低溫處理藏紅花切塊制備子種球的方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種利用低溫處理藏紅花切塊制備子種球的方法，通過(guò)對(duì)種球進(jìn)行選種、切塊、消毒、低溫處理、營(yíng)養(yǎng)土種植等步驟大規(guī)模生產(chǎn)種球，解決種球繁殖系數(shù)低的問(wèn)題，降低生產(chǎn)和種植成本，還可以減少或消除病害浸染，為大規(guī)模種植藏紅花奠定基礎(chǔ)，從根本上解決藏紅花資源短缺的問(wèn)題。
【專(zhuān)利說(shuō)明】低溫處理藏紅花切塊制備子種球的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于生物工程領(lǐng)域，具體涉及到利用藏紅花生物學(xué)特性開(kāi)發(fā)一種利用低溫處理藏紅花切塊生產(chǎn)其種球的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]藏紅花(Saffron ;學(xué)名:Crocus sativus L)屬于鳶尾科多年生草本植物，又名西紅花、番紅花、撒馥蘭、泊夫蘭等。主要出產(chǎn)在地中海、歐洲和中亞地區(qū)，其中以西班牙、法國(guó)、伊朗、印度、意大利、希臘、德國(guó)為主，被西班牙人譽(yù)為“紅色金子”。我國(guó)藏紅花是從印度經(jīng)西藏傳入內(nèi)地，故稱(chēng)藏紅花。目前，藏紅花已經(jīng)被國(guó)家中醫(yī)藥管理局列為重點(diǎn)發(fā)展的中藥材品種。
[0003]藏紅花是一種名貴藥食兩用植物，不僅藥用廣泛，還大量用于日用化工、食品、染料等工業(yè)，是美容化妝品與香料制品的寶貴原料。藏紅花取其柱頭入藥，具有活血化瘀、消腫止痛、健胃通經(jīng)之效，在國(guó)內(nèi)外都有較長(zhǎng)的藥用歷史。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)藏紅花成分藏紅花酸(Crocetin)、藏紅花醒(Safranal)、藏紅花素類(lèi)(Crocins)和藏紅花苦素(Picrocrocin)等都具有較強(qiáng)的抗腫瘤活性，特別對(duì)于血癌細(xì)胞、乳頭癌、扁平細(xì)胞瘤和軟組織肉瘤等都具有較強(qiáng)的抑制作用，有望發(fā)展成新的抗腫瘤制劑。藏紅花僅用柱頭，其產(chǎn)量低，大約7-15萬(wàn)朵花經(jīng)400小時(shí)的勞動(dòng)才能加工成I公斤干柱頭。近年來(lái)由于藏紅花應(yīng)用范圍的不斷擴(kuò)大，價(jià)格不斷攀升，2010年亳州市場(chǎng)上的價(jià)格超過(guò)30000元/公斤。2012-2013年市場(chǎng)價(jià)格也維持在15000-2000元/公斤。據(jù)統(tǒng)計(jì)，目前國(guó)際上西紅花的需求缺口較大，我國(guó)目前西 紅花年產(chǎn)量?jī)H20噸左右，約占市場(chǎng)需求的20%左右，因此需要進(jìn)口大量的西紅花才能滿(mǎn)足市場(chǎng)的需求。
[0004]目前，關(guān)于藏紅花種球繁殖或復(fù)壯的研究也有相關(guān)報(bào)道，如申請(qǐng)?zhí)枮镃N200510114652.9的“一種藏紅花種球(苗)規(guī)?；M培快繁方法”是在固體培養(yǎng)基上誘導(dǎo)出不同類(lèi)型的藏紅花愈傷，在自制的鼓泡式、周期浸沒(méi)式、霧化生物反應(yīng)器中進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)增殖，最終在周期浸沒(méi)式、霧化反應(yīng)器中大量誘導(dǎo)出藏紅花種球和種苗直接用于大田種植，球莖還可經(jīng)適度脫水，長(zhǎng)時(shí)間保藏。申請(qǐng)?zhí)枮镃N200810201021.4的“番紅花的組織培養(yǎng)快速繁殖方法”是通過(guò)外植體滅菌、愈傷組織誘導(dǎo)、叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)、不定芽繼代培養(yǎng)和球莖誘導(dǎo)培養(yǎng)等步驟，最后誘導(dǎo)出球莖。如申請(qǐng)?zhí)枮镃N201210071665.2的“西紅花的培育方法”是在現(xiàn)有的西紅花培育技術(shù)基礎(chǔ)上對(duì)其具體的播種工藝、施肥方法等進(jìn)行研究的基礎(chǔ)上獲得的，可提高西紅花的產(chǎn)量及質(zhì)量。申請(qǐng)?zhí)枮镃N201010181832.X的“一種藏紅花種球的園藝加工工藝”是通過(guò)藏紅花種球的園藝加工工藝，解決了以前使藏紅花種球受環(huán)境溫度影響大，容易發(fā)霉、腐爛和發(fā)芽的問(wèn)題，可以長(zhǎng)期保存，易于攜帶，增加了室內(nèi)觀賞花的品種，提高了藏紅花種球制品的附加值，開(kāi)拓了藏紅花種球銷(xiāo)售的廣闊市場(chǎng)。如申請(qǐng)?zhí)枮镃N201010238431.3的“新疆西紅花種植技術(shù)”是利用種植技術(shù)解決了西紅花球莖繁育率低的問(wèn)題，實(shí)現(xiàn)了西紅花的無(wú)公害種植，采用該發(fā)明技術(shù)種植的西紅花質(zhì)量達(dá)到國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，重金屬和農(nóng)藥殘留達(dá)到國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)。產(chǎn)量可達(dá)到干花產(chǎn)量與球莖投入量之比為1: 1000以上。
[0005]我國(guó)從60年代開(kāi)始從日本、德國(guó)引種藏紅花，在在浙江、上海、河南、江蘇、北京、廣西、湖北、西藏等地都有種植，但畝產(chǎn)僅0.5 -1.0公斤，產(chǎn)量低，遠(yuǎn)滿(mǎn)足不了市場(chǎng)需求。藏紅花染色體為三倍體，花粉敗育高，開(kāi)花后罕見(jiàn)結(jié)實(shí)，只能靠球莖無(wú)性繁殖。球莖繁殖率很低，一般比率只有1.5-2.0，提高繁殖系數(shù)導(dǎo)致子球莖小，花產(chǎn)量下降，難以同時(shí)擴(kuò)大種植面積和提高花產(chǎn)量。
[0006]在我國(guó)藏紅花種植方式一般采用室內(nèi)采花，大田繁殖種球的方法。2012-2013年種球市場(chǎng)價(jià)格維持在30-55元/公斤，每畝種植量在300-500公斤，種植投資成本巨大，生產(chǎn)成本高。種植過(guò)程中存在的萎花現(xiàn)象、病毒病菌侵染造成藏紅花產(chǎn)量質(zhì)量下降、種球退化，損失更為嚴(yán)重(陳書(shū)安等，中草藥，32(12):1137-1139，2001)。栽培技術(shù)難度大，產(chǎn)量又很低。故各地藥農(nóng)在有其他種植效益高的品種可選擇的前提下都不愿種植藏紅花。因此缺乏一種藏紅花種球簡(jiǎn)易快繁方法，能夠大規(guī)模繁育脫毒種球，不僅有利于擴(kuò)大種源、降低生產(chǎn)成本、擴(kuò)大種植面積，形成規(guī)模效益，同時(shí)不受節(jié)氣限制，提高經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]為了克服上述缺陷，本發(fā)明提供了一種利用低溫處理藏紅花切塊制備子種球的方法，通過(guò)對(duì)種球進(jìn)行選種、切塊、消毒、低溫處理、營(yíng)養(yǎng)土種植等步驟大規(guī)模生產(chǎn)種球，解決種球繁殖系數(shù)低的問(wèn)題，降低生產(chǎn)和種植成本，還可以減少或消除病害浸染，為大規(guī)模種植藏紅花奠定基礎(chǔ)，從根本上解決藏紅花資源短缺的問(wèn)題。
[0008]本發(fā)明為了解決其技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案是:一種低溫處理藏紅花切塊制備子種球的方法，包括以下步驟:
1)選種:選擇成熟的、含水量低的、無(wú)病蟲(chóng)害、無(wú)破損、無(wú)霉?fàn)€、肥大的優(yōu)質(zhì)藏紅花種球，要求每只種球重量在8-40克以上，盡量選擇芽點(diǎn)飽滿(mǎn)多的種球；
2)清洗:先清除步驟I)中種球表面包膜，將種球浸泡水中10-15分鐘后用軟牙刷洗去表面泥土、黑斑等雜質(zhì),不能傷芽點(diǎn)，再用流水洗滌15-20分鐘，最后涼干備用；
3)切塊:將步驟2)處理后的種球按芽點(diǎn)分布進(jìn)行切塊，切塊后的大小為0.25-1立方厘米；
4)消毒:消毒前先將步驟3)中切塊后的種球用清水洗去表面的淀粉，消毒分兩步:第一步用75%酒精浸泡30秒,用水洗I次；第二步用3%次氯酸鈉浸泡2-3分鐘,用清水洗3_4次，然后用50%多菌靈800倍液浸泡1-2小時(shí)，涼干備用；
5)低溫處理:將步驟4)處理后的切塊放入帶蓋透明的須經(jīng)過(guò)洗凈、干燥后的容器內(nèi)，蓋好后放入冰箱冷藏室內(nèi)，溫度控制在2-8°C內(nèi)，每周定期檢查芽點(diǎn)萌發(fā)及切塊表面霉變情況，低溫處理時(shí)間30-75天，芽長(zhǎng)至2.5厘米時(shí)終止低溫處理；
6)室內(nèi)種植:將步驟5)的種苗種植步驟6)按株行距為3.5-5厘米種植在營(yíng)養(yǎng)土中進(jìn)行，深度控制在1.5-2.5厘米之間，溫度控制在8-20°C，營(yíng)養(yǎng)土濕度控制在70%-90%之間，另外，適當(dāng)進(jìn)行水肥管理和病蟲(chóng)害防治。
[0009]作為本發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，所述步驟3)按芽點(diǎn)分布進(jìn)行切塊時(shí)，中如遇種球內(nèi)部有黑斑或呈黑色，應(yīng)切除其有黑斑或呈黑色的組織或廢棄種球，同時(shí)在切塊時(shí)盡量不可傷及芽點(diǎn)。[0010]作為本發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，所述步驟5)中切塊放入容器內(nèi)，不得超過(guò)2/3容器體積。
[0011]作為本發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，所述步驟4)中消毒第一步用的清水為冷開(kāi)水。
[0012]作為本發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，在步驟6)種植之前可以先進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)土處理:松樹(shù)皮與基質(zhì)按1:9重量比例進(jìn)行混合制成營(yíng)養(yǎng)土。
[0013]本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明建立了一種利用低溫處理藏紅花切塊制備子種球的方法，該方法通過(guò)對(duì)種球進(jìn)行切塊和低溫處理，打破種球休眠期，可誘導(dǎo)種球表面更多的芽點(diǎn)萌發(fā)，生產(chǎn)大量的種苗，無(wú)需通過(guò)組織培養(yǎng)的過(guò)程，縮短時(shí)間，減少操作環(huán)節(jié)，降低了生產(chǎn)成本和勞動(dòng)強(qiáng)度，且該方法操作簡(jiǎn)便，設(shè)備要求低且成本低廉，為大規(guī)模種植藏紅花奠定了基礎(chǔ)。
【具體實(shí)施方式】
[0014]為了進(jìn)一步了解本發(fā)明。下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明實(shí)施方案進(jìn)行描述，但是應(yīng)當(dāng)理解，這些描述只是為進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的特征和優(yōu)點(diǎn)，而不是對(duì)本發(fā)明權(quán)利要求的限制。
[0015]實(shí)施例一:
選擇10只的優(yōu)質(zhì)藏紅花種球，要求每只種球重量在30-40克，盡量選擇芽點(diǎn)飽滿(mǎn)多的種球；清除種球表面包膜，將種球浸泡水中10-15分鐘后用軟牙刷洗去表面泥土、黑斑等雜質(zhì)，再流水洗滌15-20分鐘；種球切塊按根據(jù)表面芽點(diǎn)分布進(jìn)行切塊，切成大小0.25-1立方厘米小方塊，共計(jì)87個(gè)小方塊；用清水洗去表面的淀粉后消毒，先用75%酒精浸泡30秒，用清水(最好是冷開(kāi)水)洗I次，再用3%次氯酸鈉浸泡2-3分鐘,用清水洗3-4次。然后用50%多菌靈800倍液浸泡1-2小時(shí)，涼干后的切塊放入帶蓋透明容器內(nèi)，裝容積2 /3，蓋好后放入冰箱冷藏室內(nèi)，溫度在2-8°C內(nèi)，經(jīng)過(guò)30天低溫處理時(shí)間后，共有62個(gè)小方塊長(zhǎng)芽，長(zhǎng)芽率達(dá)71.3%，芽長(zhǎng)在0.3-0.5厘米之間，再經(jīng)過(guò)30天低溫后，65個(gè)小方塊長(zhǎng)芽，長(zhǎng)芽率達(dá)74.7%，芽長(zhǎng)0.5-1.5厘米之間，健壯，并出現(xiàn)少量葉。
[0016]實(shí)施例二:
選擇15只的優(yōu)質(zhì)藏紅花種球，要求每只種球重量在15-25克；清除種球表面包膜，將種球浸泡水中10-15分鐘后用軟牙刷洗去表面泥土、黑斑等雜質(zhì)，再流水洗滌15-20分鐘；種球切塊按根據(jù)表面芽點(diǎn)分布進(jìn)行切塊，切成大小0.25-1立方厘米小方塊，共計(jì)106個(gè)小方塊；用清水洗去表面的淀粉后消毒，先用75%酒精浸泡30秒，用清水(最好是冷開(kāi)水)洗I次，再用3%次氯酸鈉浸泡2-3分鐘，用清水洗3-4次。然后用50%多菌靈800倍液浸泡I小時(shí)，涼干后的切塊放入帶蓋透明容器內(nèi)，裝容積2 /3，蓋好后放入冰箱冷藏室內(nèi)，溫度在2-8°C內(nèi)，經(jīng)過(guò)30天低溫處理時(shí)間后，共有69個(gè)小方塊長(zhǎng)芽，長(zhǎng)芽率達(dá)65.1%，芽長(zhǎng)在0.3-0.5厘米之間，再經(jīng)過(guò)30天低溫后，74個(gè)小方塊長(zhǎng)芽，長(zhǎng)芽率達(dá)69.8%，芽長(zhǎng)0.5-1.3厘米之間，健壯，并出現(xiàn)葉鞘分化。
[0017]實(shí)施例三:
選擇20只的優(yōu)質(zhì)藏紅花種球，要求每只種球重量在8-15克；清除種球表面包膜，將種球浸泡水中10-15分鐘后用軟牙刷洗去表面泥土、黑斑等雜質(zhì)，再流水洗滌15-20分鐘；種球切塊按根據(jù)表面芽點(diǎn) 分布進(jìn)行切塊，切成大小0.25-1立方厘米小方塊，共計(jì)116個(gè)小方塊；用清水洗去表面的淀粉后消毒，先用75%酒精浸泡30秒，用清水(最好是冷開(kāi)水)洗I次，再用3%次氯酸鈉浸泡2-3分鐘,用清水洗3-4次。然后用50%多菌靈800倍液浸泡
1.5小時(shí)，涼干后的切塊放入帶蓋透明容器內(nèi)，裝容積2 /3，蓋好后放入冰箱冷藏室內(nèi)，溫度在2-8°C內(nèi)，經(jīng)過(guò)30天低溫處理時(shí)間后，共有63個(gè)小方塊長(zhǎng)芽，長(zhǎng)芽率達(dá)54.3%，芽長(zhǎng)在
0.3-0.5厘米之間，再經(jīng)過(guò)30天低溫后，71個(gè)小方塊長(zhǎng)芽，長(zhǎng)芽率達(dá)61.2%，芽長(zhǎng)0.5-1.5厘米之間，芽呈細(xì)長(zhǎng)型。
[0018] 實(shí)施例四:
如實(shí)施一、二、三得到已長(zhǎng)芽小方塊后方可在溫棚內(nèi)進(jìn)行種植，溫度控制在20°C以下，自然光照，以松樹(shù)皮與基質(zhì)按1:9重量比例進(jìn)行混合制成營(yíng)養(yǎng)土種植為佳，按株行距為
3.5-5厘米進(jìn)行，深度控制在1.5-2.5厘米之間，營(yíng)養(yǎng)土保持充足的水份，在70%-90%之間為宜。根據(jù)種苗生長(zhǎng)情況，適當(dāng)進(jìn)行水肥管理和防病蟲(chóng)害防治。生長(zhǎng)周期在45-90天左右，葉完全發(fā)黃，即可 收獲，收獲后的子種球直徑在1.2-3.5厘米，經(jīng)脫水，方可用于秋季田間種植。
【權(quán)利要求】
1.一種低溫處理藏紅花切塊制備子種球的方法，其特征在于，包括以下步驟: 1)選種:選擇成熟的、含水量低的、無(wú)病蟲(chóng)害、無(wú)破損、無(wú)霉?fàn)€、肥大的藏紅花種球，要求每只種球重量在8-40克以上； 2)清洗:先清除步驟I)中種球表面包膜，將種球浸泡水中10-15分鐘后洗去表面泥土、黑斑等雜質(zhì)，用流水洗滌15-20分鐘，最后涼干備用； 3)切塊:將步驟2)處理后的種球按芽點(diǎn)分布進(jìn)行切塊，切塊后的大小為0.25-1立方厘米； 4)消毒:消毒前先將步驟3)中切塊后的種球用清水洗去表面的淀粉，消毒分兩步:第一步用75%酒精浸泡30秒,用水洗I次；第二步用3%次氯酸鈉浸泡2-3分鐘,用清水洗3_4次，然后用50%多菌靈800倍液浸泡1-2小時(shí)，涼干備用； 5)低溫處理:將步驟4)處理后的切塊放入容器內(nèi)，蓋好后放入冰箱冷藏室內(nèi)，溫度控制在2-8°C內(nèi)，低溫處理時(shí)間30-75天，芽長(zhǎng)至2.5厘米時(shí)終止低溫處理； 6)室內(nèi)種植:將步驟5)的種苗按株行距為3.5-5厘米種植在營(yíng)養(yǎng)土中，深度控制在1.5-2.5厘米之間，溫度控制在8-20°C，營(yíng)養(yǎng)土濕度控制在70%-90%之間。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的低溫處理藏紅花切塊制備子種球的方法，其特征在于:所述步驟3)按芽點(diǎn)分布進(jìn)行切塊時(shí)，應(yīng)切除有黑斑或呈黑色的組織。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的低溫處理藏紅花切塊制備子種球的方法，其特征在于:所述步驟5)中切塊放入容器內(nèi)，不得超過(guò)2/3容器體積。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的低溫處理藏紅花切塊制備子種球的方法，其特征在于:所述步驟4)中消毒第一步用的水為冷開(kāi)水。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的低溫處理藏紅花切塊制備子種球的方法，其特征在于:在步驟6)種植之前可以先進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)土處理:松樹(shù)皮與基質(zhì)按1:9重量比例進(jìn)行混合制成營(yíng)養(yǎng)土。
【文檔編號(hào)】A01G1/00GK103875432SQ201410139136
【公開(kāi)日】2014年6月25日 申請(qǐng)日期:2014年4月9日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月9日
【發(fā)明者】丁愛(ài)軍, 朱笑扣, 孫月娟, 陳集雙, 陳相華 申請(qǐng)人:南京工業(yè)大學(xué)大豐海洋產(chǎn)業(yè)研究院