一種可替代抗生素的果殼提取物及其制備方法與應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于農(nóng)業(yè)飼料添加劑領(lǐng)域，公開了一種可替代抗生素的果殼提取物及其制備方法與應(yīng)用。所述可替代抗生素的果殼提取物，由40～70wt％的核桃果外殼、20～50wt％的栗子果外殼及10～40wt％的茶果外殼混合提取后干燥制備而得。制備方法包括以下步驟：(1)將核桃果外殼、栗子果外殼及茶果外殼混合，加入水和酶的混合溶液進(jìn)行第一次提取，過(guò)濾所得濾渣用乙醇水溶液進(jìn)行第二次提取，過(guò)濾，合并得到果殼提取物濾液；(2)將果殼提取物濾液減壓濃縮，干燥得到所述可替代抗生素的果殼提取物。所述果殼提取物可以替代抗生素添加在動(dòng)物飼料或飲用水中，添加量為0.05～1％，用于提高畜禽的抗病能力和細(xì)菌感染性畜禽疾病的防治。
【專利說(shuō)明】
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于農(nóng)業(yè)飼料添加劑領(lǐng)域，具體涉及一種可替代抗生素的果殼提取物及其 制備方法與應(yīng)用。 一種可替代抗生素的果殼提取物及其制備方法與應(yīng)用

【背景技術(shù)】
[0002] 畜禽養(yǎng)殖中抗生素的濫用已成為普遍現(xiàn)象。大量抗生素的使用既污染了環(huán)境，也 誘導(dǎo)細(xì)菌耐藥性產(chǎn)生，形成安全隱患。尋找抗生素替代物已成為當(dāng)今研究的熱點(diǎn)。
[0003] 微生物發(fā)酵制劑、中草藥制劑、功能性寡糖、有機(jī)酸作為抗生素替代物在飼料中開 始應(yīng)用。雖然長(zhǎng)期使用有一定增強(qiáng)動(dòng)物免疫功能的作用，但是其抗菌效果仍然較差，加上來(lái) 源受限，長(zhǎng)期使用的成本較高。
[0004] 在農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)作物中，果殼一般是廢棄物，如核桃果外殼、栗子果外殼、茶果外殼 等。其重量一般是其內(nèi)果實(shí)量的1?3倍，果殼廢棄造成極大的資源浪費(fèi)。因此充分開 發(fā)果殼中的有效成分，對(duì)于農(nóng)業(yè)廢棄物的資源利用具有重要意義。果殼中含有豐富的黃 酮等活性成分，但不同果殼黃酮組成有較大差異。姜天甲等報(bào)道了油茶籽殼中含有1. 7% 的總黃酮（姜天甲，應(yīng)鐵進(jìn)，陳秋平.油茶籽殼總黃酮提取及抗氧化研究.中國(guó)食品學(xué) 報(bào)，2010, 10(1) :93-99)，但單一黃酮的抗菌效果欠佳。
[0005] 將果殼有效成分提取，獲得抗菌組合物，作為抗生素替代物用于動(dòng)物畜禽疾病的 防治。此方面研究未見(jiàn)報(bào)道。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 為了克服現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)與不足，本發(fā)明的首要目的在于提供一種可替代抗生素 的果殼提取物；
[0007] 本發(fā)明的另一目的在于提供上述可替代抗生素的果殼提取物的制備方法；
[0008] 本發(fā)明的再一目的在于提供上述可替代抗生素的果殼提取物的應(yīng)用。
[0009] 本發(fā)明的目的通過(guò)下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：
[0010] 一種可替代抗生素的果殼提取物，由40?70wt%的核桃果外殼、20?50wt%的栗 子果外殼及10?40wt %的茶果外殼混合提取后干燥制備而得。
[0011] 上述可替代抗生素的果殼提取物的制備方法，包括以下步驟：
[0012] (1)將40?70wt%的核桃果外殼、20?50wt%的栗子果外殼及10?40wt%的茶 果外殼混合成果殼混合物，加入水和酶的混合溶液進(jìn)行第一次提取，過(guò)濾，所得濾渣再用乙 醇水溶液進(jìn)行第二次提取，過(guò)濾，合并濾液得到果殼提取物濾液；
[0013] 優(yōu)選的，所述水和酶的混合溶液中水的質(zhì)量為所述果殼混合物質(zhì)量的10?20倍， 酶的質(zhì)量為所述果殼混合物質(zhì)量的〇. 5?1. 5% ;
[0014] 優(yōu)選的，所述酶為纖維素酶、半纖維素酶或果膠酶中的一種；
[0015] 優(yōu)選的，所述第一次提取的條件為：提取溫度為35?55°C，提取時(shí)間為2?4h ;
[0016] 優(yōu)選的，所述乙醇水溶液中乙醇的質(zhì)量百分比為60?85% ;
[0017] 優(yōu)選的，所述乙醇水溶液的質(zhì)量為為所述果殼混合物質(zhì)量的5?15倍；
[0018] 優(yōu)選的，所述第二次提取的條件為：提取溫度為60?80°C，提取時(shí)間為1?3h ;
[0019] (2)將所述果殼提取物濾液減壓濃縮，進(jìn)行干燥，得到所述可替代抗生素的果殼提 取物；
[0020] 優(yōu)選的，所述干燥為真空干燥、噴霧干燥或冷凍干燥。
[0021] 上述可替代抗生素的果殼提取物在畜禽飼養(yǎng)中作為抗生素替代物的應(yīng)用，可用于 提高畜禽的抗病能力和防治細(xì)菌感染性畜禽疾病。
[0022] 上述可替代抗生素的果殼提取物在畜禽飼養(yǎng)中的應(yīng)用，優(yōu)選方案為：將所述可替 代抗生素的果殼提取物按〇. 05?1 %的質(zhì)量分?jǐn)?shù)添加到畜禽飼養(yǎng)的配合飼料或飲用水中。
[0023] 本發(fā)明的原理：
[0024] 本發(fā)明將核桃果外殼、栗子果外殼、茶果外殼按照一定質(zhì)量比組合，進(jìn)行酶和醇水 兩步提取。由于果殼中纖維含量高，故先用酶法水解果殼細(xì)胞壁，將活性成分從植物細(xì)胞中 溶解出來(lái)，再用乙醇水提取，得到的果殼提取物富含不同種類水溶性和醇溶性黃酮成分，抗 菌活性強(qiáng)。
[0025] 本發(fā)明相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)具有如下的優(yōu)點(diǎn)及效果：
[0026] (1)本發(fā)明所述制備方法通過(guò)不同果殼組合提取，獲得含有多種黃酮組合物的可 替代抗生素的果殼提取物，所述可替代抗生素的果殼提取物抗菌活性顯著增強(qiáng)，適合替代 抗生素作為動(dòng)物飼料添加劑。
[0027] (2)本發(fā)明所述制備方法通過(guò)酶法先將細(xì)胞中的黃酮等成分溶出，再用含水乙醇 將水溶性和醇溶性黃酮充分提取，所述可替代抗生素的果殼提取物中黃酮含量高。
[0028] (3)本發(fā)明所述制備方法適合工業(yè)化生產(chǎn)，將廢棄果殼制備抗生素替代物，提升了 廢棄資源的價(jià)值。

【具體實(shí)施方式】
[0029] 下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的描述，但本發(fā)明的實(shí)施方式不限于此。 實(shí)施例中的％都為質(zhì)量百分比。
[0030] 實(shí)施例1
[0031] 一種可替代抗生素的果殼提取物，其制備方法如下：
[0032] (1)取700g核桃果外殼、200g栗子果外殼、100g茶果外殼混合成果殼混合物，加入 20kg水、15g纖維素酶，采用溶劑提取法于35°C下提取4h，過(guò)濾，所得濾渣再加入5kg85%乙 醇水溶液，于60°C下提取2h，過(guò)濾，合并得到果殼提取物濾液；
[0033] (2)將所述果殼提取物濾液減壓濃縮，真空干燥得所述可替代抗生素的果殼提取 物 235g。
[0034] 實(shí)施例2
[0035] -種可替代抗生素的果殼提取物，其制備方法如下：
[0036] (1)取400g核桃果外殼、500g栗子果外殼、100g茶果外殼混合成果殼混合物， 加入15kg水、10g半纖維素酶，采用溶劑提取法于55°C下提取2h，過(guò)濾，所得濾渣再加入 10kg70%乙醇水溶液，于70°C下提取lh，過(guò)濾，合并得到果殼提取物濾液；
[0037] (2)將所述果殼提取物濾液減壓濃縮，噴霧干燥得所述可替代抗生素的果殼提取 物 175g。
[0038] 實(shí)施例3
[0039] -種可替代抗生素的果殼提取物，其制備方法如下：
[0040] (1)取400g核桃果外殼、200g栗子果外殼、400g茶果外殼混合成果殼混合物，力口 入10kg水、5g果膠酶，采用溶劑提取法于45°C下提取3h，過(guò)濾，濾漁再加入15kg60%乙醇 水溶液，于85°C下提取3h，過(guò)濾，合并得到果殼提取物濾液；
[0041] (2)將所述果殼提取物濾液減壓濃縮，冷凍干燥得所述可替代抗生素的果殼提取 物 250g。
[0042] 實(shí)施例4
[0043] 一種可替代抗生素的果殼提取物，其制備方法如下：
[0044] (1)取500g核桃果外殼、300g栗子果外殼、200g茶果外殼混合成果殼混合物，力口 入15kg水、12g果膠酶，采用溶劑提取法于40°C下提取2h，過(guò)濾，所得濾渣再加入8kg80% 乙醇水溶液，于65°C下提取2h，過(guò)濾，合并得到果殼提取物濾液
[0045] (2)將所述果殼提取物濾液減壓濃縮，真空干燥得所述可替代抗生素的果殼提取 物 197g。
[0046] 實(shí)施例5
[0047] -種可替代抗生素的果殼提取物，其制備方法如下：
[0048] (1)取450g核桃果外殼、250g栗子果外殼、300g茶果外殼混合成果殼混合物，加入 12kg水、6g纖維素酶，采用溶劑提取法于37°C下提取2h，過(guò)濾，所得濾渣再加入12kg75%乙 醇水溶液，于70°C下提取2h，過(guò)濾，合并得到果殼提取物濾液；
[0049] (2)將所述果殼提取物濾液減壓濃縮，噴霧干燥得所述可替代抗生素的果殼提取 物 210g。
[0050] 實(shí)施例6
[0051] 一種可替代抗生素的果殼提取物，其制備方法如下：
[0052] (1)取350g核桃果外殼、400g栗子果外殼、250g茶果外殼混合成果殼混合物，加入 18kg水、8g半纖維素酶，采用溶劑提取法于50°C下提取3h，過(guò)濾，所得濾渣再加入10kg70% 乙醇水溶液，于75°C下提取lh，過(guò)濾，合并得到果殼提取物濾液；
[0053] (2)將所述果殼提取物濾液減壓濃縮，冷凍干燥得所述可替代抗生素的果殼提取 物 182g。
[0054] 實(shí)施例7
[0055] 對(duì)實(shí)施例1?6制得的可替代抗生素的果殼提取物中黃酮的含量進(jìn)行測(cè)定。
[0056] 方法：稱取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品1001^，用60%乙醇溶解并定容至250 1^，搖勻后即得濃度 為0. 4mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)液，放置于低溫暗箱內(nèi)備用。分別吸取標(biāo)準(zhǔn)液0、2、4、6、8、10、12mL于 50mL容量瓶中，用60 %乙醇添至20mL，加入5 % NaN02溶液2mL，搖勻，放置6min，再加入 10 % A1 (N03) 3溶液2mL，6min后加入4 % NaOH溶液20mL，混勻，再用60 %的乙醇定容至刻度， 搖勻，放置15min后在波長(zhǎng)510nm處測(cè)定吸光度。以蘆丁溶液濃度y(mg/mL)為橫坐標(biāo)，吸光 度X為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到回歸方程：y = 0. 526x+0. 0047(相關(guān)系數(shù)r = 0. 9989)。
[0057] 分別稱取500mg實(shí)施例1?6制得的可替代抗生素的果殼提取物樣品，分別用 100mL60%乙醇溶解，為供試液。吸取供試液5mL，按上述標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定方法測(cè)定并計(jì)算樣品 中的黃酮含量。
[0058] 結(jié)果：實(shí)施例1?6制得的可替代抗生素的果殼提取物樣品的黃酮含量分別為 12. 5%、13. 2%、11. 5%、15. 3%、13. 7%、14. 6%。其含量顯著高于文獻(xiàn)報(bào)道的果殼提取物 中的黃酮含量。
[0059] 實(shí)施例8
[0060] 測(cè)定實(shí)施例1?6制備的可替代抗生素的果殼提取物對(duì)雞感染沙門氏菌的治
[0061] 療效果：
[0062] 方法：取1日齡清遠(yuǎn)麻雞240只，隨機(jī)分為8組，每組30只。分為對(duì)照組、實(shí)施例 1?6制備的可替代抗生素的果殼提取物1?6組、抗生素組。用雞源沙門氏菌C79 - 1感 染1次（飼喂0. lmL，約108活菌），5h后給飲藥水，各實(shí)施例可替代抗生素的果殼提取物在 飲水中添加量都為〇. 05%，抗生素為硫酸阿米卡星，在飲水中添加量為50mg/kg。連續(xù)喂養(yǎng) 30天。統(tǒng)計(jì)雞死亡數(shù)，對(duì)未死亡的雞處死后取出脾臟和胸腺，計(jì)算脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)。
[0063] 結(jié)果：結(jié)果如表1所示，從表1分析可知，實(shí)施例1?6制備的可替代抗生素的果 殼提取物對(duì)沙門氏菌所致雞感染均有良好的控制作用，無(wú)死亡發(fā)生，其脾臟和胸腺指數(shù)較 對(duì)照有顯著提高。說(shuō)明本發(fā)明所述可替代抗生素的果殼提取物具有抗生素的治療效果和提 高雞免疫力的作用。
[0064] 表1.本發(fā)明可替代抗生素的果殼提取物對(duì)沙門氏菌感染雞的測(cè)試結(jié)果
[0065]

【權(quán)利要求】
1. 一種可替代抗生素的果殼提取物，其特征在于：由40?70wt%的核桃果外殼、20? 50wt %的栗子果外殼及10?40wt %的茶果外殼混合提取后干燥制備而得。
2. -種根據(jù)權(quán)利要求1所述的可替代抗生素的果殼提取物的制備方法，其特征在于包 括以下步驟： (1) 將40?70wt%的核桃果外殼、20?50wt%的栗子果外殼及10?40wt%的茶果外 殼混合成果殼混合物，加入水和酶的混合溶液進(jìn)行第一次提取，過(guò)濾，所得濾渣再用乙醇水 溶液進(jìn)行第二次提取，過(guò)濾，合并濾液得到果殼提取物濾液； (2) 將所述果殼提取物濾液減壓濃縮，進(jìn)行干燥，得到所述可替代抗生素的果殼提取 物。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的可替代抗生素的果殼提取物的制備方法，其特征在于：步驟 (1) 所述水和酶的混合溶液中水的質(zhì)量為所述果殼混合物質(zhì)量的10?20倍，酶的質(zhì)量為所 述果殼混合物質(zhì)量的0. 5?1. 5% ;步驟（1)所述酶為纖維素酶、半纖維素酶或果膠酶中的 一種；步驟（1)所述第一次提取的條件為：提取溫度為35?55°C，提取時(shí)間為2?4h ;步 驟（1)所述乙醇水溶液中乙醇的質(zhì)量百分比為60?85% ;步驟（1)所述乙醇水溶液的質(zhì) 量為為所述果殼混合物質(zhì)量的5?15倍；步驟（1)所述第二次提取的條件為：提取溫度為 60?80°C，提取時(shí)間為1?3h。
4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的可替代抗生素的果殼提取物的制備方法，其特征在于：步驟 (2) 所述干燥為真空干燥、噴霧干燥或冷凍干燥。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的可替代抗生素的果殼提取物在畜禽飼養(yǎng)中作為抗生素替代 物的應(yīng)用。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的可替代抗生素的果殼提取物在畜禽飼養(yǎng)中作為抗生素替代 物的應(yīng)用，其特征在于：將所述可替代抗生素的果殼提取物按〇. 05?1 %的質(zhì)量分?jǐn)?shù)添加 到畜禽飼養(yǎng)的配合飼料或飲用水中。
【文檔編號(hào)】A23K1/17GK104054898SQ201410212288
【公開日】2014年9月24日 申請(qǐng)日期:2014年5月19日 優(yōu)先權(quán)日:2014年5月19日
【發(fā)明者】葉勇, 方菲 申請(qǐng)人:華南理工大學(xué)