一種促進(jìn)水稻秧苗根系生長(zhǎng)的微生物肥料及其制備方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種促進(jìn)水稻秧苗根系生長(zhǎng)的微生物肥料及其制備方法。本發(fā)明首先通過(guò)肺炎克雷伯氏菌、地衣芽孢桿菌、解淀粉芽孢桿菌植物亞種、鶴羽田戴爾福特菌和多粘類(lèi)芽胞桿菌菌種分別發(fā)酵制得菌液，然后將其混合制得混合發(fā)酵菌液；最后在有機(jī)物料中加入混合肥料、混合發(fā)酵菌液和無(wú)菌水，發(fā)酵，發(fā)酵結(jié)束后，將發(fā)酵后肥料與腐殖酸、草炭混勻，經(jīng)對(duì)輥擠壓式造粒機(jī)制備微生物肥料。本發(fā)明的微生物肥料能顯著促進(jìn)水稻秧苗根系的生長(zhǎng)發(fā)育，增強(qiáng)抵抗不良環(huán)境對(duì)水稻根系生長(zhǎng)的影響，讓水稻秧苗達(dá)到壯根、壯秧的目的。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種促進(jìn)水稻秧苗根系生長(zhǎng)的微生物肥料及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及農(nóng)業(yè)肥料領(lǐng)域，尤其涉及的是一種促進(jìn)水稻秧苗根系生長(zhǎng)的微生物肥料及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]水稻生產(chǎn)屬于勞動(dòng)密集型產(chǎn)業(yè)，隨著中國(guó)勞動(dòng)力成本不斷增加，水稻機(jī)械化生產(chǎn)，特別是機(jī)械化插秧，將是以后產(chǎn)業(yè)發(fā)展的一個(gè)主要趨勢(shì)。為了適合機(jī)械插秧，水稻在育秧時(shí)要求根系要多且成毯狀，這樣才有利于運(yùn)輸和插秧。然而在水稻育秧過(guò)程中有時(shí)候受到基質(zhì)、溫度等因素影響時(shí)，根系生長(zhǎng)很差，給機(jī)械插秧帶來(lái)一定問(wèn)題。
[0003]水稻在育 秧時(shí)特別是早稻容易出現(xiàn)秧苗抗寒力弱，秧苗纖弱，下部一到三葉葉尖常呈焦枯狀，病害較多，爛秧爛種等，因此需要一種水稻育秧的專(zhuān)用肥料，既能促進(jìn)秧苗生長(zhǎng)，又能減輕病害的發(fā)生，又有利于機(jī)械化插秧的開(kāi)展。目前，盡管生產(chǎn)上關(guān)于微生物有機(jī)肥料的產(chǎn)品很多，但針對(duì)于水稻育秧的的專(zhuān)用微生物肥料較少，特別是在促根、壯根方面。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供了一種促進(jìn)水稻秧苗根系生長(zhǎng)的微生物肥料及其制備方法。
[0005]本發(fā)明的技術(shù)方案如下:
[0006]一種促進(jìn)水稻秧苗根系生長(zhǎng)的微生物肥料的制備方法，其步驟如下:
[0007](I)肺炎克雷伯氏菌的發(fā)酵
[0008]將在LB固體培養(yǎng)基上活化的肺炎克雷伯氏菌菌株單菌落在超凈工作臺(tái)上轉(zhuǎn)接到裝有IOmL牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基的容積為50mL的三角瓶中，于30°C、180rpm條件下振蕩培養(yǎng)20h ;然后將其接種于裝有400mL牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的容積為1000mL的三角瓶中，180rpm、30°C條件下振蕩培養(yǎng)20h，之后將其接種于裝有20L發(fā)酵培養(yǎng)基的機(jī)械攪拌式發(fā)酵罐中，發(fā)酵條件設(shè)定為:溶氧100%，攪拌速度350rpm，發(fā)酵溫度30°C，發(fā)酵時(shí)間48h，pH6.8-7.2 ;發(fā)酵到達(dá)終點(diǎn)后，取樣檢測(cè)活芽孢濃度，確保活芽孢濃度≥1.0X108cfu/mL ；
[0009](2)地衣芽孢桿菌、解淀粉芽孢桿菌植物亞種、鶴羽田戴爾福特菌和多粘類(lèi)芽胞桿菌的發(fā)酵
[0010]將在LB固體培養(yǎng)基上分別活化的地衣芽孢桿菌菌株單菌落，解淀粉芽孢桿菌植物亞種、鶴羽田戴爾福特菌或多粘類(lèi)芽胞桿菌，在超凈工作臺(tái)上轉(zhuǎn)接到裝有IOmLLB液體培養(yǎng)基的容積為50mL的三角瓶中，于30°C、180rpm條件下振蕩培養(yǎng)20h ;然后將其接種于裝有400mL牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的容積為1000mL的三角瓶中，180rpm、30°C條件下振蕩培養(yǎng)20h，之后將其接種于裝有20L發(fā)酵培養(yǎng)基的機(jī)械攪拌式發(fā)酵罐中，發(fā)酵條件設(shè)定為:溶氧100%，攪拌速度350rpm，發(fā)酵溫度30°C，發(fā)酵時(shí)間48h，pH6.8-7.2 ;發(fā)酵到達(dá)終點(diǎn)后，取樣檢測(cè)活芽孢濃度，確?；钛挎邼舛?gt; 1.0X108cfu/mL ；
[0011](3)混合發(fā)酵菌液的制備[0012]將⑴和⑵中發(fā)酵得到的肺炎克雷伯氏菌、地衣芽孢桿菌、解淀粉芽孢桿菌植物亞種、鶴羽田戴爾福特菌、多粘類(lèi)芽胞桿菌按照體積比1.5:1:1:1:0.5混合，混合均勻，制得混合發(fā)酵菌液；
[0013](4)微生物肥料的制備
[0014]將菜籽餅、大豆餅按照重量1:1混勻作為有機(jī)物料，添加氮磷鉀肥按照純氮(尿素):純磷(過(guò)磷酸鈣):純鉀(硫酸鉀)=3:1:1 (重量比)混勻作為混合肥料，將有機(jī)物料和混合肥料混合，混勻后添加混合發(fā)酵菌液，同時(shí)添加無(wú)菌水，在發(fā)酵罐中發(fā)酵I周；發(fā)酵結(jié)束后，將發(fā)酵后肥料與腐殖酸、草炭混勻，經(jīng)對(duì)輥擠壓式造粒機(jī)制備微生物肥料，并檢測(cè)微生物肥料的活芽孢、有機(jī)質(zhì)和水分含量，使活芽孢含量> 1.0X108cfU/g，有機(jī)質(zhì)含量^ 60%，水分含量控制在8-10%之間，檢驗(yàn)合格后包裝。
[0015]所述的發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為:大豆粉5g/L，玉米粉5g/L，酵母提取物5g/L，紅糖50g/L,碳酸鈣 lg/L, MnS045mg/L, pH7.0-7.2,用無(wú)菌蒸懼水配制。
[0016]所述的制備方法，步驟(4)中，每kg有機(jī)物料加12_15g混合肥料；每1^有機(jī)肥料加Iml混合發(fā)酵菌液；每kg有機(jī)物料添加200ml的無(wú)菌水。
[0017]所述的制備方法，步驟⑷中，發(fā)酵后肥料與腐殖酸、草炭的重量比為10:1:2。
[0018]所述的制備方法制得的促進(jìn)水稻秧苗根系生長(zhǎng)的微生物肥料。 [0019]本發(fā)明的微生物肥料能顯著促進(jìn)水稻秧苗根系的生長(zhǎng)發(fā)育，增強(qiáng)抵抗不良環(huán)境對(duì)水稻根系生長(zhǎng)的影響， 讓水稻秧苗達(dá)到壯根、壯秧的目的。
【具體實(shí)施方式】
[0020]以下結(jié)合具體實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。
[0021]實(shí)施例中用到的微生物菌種購(gòu)自中國(guó)工業(yè)微生物菌種保藏中心和中國(guó)農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏中心。
[0022]實(shí)施例1
[0023]1、微生物菌種發(fā)酵
[0024](I)肺炎克雷伯氏菌的發(fā)酵
[0025]將在LB固體培養(yǎng)基上活化的肺炎克雷伯氏菌菌株單菌落在超凈工作臺(tái)上轉(zhuǎn)接到裝有IOmL牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基的容積為50mL的三角瓶中，于30°C、180rpm條件下振蕩培養(yǎng)20h。然后將其接種于裝有400mL牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的容積為1000mL的三角瓶中，180rpm、30°C條件下振蕩培養(yǎng)20h，之后將其接種于裝有20L發(fā)酵培養(yǎng)基的機(jī)械攪拌式發(fā)酵罐中，發(fā)酵條件設(shè)定為:溶氧100%，攪拌速度350rpm，發(fā)酵溫度30°C，發(fā)酵時(shí)間48h，pH6.8-7.2。其中所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為:大豆粉5g/L，玉米粉5g/L，酵母提取物5g/L，紅糖50g/L，碳酸鈣lg/L，MnS045mg/L，pH7.0-7.2，用無(wú)菌蒸餾水配制。發(fā)酵到達(dá)終點(diǎn)后，取樣檢測(cè)活芽孢濃度，確?；钛挎邼舛?gt; 1.0X 108cfu/mL。
[0026](2)地衣芽孢桿菌、解淀粉芽孢桿菌植物亞種、鶴羽田戴爾福特菌和多粘類(lèi)芽胞桿菌的發(fā)酵
[0027]將在LB固體培養(yǎng)基上分別活化的地衣芽孢桿菌菌株單菌落，解淀粉芽孢桿菌植物亞種、鶴羽田戴爾福特菌或多粘類(lèi)芽胞桿菌，在超凈工作臺(tái)上轉(zhuǎn)接到裝有IOmLLB液體培養(yǎng)基的容積為50mL的三角瓶中，于30°C、180rpm條件下振蕩培養(yǎng)20h。然后將其接種于裝有400mL牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的容積為1000mL的三角瓶中，180rpm、30°C條件下振蕩培養(yǎng)20h，之后將其接種于裝有20L發(fā)酵培養(yǎng)基(同I中發(fā)酵培養(yǎng)基)的機(jī)械攪拌式發(fā)酵罐中，發(fā)酵條件設(shè)定為:溶氧100%，攪拌速度350rpm，發(fā)酵溫度30°C，發(fā)酵時(shí)間48h，pH6.8-7.2。發(fā)酵到達(dá)終點(diǎn)后，取樣檢測(cè)活芽孢濃度，確?；钛挎邼舛?gt; 1.0X108cfu/mL。
[0028]將所述發(fā)酵得到的肺炎克雷伯氏菌、地衣芽孢桿菌、解淀粉芽孢桿菌植物亞種、鶴羽田戴爾福特菌、多粘類(lèi)芽胞桿菌按照體積比1.5:1:1:1:0.5混合，混合均勻，制得混合發(fā)酵菌液。
[0029]2、微生物肥料的制備
[0030]將菜籽餅、大豆餅按照重量1:1混勻作為有機(jī)物料，添加氮磷鉀肥按照純氮(尿素):純磷(過(guò)磷酸鈣):純鉀(硫酸鉀)=3:1:1 (重量比)混勻作為混合肥料，每kg有機(jī)物料加Hg混合肥料，混勻后添加混合發(fā)酵菌液，每kg有機(jī)肥料加Iml混合發(fā)酵菌液，同時(shí)每kg有機(jī)物料添加200ml的無(wú)菌水，在發(fā)酵罐中發(fā)酵I周。發(fā)酵結(jié)束后，將發(fā)酵后肥料與腐殖酸、草炭按照重量比10:1:2混勻，經(jīng)對(duì)輥擠壓式造粒機(jī)制備微生物肥料，并檢測(cè)微生物肥料的活芽孢、有機(jī)質(zhì)和水分含量，使活芽孢含量> 1.0X 108cfu/g，有機(jī)質(zhì)含量> 60%,水分含量控制在8-10%之間，檢驗(yàn)合格后包裝。
[0031]實(shí)施例2
[0032]在中國(guó)水稻研究所浙江省富陽(yáng)基地溫室進(jìn)行水稻對(duì)比試驗(yàn)，試驗(yàn)設(shè)3個(gè)處理，CK:化肥對(duì)照，即為微生物肥料中的混合肥料；A:施用有機(jī)物料一菜籽餅、大豆餅按照重量比I: I混勻的混合物；B:施用實(shí)施例1制備的微生物肥料。微生物肥料用量:水稻育秧時(shí)按普通秧盤(pán)(60X25)每盤(pán)添加500g，常規(guī)管理。20天之后觀察水稻秧苗生長(zhǎng)情況，確認(rèn)促生菌株是否有促進(jìn)水稻根系生長(zhǎng)的效果。經(jīng)觀察發(fā)現(xiàn)，隨著水稻秧苗生長(zhǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，施用實(shí)施例I制備的微生物肥料處理(B)，其長(zhǎng)勢(shì)遠(yuǎn)好于施用化肥(CK)和有機(jī)物料(A)的水稻秧苗(表 I)。
[0033]表1施用實(shí)施例1制備的微生物肥料對(duì)水稻根系及地上部生長(zhǎng)的影響
[0034]
【權(quán)利要求】
1.一種促進(jìn)水稻秧苗根系生長(zhǎng)的微生物肥料的制備方法，其特征是，其步驟如下: (1)肺炎克雷伯氏菌的發(fā)酵 將在LB固體培養(yǎng)基上活化的肺炎克雷伯氏菌菌株單菌落在超凈工作臺(tái)上轉(zhuǎn)接到裝有IOmL牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基的容積為50mL的三角瓶中，于30°C、180rpm條件下振蕩培養(yǎng)20h ;然后將其接種于裝有400mL牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的容積為1000mL的三角瓶中，180rpm、30°C條件下振蕩培養(yǎng)20h，之后將其接種于裝有20L發(fā)酵培養(yǎng)基的機(jī)械攪拌式發(fā)酵罐中，發(fā)酵條件設(shè)定為:溶氧100%，攪拌速度350rpm，發(fā)酵溫度30°C，發(fā)酵時(shí)間48h，pH6.8-7.2 ;發(fā)酵到達(dá)終點(diǎn)后，取樣檢測(cè)活芽孢濃度，確?；钛挎邼舛?gt; 1.0X108cfu/mL ； (2)地衣芽孢桿菌、解淀粉芽孢桿菌植物亞種、鶴羽田戴爾福特菌和多粘類(lèi)芽胞桿菌的發(fā)酵 將在LB固體培養(yǎng)基上分別活化的地衣芽孢桿菌菌株單菌落，解淀粉芽孢桿菌植物亞種、鶴羽田戴爾福特菌或多粘類(lèi)芽胞桿菌，在超凈工作臺(tái)上轉(zhuǎn)接到裝有IOmLLB液體培養(yǎng)基的容積為50mL的三角瓶中，于30°C、180rpm條件下振蕩培養(yǎng)20h ;然后將其接種于裝有400mL牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的容積為1000mL的三角瓶中，180rpm、30°C條件下振蕩培養(yǎng)20h，之后將其接種于裝有20L發(fā)酵培養(yǎng)基的機(jī)械攪拌式發(fā)酵罐中，發(fā)酵條件設(shè)定為:溶氧100%，攪拌速度350rpm，發(fā)酵溫度30°C，發(fā)酵時(shí)間48h，pH6.8-7.2 ;發(fā)酵到達(dá)終點(diǎn)后，取樣檢測(cè)活芽孢濃度，確保活芽孢濃度≥ 1.0X108cfu/mL ； (3)混合發(fā)酵菌液的制備 將(I)和(2)中發(fā)酵得到的肺炎克雷伯氏菌、地衣芽孢桿菌、解淀粉芽孢桿菌植物亞種、鶴羽田戴爾福特菌、多粘類(lèi)芽胞桿菌按照體積比1.5:1:1:1:0.5混合，混合均勻，制得混合發(fā)酵菌液； (4)微生物肥料的制備 將菜籽餅、大豆餅按照重量1:1混勻作為有機(jī)物料，添加氮磷鉀肥按照純氮:純磷:純鉀的重量比為3:1:1混勻作為混合肥料，將有機(jī)物料和混合肥料混合，混勻后添加混合發(fā)酵菌液，同時(shí)添加無(wú)菌水，在發(fā)酵罐中發(fā)酵I周；發(fā)酵結(jié)束后，將發(fā)酵后肥料與腐殖酸、草炭混勻，經(jīng)對(duì)輥擠壓式造粒機(jī)制備微生物肥料，并檢測(cè)微生物肥料的活芽孢、有機(jī)質(zhì)和水分含量，使活芽孢含量> 1.0X 108cfu/g,有機(jī)質(zhì)含量> 60%,水分含量控制在8-10%之間，檢驗(yàn)合格后包裝。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是，所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為:大豆粉5g/L，玉米粉5g/L，酵母提取物5g/L，紅糖50g/L，碳酸鈣lg/L，MnS045mg/L，pH7.0-7.2，用無(wú)菌蒸餾水配制。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是，步驟⑷中，每kg有機(jī)物料加12-15g混合肥料；每kg有機(jī)肥料加Iml混合發(fā)酵菌液；每kg有機(jī)物料添加200ml的無(wú)菌水。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是，步驟(4)中，發(fā)酵后肥料與腐殖酸、草炭的重量比為10:1:2。
5.根據(jù)權(quán)利要求1~4所述的制備方法制得的促進(jìn)水稻秧苗根系生長(zhǎng)的微生物肥料。
【文檔編號(hào)】C05G1/00GK103980026SQ201410214678
【公開(kāi)日】2014年8月13日 申請(qǐng)日期:2014年5月19日 優(yōu)先權(quán)日:2014年5月19日
【發(fā)明者】張義凱, 朱德峰 申請(qǐng)人:中國(guó)水稻研究所