一種鐵皮石斛組培苗玻瓶馴化的方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于植物組培快繁【技術(shù)領(lǐng)域】，提供了一種鐵皮石斛（DendrobiumofficinaleKimuraetMigo）組培苗通過(guò)培養(yǎng)瓶馴化的方法。本發(fā)明所述方法包括以下步驟：選取成熟組織培養(yǎng)瓶苗；瓶苗遮陰預(yù)培養(yǎng)；瓶苗去瓊脂、消毒；瓶苗晾干脫水；瓶苗再次入瓶?jī)?nèi)半開(kāi)蓋培養(yǎng)；最后移栽苗床基質(zhì)中。本發(fā)明所述方法操作簡(jiǎn)單，成本低廉，有效地克服了鐵皮石斛組培苗出瓶后易潰爛死亡，栽種成活率低的技術(shù)難題。使得組培苗在出瓶后較短的時(shí)間里，葉片基本形成完善的角質(zhì)層，能很好地進(jìn)行有效的光合作用，合成各種物質(zhì)。經(jīng)過(guò)本法馴化的組培苗，根系發(fā)達(dá)，葉片變厚，葉色深綠，莖變粗變硬，保持生長(zhǎng)的連貫性。移栽后，成活率可達(dá)95%以上。
【專利說(shuō)明】一種鐵皮石斛組培苗玻瓶馴化的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ] 本發(fā)明屬于植物組培快繁【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種鐵皮石斛(Dendrobiumofficinale Kimura et Migo)組培苗通過(guò)培養(yǎng)瓶完成馴化的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]鐵皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)是我國(guó)常用的名貴中藥,為蘭科石斛蘭屬多年生草本植物，具有滋陰清熱、生津益胃、潤(rùn)肺止咳等功效，常用于熱病傷津、口干煩燥、病后虛熱等多種病癥。用途廣泛，需求量大。由于長(zhǎng)期無(wú)節(jié)制采挖，再加上自身資源再生能力低，鐵皮石斛自然資源已漸趨枯竭。目前該種植物已成為國(guó)家重點(diǎn)保護(hù)藥材品種之一。人工種植鐵皮石斛具有廣闊的前景，種植規(guī)模正在不斷擴(kuò)展，組培快繁規(guī)?；a(chǎn)種苗是其關(guān)鍵技術(shù)之一。國(guó)內(nèi)外學(xué)者在鐵皮石斛快速繁殖、擴(kuò)大繁殖系數(shù)等方面已獲得關(guān)鍵性的進(jìn)展，已能規(guī)?；a(chǎn)鐵皮石斛組培苗。但目前普遍存在組培苗移栽成活率低的情況，從瓶苗到大田栽培的中間環(huán)節(jié)成為制約鐵皮石斛生產(chǎn)發(fā)展的一大障礙。如中國(guó)專利《鐵皮石斛的種植方法》( 申請(qǐng)人::桂平市白石洞天仙山鐵皮石斛專業(yè)合作社；申請(qǐng)日:2013年11月30日；申請(qǐng)?zhí)?CN201310623199.9)公開(kāi)了一種鐵皮石斛的種植方法，所述方法中利用泥炭土、花生殼、松土糠、松樹(shù)皮和少量蝙蝠糞便等原料打粉作基質(zhì)培育鐵皮石斛，但該方法中所述蝙蝠糞便較難獲得，并且所述基質(zhì)需在io(Tii(rc下處理后使用，從一定程度上加大了培育成本，較為繁瑣，并且也存在組培苗移栽成活率低的情況。
[0003]綜上所述，目前急需一種方法操作簡(jiǎn)單，成本低廉，組培苗移栽成活率低的鐵皮石斛的培育方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于開(kāi)發(fā)出一種鐵皮石斛組培苗馴化煉苗的方法，大幅度提高鐵皮石斛組培苗移栽成活率。
[0005]該方法根據(jù)鐵皮石斛組培苗在出瓶之前其莖葉未形成完善的角質(zhì)層，也不能進(jìn)行有效的光合作用等生理特征，使用組培瓶并配合平衡營(yíng)養(yǎng)液控制光溫濕微環(huán)境，使組培苗處于適宜生長(zhǎng)的環(huán)境條件下，較快地完成從異養(yǎng)型代謝向自養(yǎng)型代謝的轉(zhuǎn)變，葉片表皮細(xì)胞發(fā)育成熟，能適應(yīng)自然環(huán)境條件，完成鐵皮石斛組培苗的馴化過(guò)程。
[0006]本發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的:
一種鐵皮石斛組培苗玻瓶馴化的方法，所述方法包括以下步驟:
O選取成熟的培養(yǎng)瓶苗；
2)瓶苗遮陰預(yù)培養(yǎng)；
3)瓶苗去瓊脂、消毒；
4)瓶苗晾干脫水；
5)瓶苗再次入瓶?jī)?nèi)半開(kāi)蓋培養(yǎng)，；最后將其移栽苗床基質(zhì)中，得到的鐵皮石斛組培苗。
[0007]所述的成熟的鐵皮石斛培養(yǎng)瓶苗，是指苗高5-8cm，有明顯莖節(jié)，具4-6條根。所述的瓶苗遮陰預(yù)培養(yǎng)，是指在可遮雨的塑料大棚，或者溫室內(nèi)培養(yǎng)，蔭蔽度約為70%，預(yù)培養(yǎng)20-30 d，并在苗子出瓶處理的前3 d敞開(kāi)瓶蓋預(yù)培養(yǎng)。所述的瓶苗去瓊脂、消毒，是指將預(yù)培養(yǎng)過(guò)的瓶苗取出，用飲用自來(lái)水輕柔漂洗，洗凈組培苗上粘附的培養(yǎng)基。洗完后晾干并用
0.1%多菌靈侵泡消毒30 S。所述的瓶苗晾干脫水，是指將將消毒好的組培苗晾干脫水1-2d，晾干至根系完全發(fā)白。所述的瓶苗再次入瓶?jī)?nèi)半開(kāi)蓋培養(yǎng)，是指將將苗再放回組培瓶?jī)?nèi)進(jìn)行半開(kāi)瓶蓋培養(yǎng)。使用自來(lái)水、營(yíng)養(yǎng)液定期噴霧補(bǔ)液，瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)14-21 d。所述的移栽苗床基質(zhì)中，是指將苗移栽于由椰糠、木屑刨花、樹(shù)皮等混合而成的苗床基質(zhì)中，經(jīng)30-40 d栽培為成苗。
[0008]本發(fā)明相比現(xiàn)有技術(shù)的有益效果為:
本發(fā)明所述方法操作簡(jiǎn)單，成本低廉，有效地克服了鐵皮石斛組培苗出瓶后易潰爛死亡，栽種成活率低的技術(shù)難題。使得組培苗在出瓶后較短的時(shí)間里，葉片基本形成完善的角質(zhì)層，能很好地進(jìn)行有效的光合作用，合成各種物質(zhì)。經(jīng)過(guò)本法馴化的組培苗，根系發(fā)達(dá)，葉片變厚，葉色深綠，莖變粗變硬，保持生長(zhǎng)的連貫性。移栽后，成活率可達(dá)95%以上。
【具體實(shí)施方式】
[0009]依據(jù)本發(fā)明提出的鐵皮石斛組培苗玻瓶馴化方法，【具體實(shí)施方式】詳細(xì)敘述如下: 實(shí)施例1
一種鐵皮石斛組培苗玻瓶馴化的方法，所述方法包括以下步驟:
1)選取成熟的培養(yǎng) 瓶苗；
2)瓶苗遮陰預(yù)培養(yǎng)；
3)瓶苗去瓊脂、消毒；
4)瓶苗晾干脫水；
5)瓶苗再次入瓶?jī)?nèi)半開(kāi)蓋培養(yǎng)，最后將其移栽苗床基質(zhì)中，得到的鐵皮石斛組培苗。
[0010]進(jìn)一步的，步驟I)所述成熟的培養(yǎng)瓶苗，是指苗高5-8cm，有明顯莖節(jié)，具4_6條根。
[0011]進(jìn)一步的，步驟2 )所述瓶苗遮陰預(yù)培養(yǎng)，是指在可遮雨的塑料大棚，或者溫室內(nèi)培養(yǎng)，蔭蔽度約為70%，預(yù)培養(yǎng)20-30 d，并在苗子出瓶處理的前3 d敞開(kāi)瓶蓋預(yù)培養(yǎng)。
[0012]進(jìn)一步的，步驟3)所述瓶苗去瓊脂、消毒，是指將所述步驟2)預(yù)培養(yǎng)過(guò)的瓶苗取出，用飲用自來(lái)水輕柔漂洗，洗凈組培苗上粘附的培養(yǎng)基，洗完后晾干并用0.1%多菌靈侵泡消毒30 S。
[0013]進(jìn)一步的，步驟4)所述瓶苗晾干脫水，是指將將消毒好的組培苗晾干脫水1-2 d。
[0014]進(jìn)一步的，步驟5)所述瓶苗再次入瓶?jī)?nèi)半開(kāi)蓋培養(yǎng)，是指將將苗再放回組培瓶?jī)?nèi)進(jìn)行半開(kāi)瓶蓋培養(yǎng)，使用自來(lái)水、營(yíng)養(yǎng)液定期噴霧補(bǔ)液，瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)14-21 d。
[0015]進(jìn)一步的，步驟5 )所述移栽苗床基質(zhì)中，是指將苗移栽于苗床基質(zhì)中，經(jīng)30-40 d栽培為成苗。
[0016]進(jìn)一步的，所述苗床基質(zhì)為椰糠、木屑刨花、樹(shù)皮或上述兩種或三種的混合物。
[0017]本實(shí)施例的單位為克，也可以為千克。
[0018]本實(shí)施例中所述的各原料均為市場(chǎng)上出售的常規(guī)產(chǎn)品，本實(shí)施例的培育方法中采用的設(shè)備也均為市場(chǎng)上出售的常規(guī)產(chǎn)品。[0019]實(shí)施例2
本實(shí)施例是在實(shí)施例1的基礎(chǔ)上的優(yōu)選化方案，提供了一種鐵皮石斛組培苗玻瓶馴化的方法。本實(shí)施例中與實(shí)施例1相同的部分，請(qǐng)參照實(shí)施例1中公開(kāi)的內(nèi)容進(jìn)行理解，實(shí)施例I公開(kāi)的內(nèi)容也應(yīng)當(dāng)作為本實(shí)施例的內(nèi)容，此處不作重復(fù)描述。
[0020]所述方法包括以下步驟:
1、選取成熟的鐵皮石斛組培苗:選擇苗高5-8 Cm，有明顯莖節(jié)，具4-6條根的組培苗作為瓶苗。
[0021]2、瓶苗遮陰預(yù)培養(yǎng):將步驟I)選取的瓶苗放在可遮雨的塑料大棚內(nèi)培養(yǎng)，蔭蔽度約為70%，預(yù)培養(yǎng)20-30 d，并在苗子出瓶處理的前3 d敞開(kāi)瓶蓋預(yù)培養(yǎng)。
[0022]3、瓶苗去瓊脂、消毒:將陰棚內(nèi)預(yù)培養(yǎng)的瓶苗開(kāi)蓋，取出苗，用飲用自來(lái)水輕柔漂洗，洗凈組培苗上粘附的培養(yǎng)基。洗完后晾干并用0.1%多菌靈侵泡消毒30 S，防止微生物感染。
[0023]4、瓶苗晾干脫水:將將消毒好的組培苗晾干脫水1-2 d，使苗表層細(xì)胞快速角質(zhì)化。必須晾干至根系完 全發(fā)白。
[0024]5、瓶苗再次入瓶?jī)?nèi)半開(kāi)蓋培養(yǎng):將上述處理好的苗再放回組培瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)?？掌?、瓶底保持少量水分，瓶蓋半開(kāi)，I次/1-2 d噴霧補(bǔ)水，使用1/10的MS培養(yǎng)液營(yíng)養(yǎng)液I次/周噴霧補(bǔ)液，瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)14-21 d。
[0025]6、移栽苗床基質(zhì)中:將苗移栽于木屑刨花、椰糠(刨花:椰糠=2.5:1 ;預(yù)先泡透)混合而成的基質(zhì)中，經(jīng)30-40 d栽培為成苗。
[0026]移栽后，成活率可達(dá)95.9%。
[0027]實(shí)施例3
本實(shí)施例是在實(shí)施例1的基礎(chǔ)上的優(yōu)選化方案，提供了一種鐵皮石斛組培苗玻瓶馴化的方法。本實(shí)施例中與實(shí)施例1相同的部分，請(qǐng)參照實(shí)施例1中公開(kāi)的內(nèi)容進(jìn)行理解，實(shí)施例I公開(kāi)的內(nèi)容也應(yīng)當(dāng)作為本實(shí)施例的內(nèi)容，此處不作重復(fù)描述。
[0028]所述方法包括以下步驟:
1、選取成熟的鐵皮石斛組培苗:選擇苗高5-8 Cm，有明顯莖節(jié)，具4-6條根的組培苗作為瓶苗。
[0029]2、瓶苗遮陰預(yù)培養(yǎng):將步驟I)選取的瓶苗放在可遮雨的塑料大棚內(nèi)培養(yǎng)，蔭蔽度約為70%，預(yù)培養(yǎng)20-30 d，并在苗子出瓶處理的前3 d敞開(kāi)瓶蓋預(yù)培養(yǎng)。
[0030]3、瓶苗去瓊脂、消毒:將陰棚內(nèi)預(yù)培養(yǎng)的瓶苗開(kāi)蓋，取出苗，用飲用自來(lái)水輕柔漂洗，洗凈組培苗上粘附的培養(yǎng)基。洗完后晾干并用0.1%多菌靈侵泡消毒30 S，防止微生物感染。
[0031]4、瓶苗晾干脫水:將將消毒好的組培苗晾干脫水1-2 d，使苗表層細(xì)胞快速角質(zhì)化。必須晾干至根系完全發(fā)白。
[0032]5、瓶苗再次入瓶?jī)?nèi)半開(kāi)蓋培養(yǎng):將上述處理好的苗再放回組培瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶瓶底墊1/4厚度基質(zhì)(新鮮刨花:水苔=3:1 ;所述新鮮刨花和水苔需預(yù)先用水泡透)，基質(zhì)保持濕潤(rùn)，瓶蓋半開(kāi)，I次/1-2 d噴霧補(bǔ)水，使用1/10的MS培養(yǎng)液營(yíng)養(yǎng)液I次/周噴霧補(bǔ)液，瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)14-21 d。
[0033]6、移栽苗床基質(zhì)中:是指將苗移栽于樹(shù)皮(松樹(shù)皮粗:細(xì)=2:1 ;預(yù)先泡透)等混合而成的苗床基質(zhì)中，經(jīng)30-40 d栽培為成苗。
[0034]移栽后，成活率可達(dá)97.4%。
[0035]所述MS培養(yǎng)液MS培養(yǎng)基為植物組織和細(xì)胞培養(yǎng)最常見(jiàn)的培養(yǎng)基之一，由威斯康星大學(xué)的村重敏夫(英語(yǔ):Toshio Murashige)和福爾克.K ?斯科格(英語(yǔ):Folke K.Skoog)所研發(fā)并用于植物激素的研究。培養(yǎng)基以兩人的姓氏首字母命名，包括大量元素組分和微量元素組分，其配方如下:
大量元素
硝酸銨(NH4NO3) 1,650 mg/1 氯化鈣(CaCl2.2H20) 440 mg/1 硫酸鎂(MgSO4.7H20) 370 mg/1 磷酸二氫鉀(KH2PO4) 170 mg/1 硝酸鉀(KNO3) 1,900 mg/1。[0036]微量元素
硼酸(H3BO3) 6.2 mg/1 氯化鈷(CoCl2.6H20) 0.025 mg/1 硫酸銅(CuSO4.5H20) 0.025 mg/1 硫酸亞鐵(FeSO4.7H20) 27.8 mg/1 硫酸錳(MnSO4.4H20) 22.3 mg/1 碘化鉀(ΚΙ) 0.83 mg/1 鑰酸鈉(Na2MoO4.2H20) 0.25 mg/1 硫酸鋅(ZnSO4.7H20) 8.6 mg/1 Na2EDTA.2H20 37.2 mg/1。
【權(quán)利要求】
1.一種鐵皮石斛組培苗玻瓶馴化的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟: 1)選取成熟的培養(yǎng)瓶苗； 2)瓶苗遮陰預(yù)培養(yǎng)； 3)瓶苗去瓊脂、消毒； 4)瓶苗晾干脫水； 5)瓶苗再次入瓶?jī)?nèi)半開(kāi)蓋培養(yǎng)，最后將其移栽苗床基質(zhì)中，得到的鐵皮石斛組培苗。
2.如權(quán)利要求1所述的鐵皮石斛組培苗玻瓶馴化的方法，其特征在于，步驟I)所述成熟的培養(yǎng)瓶苗，是指苗高5-8cm，有明顯莖節(jié)，具4-6條根。
3.如權(quán)利要求1所述的鐵皮石斛組培苗玻瓶馴化的方法，其特征在于，步驟2)所述瓶苗遮陰預(yù)培養(yǎng)，是指在可遮雨的塑料大棚，或者溫室內(nèi)培養(yǎng)，蔭蔽度約為70%，預(yù)培養(yǎng)20-30d,并在苗子出瓶處理的前3 d敞開(kāi)瓶蓋預(yù)培養(yǎng)。
4.如權(quán)利要求1所述的鐵皮石斛組培苗玻瓶馴化的方法，其特征在于，步驟3)所述瓶苗去瓊脂、消毒，是指將所述步驟2)預(yù)培養(yǎng)過(guò)的瓶苗取出，用飲用自來(lái)水輕柔漂洗，洗凈組培苗上粘附的培養(yǎng)基 ，洗完后晾干并用0.1%多菌靈侵泡消毒30 S。
5.如權(quán)利要求1所述的鐵皮石斛組培苗玻瓶馴化的方法，其特征在于，步驟4)所述瓶苗晾干脫水，是指將將消毒好的組培苗晾干脫水1-2 d。
6.如權(quán)利要求1所述的鐵皮石斛組培苗玻瓶馴化的方法，其特征在于，步驟5)所述瓶苗再次入瓶?jī)?nèi)半開(kāi)蓋培養(yǎng)，是指將將苗再放回組培瓶?jī)?nèi)進(jìn)行半開(kāi)瓶蓋培養(yǎng)，使用自來(lái)水、營(yíng)養(yǎng)液定期噴霧補(bǔ)液，瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)14-21 d。
7.如權(quán)利要求1所述的鐵皮石斛組培苗玻瓶馴化的方法，其特征在于，步驟5)所述移栽苗床基質(zhì)中，是指將苗移栽于苗床基質(zhì)中，經(jīng)30-40 d栽培為成苗。
8.如權(quán)利要求7所述的鐵皮石斛組培苗玻瓶馴化的方法，其特征在于，所述苗床基質(zhì)為椰糠、木屑刨花、樹(shù)皮或上述兩種或三種的混合物。
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK103918558SQ201410183404
【公開(kāi)日】2014年7月16日 申請(qǐng)日期:2014年5月4日 優(yōu)先權(quán)日:2014年5月4日
【發(fā)明者】李娟 , 林位夫, 張朝陽(yáng) 申請(qǐng)人:中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院橡膠研究所