(yǎng)基中添加:黃芪多糖20mg/L,黨參多糖20mg/L,所述芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基,滅菌冷卻后形成固體厚度為1.5 cm。
[0008]100個(gè)胚,共有79個(gè)胚誘導(dǎo)出芽,每個(gè)胚的平均誘導(dǎo)芽數(shù)為8個(gè)。
[0009]實(shí)施例3
1)取材方法:取當(dāng)年籽粒飽滿的德保蘇鐵種子,采摘后,消毒處理;
2)芽誘導(dǎo)培養(yǎng):誘導(dǎo)培養(yǎng):在無菌的條件下取飽滿的胚,直接接種于所述芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上;150 g的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基接種5個(gè)胚;
所述誘導(dǎo)培養(yǎng)的培養(yǎng)條件:培養(yǎng)室溫度為25°C,光照時(shí)間10 h/d,光照強(qiáng)度1500 Lx ;誘導(dǎo)培養(yǎng)的時(shí)間18天;
3)芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配制:在MS基本培養(yǎng)基中添加:NAA(0.1 mg/L)+IAA(1.0 mg/L)+AgCL (8.5 g/L),所述芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基,滅菌冷卻后形成固體厚度為1.4 cm。
[0010]100個(gè)胚,共有14個(gè)胚誘導(dǎo)出芽,每個(gè)胚的平均誘導(dǎo)芽數(shù)為2個(gè)。
[0011]實(shí)施例4
1)取材方法:選取當(dāng)年籽粒飽滿的德保蘇鐵種子,采摘后,消毒處理,將消毒過的雞蛋清與德保蘇鐵種子混合均勻;
2)芽誘導(dǎo)培養(yǎng):誘導(dǎo)培養(yǎng):在無菌的條件下取飽滿的胚,直接接種于所述芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上;150 g的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基接種5個(gè)胚;
所述誘導(dǎo)培養(yǎng)的培養(yǎng)條件:培養(yǎng)室溫度為25°C,光照時(shí)間10 h/d,光照強(qiáng)度1500 Lx ;誘導(dǎo)培養(yǎng)的時(shí)間18天;
3)芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配制:在MS基本培養(yǎng)基中添加:黃芪多糖20mg/L,黨參多糖20mg/L,所述芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基,滅菌冷卻后形成固體厚度為1.5 cm。
[0012]100個(gè)胚,共有61個(gè)胚誘導(dǎo)出芽,每個(gè)胚的平均誘導(dǎo)芽數(shù)為3個(gè)。
【權(quán)利要求】
1.一種德保蘇鐵的培養(yǎng)基的制備方法,其特征在于:所述方法的具體步驟包括:芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的制備方法,在MS基本培養(yǎng)基中添加誘導(dǎo)成分。
2.一種德保蘇鐵的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的制備方法,其特征在于:芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配制:在MS基本培養(yǎng)基中添加:黃芪多糖10-20 mg/L,黨參多糖10-20 mg/L,所述芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基,滅菌冷卻后形成固體厚度為1.4~1.6 cm。
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK103734003SQ201310729882
【公開日】2014年4月23日 申請(qǐng)日期:2013年12月26日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月26日
【發(fā)明者】崔鎧, 李玲玲 申請(qǐng)人:崔鎧