一種抗旱性種質(zhì)的篩選方法
【專利摘要】本發(fā)明公開一種抗旱性種質(zhì)的篩選方法,采用瓊脂床進(jìn)行篩選。采用上述方法種子發(fā)芽的介質(zhì)非常均一,而且重復(fù)間的差異非常小,可忽略不計,可從大量的上千份的品種中帥選出抗旱性材料,效率高,可重復(fù)性好、準(zhǔn)確性高,操作簡單,水分散均勻,篩選過程中無需補(bǔ)水操作。
【專利說明】一種抗旱性種質(zhì)的篩選方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種抗旱性種質(zhì)的篩選方法。
【背景技術(shù)】
[0002]干旱是影響植物生長發(fā)育的主要環(huán)境因子之一,煙草在生長過程中,特別是從團(tuán)棵期進(jìn)入旺長期常常遭遇干旱,干旱已經(jīng)成為影響營養(yǎng)生長的重要因素。篩選抗旱種子的篩選成為解決上述問題的有效途徑之一。
[0003]傳統(tǒng)上鑒定抗旱的方法主要是采用田間鑒定,但田間鑒定周期長,可重復(fù)性差,另外受栽培環(huán)境影響較大。所以選擇在種子萌發(fā)到幼苗生長前期鑒定是比較方便快鍵的。種子的發(fā)芽床主要包括紙床、沙床和土床,在煙草種子上主要選用紙床,因為煙草種子很小,而沙床和土床的顆粒相對又比較大,如果用沙床或土床則煙草種子容易丟失,但紙床存在操作繁瑣、難控制、準(zhǔn)確性不高等缺點,如果在試驗過程中不淋水,則容易造成過渡干旱,導(dǎo)致所有樣本均死亡,難以區(qū)分抗旱性,如果中間淋水又無法控制量,過少作用不明顯,過量又可能就達(dá)不到干旱試驗的目的。另外,無論是紙床還是沙床和土床,均存在水分分布不均勻,可重復(fù)性差,篩選準(zhǔn)確性不高的缺陷。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004]本發(fā)明的目的是提供一種抗旱性種質(zhì)的篩選方法。
[0005]為解決上述技術(shù)問題,本發(fā)明的技術(shù)方案是:
[0006]一種抗旱性種質(zhì)的篩選方法,采用瓊脂床進(jìn)行篩選。
[0007]篩選時,最好挑選健康有生活力的種子,這樣可提高篩選效率。采用上述方法種子發(fā)芽的介質(zhì)非常均一,而且重復(fù)間的差異非常小,可忽略不計,可從大量的上千份的品種中帥選出抗旱性材料,效率高,可重復(fù)性好、準(zhǔn)確性高,操作簡單,水分散均勻,篩選過程中無需補(bǔ)水操作。
[0008]為了保證所篩選出種質(zhì)的抗旱性能,瓊脂床的濃度為不小于16g/L。
[0009]為了提高篩選的準(zhǔn)確性,瓊脂床的濃度為16_28g/L。
[0010]為了進(jìn)一步保證篩選的準(zhǔn)確性,瓊脂床的濃度為17g/L。
[0011]抗旱性種質(zhì)的篩選方法優(yōu)選,在瓊脂床上均勻點播種子,然后將瓊脂床放置在20-30°C,RH>90%,光照和黑暗12h交替的人工氣候培養(yǎng)箱中培養(yǎng),篩選抗旱性種質(zhì)。
[0012]采用上述方法,可根據(jù)不同種子的類型,確定發(fā)芽時間,期限到時,不出現(xiàn)萎蔫或萎蔫率很少的為抗旱性種質(zhì)。上述篩選方法準(zhǔn)確性高、可重復(fù)性強(qiáng)。
[0013]種子的行距與株距均為種子長度的3倍以上。這樣可進(jìn)一步提高篩選的準(zhǔn)確性,盡可能低避免種子相互之間的影響。 [0014]上述方法中所述種子優(yōu)選為煙草種子。
[0015]當(dāng)為煙草種子時,上述方法,10天時,種子萎蔫率< 5%的為抗旱性種質(zhì),而5% <種子萎蔫率< 50%為中等型種質(zhì),種子萎蔫率> 50%為干旱敏感性種質(zhì)。 申請人:經(jīng)研究發(fā)現(xiàn):當(dāng)時間為10天時,可準(zhǔn)確地篩選出是否是抗旱性種質(zhì)。
[0016]上述萎蔫率=萎蔫幼苗的個數(shù)/試驗總苗數(shù)(萎蔫:指在瓊脂床已經(jīng)發(fā)芽的幼苗由于缺水幼苗長勢出現(xiàn)問題)。
[0017]采用上述方法可準(zhǔn)確篩選出抗旱性種質(zhì)。
[0018]本發(fā)明抗旱性種質(zhì)的篩選方法,操作簡單,在發(fā)芽過程中無需補(bǔ)水,種子發(fā)芽的介質(zhì)非常均一,可重復(fù)性高,可從大量的上千份的品種中篩選抗旱性材料,且篩選準(zhǔn)確性高。
【具體實施方式】
[0019]為了更好地理解本發(fā)明,下面結(jié)合實施例進(jìn)一步闡明本發(fā)明的內(nèi)容,但本發(fā)明的內(nèi)容不僅僅局限于下面的實施例。
[0020]實施例中南江3號、紅花大金元和云煙87的種子均由貴州省煙草科學(xué)研究所良種繁育推廣中心保存和提供。
[0021]瓊脂粉由上海稼豐公司生產(chǎn),凝膠強(qiáng)度為900g/cm2,總灰分≤6.5%,重金屬<40ppm,鉛〈IOppmο
[0022]種子培育溫度為26°C,相對濕度大于90%,并在關(guān)照和黑暗12h交替的人工氣候培養(yǎng)箱(RZH-850A)中培養(yǎng),10天時,種子萎蔫率< 5%的為抗旱性種質(zhì),而5% <種子萎蔫率(50%為中等型種質(zhì),種子萎蔫率> 50%為干旱敏感性種質(zhì)。
[0023]培養(yǎng)皿的規(guī)格為皿底直徑90_,皿高為15_,皿底厚為2_。
[0024]實施例1
[0025]1、打孔器的制備:在邊長為70mm的正方形木板上,固定10行直徑為1mm,長為Icm的棍狀物,每行固定10個,相鄰兩行行距和相鄰兩列列距均為4mm。
[0026]2、將上述打孔器棍狀物向下插入到培養(yǎng)皿中。
[0027]3、采用SX-500高壓滅菌鍋將瓊脂粉溶解,得所需濃度的瓊脂溶液,將所得瓊脂溶液注入步驟2中的培養(yǎng)皿中,使液態(tài)瓊脂厚為6mm,冷卻后,垂直輕輕拔出打孔器,在瓊脂床上留下了播種孔100個。
[0028]根據(jù)上述方法分別制備濃度為17%、22%的瓊脂床,然后在上述瓊脂床上的孔中點種南江3號、紅花大金元和云煙87。
[0029]在培養(yǎng)皿中平鋪2張濾紙,用蒸餾水淋濕濾紙(1-1.5ml/100cm2),得紙床作為對照,其點種的種子數(shù)量和間距同瓊脂床(實驗過程中需要控制紙床上蒸餾水的量,在第5天和第10天分別補(bǔ)充少量的水(l-1.5ml/100cm2),避免過渡干旱導(dǎo)致種子死亡。而瓊脂床在實驗過程中無需補(bǔ)充任何水分。
[0030]表1抗旱性種質(zhì)瓊脂床篩選方法
[0031]
【權(quán)利要求】
1.一種抗旱性種質(zhì)的篩選方法,其特征在于:采用瓊脂床進(jìn)行篩選。
2.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于:瓊脂床的濃度為不小于16g/L。
3.如權(quán)利要求2所述的方法,其特征在于:瓊脂床的濃度為16-28g/L。
4.如權(quán)利要求3所述的方法,其特征在于:瓊脂床的濃度為17g/L。
5.如權(quán)利要求1-4任意一項所述的方法,其特征在于:瓊脂的深度不小于0.5cm。
6.如權(quán)利要求1-4任意一項所述的方法,其特征在于:在瓊脂床上點播種子,然后將瓊脂床放置在20-30°C,RH>90%,光照和黑暗12h交替的人工氣候培養(yǎng)箱中培養(yǎng),篩選抗旱性種質(zhì)。
7.如權(quán)利要求6所述的方法,其特征在于:種子的行距與株距均為種子長度的3倍以上。
8.如權(quán)利要求6所述的方法,其特征在于:所述種子為煙草種子。
9.如權(quán)利要求6所述的方法,其特征在于:10天時,種子萎蔫率<5%的為抗旱性種質(zhì),而5% <種子萎蔫率< 50%為中·等型種質(zhì),種子萎蔫率> 50%為干旱敏感性種質(zhì)。
【文檔編號】A01G7/00GK103843561SQ201410062281
【公開日】2014年6月11日 申請日期:2014年2月24日 優(yōu)先權(quán)日:2014年2月24日
【發(fā)明者】李振華, 葉定勇, 陳堯, 劉一靈, 管昌杰, 楊貴生 申請人:貴州省煙草科學(xué)研究院