一種大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)化合物的制備方法與作為農(nóng)業(yè)殺菌劑的應(yīng)用的制作方法
【專(zhuān)利摘要】一種大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)化合物的制備方法與作為農(nóng)業(yè)殺菌劑的應(yīng)用，制備時(shí)先在菌種培養(yǎng)基中對(duì)真菌Cochliobolus?lunatus(TA26-46)進(jìn)行菌種培養(yǎng)，再在發(fā)酵培養(yǎng)基中對(duì)上述真菌進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)；將所得發(fā)酵物以甲醇浸泡，減壓濃縮后得甲醇粗提物；將甲醇粗提物懸浮于水中，經(jīng)乙酸乙酯萃取減壓濃縮后得乙酸乙酯相浸膏；對(duì)乙酸乙酯相浸膏進(jìn)行色譜分離，得到上述十四元二羥基苯甲酸大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)化合物。本發(fā)明提供一種農(nóng)業(yè)殺菌劑，其特征在于以式I十四元二羥基苯甲酸大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)化合物或其鹽作為有效成分，用于防治致病疫霉菌Phytophthora?infestans和霜霉病菌Plasrnopara?viticola引起的農(nóng)業(yè)病害。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)化合物的制備方法與作為農(nóng)業(yè)殺菌劑的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種十四元二羥基苯甲酸大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)化合物的制備方法與作為農(nóng)業(yè)殺菌劑的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]真菌病原病害是嚴(yán)重危害農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的自然災(zāi)害之一，對(duì)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成巨大損失，全世界的農(nóng)作物由此平均每年減少產(chǎn)量約500Mt。真菌病原病害不僅可以引起農(nóng)作物產(chǎn)量的減少，而且還嚴(yán)重威脅到農(nóng)產(chǎn)品的質(zhì)量安全及其國(guó)際貿(mào)易。例如，由致病疫霉菌Phytophthora infestans引起的晚疫病是危害馬鈴薯生產(chǎn)的最嚴(yán)重的病害,在我國(guó)馬鈴薯種植地均有發(fā)生，使得馬鈴薯產(chǎn)量嚴(yán)重降低；而霜霉病菌Plasmopara viticola是葡萄生產(chǎn)中的重要病害，近年來(lái)嚴(yán)重蔓延，造成病葉焦枯早落，影響長(zhǎng)勢(shì)、品質(zhì)和產(chǎn)量。更為嚴(yán)重的是，這兩種農(nóng)業(yè)致病菌對(duì)其他農(nóng)作物也造成嚴(yán)重?fù)p害，如番茄、黃瓜、甘蔗、大豆等。殺菌劑的使用是防治農(nóng)業(yè)病害的一種經(jīng)濟(jì)有效的方法，目前的殺菌劑種類(lèi)主要有三唑類(lèi)、酰胺類(lèi)、嘧啶胺類(lèi)、甲氧基丙烯酸酯類(lèi)等。然而，殺菌劑的過(guò)度使用也帶來(lái)一系列問(wèn)題，如殺菌劑毒性對(duì)人類(lèi)的危害，以及抗藥性導(dǎo)致的殺菌劑殘留增加及病害再猖獗等，因此急需開(kāi)發(fā)高效、低毒、低殘留和環(huán)境友好型殺菌劑。海洋高鹽、高壓、低溫、寡營(yíng)養(yǎng)、低光照等特殊環(huán)境使海洋微生物能夠產(chǎn)生大量結(jié)構(gòu) 新穎、活性獨(dú)特的次級(jí)代謝產(chǎn)物，其中有些化合物具有殺菌活性；且海洋微生物可以大規(guī)模發(fā)酵，不受資源限制，為開(kāi)發(fā)農(nóng)業(yè)殺菌劑提供了重要來(lái)源。目前尚未見(jiàn)從海洋微生物中開(kāi)發(fā)成功的針對(duì)農(nóng)業(yè)病原真菌的殺菌劑。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的在于提供一種來(lái)源于海洋真菌的十四元二羥基苯甲酸大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)化合物的制備方法與作為農(nóng)業(yè)殺菌劑的應(yīng)用，它能滿(mǎn)足現(xiàn)有技術(shù)的上述需求。菌種保藏信息:保藏單位名稱(chēng):中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心；保藏單位地址:北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路I號(hào)院3號(hào)，中國(guó)科學(xué)院微生物研究所；保藏日期:2014年01月09日；保藏編號(hào):CGMCC8698 ;分類(lèi)命名:Cochliobolus lunatus。
[0004]一種式I結(jié)構(gòu)的十四元二羥基苯甲酸大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)化合物或其鹽:
[0005]
【權(quán)利要求】
1.一種式I結(jié)構(gòu)的十四元二羥基苯甲酸大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)化合物的制備方法，其特征在于包括以下步驟:先在菌種培養(yǎng)基中對(duì)真菌Cochliobolus lunatus (TA26-46)進(jìn)行菌種培養(yǎng)，再在發(fā)酵培養(yǎng)基中對(duì)上述真菌進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)；將所得發(fā)酵物以甲醇浸泡2-6次，減壓濃縮后得甲醇粗提物；將甲醇粗提物懸浮于水中，經(jīng)乙酸乙酯萃取減壓濃縮后得乙酸乙酯相浸膏；對(duì)乙酸乙酯相浸膏進(jìn)行色譜分離，得到式I化合物；其中式I化合物結(jié)構(gòu)為:

2.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于所述的菌種培養(yǎng)基含有葡萄糖0.1 % -5.0 %、酵母膏 0.01 % -2 %、蛋白胨 0.01 % -2 %、瓊脂 0.1 % -3.0 %、粗海鹽0.05% _5%，其余為水，上述百分含量均為重量百分比；培養(yǎng)溫度為5-45°C，培養(yǎng)時(shí)間為3-15 天。
3.如權(quán)利要求1-2任一項(xiàng)所述的制備方法，其特征在于所述的發(fā)酵培養(yǎng)基為大米固體培養(yǎng)基，每1000mL的錐形瓶中，加入大米50-200g、粗海鹽0.l_5g、蛋白胨0.l_2g、水50-200mL，培養(yǎng)溫度為5_45°C，培養(yǎng)時(shí)間為7_40天。
4.如權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的制備方法，其特征在于所述的正相硅膠柱色譜分離中采用的固定相為200~300目硅膠，流動(dòng)相為0-100%的乙酸乙酯-石油醚以及0-100%的甲醇-乙酸乙酯混合溶劑；所述的高效液相色譜分離中采用的色譜柱為ODS C18柱Kromasil, 7 μ m，150 X 7.8mm,流動(dòng)相為45% -65%的甲醇-水混合溶劑；上述混合溶劑百分比均為體積百分比。
5.—種農(nóng)業(yè)殺菌劑，其特征在于包括權(quán)利要求1制備的式I化合物或其鹽作為有效成分。
6.權(quán)利要求1制備的式I化合物或其鹽在防治致病疫霉菌Phytophthorainfestans和霜霉病菌Plasmopara viticola引起的農(nóng)業(yè)病害中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】A01N43/22GK103865963SQ201410102959
【公開(kāi)日】2014年6月18日 申請(qǐng)日期:2014年3月13日 優(yōu)先權(quán)日:2014年3月13日
【發(fā)明者】王長(zhǎng)云, 邵長(zhǎng)倫, 劉慶艾, 顧玉誠(chéng) 申請(qǐng)人:中國(guó)海洋大學(xué)