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一種殺蟲抗病生物有機肥及其制備方法

文檔序號:230215閱讀:250來源:國知局
一種殺蟲抗病生物有機肥及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種殺蟲抗病生物有機肥及其制備方法,包括下述重量比的原料:桉樹葉13-23.5、煙草莖桿20-25、萬壽菊莖桿20-25、苦參莖桿15-18、羊毛土17-22.5、混合菌種1-2及碳酸鉀1.5-2.5。制備步驟為:⑴按重量比取桉樹葉、煙草莖桿、萬壽菊莖桿、苦參莖桿、羊毛土分別破碎均勻后備用;(2)制備混合菌種;(3)按重量比取混合菌種,噴至混合物上攪拌均勻,進行有氧發(fā)酵,按重量比取碳酸鉀對發(fā)酵的混合物調(diào)PH值,得到有機肥基料;(4)將步驟(3)中有機肥基料進行干燥后粉碎,篩分后包裝即為殺蟲抗病有機肥。本發(fā)明作為有機肥,在滿足促進植物健壯生長的同時對植物的殺蟲抗病能力有較大提高。
【專利說明】一種殺蟲抗病生物有機肥及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及肥料,是一種殺蟲抗病生物有機肥及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]目前,農(nóng)作物的肥料主要是氮、磷、鉀肥,由于這種肥料只滿足于促進植物及根系形成和生長健狀、抗干旱、抗低溫、含鹽量等作用,對農(nóng)作物的蟲害的防治作用極低,因此作物在生長期需要噴灑大量農(nóng)藥,導(dǎo)致農(nóng)作物特別是蔬菜水果的殺蟲劑用量較大,藥物殘留較重,對于長期食用高農(nóng)藥殘留食物的人群來說,患病的風(fēng)險極大。為此,近幾年本領(lǐng)域技術(shù)人員試圖研究用有機物制做肥料,用以使農(nóng)作物抗病害,減少蟲害的發(fā)生,并同時對作物生長有促進作用。但是,已公開的肥料在抗蟲害方面的作用甚少,特別是酸性土壤對農(nóng)作物的多種蟲害的抗病能力更是較低等。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的是,提供一種殺蟲抗病生物有機肥及其制備方法,它作為有機肥,在滿足促進植物健壯生長的同時,對植物的殺蟲抗病能力有較大提高。
[0004]本發(fā)明為實現(xiàn)上述目的,通過以下技術(shù)方案實現(xiàn):一種殺蟲抗病生物有機肥,包括下述重量比的原料:桉樹葉13-23.5、煙草莖桿20-25、萬壽菊莖桿20-25、苦參莖桿15-18、羊毛土 17-22.5、混合菌種1-2及碳酸鉀1.5-2.5。
[0005]所述的一種殺蟲抗病生物有機肥,包括下述重量比的原料:桉樹葉15、煙草莖桿21、萬壽菊莖桿22、苦參莖桿18、羊毛土 22、混合菌種I及碳酸鉀2。
[0006]所述的一種殺蟲抗病生物有機肥,包括下述重量比的原料:桉樹葉23.5、煙草莖桿20、萬壽菊莖桿20、苦參莖桿15、羊`毛土 17、混合菌種2及碳酸鉀2.5。
[0007]所述混合菌種為放線菌、光合細菌及酵母菌組成,按單位體積內(nèi)菌種相同的菌種體積份計為:放線菌40份、光合細菌40份及酵母菌20份。
[0008]所述混合菌種的制備方法為:
(O制備放線囷:
(1.0制備放線菌斜面培養(yǎng)基:取300L水置入容器內(nèi),加熱至65°C,將原料麩皮lkg、豌豆浸汁lkg、蛋白胨50kg、硝酸鉀I kg、氯化鈉50g、磷酸氫二鉀50g、硫化鎂50g及硫酸鐵12g,置入65°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取20kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入700L的水,調(diào)PH值7.3 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘;
(1.2)制備放線菌液體培養(yǎng)基:取300L水置入容器內(nèi),加熱至65°C,將原料麩皮lkg、豌豆浸汁lkg、蛋白胨50kg、硝酸鉀lkg、氯化鈉50g、磷酸氫二鉀50g、硫化鎂50g及硫酸鐵12g,置入65°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取2.5kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入700L的水,調(diào)PH值7.3 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘;對放線菌進行活化培養(yǎng):把放線菌菌種點種在斜面培養(yǎng)基的中部,在斜面的中部稀波狀蜿蜒劃線,在溫度28°C、濕度45%的條件下,培養(yǎng)60h ;從活化好的放線菌斜面培養(yǎng)基中取接種量10%的菌種量接種于放線菌液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)溫度為28°C,培養(yǎng)5-14天,待菌落菌數(shù)為100億/ml即為放線菌;
(2)制備光合細菌:
(2.1)制備光合細菌斜面培養(yǎng)基:取300L水置入容器內(nèi),加熱至65 V,將原料蛋白胨55g、醋酸鈉1.15kg、碳酸鈉600g、硫代硫酸鈉400g、氯化鈉350g、磷酸氫二鉀50g及硫酸鎂125g,置入65°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取20kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入700L的水,調(diào)PH值8.2 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘;
(2.2)制備光合細菌液體培養(yǎng)基:取300L水置入容器內(nèi),加熱至65°C,將原料蛋白胨55g、醋酸鈉1.15kg、碳酸鈉600g、硫代硫酸鈉400g、氯化鈉350g、磷酸氫二鉀50g及硫酸鎂125g,置入65°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取2.5kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入700L的水,調(diào)PH值8.2 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘;
對光合細菌進行活化培養(yǎng):把光合細菌菌種點種在斜面的中部,在斜面的中部稀波狀蜿蜒劃線,在溫度28-36°C,光照強度:3500LX,濕度45%的條件下,培養(yǎng)40h ;從活化好的光合細菌斜面瓊脂培養(yǎng)基中取接種量10%的菌種量接種于光合細菌液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)溫度30°C,光照強度3500L X、培養(yǎng)4-7天,待斜面菌落菌數(shù)為100億/ml即為光合細菌;
(3)制備酵母菌:
(3.1)制備酵母菌斜面培養(yǎng)基:取300L水置入容器內(nèi),加熱至65°C,將原料蔗糖125g、硝酸鉀100g、氯化鈉500g、磷酸氫二鉀500g、硫酸鎂500g及硫酸鐵8g,置入65°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取20kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入700L的水,調(diào)PH值5.0 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘;
(3.2)制備酵母菌斜面培養(yǎng)基:取300L水置入容器內(nèi),加熱至65°C,將原料蔗糖125g、硝酸鉀100g、氯化鈉500g、磷酸氫二鉀500g、硫酸鎂500g及硫酸鐵8g,置入65°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取2.5kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入700L的水,調(diào)PH值5.0 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘;
對酵母菌進行活化培養(yǎng):把酵母菌菌種點種在斜面的中部,在斜面的中部自下而上劃線,在溫度25°C,濕度45%的條件下,培養(yǎng)40h ;從活化好的酵母菌斜面培養(yǎng)基中取接種量10%的菌種量接種于酵母菌液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)溫度為25°C,培養(yǎng)時間為5-10天,待菌落菌數(shù)為100億/ml即為酵母菌。
[0009](4)取放線菌40份、光合細菌40份及酵母菌20份混合均勻,即為混合菌種;
所述的一種殺蟲抗病生物有機肥的制備方法,步驟如下:
⑴按重量比取桉樹葉13-23.5、煙草莖桿20-25、萬壽菊莖桿20-25、苦參莖桿15-18、羊毛土 17-22.5破碎后備用;
⑵制備混合菌種:(2.1)制備放線菌:
(2.1.1)制備放線菌斜面培養(yǎng)基:斜面培養(yǎng)基原料為:麩皮0.8-1.2kg、豌豆浸汁
0.8-1.2kg、蛋白胨30-70kg、硝酸鉀0.8-1.2 kg、氯化鈉30_70g、磷酸氫二鉀30_70g、硫酸鎂 30-70g、硫酸鐵 10-15g、瓊脂 15-25kg 及水 800-1200L,調(diào) PH 值 7.2-7.4 ;
(2.1.2)制備放線菌液體培養(yǎng)基:液體培養(yǎng)基的原料為:麩皮0.8-1.2kg、豌豆浸汁
0.8-1.2 kg、蛋白胨30-70kg和硝酸鉀0.8-1.2 kg、氯化鈉30_70g、磷酸氫二鉀30_70g、硫酸鎂 30-70g、硫酸鐵 10-15g、瓊脂 1.5-3.5kg 及水 800-1200L,調(diào) PH 值 7.2-7.4 ;
對放線菌進行活化培養(yǎng);從活化好的放線菌斜面培養(yǎng)基中取接種量10%的菌種量接種于放線菌液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)溫度為28°C,培養(yǎng)5-14天,待菌落菌數(shù)為100億/ml即為放線菌;
(2.2)制備光合細菌:
(2.2.1)制備光合細菌斜面培養(yǎng)基:斜面培養(yǎng)基的原料為:蛋白胨50-60g、醋酸鈉1.1-1.2kg、碳酸鈉500-700g、硫代硫酸鈉300-500g、氯化鈉200_500g、磷酸氫二鉀30-70g、硫酸鎂 50-200g、瓊脂 15-25kg 及水 800-1200L,調(diào) PH 值 8-8.5 ;
(2.2.2)制備光合細菌液體培養(yǎng)基:蛋白胨50-60g、醋酸鈉1.1-1.2kg、碳酸鈉500-700g、硫代硫酸鈉300-500g、氯化鈉200_500g、磷酸氫二鉀30_70g、硫酸鎂50_200g、瓊脂 1.5-3.5kg 及水 800-1200L,調(diào) PH 值 8-8.5 ;
對光合細菌進行活化培養(yǎng);從活化好的光合細菌斜面瓊脂培養(yǎng)基中取接種量10%的菌種量接種于光合細菌液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)溫度28-36°C,光照強度3000-4000LX、培養(yǎng)4-7天,待斜面菌落菌數(shù)為100億/ml 即為光合細菌;
(2.3)制備酵母菌:
(2.3.1)制備酵母菌斜面培養(yǎng)基:斜面培養(yǎng)基的原料為:蔗糖50-200g、硝酸鉀80-120g、氯化鈉300-700g、磷酸氫二鉀300_700g、硫酸鎂300_700g、硫酸鐵5_12g、瓊脂15-25kg、水 800-1200L,調(diào)節(jié) PH 值 4.5-5.5 ;
(2.3.2)制備酵母菌液體培養(yǎng)基;液體培養(yǎng)基的原料為:蔗糖50-200g、硝酸鉀80-120g、氯化鈉300-700g、硫酸氫二鉀300_700g、硫酸鎂300_700g、硫酸鐵5_12g、瓊脂
1.5-3.5kg、水 800-1200L,調(diào)節(jié) PH 值 4.5-5.5 ;
對酵母菌進行活化培養(yǎng):從活化好的酵母菌斜面培養(yǎng)基中取接種量10%的菌種量接種于酵母菌液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)溫度為20-30°C,培養(yǎng)時間為5-10天,待菌落菌數(shù)為100億/ml即為酵母菌。
[0010](2.4)取放線菌40份、光合細菌40份及酵母菌20份混合均勻,即為混合菌種;
(3)按重量比取混合菌種1-2,噴至步驟(1)破碎后的混合物上,攪拌均勻,進行有氧發(fā)酵8-15天,按重量比取碳酸鉀1.5-2.5對發(fā)酵的的混合物調(diào)PH值7_8,得到有機肥基料;
(4)將步驟(3)中有機肥基料進行干燥后粉碎至40-100目,篩分后包裝,即為殺蟲抗病有機肥。
[0011]所述的一種殺蟲抗病生物有機肥的制備方法,步驟如下:
⑴按重量比取桉樹葉23.5、煙草莖桿20、萬壽菊莖桿20、苦參莖桿15、羊毛土 17分別破碎均勻后備用;
(2)制備混合 菌種:(2.1)制備放線菌:
(2.1.1)制備放線菌斜面培養(yǎng)基:取300L水置入容器內(nèi),加熱至65°C,將原料麩皮lkg、豌豆浸汁I kg、蛋白胨50kg、硝酸鉀lkg、氯化鈉50g、磷酸氫二鉀50g、硫化鎂50g及硫酸鐵12g,置入65°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取20kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入700L的水,調(diào)PH值7.3 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘;
(2.1.2)制備放線菌液體培養(yǎng)基:取300L水置入容器內(nèi),加熱至65°C,將原料麩皮lkg、豌豆浸汁lkg、蛋白胨50kg、硝酸鉀lkg、氯化鈉50g、磷酸氫二鉀50g、硫化鎂50g及硫酸鐵12g,置入65 °C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100 V溶解完全后得到溶解液,取2.5kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入700L的水,調(diào)PH值7.3 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘;
對放線菌進行活化培養(yǎng):把放線菌菌種點種在斜面培養(yǎng)基的中部,在斜面的中部稀波狀蜿蜒劃線,在溫度28°C、濕度45%的條件下,培養(yǎng)60h ;從活化好的放線菌斜面培養(yǎng)基中取接種量10%的菌種量接種于放線菌液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)溫度為28°C,培養(yǎng)5-14天,待菌落菌數(shù)為100億/ml即為放線菌;
(2.2)制備光合細菌:
(2.2.1)制備光合細菌斜面培養(yǎng)基:取300L水置入容器內(nèi),加熱至65°C,將原料蛋白胨55g、醋酸鈉1.15kg、碳酸鈉600g、硫代硫酸鈉400g、氯化鈉350g、磷酸氫二鉀50g及硫酸鎂125g,置入65°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取20kg瓊脂用熱水融化后加 入至溶解液中,攪拌均勻加入700L的水,調(diào)PH值8.2 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘;
(2.2.2)制備光合細菌液體培養(yǎng)基:取300L水置入容器內(nèi),加熱至65°C,將原料蛋白胨55g、醋酸鈉1.15kg、碳酸鈉600g、硫代硫酸鈉400g、氯化鈉350g、磷酸氫二鉀50g及硫酸鎂125g,置入65°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取
2.5kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入700L的水,調(diào)PH值8.2 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘;
對光合細菌進行活化培養(yǎng):把光合細菌菌種點種在斜面的中部,在斜面的中部稀波狀蜿蜒劃線,在溫度28-36°C,光照強度:3500LX,濕度45%的條件下,培養(yǎng)40h ;從活化好的光合細菌斜面瓊脂培養(yǎng)基中取接種量10%的菌種量接種于光合細菌液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)溫度30°C,光照強度3500LX、培養(yǎng)4-7天,待斜面菌落菌數(shù)為100億/ml即為光合細菌;
(2.3)制備酵母菌:
(2.3.1)制備酵母菌斜面培養(yǎng)基:取300L水置入容器內(nèi),加熱至65°C,將原料蔗糖125g、硝酸鉀100g、氯化鈉500g、磷酸氫二鉀500g、硫酸鎂500g及硫酸鐵8g,置入65°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取20kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入700L的水,調(diào)PH值5.0 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘;
(2.3.2)制備酵母菌斜面培養(yǎng)基:取300L水置入容器內(nèi),加熱至65°C,將原料蔗糖125g、硝酸鉀100 g、、氯化鈉500g、磷酸氫二鉀500g、硫酸鎂500g及硫酸鐵8g,置入65°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取2.5kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入700L的水,調(diào)PH值5.0 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘;
對酵母菌進行活化培養(yǎng):把酵母菌菌種點種在斜面的中部,在斜面的中部自下而上劃線,在溫度25°C,濕度45%的條件下,培養(yǎng)40h ;從活化好的酵母菌斜面培養(yǎng)基中取接種量10%的菌種量接種于酵母菌液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)溫度為25°C,培養(yǎng)時間為5-10天,待菌落菌數(shù)為100億/ml即為酵母菌。
[0012](2.4)取放線菌40份、光合細菌40份及酵母菌20份混合均勻,即為混合菌種;
(3)按重量比取混合菌種1-2,噴至步驟(1)破碎后的混合物上,攪拌均勻,進行有氧發(fā)酵8-15天,按重量比取碳酸鉀1.5-2.5對發(fā)酵的的混合物調(diào)PH值7_8,得到有機肥基料;
(4)將步驟(3)中有機肥基料進行干燥后粉碎至40-100目,篩分后包裝,即為殺蟲抗病有機肥。
[0013]本發(fā)明生物有機肥中的桉樹葉中含有香茅醛,菔烯,1,8_桉油素;煙草莖桿中含有煙堿;萬壽菊中含有菔烯,三聯(lián)噻吩,萬壽菊酮;苦參莖桿中含有苦參堿,槐果堿,氧化苦參堿,氧化槐果堿,槐定堿,這些物質(zhì)組合后具有協(xié)同作用,具有極強的殺蟲殺菌活性,特別是經(jīng)過有氧發(fā)酵后其營養(yǎng)物質(zhì)極易被植物吸收,產(chǎn)生了極強的殺蟲抗病能力,并對植物的根系及莖葉生長有較好的促進作用。本發(fā)明用天然植物的廢棄物為原料,采用特制后的混合菌種發(fā)酵制取的有機肥,解決了現(xiàn)有有機肥功效單一、抗蟲害效果低的不足,提高了殺蟲抗病效果,特別是特制的混合菌種只降解有機質(zhì),不破壞生物堿。本發(fā)明的生物有機肥特別適用于酸性土壤,對于酸性土壤的改良具有極好的效果,同時,能有效抑殺多種害蟲及病原菌,對土壤、環(huán)境及農(nóng) 作物沒有任何污染,是一種純綠色殺蟲抗病有機肥。
[0014]本發(fā)明有機肥在云南,江西兩地在三七,瑪卡,百合,馬鈴薯作物上進行了兩年實驗,實驗結(jié)果得出:每畝用80公斤本發(fā)明有機肥作為基肥,按照條溝施基肥(與25公分土均勻混合)后,定植進行常規(guī)管理。兩年實驗發(fā)現(xiàn):地表下一尺沒有常見的地下害蟲(蠐螬,金針蟲,螻蛄,地老虎,根蛆,根結(jié)線蟲),在防治地下害蟲上效果顯著;在地上同樣也沒有發(fā)現(xiàn)害蟲對植株的危害,在實驗期間,農(nóng)民沒有用過任何化學(xué)農(nóng)藥殺蟲劑,真正實現(xiàn)了綠色農(nóng)產(chǎn)品的生產(chǎn)。
【具體實施方式】
[0015]本發(fā)明的一種殺蟲抗病生物有機肥,由下述重量比的原料組成:桉樹葉13-23.5、煙草莖桿20-25、萬壽菊莖桿20-25、苦參莖桿15-18、羊毛土 17-22.5、混合菌種1_2及碳酸鉀 1.5-2.5。
[0016]上述重量比的原料可有下述多種組合:
1、桉樹葉15、煙草莖桿21、萬壽菊莖桿22、苦參莖桿18、羊毛土 22、混合菌種I及碳酸鉀2。
[0017]2、桉樹葉23.5、煙草莖桿20、萬壽菊莖桿20、苦參莖桿15、羊毛土 17、混合菌種2及碳酸鉀2.5。
[0018]3、桉樹葉13、煙草莖桿25、萬壽菊莖桿25、苦參莖桿17、羊毛土 17.5、混合菌種I及碳酸鉀1.5。
[0019]4、桉樹葉16、煙草莖桿20、萬壽菊莖桿22、苦參莖桿17、羊毛土 22、混合菌種I及碳酸鉀2。
[0020]5、桉樹葉19、煙草莖桿20、萬壽菊莖桿20、苦參莖桿15.5、羊毛土 22.5、混合菌種
1.2及碳酸鉀1.8。
[0021]6、桉樹葉17、煙草莖桿23、萬壽菊莖桿23、苦參莖桿17、羊毛土 17、混合菌種I及碳酸鉀2.3。
[0022]本發(fā)明所述混合菌種為放線菌、光合細菌及酵母菌組成,按單位體積內(nèi)菌種相同的菌種體積份計為:放線菌40份、光合細菌40份及酵母菌20份。
[0023]本發(fā)明所述混合菌種的制備方法為:
(O制備放線囷:
(1.0制備放線菌斜面培養(yǎng)基:取300L水置入容器內(nèi),加熱至65°C,將原料麩皮lkg、豌豆浸汁lkg、蛋白胨50kg、硝酸鉀lkg、氯化鈉50g、磷酸氫二鉀50g、硫化鎂50g及硫酸鐵12g,置入65°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取20kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入700L的水,調(diào)PH值7.3 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘;
(1.2)制備放線菌液體培養(yǎng)基:取300L水置入容器內(nèi),加熱至65°C,將原料麩皮lkg、豌豆浸汁lkg、蛋白胨50kg、硝酸鉀lkg、氯化鈉50g、磷酸氫二鉀50g、硫化鎂50g及硫酸鐵12g,置入65°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取2.5kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入700L的水,調(diào)PH值7.3 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘;
對放線菌進行活化培養(yǎng):把放線菌菌種點種在斜面培養(yǎng)基的中部,在斜面的中部稀波狀蜿蜒劃線,在溫度28°C、濕度45%的條件下,培養(yǎng)60h ;從活化好的放線菌斜面培養(yǎng)基中取接種量10%的菌種量接種于放線菌液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)溫度為28°C,培養(yǎng)5-14天,待菌落菌數(shù)為100億/ml即為放線菌;
(2)制備光合細菌:
(2.1)制備光合細菌斜面培養(yǎng)基:取300L水置入容器內(nèi),加熱至65°C,將原料蛋白胨55g、醋酸鈉1.15kg、碳酸鈉600g、硫代硫酸鈉400g、氯化鈉350g、磷酸氫二鉀50g及硫酸鎂125g,置入65°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取20kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入700L的水,調(diào)PH值8.2 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘;
(2.2)制備光合細菌液體培養(yǎng)基:取300L水置入容器內(nèi),加熱至65°C,將原料蛋白胨55g、醋酸鈉1.15kg、碳酸鈉600g、硫代硫酸鈉400g、氯化鈉350g、磷酸氫二鉀50g及硫酸鎂125g,置入65°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取2.5kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入700L的水,調(diào)PH值8.2 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘;
對光合細菌進行活化培養(yǎng):把光合細菌菌種點種在斜面的中部,在斜面的中部稀波狀蜿蜒劃線,在溫度28-36°C,光照強度:3500LX,濕度45%的條件下,培養(yǎng)40h ;從活化好的光合細菌斜面瓊脂培養(yǎng)基中取接種量10%的菌種量接種于光合細菌液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)溫度30°C,光照強度3500LX、 培養(yǎng)4-7天,待斜面菌落菌數(shù)為100億/ml即為光合細菌;
(3)制備酵母菌:(3.1)制備酵母菌斜面培養(yǎng)基:取300L水置入容器內(nèi),加熱至65°C,將原料蔗糖125g、硝酸鉀100g、氯化鈉500g、磷酸氫二鉀500g、硫酸鎂500g及硫酸鐵8g,置入65°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取20kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入700L的水,調(diào)PH值5.0 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘;
(3.2)制備酵母菌斜面培養(yǎng)基:取300L水置入容器內(nèi),加熱至65°C,將原料蔗糖125g、硝酸鉀100g、氯化鈉500g、磷酸氫二鉀500g、硫酸鎂500g及硫酸鐵8g,置入65°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取2.5kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入700L的水,調(diào)PH值5.0 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘;
對酵母菌進行活化培養(yǎng):把酵母菌菌種點種在斜面的中部,在斜面的中部自下而上劃線,在溫度25°C,濕度45%的條件下,培養(yǎng)40h ;從活化好的酵母菌斜面培養(yǎng)基中取接種量10%的菌種量接種于酵母菌液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)溫度為25°C,培養(yǎng)時間為5-10天,待菌落菌數(shù)為100億/ml即為酵母菌。
[0024](4)取放線菌40份、光合細菌40份及酵母菌20份混合均勻,即為混合菌種;
本發(fā)明所述的一種殺蟲抗病有機肥的制備方法,步驟如下:
⑴按重量比取桉樹葉13-23.5、煙草莖桿20-25、萬壽菊莖桿20-25、苦參莖桿15-18、羊毛土 17-22.5破碎后備用;
⑵制備混合菌種:
(2.1)制備放線菌:
(2.1.1)制備放線菌斜面培養(yǎng)基:斜面培養(yǎng)基原料為:麩皮0.8-1.2kg、豌豆浸汁0.8-1.2kg、蛋白胨30-70kg、硝酸鉀0.8-1.2 kg、氯化鈉30_70g、磷酸氫二鉀30_70g、硫酸鎂 30-70g、硫酸鐵 10-15g、瓊脂 15-25kg 及水 800-1200L,調(diào) PH 值 7.2-7.4 ;
(2.1.2)制備放線菌液體培養(yǎng)基:液體培養(yǎng)基的原料為:麩皮0.8-1.2kg、豌豆浸汁
0.8-1.2kg、蛋白胨30-70kg和硝酸鉀0.8-1.2 kg、氯化鈉30_70g、磷酸氫二鉀30_70g、硫酸鎂 30-70g、硫酸鐵 10-15g、瓊脂 1.5-3.5kg 及水 800-1200L,調(diào) PH 值 7.2-7.4 ;
對放線菌進行活化培養(yǎng);從活化好的放線菌斜面培養(yǎng)基中取接種量10%的菌種量接種于放線菌液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)溫度為28°C,培養(yǎng)5-14天,待菌落菌數(shù)為100億/ml即為放線菌;
(2.2)制備光合細菌:
(2.2.1)制備光合細菌斜面培養(yǎng)基:斜面培養(yǎng)基的原料為:蛋白胨50-60g、醋酸鈉
1.1-1.2kg、碳酸鈉500-700g、硫代硫酸鈉300-500g、氯化鈉200_500g、磷酸氫二鉀30_70g、硫酸鎂 50-200g、瓊脂 15-25kg 及水 800-1200L,調(diào) PH 值 8-8.5 ;
(2.2.2)制備光合細菌液體培養(yǎng)基:蛋白胨50-60g、醋酸鈉1.1-1.2kg、碳酸鈉500-700g、硫代硫酸鈉300-500g、氯化鈉200_500g、磷酸氫二鉀30_70g、硫酸鎂50_200g、瓊脂 1.5-3.5kg 及水 800-1200L,調(diào) PH 值 8-8.5 ;
對光合細菌進行活化培養(yǎng);從活化好的光合細菌斜面瓊脂培養(yǎng)基中取接種量10%的菌種量接種于光合細菌液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)溫度28-36°C,光照強度3000-4000LX、培養(yǎng)4-7天,待斜面菌落菌數(shù)為100億/ml即為光合細菌;(2.3)制備酵母菌:
(2.3.1)制備酵母菌斜面培養(yǎng)基:斜面培養(yǎng)基的原料為:蔗糖50-200g、硝酸鉀80-120g、氯化鈉300-700g、磷酸氫二鉀300_700g、硫酸鎂300_700g、硫酸鐵5_12g、瓊脂15-25kg、水 800-1200L,調(diào)節(jié) PH 值 4.5-5.5 ;
(2.3.2)制備酵母菌液體培養(yǎng)基;液體培養(yǎng)基的原料為:蔗糖50-200g、硝酸鉀80-120g、氯化鈉300-700g、硫酸氫二鉀300_700g、硫酸鎂300_700g、硫酸鐵5_12g、瓊脂
1.5-3.5kg、水 800-1200L,調(diào)節(jié) PH 值 4.5-5.5 ;
對酵母菌進行活化培養(yǎng):從活化好的酵母菌斜面培養(yǎng)基中取接種量10%的菌種量接種于酵母菌液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)溫度為20-30°C,培養(yǎng)時間為5-10天,待菌落菌數(shù)為100億/ml即為酵母菌。
[0025](2.4)取放線菌40份、光合細菌40份及酵母菌20份混合均勻,即為混合菌種;
(3)按重量比取混合菌種1-2,噴至步驟(1)破碎后的混合物上,攪拌均勻,進行有氧發(fā)酵8-15天,按重量比取碳酸鉀1.5-2.5對發(fā)酵的的混合物調(diào)PH值7_8,得到有機肥基料;
(4)將步驟(3)中有機肥基料進行干燥后粉碎至40-100目,篩分后包裝,即為殺蟲抗病有機肥。
[0026] 實施例1,一種殺蟲抗病生物有機肥的制備方法,步驟如下:
⑴按重量比取桉樹葉23.5、煙草莖桿20、萬壽菊莖桿20、苦參莖桿15、羊毛土 17分別破碎均勻后備用;
(2)制備混合菌種:
(2.1)制備放線菌:
(2.1.1)制備放線菌斜面培養(yǎng)基:取300L水置入容器內(nèi),加熱至65°C,將原料麩皮lkg、豌豆浸汁lkg、蛋白胨50kg、硝酸鉀lkg、氯化鈉50g、磷酸氫二鉀50g、硫化鎂50g及硫酸鐵12g,置入65°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取20kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入700L的水,調(diào)PH值7.3 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘;
(2.1.2)制備放線菌液體培養(yǎng)基:取300L水置入容器內(nèi),加熱至65°C,將原料麩皮lkg、豌豆浸汁lkg、蛋白胨50kg、硝酸鉀lkg、氯化鈉50g、磷酸氫二鉀50g、硫化鎂50g及硫酸鐵12g,置入65 °C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100 V溶解完全后得到溶解液,取2.5kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入700L的水,調(diào)PH值7.3 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘;
對放線菌進行活化培養(yǎng):把放線菌菌種點種在斜面培養(yǎng)基的中部,在斜面的中部稀波狀蜿蜒劃線,在溫度28°C、濕度45%的條件下,培養(yǎng)60h ;從活化好的放線菌斜面培養(yǎng)基中取接種量10%的菌種量接種于放線菌液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)溫度為28°C,培養(yǎng)5-14天,待菌落菌數(shù)為100億/ml即為放線菌;
(2.2)制備光合細菌:
(2.2.1)制備光合細菌斜面培養(yǎng)基:取300L水置入容器內(nèi),加熱至65°C,將原料蛋白胨55g、醋酸鈉1.15kg、碳酸鈉600g、硫代硫酸鈉400g、氯化鈉350g、磷酸氫二鉀50g及硫酸鎂125g,置入65°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取20kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入700L的水,調(diào)PH值8.2 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘;
(2.2.2)制備光合細菌液體培養(yǎng)基:取300L水置入容器內(nèi),加熱至65°C,將原料蛋白胨55g、醋酸鈉1.15kg、碳酸鈉600g、硫代硫酸鈉400g、氯化鈉350g、磷酸氫二鉀50g及硫酸鎂125g,置入65°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取2.5kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入700L的水,調(diào)PH值8.2 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘;
對光合細菌進行活化培養(yǎng):把光合細菌菌種點種在斜面的中部,在斜面的中部稀波狀蜿蜒劃線,在溫度30°C,光照強度:3500LX,濕度45%的條件下,培養(yǎng)40h ;從活化好的光合細菌斜面瓊脂培養(yǎng)基中取接種量10%的菌種量接種于光合細菌液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)溫度30°C,光照強度3500LX、培養(yǎng)4-7天,待斜面菌落菌數(shù)為100億/ml即為光合細菌;
(2.3)制備酵母菌:
(2.3.1)制備酵母菌斜面培養(yǎng)基:取300L水置入容器內(nèi),加熱至65°C,將原料蔗糖125g、硝酸鉀100g、氯化鈉500g、磷酸氫二鉀500g、硫酸鎂500g及硫酸鐵8g,置入65°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取20kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入700L的水,調(diào)PH值5.0 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘;
(2.3.2)制備酵母菌斜面培養(yǎng)基:取300L水置入容器內(nèi),加熱至65°C,將原料蔗糖125g、硝酸鉀100g、氯化鈉500g、磷酸氫二鉀500g、硫酸鎂500g及硫酸鐵8g,置入65°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取2.5kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加 入700L的水,調(diào)PH值5.0 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘;
對酵母菌進行活化培養(yǎng):把酵母菌菌種點種在斜面的中部,在斜面的中部自下而上劃線,在溫度25°C,濕度45%的條件下,培養(yǎng)40h ;從活化好的酵母菌斜面培養(yǎng)基中取接種量10%的菌種量接種于酵母菌液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)溫度為25°C,培養(yǎng)時間為5-10天,待菌落菌數(shù)為100億/ml即為酵母菌。
[0027](2.4)取放線菌40份、光合細菌40份及酵母菌20份混合均勻,即為混合菌種;
(3)按重量比取混合菌種1-2,噴至步驟(1)破碎后的混合物上,攪拌均勻,進行有氧發(fā)酵8-15天,按重量比取碳酸鉀1.5-2.5對發(fā)酵的的混合物調(diào)PH值7_8,得到有機肥基料;
(4)將步驟(3)中有機肥基料進行干燥后粉碎至40-100目,篩分后包裝,即為殺蟲抗病有機肥。
[0028]上述制備方法為本發(fā)明優(yōu)選方案,其殺蟲抗病效果顯著。
[0029]實施例2,一種殺蟲抗病生物有機肥的制備方法,步驟如下:
⑴按重量比取桉樹葉23.5、煙草莖桿20、萬壽菊莖桿20、苦參莖桿15、羊毛土 17分別破碎均勻后備用;
(2)制備混合菌種:
(2.1)制備放線菌:
(2.1.1)制備放線菌斜面培養(yǎng)基:取200L水置入容器內(nèi),加熱至55°C,將原料麩皮
0.88kg、豌豆浸汁0.8kg、蛋白胨30kg、硝酸鉀0.8 kg、氯化鈉30g、磷酸氫二鉀30g、硫化鎂30g及硫酸鐵10g,置入55°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取15kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入600L的水,調(diào)PH值7.2 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘;
(2.1.2)制備放線菌液體培養(yǎng)基:取200L水置入容器內(nèi),加熱至55°C,將原料麩皮
0.8kg、豌豆浸汁0.8kg、蛋白胨30kg、硝酸鉀0.8kg、氯化鈉30g、磷酸氫二鉀30g、硫化鎂30g及硫酸鐵10g,置入55°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取1.5kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入600L的水,調(diào)PH值7.2 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘;
對放線菌進行活化培養(yǎng):把放線菌菌種點種在斜面培養(yǎng)基的中部,在斜面的中部稀波狀蜿蜒劃線,在溫度28°C、濕度40%的條件下,培養(yǎng)50h ;從活化好的放線菌斜面培養(yǎng)基中取接種量10%的菌種量接種于放線菌液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)溫度為28°C,培養(yǎng)5-14天,待菌落菌數(shù)為100億/ml即為放線菌;
(2.2)制備光合細菌:
(2.2.1)制備光合細菌斜面培養(yǎng)基:取200L水置入容器內(nèi),加熱至55°C,將原料蛋白胨50g、醋酸鈉1.lkg、碳酸鈉500g、硫代硫酸鈉300g、氯化鈉200g、磷酸氫二鉀30g及硫酸鎂50g,置入55°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取15kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入700L的水,調(diào)PH值8.0 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘;
(2.2.2)制備光合細菌液體培養(yǎng)基:取200L水置入容器內(nèi),加熱至55°C,將原料蛋白胨50g、醋酸鈉1.lkg、碳酸鈉500g、硫代硫酸鈉300g、氯化鈉200g、磷酸氫二鉀30g及硫酸鎂50g,置入55°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取1.5kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入700L的水,調(diào)PH值8.0 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘;` 對光合細菌進行活化培養(yǎng):把光合細菌菌種點種在斜面的中部,在斜面的中部稀波狀蜿蜒劃線,在溫度28°C,光照強度:3000LX,濕度40%的條件下,培養(yǎng)30h ;從活化好的光合細菌斜面瓊脂培養(yǎng)基中取接種量10%的菌種量接種于光合細菌液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)溫度28°C,光照強度3000LX、培養(yǎng)4-7天,待斜面菌落菌數(shù)為100億/ml即為光合細菌;
(2.3)制備酵母菌:
(2.3.1)制備酵母菌斜面培養(yǎng)基:取200L水置入容器內(nèi),加熱至55°C,將原料蔗糖50g、硝酸鉀80g、氯化鈉300g、磷酸氫二鉀300g、硫酸鎂300g及硫酸鐵5g,置入55°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取15kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入600L的水,調(diào)PH值4.5 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘;
(2.3.2)制備酵母菌斜面培養(yǎng)基:取200L水置入容器內(nèi),加熱至55°C,將原料蔗糖50g、硝酸鉀80g、氯化鈉300g、磷酸氫二鉀300g、硫酸鎂300g及硫酸鐵5g,置入55°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取1.5kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入600L的水,調(diào)PH值4.5 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘;
對酵母菌進行活化培養(yǎng):把酵母菌菌種點種在斜面的中部,在斜面的中部自下而上劃線,在溫度20°C,濕度40%的條件下,培養(yǎng)30h ;從活化好的酵母菌斜面培養(yǎng)基中取接種量10%的菌種量接種于酵母菌液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)溫度為20°C,培養(yǎng)時間為5-10天,待菌落菌數(shù)為100億/ml即為酵母菌。
[0030](2.4)取放線菌40份、光合細菌40份及酵母菌20份混合均勻,即為混合菌種;
(3)按重量比取混合菌種1-2,噴至步驟(1)破碎后的混合物上,攪拌均勻,進行有氧發(fā)酵8-15天,按重量比取碳酸鉀1.5-2.5對發(fā)酵的的混合物調(diào)PH值7_8,得到有機肥基料;
(4)將步驟(3)中有機肥基料進行干燥后粉碎至40-100目,篩分后包裝,即為殺蟲抗病有機肥。
[0031]實施例3,一種殺蟲抗病生物有機肥的制備方法,步驟如下:
⑴按重量比取桉樹葉23.5、煙草莖桿20、萬壽菊莖桿20、苦參莖桿15、羊毛土 17分別破碎均勻后備用;
(2)制備混合菌種:
(2.1)制備放線菌:
(2.1.1)制備放線菌斜面培養(yǎng)基:取400L水置入容器內(nèi),加熱至80°C,將原料麩皮
.2kg、豌豆浸汁1.2kg、蛋白胨70kg、硝酸鉀1.2 kg、氯化鈉70g、磷酸氫二鉀70g、硫化鎂70g及硫酸鐵15g,置入80°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取25kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入800L的水,調(diào)PH值7.4 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘;
(2.1.2)制備放線菌液體培養(yǎng)基:取400L水置入容器內(nèi),加熱至80°C,將原料麩皮
1.2kg、豌豆浸汁1.2kg、蛋白胨70kg、硝酸鉀1.2 kg、氯化鈉70g、磷酸氫二鉀70g、硫化鎂70g及硫酸鐵15g,置入80°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取3.5kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入800L的水,調(diào)PH值7.4 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘;
對放線菌進行活化培養(yǎng):把放線菌菌種點種在斜面培養(yǎng)基的中部,在斜面的中部稀波狀蜿蜒劃線,在溫度36°C、濕度50%的條件下,培養(yǎng)70h ;從活化好的放線菌斜面培養(yǎng)基中取接種量10%的菌種量接種于放線菌液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)溫度為28°C,培養(yǎng)5-14天,待菌落菌數(shù)為100億/ml即為放線菌;
(2.2)制備光合細菌:
(2.2.1)制備光合細菌斜面培養(yǎng)基:取400L水置入容器內(nèi),加熱至80°C,將原料蛋白胨60g、醋酸鈉1.2kg、碳酸鈉700g、硫代硫酸鈉500g、氯化鈉500g、磷酸氫二鉀70g及硫酸鎂200g,置入80°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取25kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入800L的水,調(diào)PH值8.5 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘;
(2.2.2)制備光合細菌液體培養(yǎng)基:取400L水置入容器內(nèi),加熱至80°C,將原料蛋白胨60g、醋酸鈉1.2kg、碳酸鈉700g、硫代硫酸鈉500g、氯化鈉500g、磷酸氫二鉀70g及硫酸鎂200g,置入80°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取3.5kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入800L的水,調(diào)PH值8.5 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘;
對光合細菌進行活化培養(yǎng):把光合細菌菌種點種在斜面的中部,在斜面的中部稀波狀蜿蜒劃線,在溫度36°C,光照強度:4000LX,濕度50%的條件下,培養(yǎng)50h ;從活化好的光合細菌斜面瓊脂培養(yǎng)基中取接種量10%的菌種量接種于光合細菌液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)溫度36°C,光照強度4000LX、培養(yǎng)4-7天,待斜面菌落菌數(shù)為100億/ml即為光合細菌;
(2.3)制備酵母菌:
(2.3.1)制備酵母菌斜面培養(yǎng)基:取400L水置入容器內(nèi),加熱至80°C,將原料蔗糖200g、硝酸鉀120g、氯化鈉700g、磷酸氫二鉀700g、硫酸鎂700g及硫酸鐵12g,置入80°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取25kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入800L的水,調(diào)PH值55 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘;
(2.3.2)制備酵母菌斜面培養(yǎng)基:取400L水置入容器內(nèi),加熱至80°C,將原料蔗糖200g、硝酸鉀120g、氯化鈉700g、磷酸氫二鉀700g、硫酸鎂700g及硫酸鐵12g,置入80°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取3.5kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入800L的水,調(diào)PH值55 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘;
對酵母菌進行活化培養(yǎng):把酵母菌菌種點種在斜面的中部,在斜面的中部自下而上劃線,在溫度30°C,濕度50%的條件下,培養(yǎng)50h ;從活化好的酵母菌斜面培養(yǎng)基中取接種量10%的菌種量接種于酵母菌液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)溫度為30°C,培養(yǎng)時間為5-10天,待菌落菌數(shù)為100億/ml即為酵母菌。
[0032](2.4)取放線菌40份、光合細菌40份及酵母菌20份混合均勻,即為混合菌種;
(3)按重量比取混合菌種1-2,噴至步驟(1)破碎后的混合物上,攪拌均勻,進行有氧發(fā)酵8-15天,按重量比取碳酸鉀1.5-2.5對發(fā)酵的的混合物調(diào)PH值7_8,得到有機肥基料;
(4)將步驟(3)中有機肥`基料進行干燥后粉碎至40-100目,篩分后包裝,即為殺蟲抗病有機肥。
[0033]本發(fā)明所述的羊毛土由河北日伊豐達絨毛加工有限公司生產(chǎn)。
【權(quán)利要求】
1.一種殺蟲抗病生物有機肥,其特征在于:包括下述重量比的原料:桉樹葉13-23.5、煙草莖桿20-25、萬壽菊莖桿20-25、苦參莖桿15-18、羊毛土 17-22.5、混合菌種1_2及碳酸鉀 1.5-2.5。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種殺蟲抗病生物有機肥,其特征在于:包括下述重量比的原料:桉樹葉15、煙草莖桿21、萬壽菊莖桿22、苦參莖桿18、羊毛土 22、混合菌種I及碳酸鉀2。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種殺蟲抗病生物有機肥,其特征在于:包括下述重量比的原料:桉樹葉23.5、煙草莖桿20、萬壽菊莖桿20、苦參莖桿15、羊毛土 17、混合菌種2及碳酸鉀2.5。
4.根據(jù)權(quán)利要求1、2、3任一項所述的一種殺蟲抗病生物有機肥,其特征在于:所述混合菌種為放線菌、光合細菌及酵母菌組成,按單位體積內(nèi)菌種相同的菌種體積份計為:放線菌40份、光合細菌40份及酵母菌20份。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種殺蟲抗病生物有機肥,其特征在于:所述混合菌種的制備方法為: (O制備放線囷: (1.0制備放線菌斜面培養(yǎng)基:取300L水置入容器內(nèi),加熱至65°C,將原料麩皮1kg、豌豆浸汁1kg、蛋白胨50kg、硝酸鉀I kg、氯化鈉50g、磷酸氫二鉀50g、硫化鎂50g及硫酸鐵12g,置入65°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取20kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入700L的水,調(diào)PH值7.3 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘; (1.2)制備放線菌液體培養(yǎng)基:取300L水置入容器內(nèi),加熱至65°C,將原料麩皮1kg、豌豆浸汁1kg、蛋白胨50kg、硝酸鉀1k`g、氯化鈉50g、磷酸氫二鉀50g、硫化鎂50g及硫酸鐵12g,置入65°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取2.5kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入700L的水,調(diào)PH值7.3 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘; 對放線菌進行活化培養(yǎng):把放線菌菌種點種在斜面培養(yǎng)基的中部,在斜面的中部稀波狀蜿蜒劃線,在溫度28°C、濕度45%的條件下,培養(yǎng)60h ;從活化好的放線菌斜面培養(yǎng)基中取接種量10%的菌種量接種于放線菌液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)溫度為28°C,培養(yǎng)5-14天,待菌落菌數(shù)為100億/ml即為放線菌; (2)制備光合細菌: (2.1)制備光合細菌斜面培養(yǎng)基:取300L水置入容器內(nèi),加熱至65 V,將原料蛋白胨55g、醋酸鈉1.15kg、碳酸鈉600g、硫代硫酸鈉400g、氯化鈉350g、磷酸氫二鉀50g及硫酸鎂125g,置入65°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取20kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入700L的水,調(diào)PH值8.2 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘; (2.2)制備光合細菌液體培養(yǎng)基:取300L水置入容器內(nèi),加熱至65°C,將原料蛋白胨55g、醋酸鈉1.15kg、碳酸鈉600g、硫代硫酸鈉400g、氯化鈉350g、磷酸氫二鉀50g及硫酸鎂125g,置入65°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取2.5kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入700L的水,調(diào)PH值8.2 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘; 對光合細菌進行活化培養(yǎng):把光合細菌菌種點種在斜面的中部,在斜面的中部稀波狀蜿蜒劃線,在溫度28-36°C,光照強度:3500LX,濕度45%的條件下,培養(yǎng)40h ;從活化好的光合細菌斜面瓊脂培養(yǎng)基中取接種量10%的菌種量接種于光合細菌液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)溫度30°C,光照強度3500LX、培養(yǎng)4-7天,待斜面菌落菌數(shù)為100億/ml即為光合細菌; (3)制備酵母菌: (3.1)制備酵母菌斜面培養(yǎng)基:取300L水置入容器內(nèi),加熱至65°C,將原料蔗糖125g、硝酸鉀100g、氯化鈉500g、磷酸氫二鉀500g、硫酸鎂500g及硫酸鐵8g,置入65°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取20kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入700L的水,調(diào)PH值5.0 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘; (3.2)制備酵母菌斜面培養(yǎng)基:取300L水置入容器內(nèi),加熱至65°C,將原料蔗糖125g、硝酸鉀100g、氯化鈉500g、磷酸氫二鉀500g、硫酸鎂500g及硫酸鐵8g,置入65°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取2.5kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入700L的水,調(diào)PH值5.0 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘; 對酵母菌進行活化培養(yǎng):把酵母菌菌種點種在斜面的中部,在斜面的中部自下而上劃線,在溫度25°C,濕度45%的條件下,培養(yǎng)40h ;從活化好的酵母菌斜面培養(yǎng)基中取接種量`10%的菌種量接種于酵母菌液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)溫度為25°C,培養(yǎng)時間為5-10天,待菌落菌數(shù)為100億/ml即為酵母菌; (4)取放線菌40份、光合細菌40份及酵母菌20份混合均勻,即為混合菌種。
6.權(quán)利要求1所述的一種殺蟲抗病生物有機肥的制備方法,其特征在于:步驟如下: ⑴按重量比取桉樹葉13-23.5、煙草莖桿20-25、萬壽菊莖桿20-25、苦參莖桿15-18、羊毛土 17-22.5破碎后備用; ⑵制備混合菌種: (2.1)制備放線菌: (2.1.1)制備放線菌斜面培養(yǎng)基:斜面培養(yǎng)基原料為:麩皮0.8-1.2kg、豌豆浸汁`0.8-1.2kg、蛋白胨30-70kg、硝酸鉀0.8-1.2 kg、氯化鈉30_70g、磷酸氫二鉀30_70g、硫酸鎂 30-70g、硫酸鐵 10-15g、瓊脂 15-25kg 及水 800-1200L,調(diào) PH 值 7.2-7.4 ; (2.1.2)制備放線菌液體培養(yǎng)基:液體培養(yǎng)基的原料為:麩皮0.8-1.2kg、豌豆浸汁`0.8-1.2 kg、蛋白胨30-70kg和硝酸鉀0.8-1.2 kg、氯化鈉30_70g、磷酸氫二鉀30_70g、硫酸鎂 30-70g、硫酸鐵 10-15g、瓊脂 1.5-3.5kg 及水 800-1200L,調(diào) PH 值 7.2-7.4 ; 對放線菌進行活化培養(yǎng);從活化好的放線菌斜面培養(yǎng)基中取接種量10%的菌種量接種于放線菌液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)溫度為28°C,培養(yǎng)5-14天,待菌落菌數(shù)為100億/ml即為放線菌; (2.2)制備光合細菌:` (2.2.1)制備光合細菌斜面培養(yǎng)基:斜面培養(yǎng)基的原料為:蛋白胨50-60g、醋酸鈉1.1-1.2kg、碳酸鈉500-700g、硫代硫酸鈉300-500g、氯化鈉200_500g、磷酸氫二鉀30-70g、硫酸鎂 50-200g、瓊脂 15-25kg 及水 800-1200L,調(diào) PH 值 8-8.5 ;(2.2.2)制備光合細菌液體培養(yǎng)基:蛋白胨50-60g、 醋酸鈉1.1-1.2kg、碳酸鈉500-700g、硫代硫酸鈉300-500g、氯化鈉200_500g、磷酸氫二鉀30_70g、硫酸鎂50_200g、瓊脂 1.5-3.5kg 及水 800-1200L,調(diào) PH 值 8-8.5 ; 對光合細菌進行活化培養(yǎng);從活化好的光合細菌斜面瓊脂培養(yǎng)基中取接種量10%的菌種量接種于光合細菌液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)溫度28-36°C,光照強度3000-4000LX、培養(yǎng)4-7天,待斜面菌落菌數(shù)為100億/ml即為光合細菌; (2.3)制備酵母菌: (2.3.1)制備酵母菌斜面培養(yǎng)基:斜面培養(yǎng)基的原料為: 蔗糖50-200g、硝酸鉀80-120g、氯化鈉300-700g、磷酸氫 二鉀300_700g、硫酸鎂300_700g、硫酸鐵5_12g、

脂15-25kg、水 800-1200L,調(diào)節(jié) PH 值 4.5-5.5 ; (2.3.2 )制備酵母菌液體培養(yǎng)基;液體培養(yǎng)基的原料為: 蔗糖50-200g、硝酸鉀80-120g、氯化鈉300-700g、硫酸氫 二鉀300_700g、硫酸鎂300_700g、硫酸鐵5_12g、
瓊脂1.5-3.5kg、水 800-1200L,調(diào)節(jié) PH 值 4.5-5.5 ; 對酵母菌進行活化培養(yǎng):從活化好的酵母菌斜面培養(yǎng)基中取接種量10%的菌種量接種于酵母菌液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)溫度為20-30°C,培養(yǎng)時間為5-10天,待菌落菌數(shù)為100億/ml即為酵母菌; (2.4)取放線菌40份、光合細菌40份及酵母菌20份混合均勻,即為混合菌種; (3)按重量比取混合菌種1-2,噴至步驟(1)破碎后的混合物上,攪拌均勻,進行有氧發(fā)酵8-15天,按重量比取碳酸鉀1.5-2.5對發(fā)酵的的混合物調(diào)PH值7_8,得到有機肥基料; (4)將步驟(3)中有機肥基料進行干燥后粉碎至40-100目,篩分后包裝,即為殺蟲抗病有機肥。
7.權(quán)利要求6所述的一種殺蟲抗病生物有機肥的制備方法,其特征在于:步驟如下: (I)按重量比取桉樹葉23.5、煙草莖桿20、萬壽菊莖桿20、苦參莖桿15、羊毛土 17分別破碎均勻后備用; (2)制備混合菌種: (2.1)制備放線菌: (2.1.1)制備放線菌斜面培養(yǎng)基:取300L水置入容器內(nèi),加熱至65°C,將原料麩皮lkg、豌豆浸汁I kg、蛋白胨50kg、硝酸鉀lkg、氯化鈉50g、磷酸氫二鉀50g、硫化鎂50g及硫酸鐵12g,置入65°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取20kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入700L的水,調(diào)PH7.3 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘; (2.1.2)制備放線菌液體培養(yǎng)基:取300L水置入容器內(nèi),加熱至65°C,將原料麩皮lkg、豌豆浸汁lkg、蛋白胨50kg、硝酸鉀lkg、氯化鈉50g、磷酸氫二鉀50g、硫化鎂50g及硫酸鐵12g,置入65 °C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100 V溶解完全后得到溶解液,取2.5kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入700L的水,調(diào)PH7.3 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘; 對放線菌進行活化培養(yǎng):把放線菌菌種點種在斜面培養(yǎng)基的中部,在斜面的中部稀波狀蜿蜒劃線,在溫度28°C、濕度45%的條件下,培養(yǎng)60h ;從活化好的放線菌斜面培養(yǎng)基中取接種量10%的菌種量接種于放線菌液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)溫度 為28°C,培養(yǎng)5-14天,待菌落菌數(shù)為100億/ml即為放線菌; (2.2)制備光合細菌: (2.2.1)制備光合細菌斜面培養(yǎng)基:取300L水置入容器內(nèi),加熱至65°C,將原料蛋白胨55g、醋酸鈉1.15kg、碳酸鈉600g、硫代硫酸鈉400g、氯化鈉350g、磷酸氫二鉀50g及硫酸鎂125g,置入65°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取20kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入700L的水,調(diào)PH值8.2 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘; (2.2.2)制備光合細菌液體培養(yǎng)基:取300L水置入容器內(nèi),加熱至65°C,將原料蛋白胨55g、醋酸鈉1.15kg、碳酸鈉600g、硫代硫酸鈉400g、氯化鈉350g、磷酸氫二鉀50g及硫酸鎂125g,置入65°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取2.5kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入700L的水,調(diào)PH值8.2 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘; 對光合細菌進行活化培養(yǎng):把光合細菌菌種點種在斜面的中部,在斜面的中部稀波狀蜿蜒劃線,在溫度28-36°C,光照強度:3500LX,濕度45%的條件下,培養(yǎng)40h ;從活化好的光合細菌斜面瓊脂培養(yǎng)基中取接種量10%的菌種量接種于光合細菌液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)溫度30°C,光照強度3500LX、培養(yǎng)4-7天,待斜面菌落菌數(shù)為100億/ml即為光合細菌; (2.3)制備酵母菌: (2.3.1 )制備酵母菌斜面培養(yǎng)基:取300L水置入容器內(nèi),加熱至65°C,將原料蔗糖125g、硝酸鉀100g、氯化鈉500g、磷酸氫二鉀500g、硫酸鎂500g及硫酸鐵8g,置入65°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取20kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入700L的水,調(diào)PH值5.0 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘; (2.3.2)制備酵母菌斜面培養(yǎng)基:取300L水置入容器內(nèi),加熱至65°C,將原料蔗糖125g、硝酸鉀100 g、、氯化鈉500g、磷酸氫二鉀500g、硫酸鎂500g及硫酸鐵8g,置入65°C熱水內(nèi)攪拌下溶解,繼續(xù)加熱至100°C溶解完全后得到溶解液,取2.5kg瓊脂用熱水融化后加入至溶解液中,攪拌均勻加入700L的水,調(diào)PH值5.0 ;50°C下將培養(yǎng)基置入密閉容器內(nèi),121.3°C下滅菌30分鐘; 對酵母菌進行活化培養(yǎng):把酵母菌菌種點種在斜面的中部,在斜面的中部自下而上劃線,在溫度25°C,濕度45%的條件下,培養(yǎng)40h ;從活化好的酵母菌斜面培養(yǎng)基中取接種量10%的菌種量接種于酵母菌液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)溫度為25°C,培養(yǎng)時間為5-10天,待菌落菌數(shù)為100億/ml即為酵母菌; (2.4)取放線菌40份、光合細菌40份及酵母菌20份混合均勻,即為混合菌種; (3)按重量比取混合菌種1-2,噴至步驟(1)破碎后的混合物上,攪拌均勻,進行有氧發(fā)酵8-15天,按重量比取碳酸鉀1.5-2.5對發(fā)酵的的混合物調(diào)PH值7_8,得到有機肥基料; (4)將步 驟(3)中有機肥基料進行干燥后粉碎至40-100目,篩分后包裝,即為殺蟲抗病有機肥。
【文檔編號】C05G3/02GK103694059SQ201310748637
【公開日】2014年4月2日 申請日期:2013年12月31日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月31日
【發(fā)明者】仝玉純, 陳保蓀 申請人:曲靖康莊肥業(yè)有限公司
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