一種高效飼料添加劑的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開一種飼料添加劑的制備方法，屬于飼料添加劑領(lǐng)域。所述飼料添加劑包含如下重量份數(shù)原料：牛膝多糖5-10份，紫蘇提取物3-6份，酵母細(xì)胞壁提取物2-5份，枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物25-35份，黃芪提取物3-6份；黨參提取物5-8份。本發(fā)明制得產(chǎn)品，使用量少、性能穩(wěn)定、使用安全，與其它飼料添加劑均無配合禁忌，采用中草藥提取物與微生物菌劑合理配比，再配合高產(chǎn)酶的枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物，有效促進(jìn)飼料中中草藥有益成分的消化吸收；同時也提高了各種飼料資源的能量和蛋白質(zhì)的可利用值，增強(qiáng)了畜禽的生產(chǎn)性能、應(yīng)激性能和飼養(yǎng)的綜合效益，提高了動物日增重和飼料轉(zhuǎn)化率，節(jié)約藥物的使用量。
【專利說明】一種高效飼料添加劑的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】:
[0001]本發(fā)明屬于飼料添加劑領(lǐng)域，特別涉及含有多種中藥成分的高效飼料添加劑的制備方法。
【背景技術(shù)】:
[0002]隨著我國畜牧業(yè)的快速發(fā)展，飼料添加劑的應(yīng)用日益廣泛，為保障畜牧業(yè)的健康發(fā)展、滿足人們對動物性食品的需求作出了巨大貢獻(xiàn)，但同時也帶來了一系列問題。由于大多數(shù)添加劑屬于化學(xué)合成類的藥物，如激素、抗菌素等，在提高畜禽產(chǎn)量的同時，畜產(chǎn)品藥殘量增加，直接危害著人類的健康；并且在現(xiàn)代畜禽養(yǎng)殖過程中，為了預(yù)防和治療動物疾病，也常使用過量抗生素產(chǎn)品來確保動物健康，但過量抗生素的使用常導(dǎo)致動物肉制品及其產(chǎn)物的品質(zhì)下降和抗生素耐性增強(qiáng)，通過食物鏈的傳遞導(dǎo)致人類健康也受到抗生素問題的嚴(yán)重影響；人們已經(jīng)逐漸認(rèn)識到了這些化學(xué)合成類添加劑、抗生素等帶來的負(fù)面效應(yīng)。
[0003]源自自然界的一些天然物質(zhì)不僅具有良好的營養(yǎng)特性，同時還具有抗病毒、消炎、抗氧化、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能等作用，具有廣闊的應(yīng)用前景；而中草藥正是以它獨(dú)特的作用方式、良好效果，無殘留、無抗藥性以及無污染而受到廣大科研人員、生產(chǎn)廠家的青睞。
[0004]目前，投放市場的中草藥飼料添加劑大部分為粉劑或散劑，其生產(chǎn)工藝落后，生產(chǎn)設(shè)備簡陋，加工粗糙簡單，品種單一，使用劑量普遍偏大，這不僅增加了產(chǎn)品成本，浪費(fèi)藥物，而且也影響了飼料的營養(yǎng)配比，這些問題的存在也使得目前市場上的中草藥飼料添加劑不符合“微量、高效”這一飼料添加劑的基本功能原則，難以實現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化、標(biāo)準(zhǔn)化。
[0005]因此，研制開發(fā)具有科學(xué)配比，且效果明顯的的含有多種中草藥制劑且能夠?qū)崿F(xiàn)“微量、高效”的飼料添加劑，對于促進(jìn)畜牧業(yè)的發(fā)展具有非常重要的意義。

【發(fā)明內(nèi)容】
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[0006]本發(fā)明解決的技術(shù)問題是提供一種高效飼料添加劑的制備方法。
[0007]—種高效飼料添加劑，包含如下重量份數(shù)的原料:牛膝多糖5-10份，紫蘇提取物3-6份，酵母細(xì)胞壁提取物2-5份，枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物25-35份，黃芪提取物3_6份；黨參提取物5-8份。
[0008]一種高效飼料添加劑的制備方法包括如下步驟:
[0009]酵母細(xì)胞壁提取物粉碎過50-60目篩，將上述粉碎物與紫蘇提取物及枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物、黃芪提取物、黨參提取物、牛膝多糖按照比例混合得到高效飼料添加劑。
[0010](I)黃芪提取物的制備:將原料黃芪粉碎至粒徑為2毫米以下，于容器中添加3-6倍重量的水混合均勻，控制溫度70°C -90°C，保持2-4h，用乳酸調(diào)節(jié)pH值為5.5-6.8，降溫至45-60°C，加入混合酶，酶解2-4h，添加混合物料0.5-3倍重量乙醇和丙醇的混合物，控制溫度至60°C _78°C，保持3-4h，過濾；濾液真空濃縮后冷凍干燥。
[0011 ] 所述混合酶添加量為混合物料總重量的5-10%。
[0012]所述混合酶的重量份數(shù)組成為:內(nèi)β -葡聚糖酶15-25份，木聚糖酶10-15份，戊聚糖酶10-15份，β -淀粉酶15-20份，酸性蛋白酶15-20份。
[0013]所述乙醇和丙醇的質(zhì)量比例為1:1-1.2。
[0014](2)黨參提取物的制備:將原料黨參粉碎至粒徑為2毫米以下，于容器中添加3-6倍重量的水混合均勻，控制溫度70°C -90°C，保持2-4h，降至45-60°C，用乳酸調(diào)節(jié)pH值為
5.5-6.8，加入混合酶，酶解2-4h，添加混合物料0.5-3倍重量乙醇和丙醇的混合物，控制溫度至60°C _78°C保持3-4h，過濾；濾液真空濃縮后冷凍干燥。
[0015]所述混合酶添加量為混合物料總重量的5-10%。
[0016]所述混合酶的重量份數(shù)組成為:內(nèi)葡聚糖酶10-20份，外葡聚糖酶10-20份，β -葡萄糖苷酶10-15份，木聚糖酶15-20份，戊聚糖酶15-20份，中性蛋白酶10-15份。
[0017]所述乙醇和丙醇的質(zhì)量比例為1:1-1.5。
[0018](3)紫蘇提取物制備方法如下:紫蘇子粉碎過40-60目篩后，添加紫蘇子7-10倍重量無水乙醇浸潰提取，控制溫度30-45°C，1-2小時后調(diào)整溫度為55-60°C 2-3小時，提取液濃縮、干燥得到乙醇提取物；乙醇提取后的紫蘇子殘渣中添加75?85°C熱水，熱水添加量為紫蘇子殘渣重量的3-6倍，處理時間30-50分鐘，連續(xù)提取2-3次，將提取液真空濃縮后噴霧干燥，得到熱水提取物；將上述乙醇提取物和熱水提取物合并粉碎，過60目篩，即得紫蘇提取物。
[0019](4)枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物的制備:從斜面轉(zhuǎn)接培養(yǎng)枯草芽孢桿菌，逐級擴(kuò)培后的種子液轉(zhuǎn)接入發(fā)酵罐中，控制溫度為37-42°C，通風(fēng)培養(yǎng)19-24小時，通氣量為2.0m3/分鐘；發(fā)酵完畢，發(fā)酵液經(jīng)板框過濾、濃縮、精濾、冷凍干燥后得枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物。
[0020](5)牛膝多糖制備方法如下:川牛膝粉碎后過30-60目篩，添加川牛膝重量3-6倍量70-85°C熱水連續(xù)提取2-3次，每次30-50分鐘；收集提取液，向提取液中添加乙醇使提取液中乙醇濃度達(dá)到70-85%，保持2-3小時，收集沉淀60-75°C干燥后粉碎，過40目篩，即得牛膝多糖。
[0021]本發(fā)明采用的菌種如下:
[0022]枯草芽抱桿菌(Bacillus subtilis) L1-2013-02,該菌株已于2013年7月15日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱CGMCC，地址為:中國北京市朝陽區(qū)北辰西路I號院3號)，保藏號為CGMCCN0.7926。
[0023]所述菌株特性是產(chǎn)耐高溫α -淀粉酶的酶活力高，耐熱、耐酸性強(qiáng)。
[0024]所述菌株制備的耐高溫α -淀粉酶酶活力為30000-35000u/ml ;適用溫度范圍為105-115°C，最適反應(yīng)溫度110°C，在110°C酶活完全穩(wěn)定；適用反應(yīng)pH值范圍為3.0-7.0，在PH值為3.0時酶活完全穩(wěn)定，最適反應(yīng)pH值為4.2。
[0025]所述菌株特點(diǎn)如下:
[0026]所述菌株在固體平板上菌落顏色為乳白色，表面干燥不透明，邊緣整齊，為具有運(yùn)動性的好氧菌。鏡檢為長桿狀，革蘭氏染色呈陽性。該菌可利用檸檬酸鹽，硝酸還原、V-P實驗成陽性。
[0027]所述枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)L1-2013_02由一株產(chǎn)耐高溫α -淀粉酶的枯草芽孢桿菌L1-2013經(jīng)紫外線-氯化鋰-硫酸二乙酯復(fù)合誘變篩選獲得，具體篩選步驟如下:
[0028](I)菌懸液的制備[0029]將在平板劃線分離后長出的L1-2013單菌落接入種子培養(yǎng)基中，100r/min，40°C培養(yǎng)12h后,取ImL培養(yǎng)液離心后用生理鹽水洗漆兩次,并重懸于9mL生理鹽水中。
[0030](2)紫外線-氯化鋰-硫酸二乙酯復(fù)合誘變
[0031]將菌懸液置于無菌平板中，在距離為30cm，功率15w的紫外燈下攪拌照射100s。將經(jīng)過照射的菌液經(jīng)梯度稀釋后涂布于氯化鋰平板，并以未經(jīng)紫外照射的菌液稀釋涂平板做對照。將上述涂布均勻的平板，用黑色的布或報紙包好，置40°C培養(yǎng)48h，在長出菌落的平板上篩選出水解圈與菌落直徑比值最大者挑至斜面保存，純化后配制成菌懸液，經(jīng)梯度稀釋后與硫酸二乙酯原液充分混合，并于40°C震蕩處理40min，將處理過的菌液經(jīng)梯度稀釋后涂布于氯化鋰平板。
[0032](3)高產(chǎn)菌種的初篩
[0033]將上述涂布均勻的平板，置40°C培養(yǎng)48h，在長出菌落的平板上初篩出水解圈與菌落直徑比值較大者挑至斜面保存，純化后獲得三株菌L1-2013-01，L1-2013-02，L1-2013-03
[0034](4)搖瓶發(fā)酵復(fù)篩
[0035]將獲得的三株菌L1-2013-01，L1-2013-02, L1-2013-03在含有30mL發(fā)酵培養(yǎng)基的250mL搖瓶中進(jìn)行搖瓶發(fā)酵，種子接種量10% (V/V)，40°C、100r/min培養(yǎng)72h，離心取發(fā)酵上清液制得粗酶液。
[0036](5)酶活測定
[0037]酶活單位的定義:ImL粗酶液,于105°C、pH4.2條件下，Imin液化Img可溶性淀粉，
[0038]即為I個酶活力單位，以U/mL表示。
[0039]經(jīng)測定，菌株L1-2013-02，為穩(wěn)定的最高產(chǎn)菌株，且酶活達(dá)到30000U/mL。
[0040]所述氯化鋰平板:淀粉1%，蛋白胨 1%，(NH3)2SO40.4%,K2HPO40.8%,CaCl20.2%，氯化鋰0.9%，瓊脂2%。
[0041 ] 所述的種子培養(yǎng)基:酵母粉0.5 %，蛋白胨I %，可溶性淀粉I %，NaCl I %。
[0042]所述的發(fā)酵培養(yǎng)基:玉米粉5% -15%，豆餅粉4% -10%，(NH3)2SO40.4 %,K2HPO40.8%, CaCl20.2% 0
[0043]所述的搖瓶培養(yǎng)條件:該菌在含有30mL發(fā)酵培養(yǎng)基的250mL搖瓶中，接種量10%(V/V)，100r/min、40°C 發(fā)酵培養(yǎng) 72h。
[0044]所述耐高溫的α -淀粉酶，其酶學(xué)性質(zhì)如下:
[0045](I)該酶溫度適應(yīng)范圍較寬，最適作用溫度在100-110°C之間，且在110°C以下保存的，溫度穩(wěn)定性較好，而110°c以上保存長時間溫度穩(wěn)定性較差。
[0046](2)該酶最適反應(yīng)pH值為4.2。在pH值3.0_7.0之間均有較高酶活力，在pH值為3.0時酶活完全穩(wěn)定。
[0047](3)酶活性:由本發(fā)明所提供的突變株L1-2013-02，制備的耐高溫α -淀粉酶酶活力為 30000-35000U/ml。
[0048]有益效果:
[0049]本發(fā)明中采用的中草藥黃芪:含有皂甙、蔗糖、多糖、多種氨基酸、葉酸及硒、鋅、銅等多種微量元素，具有補(bǔ)氣固表、利水退腫、托毒排膿、增強(qiáng)機(jī)體免疫功能、保肝、抗衰老、抗應(yīng)激、降壓作用。
[0050]黨參:具有補(bǔ)脾胃而益肺氣，益氣以補(bǔ)血的功效；黨參還對神經(jīng)系統(tǒng)有興奮作用，能增強(qiáng)機(jī)體抵抗力；還能使周圍血管擴(kuò)張而降低血壓，并能抑制腎上腺的升壓作用。
[0051]紫蘇:抗菌作用，其中所含的紫蘇醛、檸檬醛起主要抑菌作用，對金黃色葡萄球菌、真菌等有抑制作用，紫蘇酮作為紫蘇葉中促進(jìn)小腸蠕動的有效成分，能促進(jìn)消化液分泌，增強(qiáng)胃腸蠕動。
[0052]本發(fā)明紫蘇子進(jìn)行粉碎破壁處理，使紫蘇子中功能因子實現(xiàn)全價溶出和高效提取利用，分別采用有機(jī)溶劑和熱水實現(xiàn)其中不同功效成分的有效提取，特別是控制溫度分段提取更是有效提聞了提取收率，提聞了紫蘇子的提取物的提取效率和質(zhì)量。
[0053]牛膝多糖:是莧科植物牛膝的根中提取的一種水溶性多糖，水溶性好，易被機(jī)體吸收，且具有免疫調(diào)節(jié)、抗氧化等廣泛的生物學(xué)功能，被視為替代抗生素的天然綠色添加劑。
[0054]酵母細(xì)胞壁提取物中酵母細(xì)胞外壁的功能型碳水化合物可結(jié)合多種霉菌毒素，通過吸收毒物和病原菌到細(xì)胞壁上來改善動物健康。
[0055]酵母細(xì)胞壁提取物是以釀酒酵母為原料，經(jīng)過細(xì)胞破壁、酶解、分離提純和干燥等工藝精制而成的一類真菌提取物，成品通常為淺灰色至深灰色的粉狀物。研究證實，酵母細(xì)胞壁分為3層:外層為甘露寡糖和蛋白質(zhì)結(jié)合物，中間層為β_(1，3)、β-(1，6)葡聚糖，內(nèi)層為幾丁質(zhì)。其特殊的構(gòu)型可與多種霉菌毒素形成特異的互補(bǔ)構(gòu)造，從而與多種霉菌毒素牢牢的結(jié)合，并通過腸道排出動物體外。
[0056]本發(fā)明制得高效飼料添加劑使用量少、性能穩(wěn)定、使用安全，與其它飼料添加劑均無配合禁忌，采用黃芪、黨參、紫蘇提取物、牛膝多糖與枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物合理配比，利用酶解和乙醇浸潰提取的方法提高了中草藥中的氨基酸、多糖、微量元素等有益成分的提取率，利用枯草芽孢桿菌，迅速消耗消化腸道內(nèi)環(huán)境中的游離氧，促進(jìn)有益厭氧菌生長，并產(chǎn)生乳酸等有機(jī)酸類，降低腸道PH值，改善腸道菌群，而有效促進(jìn)飼料中中草藥有益成分的消化吸收；同時枯草芽孢桿菌菌體還能夠自身合成蛋白酶、淀粉酶等消化性酶類，在消化道中與內(nèi)源酶共同發(fā)揮作用，從而提高了各種飼料資源的能量和蛋白質(zhì)的可利用值，增強(qiáng)了畜禽的生產(chǎn)性能、應(yīng)激性能和飼養(yǎng)的綜合效益，提高了動物日增重和飼料轉(zhuǎn)化率，節(jié)約了飼料的使用量。
[0057]本發(fā)明中的中草藥還對多種球菌、桿菌和耐藥的金黃色葡萄球菌有抑制作用，而且枯草芽孢桿菌菌體具有能刺激動物免疫器官的生長發(fā)育，激活淋巴細(xì)胞，提高免疫球蛋白和抗體水平，增強(qiáng)細(xì)胞免疫和體液免疫的功能，在生長過程中產(chǎn)生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短桿菌肽等活性物質(zhì)對致病菌或內(nèi)源性感染的條件致病菌有明顯的抑制作用；因此，通過中草藥提取物與枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物對腸道菌群的相互作用，明顯的減少了動物的腸道疾病，降低了抗生素的使用量，提高了畜禽肌體免疫力，提高動物肉制品的安全性，提高動物的飼料利用效率，提高飼養(yǎng)效益，是天然的綠色無公害動物飼料。
[0058]本發(fā)明制得產(chǎn)品對提高我國畜牧業(yè)的生產(chǎn)水平，提高飼料資源的有效利用，充分實現(xiàn)“微量、高效”等方面都具有很高的應(yīng)用價值。
【具體實施方式】:
[0059]下面的實施例可以使本專業(yè)技術(shù)人員更全面地理解本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明。
[0060]實施例1:[0061]枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物的制備:
[0062]采用斜面菌種逐級擴(kuò)培獲得枯草芽孢桿菌發(fā)酵液；
[0063](I) 一級種子培養(yǎng):將枯草芽孢桿菌斜面菌種接入500毫升搖瓶中，培養(yǎng)基裝量100毫升，旋轉(zhuǎn)式搖床180轉(zhuǎn)/分，培養(yǎng)溫度40°C，培養(yǎng)時間12小時；
[0064](2)二級種子培養(yǎng):將一級種子按照10%的接種量接入500暈升二級種子搖瓶中，培養(yǎng)條件與一級種子相同；
[0065](3)三級種子培養(yǎng):將二級種子以10%接種量接入5000暈升三級種子搖瓶中，培養(yǎng)基裝量1000毫升，旋轉(zhuǎn)式搖床100轉(zhuǎn)/分，培養(yǎng)溫度40°C，培養(yǎng)時間12小時；
[0066](4) 一級種子罐培養(yǎng):將三級種子以10%接種量接入總?cè)莘e為150L的一級種子罐，發(fā)酵培養(yǎng)基裝量100L，培養(yǎng)溫度43°C，攪拌速度100轉(zhuǎn)/分，通風(fēng)量(V/V) 1:1,罐壓
0.05Mpa,培養(yǎng)時間15小時；
[0067](5)發(fā)酵培養(yǎng):將一級種子罐菌種以10%接種量接入總?cè)莘e為1.5噸二級種子罐，發(fā)酵培養(yǎng)基裝量I噸，培養(yǎng)條件:溫度40°C，攪拌速度100轉(zhuǎn)/分，通風(fēng)量(V/V) 1: 1.5，罐壓0.05Mpa,時間24小時；
[0068](6)培養(yǎng)物的制備:發(fā)酵完畢，發(fā)酵液經(jīng)板框過濾、濃縮、精濾、冷凍干燥后得枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物；
[0069]所述培養(yǎng)基組成:葡萄糖6%，酵母提取物1%，蛋白胨0.2%，CaC03l%,其余為水，pH6.8 ；
[0070]所述枯草芽抱桿菌(Bacillussubtilis)保藏號為 CGMCCN0.7926。
[0071]一種高效飼料添加劑包括如下重量份數(shù)的原料:紫蘇提取物13份，酵母細(xì)胞壁提取物7份，枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物20份，黃芪提取物6份；黨參提取物5份；低聚果糖5份；枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis) L1-2013-02 保藏號為 CGMCCN0.7926。
[0072]實施例2:
[0073]—種高效飼料添加劑包括如下重量份數(shù)的原料:牛膝多糖8份，紫蘇提取物5份，酵母細(xì)胞壁提取物4份，枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物32份，黃芪提取物4份；黨參提取物6份；枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis) L1-2013-02 保藏號為 CGMCC N0.7926。
[0074]實施例3:
[0075]實施例2中所述高效飼料添加劑的制備方法:酵母細(xì)胞壁提取物粉碎過60目篩，將上述粉碎物與紫蘇提取物及枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物、黃芪提取物、黨參提取物、牛膝多糖按照比例混合得到高效飼料添加劑。
[0076]黃芪提取物的制備:
[0077]將原料黃芪粉碎至粒徑為2毫米以下，于容器中添加5倍重量的水混合均勻，控制溫度85°C，保持3h，用乳酸調(diào)節(jié)pH值為6.5，降溫至52°C，加入混合酶，酶解3h，添加混合物料2倍重量乙醇和丙醇的混合物，控制溫度至75°C，保持4h，過濾；濾液真空濃縮后冷凍干燥。
[0078]所述混合酶添加量為混合物料總重量的7%。
[0079]所述混合酶的重量份數(shù)組成為:內(nèi)β -葡聚糖酶20份，木聚糖酶10份，戊聚糖酶12份，β -淀粉酶18份，酸性蛋白酶17份。
[0080]所述乙醇和丙醇的質(zhì)量比例為1:1.I。[0081]黨參提取物的制備:
[0082]將原料黨參粉碎至粒徑為2毫米以下，于容器中添加4倍重量的水混合均勻，控制溫度86°C，保持4h，降至57°C，用乳酸調(diào)節(jié)pH值為6，加入混合酶，酶解3h，添加混合物料2.5倍重量乙醇和丙醇的混合物，控制溫度至70°C保持3h，過濾；濾液真空濃縮后冷凍干燥。
[0083]所述混合酶添加量為混合物料總重量的9%。
[0084]所述混合酶的重量份數(shù)組成為:內(nèi)葡聚糖酶14份，外β-葡聚糖酶15份，β -葡萄糖苷酶12份，木聚糖酶18份，戊聚糖酶16份，中性蛋白酶12份。
[0085]所述乙醇和丙醇的質(zhì)量比例為1:1.3。
[0086]紫蘇提取物制備:
[0087]紫蘇子粉碎過50目篩后添加紫蘇子8倍重量無水乙醇浸潰提取，控制溫度42°C，2小時后調(diào)整溫度為58°C保持3小時，提取液濃縮、干燥得到乙醇提取物；乙醇提取后的紫蘇子殘渣中添加80°C熱水，熱水添加量為紫蘇子殘渣重量的5倍，處理時間40分鐘，連續(xù)提取3次，將提取液真空濃縮后噴霧干燥，得到熱水提取物；將上述乙醇提取物和熱水提取物合并粉碎，過60目篩，即得紫蘇提取物。
[0088]枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物的制備:
[0089]從斜面轉(zhuǎn)接培養(yǎng)枯草芽孢桿菌，逐級擴(kuò)培后的種子液轉(zhuǎn)接入發(fā)酵罐中，控制溫度為39°C，通風(fēng)培養(yǎng)22小時，通氣量為2.0m3/分鐘；發(fā)酵完畢，發(fā)酵液經(jīng)板框過濾、濃縮、精濾、冷凍干燥后得枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物。
[0090]牛膝多糖的制備:川牛膝粉碎后過50目篩，添加川牛膝重量4倍量75°C熱水連續(xù)提取3次，每次45分鐘；收集提取液，向提取液中添加乙醇使提取液中乙醇濃度達(dá)到80%，保持3小時，收集沉淀75°C干燥后粉碎，過40目篩，即得牛膝多糖。
[0091]實施例4
[0092]產(chǎn)品使用效果:
[0093]本發(fā)明實施例3所述制備方法制得高效飼料添加劑使用效果試驗
[0094]試驗方法:
[0095]選擇日齡、體重相近的健康母豬、仔豬和公豬各50頭，均隨機(jī)分成2組(試驗組和對照組)，試驗組使用本發(fā)明制得產(chǎn)品，對照組不添加本發(fā)明制得產(chǎn)品；本發(fā)明制得產(chǎn)品的添加量為飼料用量的0.5-1%，連續(xù)飼喂60天。與對照組相比，使用發(fā)明高效飼料添加劑可獲得如下效果:
[0096](I)母豬產(chǎn)仔數(shù)平均增加0.6頭；
[0097](2)公豬精子數(shù)增加22%?25%，提高受胎率；
[0098](3)分娩前后，母豬便秘次數(shù)減少30%以上；
[0099](4)斷奶仔豬體重比對照組體重平均增加8%;
[0100](5)仔豬期抗生素使用量減少了 80-90%，腹瀉率降低了 80%，死亡率降低了 70% ；
[0101]上述結(jié)果表明本發(fā)明制得產(chǎn)品可改善母豬、仔豬和公豬機(jī)體免疫能力，減少抗生素用量，增加養(yǎng)殖質(zhì)量和效益。本發(fā)明制得的高效飼料添加劑用途廣泛，不但使用與肉豬的飼養(yǎng)，也適用于雞、鴨、牛、羊和水產(chǎn)動物的飼養(yǎng)。
【權(quán)利要求】
1.一種高效飼料添加劑的制備方法，包括如下步驟:酵母細(xì)胞壁提取物粉碎過50-60目篩，將上述粉碎物與紫蘇提取物及枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物、黃芪提取物、黨參提取物、牛膝多糖按照比例混合得到飼料添加劑；所述飼料添加劑包含如下重量份數(shù)的原料:牛膝多糖5-10份，紫蘇提取物3-6份，酵母細(xì)胞壁提取物2-5份，枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物25-35份，黃芪提取物3-6份；黨參提取物5-8份；所述枯草芽孢桿菌保藏號為CGMCC N0.7926。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述高效飼料添加劑的制備方法，其特征在于，枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物的制備方法如下: (1)一級種子培養(yǎng):將枯草芽孢桿菌斜面菌種接入500毫升搖瓶中，培養(yǎng)基裝量100毫升，旋轉(zhuǎn)式搖床180轉(zhuǎn)/分，培養(yǎng)溫度40°C，培養(yǎng)時間12小時； (2)二級種子培養(yǎng):將一級種子按照10%的接種量接入500毫升二級種子搖瓶中，培養(yǎng)條件與一級種子相同； (3)三級種子培養(yǎng):將二級種子以10%接種量接入5000毫升三級種子搖瓶中，培養(yǎng)基裝量1000毫升，旋轉(zhuǎn)式搖床100轉(zhuǎn)/分，培養(yǎng)溫度40°C，培養(yǎng)時間12小時； (4)一級種子罐培養(yǎng):將三級種子以10%接種量接入總?cè)莘e為150L的一級種子罐，發(fā)酵培養(yǎng)基裝量100L，培養(yǎng)溫度43°C，攪拌速度100轉(zhuǎn)/分，通風(fēng)量(V/V)l:1,罐壓0.05MPa,培養(yǎng)時間15小時； (5)發(fā)酵培養(yǎng):將一級種子罐菌種以10%接種量接入總?cè)莘e為1.5噸二級種子罐，發(fā)酵培養(yǎng)基裝量I噸，培養(yǎng)溫度40°C，攪拌速度100轉(zhuǎn)/分，通風(fēng)量(V/V)l:1.5,罐壓0.05MPa,培養(yǎng)時間24小時； (6)培養(yǎng)物的制備:發(fā)酵完畢，發(fā)酵液經(jīng)板框過濾、濃縮、精濾、冷凍干燥后得枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物； 所述培養(yǎng)基組成:葡萄糖6%，酵母提取物1%，蛋白胨0.2%，CaC03l%，其余為水，pH6.8。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述高效飼料添加劑的制備方法，其特征在于，紫蘇提取物制備方法如下:紫蘇子粉碎過40-60目篩后添加紫蘇子7-10倍重量無水乙醇浸潰提取，溫度30-450C 1-2小時后調(diào)整溫度為55-60°C 2-3小時，提取液濃縮、干燥得到乙醇提取物；乙醇提取后的紫蘇子殘渣中添加75~85°C熱水，熱水添加量為紫蘇子殘渣重量的3-6倍，處理時間30-50分鐘，連續(xù)提取2-3次，將提取液真空濃縮后噴霧干燥，得到熱水提取物；將上述乙醇提取物和熱水提取物合并粉碎，過60目篩，即得紫蘇提取物。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述高效飼料添加劑的制備方法，其特征在于，黃芪提取物的制備方法如下: 將原料黃芪粉碎至粒徑為2毫米以下，于容器中添加3-6倍重量的水混合均勻，控制溫度70°C -90°C，保持2-4h，降溫至45-60°C，用乳酸調(diào)節(jié)pH值為5.5-6.8，加入混合酶，酶解2_4h，添加混合物料0.5-3倍重量乙醇和丙醇的混合物，控制溫度60°C -78°C，保持3_4h，過濾；濾液真空濃縮后冷凍干燥； 所述混合酶添加量為混合物料總重量的5-10% ； 所述混合酶的重量份數(shù)組成為:內(nèi)β -葡聚糖酶15-25份，木聚糖酶10-15份，戊聚糖酶10-15份，β -淀粉酶15-20份，酸性蛋白酶15-20份； 所述乙醇和丙醇的質(zhì)量比例為1:1-1.2。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述高 效飼料添加劑的制備方法，其特征在于，黨參提取物的制備方法如下: 將原料黨參粉碎至粒徑為2毫米以下，于容器中添加3-6倍重量的水混合均勻，控制溫度70°C -90°C，保持2-4h，降至45-60°C，用乳酸調(diào)節(jié)pH值為5.5-6.8，加入混合酶，酶解2_4h，添加混合物料0.5-3倍重量乙醇和丙醇的混合物，控制溫度至60°C -78°C，保持3_4h，過濾；濾液真空濃縮后冷凍干燥； 所述混合酶添加量為混合物料總重量的5-10% ； 所述混合酶的重量份數(shù)組成為:內(nèi)β -葡聚糖酶10-20份，外β -葡聚糖酶10-20份，β-葡萄糖苷酶10-15份，木聚糖酶15-20份，戊聚糖酶15-20份，中性蛋白酶10-15份； 所述乙醇和丙醇的質(zhì)量比例為1:1-1.5。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述高效飼料添加劑的制備方法，其特征在于，牛膝多糖提取物的制備方法如下: 川牛膝粉碎后過30-60目篩，添加川牛膝重量3-6倍量70-85°C熱水連續(xù)提取2_3次，每次30-50分鐘；收集提取液，向提取液中添加乙醇使提取液中乙醇濃度達(dá)到70-85%，保持2-3小時，收集沉淀60-75°C干燥后粉碎，過40目篩，即得牛膝多糖。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述高效飼料添加劑的制備方法，其特征在于，包含如下重量份數(shù)的原料:牛膝多糖8份，紫蘇提取物5份，酵母細(xì)胞壁提取物4份，枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物32份，黃芪提取物4份；黨參提取物6份；上述比例為重量分?jǐn)?shù)比；枯草芽孢桿菌保藏號為CGMCC N0.7926。
8.根據(jù)權(quán)利要求1至7任一所述高效飼料添加劑的制備方法，包括如下步驟: 酵母細(xì)胞壁提取物粉碎過60目篩，將上述粉碎物與紫蘇提取物及枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物、黃芪提取物、黨參提取物、牛膝多糖按照比例混合得到飼料添加劑； 黃芪提取物的制備: 將原料黃芪粉碎至粒徑為2毫米以下，于容器中添加5倍重量的水混合均勻，控制溫度850C，保持3h，用乳酸調(diào)節(jié)pH值為6.5，降溫至52°C，加入混合酶，酶解3h，添加混合物料2倍重量乙醇和丙醇的混合物，控制溫度至75°C，保持4h，過濾；濾液真空濃縮后冷凍干燥；所述混合酶添加量為混合物料總重量的7% ； 所述混合酶的重量份數(shù)組成為:內(nèi)葡聚糖酶20份，木聚糖酶10份，戊聚糖酶12份，β -淀粉酶18份，酸性蛋白酶17份； 所述乙醇和丙醇的質(zhì)量比例為1:1.1 ; 黨參提取物的制備: 將原料黨參粉碎至粒徑為2毫米以下，于容器中添加4倍重量的水混合均勻，控制溫度860C，保持4h，降至57°C，用乳酸調(diào)節(jié)pH值為6，加入混合酶，酶解3h，添加混合物料2.5倍重量乙醇和丙醇的混合物，控制溫度至70°C保持3h，過濾；濾液真空濃縮后冷凍干燥； 所述混合酶添加量為混合物料總重量的9% ； 所述混合酶的重量份數(shù)組成為:內(nèi)葡聚糖酶14份，外β-葡聚糖酶15份，β-葡萄糖苷酶12份，木聚糖酶18份，戊聚糖酶16份，中性蛋白酶12份； 所述乙醇和丙醇的質(zhì)量比例為1:1.3 ; 紫蘇提取物制備: 紫蘇子粉碎過50目篩后添加紫蘇子8倍重量無水乙醇浸潰提取，控制溫度42°C，2小時后調(diào)整溫度為58°C保持3小時，提取液濃縮、干燥得到乙醇提取物；乙醇提取后的紫蘇子殘渣中添加80°C熱水，熱水添加量為紫蘇子殘渣重量的5倍，處理時間40分鐘，連續(xù)提取3次，將提取液真空濃縮后噴霧干燥，得到熱水提取物；將上述乙醇提取物和熱水提取物合并粉碎，過60目篩，即得紫蘇提取物； 枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物的制備: 從斜面轉(zhuǎn)接培養(yǎng)枯草芽孢桿菌，逐級擴(kuò)培后的種子液轉(zhuǎn)接入發(fā)酵罐中，控制溫度為39°C，通風(fēng)培養(yǎng)22小時，通氣量為2.0m3/分鐘；發(fā)酵完畢，發(fā)酵液經(jīng)板框過濾、濃縮、精濾、冷凍干燥后得枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物； 牛膝多糖的制備:川牛膝粉碎后過50目篩，添加川牛膝重量4倍量75°C熱水連續(xù)提取3次，每次45分鐘；收集提取液，向提取液中添加乙醇使提取液中乙醇濃度達(dá)到80%，保持3小時，收集沉淀75°C干燥后粉碎，過40目篩，即得牛膝多糖。
【文檔編號】A23K1/16GK103734477SQ201310743231
【公開日】2014年4月23日 申請日期:2013年12月28日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月28日
【發(fā)明者】邵素英, 孔日祥 申請人:邵素英