一種提高澳洲堅果雜交授粉效率的方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種提高澳洲堅果雜交授粉效率的方法，屬于果樹雜交育種【技術領域】。它包括搭防蟲網(wǎng)、采集花粉和人工授粉三大步驟。本發(fā)明根據(jù)澳洲堅果大部分品種自交親和性程度低的特性，利用網(wǎng)室可對大量花序進行授粉，以滿足大規(guī)模雜交育種的需求，免去常規(guī)雜交方法中去雄、采集花粉、套袋等復雜程序，能節(jié)省用工，避免了對花朵自然結構的損傷。本發(fā)明操作簡單，省時省力，不損傷花朵的自然結構，雜交授粉成功率高。本發(fā)明對澳洲堅果雜交育種的關鍵步驟進行優(yōu)化，獲得優(yōu)化的技術方法體系，提高澳洲堅果雜交育種效率，同時降低了澳洲堅果雜交育種的成本。
【專利說明】一種提高澳洲堅果雜交授粉效率的方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于果樹雜交育種【技術領域】，具體涉及一種提高澳洲堅果雜交授粉效率的方法。
【背景技術】
[0002]澳洲堅果(Macadamia spp.),又稱澳洲胡桃、夏威夷果等，為山龍眼科(Proteaceae)澳洲堅果屬(Macadamia F.Muell)多年生常綠喬木果樹。澳洲堅果可食部分為果仁，脂肪含量高達65~83%，還富含蛋白質、鈣、磷、鐵和維生素，營養(yǎng)豐富，美味可口，是世界堅果類食品中最高級的一種，也是近年來我國熱區(qū)栽培面積較大的果樹樹種。但是目前，我國尚無自己選育的品種，生產(chǎn)上所用品種全部來自國外育成品種，由于氣候環(huán)境的差異，大多數(shù)品種的平均株產(chǎn)只有選育地的1/3~1/2。雖然我國科研工作者針對部分引進品種的環(huán)境適應性及其他特征進行了 20多年的研究，也篩選出了一批相對較好的澳洲堅果品種，如Hinde、0wn Choice、HAES900等，但總體說來，這些品種的產(chǎn)量與其選育地尚存一定的距離，且數(shù)量還 十分有限，不能滿足我國各種小氣候環(huán)境的需要，另外，隨著我國加入WT0，世界貿(mào)易競爭的加劇和澳洲堅果主要育成國對新品種保護力度的加大，今后從國外直接引進育成品種的難度將變得越來越大。只有堅持自力更生，選育適合我國氣候環(huán)境的、具有自主知識產(chǎn)權的新品種，才能在未來的競爭中，立于不敗之地，這也是解決我國澳洲堅果品種問題的根本途徑和我國澳洲堅果產(chǎn)業(yè)良種化的必由之路。
[0003]雖然澳洲堅果新品種的培育可以采取雜交育種、實生選種、芽變選種、輻射誘變等多種途徑和方法，但雜交育種仍然是澳洲堅果新品種選育的最主要方法，是澳洲堅果育種最重要和最有效的途徑，也是目前使用最廣泛的方法。澳洲堅果雜交子代苗及子代果實的評價篩選方法步驟繁雜，每一個步驟的處理不當都會影響育種效率。一般從雜交到選育出一個澳洲堅果新品種最少需要20年時間。目前，澳洲堅果雜交育種程序復雜，經(jīng)常對花朵自然結構造成損傷，授粉效率較低，雜交結實成功率也較低，因此，如何克服現(xiàn)有技術的不足是目前雜交育種【技術領域】亟需解決的問題。

【發(fā)明內容】

[0004]為了克服現(xiàn)有技術的不足，本發(fā)明提供一種工作效率更高，雜交結實成功率更高的澳洲堅果雜交授粉方法。
[0005]為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術方案:
一種提高澳洲堅果雜交授粉效率的方法，包括如下步驟:
步驟(1)，搭防蟲網(wǎng):根據(jù)育種目標選擇親本組合，在初花期的父母本堅果樹上方搭授粉棚架，將防蟲網(wǎng)直接覆蓋并固定在棚架上，棚架四周下方留0.5-lm的防蟲網(wǎng)堆在樹四周的地上并壓實，以防授粉昆蟲進入；
步驟(2)，采集花粉:當父母本樹進入盛花期時，在父本樹上選擇24小時之內開放的花序，把花序放入干凈的試管內，左右各螺旋式旋轉試管3-5下，上下移動試管2-3下，讓花粉盡可能多的粘到試管內壁上，待試管內壁上能夠明顯的看到一層花粉時即可，采集完花粉的試管標上標簽，用濕毛巾包裹，試管口包在濕毛巾內，濕毛巾以不滴水為宜，得到授粉試管；
步驟(3)，人工授粉:將步驟(2)得到的授粉試管拿到母本樹的棚架內，選擇母本24小時之內開放的花序，把花序上還未開放的小花抹去，并把超過試管長度的花朵去除，手戴上純棉白紗線手套從上到下輕輕的抹1-2下柱頭，把抹好的花序放入步驟(2)得到的授粉試管內，左右各螺旋式旋轉試管2-3下，上下移動試管1-2下即可完成授粉，授粉后標上標簽，注明父母本，IOd后拆去防蟲網(wǎng)。
[0006]步驟(1)中選用的防蟲網(wǎng)為80-100目。
[0007]步驟(1)中選用的防蟲網(wǎng)為尼龍防蟲網(wǎng)。
[0008]步驟(2)中所述的采集花粉選擇晴天或陰天早上8:00-11:00進行采集花粉。
[0009]步驟(2)中所述的試管規(guī)格為25X200mm，且為透明材質內壁光滑的試管。
[0010]步驟(3)中所述的人工授粉選擇晴天或陰天早上9:00-12:00進行人工授粉。
[0011]每支步驟(2)得到的授粉試管可對3-5個花序進行人工授粉。
[0012]步驟(3)人工授粉的環(huán)境條件為溫度18_21°C，相對濕度60-70%，無風或微風的天氣。 [0013]步驟(3)人工授粉后24小時內降中到大雨，需重新人工授粉。
[0014]所述的步驟(3)所述的人工授粉時期為I月下旬至2月下旬或盛花期，盛花期為父母本樹上開花數(shù)量在25%-75%之間時。
[0015]本發(fā)明與現(xiàn)有技術相比，其有益效果為:(I)本發(fā)明根據(jù)澳洲堅果大部分品種自交親和性程度低的特性，利用網(wǎng)室可對大量花序進行授粉，以滿足大規(guī)模雜交育種的需求，免去常規(guī)雜交方法中去雄、采集花粉、套袋等復雜程序，能節(jié)省用工，避免了對花朵自然結構的損傷；(2)本發(fā)明操作簡單，省時省力，不損傷花朵的自然結構，雜交授粉成功率高；(3 )本發(fā)明對澳洲堅果雜交育種的關鍵步驟進行優(yōu)化，獲得優(yōu)化的技術方法體系，提高澳洲堅果雜交育種效率。具體實施例
下面結合實施例對本發(fā)明作進一步的詳細描述。
[0016]以下實施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。在不背離本發(fā)明精神和實質的情況下，對本發(fā)明方法、步驟或條件所作的修改或替換，均屬于本發(fā)明的保護范圍。若未特別指明，實施例中所用的技術手段為本領域技術人員所熟知的常規(guī)手段。
[0017]實施例1
一種提高澳洲堅果雜交授粉效率的方法，其中，澳洲堅果品種D4為母本，品種HAES900為父本，母本選7株，父本選5株，包括如下步驟:
步驟(1)，搭防蟲網(wǎng):根據(jù)育種目標選擇親本組合，在初花期的父母本堅果樹上方搭授粉棚架，將80目尼龍防蟲網(wǎng)直接覆蓋并固定在棚架上，棚架四周下方留0.5m的防蟲網(wǎng)堆在樹四周的地上并壓實，以防授粉昆蟲進入；
步驟(2)，采集花粉:當父母本樹進入盛花期時，晴天或陰天早上8:00-10:00，在父本樹上選擇24小時之內開放的花序，用規(guī)格為25 X 200mm、透明材質內壁光滑的試管取花粉，把花序放入干凈的試管內，左右各螺旋式旋轉試管3下，上下移動試管2下，讓花粉盡可能多的粘到試管內壁上，待試管內壁上能夠明顯的看到一層花粉時即可，采集完花粉的試管標上標簽，用濕毛巾包裹，試管口包在濕毛巾內，濕毛巾以不滴水為宜，得到授粉試管；
步驟(3)，人工授粉:晴天或陰天早上8:00-12:00，將步驟(2)得到的授粉試管拿到母本樹的棚架內，選擇母本24小時之內開放的花序，把花序上還未開放的小花抹去，并把超過試管長度的花朵去除，手戴上純棉白紗線手套從上到下輕輕的抹I下柱頭，把抹好的花序放入步驟(2)得到的授粉試管內，左右各螺旋式旋轉試管2下，上下移動試管I下即可完成授粉，授粉后標上標簽，注明父母本，IOd后拆去防蟲網(wǎng)。
[0018]每支步驟(2)得到的授粉試管對3個花序進行人工授粉；
步驟(3)人工授粉的環(huán)境條件為溫度18-21°C，相對濕度60-70%，無風；人工授粉時期為I月下旬
授粉后5個月調查最終坐果數(shù)，平均每個花序的坐果率為0.69%, 200個花序收獲種子307粒，自然授粉的平均每個花序的坐果率為0.12%，200個花序收獲種子52粒。
[0019]實施例2
一種提高澳洲堅果雜交授粉效率的方法，其中，以澳洲堅果品種HAES951為母本，品種D為父本，各選擇5株，包括如下步驟:
步驟(1)，搭防蟲網(wǎng):根據(jù)育種目標選擇親本組合，在初花期的父母本堅果樹上方搭授粉棚架，將90目尼龍防蟲網(wǎng)直接覆蓋并固定在棚架上，棚架四周下方留0.75m的防蟲網(wǎng)堆在樹四周的地上并壓實，以防授粉昆蟲進入；
步驟(2)，采集花粉 :當父母本樹進入盛花期時，晴天或陰天早上8:00-10:00，在父本樹上選擇24小時之內開放的花序，用規(guī)格為25 X 200mm、透明材質內壁光滑的試管取花粉，把花序放入干凈的試管內，左右各螺旋式旋轉試管5下，上下移動試管3下，讓花粉盡可能多的粘到試管內壁上，待試管內壁上能夠明顯的看到一層花粉時即可，采集完花粉的試管標上標簽，用濕毛巾包裹，試管口包在濕毛巾內，濕毛巾以不滴水為宜，得到授粉試管；
步驟(3)，人工授粉:晴天或陰天早上8:00-12:00，將步驟(2)得到的授粉試管拿到母本樹的棚架內，選擇母本24小時之內開放的花序，把花序上還未開放的小花抹去，并把超過試管長度的花朵去除，手戴上純棉白紗線手套從上到下輕輕的抹2下柱頭，把抹好的花序放入步驟(2)得到的授粉試管內，左右各螺旋式旋轉試管3下，上下移動試管2下即可完成授粉，授粉后標上標簽，注明父母本，IOd后拆去防蟲網(wǎng)。
[0020]每支步驟(2)得到的授粉試管可對5個花序進行人工授粉；
步驟(3)人工授粉的環(huán)境條件為溫度18-21°C，相對濕度60-70%，微風；人工授粉時期為2月下旬。
[0021]授粉后5個月調查最終坐果數(shù)，平均每個花序的坐果率為0.78%, 200個花序收獲種子數(shù)為224粒，自然授粉的平均每個花序的坐果率為0.22%，200個花序收獲種子62粒。
[0022]實施例3
一種提高澳洲堅果雜交授粉效率的方法，其中，以澳洲堅果品種HAES842為母本，品種816為父本，各選擇5株，包括如下步驟:
步驟(1)，搭防蟲網(wǎng):根據(jù)育種目標選擇親本組合，在初花期的父母本堅果樹上方搭授粉棚架，將100目尼龍防蟲網(wǎng)直接覆蓋并固定在棚架上，棚架四周下方留Im的防蟲網(wǎng)堆在樹四周的地上并壓實，以防授粉昆蟲進入；
步驟(2)，采集花粉:當父母本樹進入盛花期時，晴天或陰天早上8:00-10:00，在父本樹上選擇24小時之內開放的花序，用規(guī)格為25 X 200mm、透明材質內壁光滑的試管取花粉，把花序放入干凈的試管內，左右各螺旋式旋轉試管4下，上下移動試管3下，讓花粉盡可能多的粘到試管內壁上，待試管內壁上能夠明顯的看到一層花粉時即可，采集完花粉的試管標上標簽，用濕毛巾包裹，試管口包在濕毛巾內，濕毛巾以不滴水為宜，得到授粉試管；
步驟(3)，人工授粉:晴天或陰天早上8:00-12:00，將步驟(2)得到的授粉試管拿到母本樹的棚架內，選擇母本24小時之內開放的花序，把花序上還未開放的小花抹去，并把超過試管長度的花朵去除，手戴上純棉白紗線手套從上到下輕輕的抹2下柱頭，把抹好的花序放入步驟(2)得到的授粉試管內，左右各螺旋式旋轉試管2下，上下移動試管2下即可完成授粉，授粉后標上標簽，注明父母本，IOd后拆去防蟲網(wǎng)。
[0023]每支步驟(2)得到的授粉試管可對4個花序進行人工授粉；
步驟(3)人工授粉的環(huán)境條件為溫度18-21°C，相對濕度60-70%，無風；人工授粉時期為2月上旬。
[0024]授粉后5個月調查最終坐果數(shù)，平均每個花序的坐果率為2.16%, 200個花序收獲種子數(shù)為820粒，自然授粉的平均每個花序的坐果率為1.00%，200個花序收獲種子380粒。
[0025]實施例4
本實施例提高澳洲堅果雜交授粉效率的方法，以澳洲堅果品種D為母本，品種0.C、HAES951為父本，各選擇5株，具體步驟同實例1，人工授粉時期為盛花期。授粉后5個月調查最終坐果數(shù)，組合DX0.C.DXHAES951平均每個花序的坐果率分別為1.08%、1.05%，每個組合授粉200個花序，收獲種子數(shù)分別為311、303粒；自然授粉的平均每個花序的坐果率為
0.40%, 200個花序收獲種子115粒。
[0026]實施例5
本實施例提高澳洲堅果雜交授粉效率的方法，以澳洲堅果品種0.C為母本，品種HAES816、HAES294、HAES344、HAES951為父本，各選擇5株，具體步驟同實例1，授粉后5個月調查最終坐果數(shù)，組合 0.CXHAES344、0.CXHAES816、0.CXHAES95U0.CXHAES294 平均每個花序的坐果率分別為0.80%,0.80%,0.65%,0.61%，每個組合授粉300個花序，收獲種子數(shù)分別為426、424、345、323粒；自然授粉的平均每個花序的坐果率為0.21%，300個花序收獲種子111粒。
【權利要求】
1.一種提高澳洲堅果雜交授粉效率的方法，其特征在于包括如下步驟: 步驟(1)，搭防蟲網(wǎng):根據(jù)育種目標選擇親本組合，在初花期的父母本堅果樹上方搭授粉棚架，將防蟲網(wǎng)直接覆蓋并固定在棚架上，棚架四周下方留0.5-lm的防蟲網(wǎng)堆在樹四周的地上并壓實； 步驟(2)，采集花粉:當父母本樹進入盛花期時，在父本樹上選擇24小時之內開放的花序，把花序放入干凈的試管內，左右各螺旋式旋轉試管3-5下，上下移動試管2-3下，采集完花粉的試管用濕毛巾包裹，得到授粉試管； 步驟(3)，人工授粉:將步驟(2)得到的授粉試管拿到母本樹的棚架內，選擇母本24小時之內開放的花序，把花序上還未開放的小花抹去，并把超過試管長度的花朵去除，手戴上純棉白紗線手套從上到下輕輕的抹1-2下柱頭，把抹好的花序放入步驟(2)得到的授粉試管內，左右各螺旋式旋轉試管2-3下，上下移動試管1-2下即可完成授粉，IOd后拆去防蟲網(wǎng)。
2.根據(jù)權利要求1所述的提高澳洲堅果雜交授粉效率的方法，其特征在于:步驟(1)中選用的防蟲網(wǎng)為80-100目。
3.根據(jù)權利要求1所述的提高澳洲堅果雜交授粉效率的方法，其特征在于:步驟(1)中選用的防蟲網(wǎng)為尼龍防蟲網(wǎng)。
4.根據(jù)權利要求1所述的提高澳洲堅果雜交授粉效率的方法，其特征在于:步驟(2)中所述的采集花粉選擇晴 天或陰天早上8:00-11:00進行采集花粉。
5.根據(jù)權利要求1所述的提高澳洲堅果雜交授粉效率的方法，其特征在于:步驟(2)中所述的試管規(guī)格為25 X 200mm,且為透明材質內壁光滑的試管。
6.根據(jù)權利要求1所述的提高澳洲堅果雜交授粉效率的方法，其特征在于:步驟(3)中所述的人工授粉選擇晴天或陰天早上9:00-12:00進行人工授粉。
7.根據(jù)權利要求1所述的提高澳洲堅果雜交授粉效率的方法，其特征在于:每支步驟(2)得到的授粉試管可對3-5個花序進行人工授粉。
8.根據(jù)權利要求1所述的提高澳洲堅果雜交授粉效率的方法，其特征在于步驟(3)人工授粉的環(huán)境條件為溫度18-21°C，相對濕度60-70%，無風或微風的天氣。
9.根據(jù)權利要求1所述的提高澳洲堅果雜交授粉效率的方法，其特征在于步驟(3)人工授粉后24小時內降中到大雨，需重新人工授粉。
10.根據(jù)權利要求1所述的提高澳洲堅果雜交授粉效率的方法，其特征在于所述的步驟(3)所述的人工授粉時期為I月下旬至2月下旬或盛花期。
【文檔編號】A01H1/02GK103999764SQ201410233516
【公開日】2014年8月27日 申請日期:2014年5月29日 優(yōu)先權日:2014年5月29日
【發(fā)明者】陶麗, 賀熙勇, 倪書邦, 陳麗蘭, 肖曉明, 陳國云, 孔廣紅 申請人:云南省熱帶作物科學研究所