一種快捷簡(jiǎn)便的葉蟬消化器官解剖方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明提供了一種快捷簡(jiǎn)便的葉蟬消化器官解剖方法，屬于昆蟲(chóng)解剖學(xué)領(lǐng)域。本方法能在短時(shí)間內(nèi)得到完整的葉蟬消化道，最大程度減少細(xì)胞成分的損失，保證細(xì)胞內(nèi)超微結(jié)構(gòu)的原始狀態(tài)保存完好，便于下一步實(shí)驗(yàn)得到良好結(jié)果。本申請(qǐng)利用消化道連接著頭部的唾液腺和尾部的直腸，用抽拉的方法小心將消化道解剖出來(lái)，不損傷消化器官，也不破壞葉蟬軀殼，最大程度保存了昆蟲(chóng)的完整性。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種快捷簡(jiǎn)便的葉蟬消化器官解剖方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種快捷簡(jiǎn)便的葉蟬消化器官解剖方法，屬于昆蟲(chóng)解剖學(xué)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]解剖學(xué)是涉及生命體的結(jié)構(gòu)和組織的生物學(xué)分支學(xué)科；可以分為動(dòng)物解剖學(xué)和植物解剖學(xué)。解剖學(xué)的主要分支是比較解剖學(xué)、組織學(xué)和人體解剖學(xué)。在解剖學(xué)研究中，研究大體器官常利用剖割的方法；組織、細(xì)胞、細(xì)胞器的觀察則會(huì)利用顯微鏡。
[0003]昆蟲(chóng)解剖是研究介體與病原物互作機(jī)理的重要技術(shù)，是進(jìn)行電鏡和免疫熒光觀察病原物侵染消化道實(shí)驗(yàn)的前提。葉蟬是該方面研究較為常見(jiàn)的介體昆蟲(chóng)。此類(lèi)昆蟲(chóng)體型小，3齡若蟲(chóng)體長(zhǎng)約為2.0-2.5mm，成蟲(chóng)體長(zhǎng)約為5mm，消化道小且嬌嫩，因此解剖葉蟬需要較多耐心、熟練的技術(shù)和合理的方法。
[0004]一般的解剖方法是從葉蟬外部體壁往里剝，找到一段消化道后，順著該段繼續(xù)剝，直至剝出完整的消化道。這種方法不僅對(duì)消化道損傷很大，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果和質(zhì)量，而且難度大，因?yàn)閺耐馔鶅?nèi)剝，消化道經(jīng)常會(huì)卷在真皮層中，不容易發(fā)覺(jué)，有時(shí)剝完了整只葉蟬都找不到消化道，浪費(fèi)了實(shí)驗(yàn)材料。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于提供一種快捷簡(jiǎn)便的葉蟬消化器官解剖方法，能在短時(shí)間內(nèi)得到完整的葉蟬消化道，最大程度減少細(xì)胞成分的損失，保證細(xì)胞內(nèi)超微結(jié)構(gòu)的原始狀態(tài)保存完好，便于下一步實(shí)驗(yàn)得到良好結(jié)果。
[0006]為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案:
一種快捷簡(jiǎn)便的葉蟬消化器官解剖方法，包括以下步驟:
1)將收集到的葉蟬置于玻璃試管內(nèi)，放于冰上麻痹；
2)在載玻片上滴I滴緩沖液，置于顯微鏡下；
3)將麻痹后的葉蟬移至載玻片上的緩沖液中，腹部朝上；
4)若為若蟲(chóng)，一邊輕夾蟲(chóng)體以便固定,一邊夾住頭部輕輕抽拉,使頭部剝離體軀,但食道仍連接著頭部和胸腹；繼續(xù)夾緊，小心移動(dòng)，漸漸抽拉出大部分消化道；隨著持續(xù)移動(dòng)，原本連接尾部的消化道末端會(huì)自行脫離尾部，最終得到完整的消化道器官，同時(shí)不會(huì)大面積損壞葉蟬體軀；
5)若為成蟲(chóng)，先摘除頭部，接著一邊夾住腹節(jié)倒數(shù)第二節(jié)側(cè)邊，一邊夾住尾部的產(chǎn)卵器或交配器，并小心慢慢撕開(kāi)該段腹節(jié)的節(jié)間膜，露出消化道器官；繼續(xù)撕，漸漸抽拉出位于腹部的完整消化道，而此時(shí)腸道的末端仍連在尾部，因此稍稍拉斷連接尾部的腸道末段，便得到完整的消化道器官。
[0007]所述的緩沖液為清水或磷酸緩沖液，其中磷酸緩沖液濃度為0.01 mol/L, pH值為7.4。
[0008]所述消化道器官為中腸和后腸。[0009]本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于:利用消化道連接著頭部的唾液腺和尾部的直腸，用抽拉的方法小心將消化道解剖出來(lái)，不損傷消化器官，也不破壞葉蟬軀殼，最大程度保存了昆蟲(chóng)的完整性。
【專(zhuān)利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0010]圖1葉蟬成蟲(chóng)完整的消化道器官。
【具體實(shí)施方式】
[0011]材料和試劑:載玻片，玻璃試管，冰，磷酸緩沖液(PBS)濃度為0.01 mol/L，pH值為
7.4。
[0012]儀器和工具:體視顯微鏡、尖頭鑷子(電鏡專(zhuān)用)。
[0013]實(shí)施例1
1.將收集到的葉蟬若蟲(chóng)置于玻璃試管內(nèi)，放于冰上麻痹。
[0014]2.在載玻片上滴I滴PBS，置于體視顯微鏡下。
[0015]3.將麻痹后的葉蟬移至載玻片上的PBS中，腹部朝上。
[0016]4.左手用鑷子輕夾蟲(chóng)體以便固定，右手用鑷子夾住頭部稍稍向右移動(dòng)，使頭部剝離體軀，但食道仍連接著頭部和胸腹。右手繼續(xù)加緊鑷子，小心向右移動(dòng)，漸漸抽拉出大部分消化道(中腸)。隨著右手的持續(xù)移動(dòng)，原本連接尾部的消化道末端會(huì)自行脫離尾部，最終得到完整的消化道器官(中腸和后腸)，同時(shí)不會(huì)大面積損壞葉蟬體軀。
[0017]實(shí)施例2
1、將收集到的葉蟬雌成蟲(chóng)置于玻璃試管內(nèi)，冰上麻痹。
[0018]2、在載玻片上滴I滴PBS，置于體視顯微鏡下。
[0019]3、將麻痹后的葉蟬移至載玻片上的PBS中，腹部朝上。
[0020]4、左手用鑷子輕夾蟲(chóng)體以便固定，右手用鑷子摘除頭部。而后，右手用鑷子夾住腹節(jié)倒數(shù)第二節(jié)側(cè)邊，左手用鑷子夾住尾部的產(chǎn)卵器，并小心慢慢向左移動(dòng)，逐漸撕破該段腹節(jié)的節(jié)間膜，露出消化道器官(中腸)。繼續(xù)左手向左移動(dòng)，漸漸抽拉出位于腹部的完整消化道。而此時(shí)腸道的末端仍連在尾部，因此用鑷子稍稍拉斷連接尾部的腸道末段，便可得到完整的消化道器官(中腸和后腸)。
[0021]實(shí)施例3
1、將收集到的葉蟬雄成蟲(chóng)置于玻璃試管內(nèi)，放于冰上麻痹。
[0022]2、在載玻片上滴I滴PBS，置于體視顯微鏡下。
[0023]3、將麻痹后的葉蟬移至載玻片上的PBS中，腹部朝上。
[0024]4、左手用鑷子輕夾蟲(chóng)體以便固定，右手用鑷子摘除頭部。而后，右手用鑷子夾住腹節(jié)倒數(shù)第二節(jié)側(cè)邊，左手用鑷子夾住尾部的交配器，并小心慢慢向左移動(dòng)，逐漸撕破該段腹節(jié)的節(jié)間膜，露出消化道器官(中腸)。繼續(xù)左手向左移動(dòng)，漸漸抽拉出位于腹部的完整消化道。而此時(shí)腸道的末端仍連在尾部，因此用鑷子稍稍拉斷連接尾部的腸道末段，便可得到完整的消化道器官(中腸和后腸)。
[0025]以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，凡依本發(fā)明申請(qǐng)專(zhuān)利范圍所做的均等變化與修飾，皆應(yīng)屬本發(fā)明的涵蓋范圍。
【權(quán)利要求】
1.一種快捷簡(jiǎn)便的葉蟬消化器官解剖方法，其特征在于:包括以下步驟: 1)將收集到的葉蟬置于玻璃試管內(nèi)，放于冰上麻痹； 2)在載玻片上滴I滴緩沖液，置于顯微鏡下； 3)將麻痹后的葉蟬移至載玻片上的緩沖液中，腹部朝上； 4)若為若蟲(chóng)，一邊輕夾蟲(chóng)體以便固定,一邊夾住頭部輕輕抽拉,使頭部剝離體軀,但食道仍連接著頭部和胸腹；繼續(xù)夾緊，小心移動(dòng)，漸漸抽拉出大部分消化道；隨著持續(xù)移動(dòng)，原本連接尾部的消化道末端會(huì)自行脫離尾部，最終得到完整的消化道器官，同時(shí)不會(huì)大面積損壞葉蟬體軀； 5)若為成蟲(chóng)，先摘除頭部，接著一邊夾住腹節(jié)倒數(shù)第二節(jié)側(cè)邊，一邊夾住尾部的產(chǎn)卵器或交配器，并小心慢慢撕開(kāi)該段腹節(jié)的節(jié)間膜，露出消化道器官；繼續(xù)撕，漸漸抽拉出位于腹部的完整消化道，而此時(shí)腸道的末端仍連在尾部，因此稍稍拉斷連接尾部的腸道末段，便得到完整的消化道器官。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種快捷簡(jiǎn)便的葉蟬消化器官解剖方法，其特征在于:所述的緩沖液為清水或磷酸緩沖液；其中磷酸緩沖液濃度為0.01 mol/L, pH值為7.4。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種快捷簡(jiǎn)便的葉蟬消化器官解剖方法，其特征在于:所述消化道器官為中腸和后腸。
【文檔編號(hào)】A61D1/00GK103800090SQ201410067296
【公開(kāi)日】2014年5月21日 申請(qǐng)日期:2014年2月27日 優(yōu)先權(quán)日:2014年2月27日
【發(fā)明者】陳紅燕, 魏太云, 陳倩, 毛倩卓, 賈東升, 吳維 申請(qǐng)人:福建農(nóng)林大學(xué)