一種甜玉米單倍體化學(xué)浸種加倍方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及農(nóng)業(yè)【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種甜玉米單倍體化學(xué)浸種加倍方法。該方法包含如下具體步驟：首先對(duì)甜玉米種子表面消毒，再將消毒后的種子放入含有秋水仙素的營(yíng)養(yǎng)液中進(jìn)行加倍處理，然后播種移栽；所述的加倍處理的條件為：含質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.02％秋水仙素的營(yíng)養(yǎng)液32℃下加倍處理30h、含質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.02％秋水仙素的營(yíng)養(yǎng)液32℃下加倍處理24h或含質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.06％秋水仙素的營(yíng)養(yǎng)液32℃下加倍處理30h。該方法機(jī)械損傷少、操作方便、植物藥害率低、對(duì)人體的毒害作用小，平均加倍率為11.82％～14.29％，高于傳統(tǒng)加倍方法和自然加倍方法的6～7倍，便于規(guī)模化應(yīng)用。
【專利說(shuō)明】
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及農(nóng)業(yè)【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種甜玉米單倍體化學(xué)浸種加倍方法。 一種甜玉米單倍體化學(xué)浸種加倍方法

【背景技術(shù)】
[0002] 甜玉米籽粒含有豐富和均衡的營(yíng)養(yǎng)成分，具有較好的口感，已經(jīng)成為不可或缺的 營(yíng)養(yǎng)和保健食品之一。單倍體技術(shù)因其育種周期短、效率高、自交系純度高，是玉米育種的 首選方法。
[0003] 目前，單倍體育種技術(shù)在普通玉米中應(yīng)用非常廣泛，但甜玉米的相關(guān)研究卻報(bào)道 較少。限制單倍體育種主要障礙之一是單倍體的加倍率偏低，影響因素非常多，除了加倍材 料的遺傳背景外，溫度、濕度、時(shí)間、時(shí)機(jī)、試劑的濃度與類型等均顯著影響加倍率。相關(guān)研 究在普通玉米中已經(jīng)比較全面和深入，但針對(duì)甜玉米的研究非常缺乏。甜玉米因抗性較弱， 加倍過(guò)程因藥物毒性植株極易死亡；同時(shí)其單倍體幼苗弱小、抗逆性差，對(duì)加倍過(guò)程的機(jī)械 損傷非常敏感，因此，選擇機(jī)械損傷少、操作方便的加倍方法，對(duì)甜玉米的單倍體育種應(yīng)用 非常關(guān)鍵。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)與不足，提供一種甜玉米單倍體化學(xué)浸種 加倍方法。
[0005] 本發(fā)明的目的通過(guò)下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：
[0006] -種甜玉米單倍體化學(xué)浸種加倍方法，包含如下具體步驟：
[0007] (1)種子消毒
[0008] 甜玉米單倍體種子先用乙醇消毒，再用次氯酸鈉溶液處理，之后再用無(wú)菌水沖 洗；
[0009] (2)種子加倍
[0010] 將步驟（1)中消毒過(guò)的甜玉米單倍體種子放入含有秋水仙素的營(yíng)養(yǎng)液中進(jìn)行加 倍處理，加入營(yíng)養(yǎng)液的量以恰好浸沒(méi)種子為準(zhǔn)；之后，再用清水沖洗；
[0011] ⑶播種
[0012] 將步驟（2)處理過(guò)的甜玉米種子播種到育苗盤中，常溫下育苗；
[0013] ⑷移栽
[0014] 待玉米苗長(zhǎng)至3?4片葉后，移栽至大田；
[0015] 步驟⑴中所述的甜玉米優(yōu)選為甜玉米"粵甜13號(hào)"；
[0016] 步驟⑴中所述的乙醇的體積分?jǐn)?shù)優(yōu)選為75%，消毒時(shí)間為lmin?2min ;
[0017] 步驟（1)中所述的體積分?jǐn)?shù)為75%的乙醇消毒的時(shí)間優(yōu)選為lmin ;
[0018] 步驟⑴中所述的次氯酸鈉溶液的體積分?jǐn)?shù)為15%，處理時(shí)間為15min?20min ;
[0019] 步驟（1)中所述的體積分?jǐn)?shù)為15%的次氯酸鈉溶液處理的時(shí)間優(yōu)選為15min ;
[0020] 步驟⑴中所述的無(wú)菌水的沖洗次數(shù)為3?5次；
[0021] 步驟⑴中所述的無(wú)菌水的沖洗次數(shù)優(yōu)選為3次；
[0022] 步驟（2)所述的加倍處理的條件為：含質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0. 02%秋水仙素的營(yíng)養(yǎng)液32°C 下加倍處理30h、含質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0. 02%秋水仙素的營(yíng)養(yǎng)液32°C下加倍處理24h或含質(zhì)量分 數(shù)為0. 06%秋水仙素的營(yíng)養(yǎng)液32°C下加倍處理30h ;
[0023] 步驟（2)所述的加倍處理的條件優(yōu)選為含質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0. 02%秋水仙素的營(yíng)養(yǎng)液 32°C下加倍處理30h ;
[0024] 步驟（2)中所述的營(yíng)養(yǎng)液包含MS大量元素、MS微量元素和20g/L蔗糖；
[0025] 步驟（2)中所述的清水沖洗的時(shí)間為30min?40min ;
[0026] 步驟⑵中所述的清水沖洗的時(shí)間優(yōu)選為30min ;
[0027] 步驟（3)中所述的常溫為25°C?28°C ;
[0028] 本發(fā)明相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)具有如下的優(yōu)點(diǎn)及效果：
[0029] (1)本發(fā)明提供的甜玉米單倍體化學(xué)浸種加倍方法在浸種加倍前不經(jīng)過(guò)清水浸 泡，而是經(jīng)過(guò)種子消毒后直接采用秋水仙素加倍，不僅極大地節(jié)約了種子處理時(shí)間，更重要 的是可有效降低甜玉米單倍體種子的藥害率，提高加倍效率；
[0030] (2)本發(fā)明提供的甜玉米單倍體化學(xué)浸種加倍方法秋水仙素使用濃度低，在減少 化學(xué)藥品消耗、有效地降低實(shí)驗(yàn)成本的同時(shí)，可有效地降低甜玉米苗的藥害率，以及減輕播 種時(shí)對(duì)人體的毒害作用；
[0031] (3)本發(fā)明提供的甜玉米單倍體化學(xué)浸種加倍方法平均加倍率為11. 82 %? 14. 29%，加倍率明顯高于改良前的傳統(tǒng)化學(xué)浸種加倍方法，便于規(guī)?；瘧?yīng)用。

【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0032] 圖1是秋水仙素濃度對(duì)甜玉米單倍體植株的散粉率、結(jié)實(shí)率和藥害率影響的結(jié)果 分析圖。
[0033] 圖2是加倍時(shí)間對(duì)甜玉米單倍體植株的散粉率、結(jié)實(shí)率和藥害率影響的結(jié)果分析 圖。
[0034] 圖3是加倍溫度對(duì)甜玉米單倍體植株的散粉率、結(jié)實(shí)率和藥害率影響的結(jié)果分析 圖。

【具體實(shí)施方式】
[0035] 下面結(jié)合實(shí)施例和附圖對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的描述，但本發(fā)明的實(shí)施方式不限 于此。
[0036] 實(shí)施例和對(duì)比實(shí)施例數(shù)據(jù)計(jì)算方式：
[0037] 散粉率（％ )=散粉株數(shù)/存活雙單倍體數(shù)X 100%
[0038] 藥害率（％ )=藥害株數(shù)/出苗數(shù)X 100%
[0039] 結(jié)實(shí)率（％)=結(jié)實(shí)株數(shù)/存活雙單倍體數(shù)X 100%
[0040] 實(shí)施例中所用甜玉米品種"粵甜13號(hào)"由廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物研究所玉米室提 供，秋水仙素購(gòu)于廣州市叢源儀器有限公司，表1為營(yíng)養(yǎng)液詳細(xì)配方。
[0041] 表1營(yíng)養(yǎng)液配方
[0042]

【權(quán)利要求】
1. 一種甜玉米單倍體化學(xué)浸種加倍方法，其特征在于包含如下具體步驟： (1) 種子消毒 甜玉米單倍體種子先用乙醇消毒，再用次氯酸鈉溶液處理，之后再用無(wú)菌水沖洗； (2) 種子加倍 將步驟（1)中消毒過(guò)的甜玉米單倍體種子放入含有秋水仙素的營(yíng)養(yǎng)液中進(jìn)行加倍處 理，加入營(yíng)養(yǎng)液的量以恰好浸沒(méi)種子為準(zhǔn)；之后，再用清水沖洗； (3) 播種 將步驟（2)處理過(guò)的甜玉米種子播種到育苗盤中，常溫下育苗； (4) 移栽 待玉米苗長(zhǎng)至3?4片葉后，移栽至大田。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的甜玉米單倍體化學(xué)浸種加倍方法，其特征在于： 步驟（1)中所述的甜玉米為甜玉米"粵甜13號(hào)"。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的甜玉米單倍體化學(xué)浸種加倍方法，其特征在于： 步驟（2)所述的加倍處理的條件為：含質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0. 02%秋水仙素的營(yíng)養(yǎng)液32°C下加 倍處理30h、含質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0. 02%秋水仙素的營(yíng)養(yǎng)液32°C下加倍處理24h或含質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 0. 06 %秋水仙素的營(yíng)養(yǎng)液32°C下加倍處理30h。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的甜玉米單倍體化學(xué)浸種加倍方法，其特征在于： 步驟（2)所述的加倍處理的條件為含質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.02%秋水仙素的營(yíng)養(yǎng)液32°C下加 倍處理30h。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的甜玉米單倍體化學(xué)浸種加倍方法，其特征在于： 步驟（1)中所述的乙醇的體積分?jǐn)?shù)為75%，消毒時(shí)間為lmin?2min。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的甜玉米單倍體化學(xué)浸種加倍方法，其特征在于： 步驟（1)中所述的體積分?jǐn)?shù)為75%的乙醇消毒的時(shí)間優(yōu)選為lmin。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的甜玉米單倍體化學(xué)浸種加倍方法，其特征在于： 步驟（1)中所述的次氯酸鈉溶液的體積分?jǐn)?shù)為15%，處理時(shí)間為15min?20min。
8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的甜玉米單倍體化學(xué)浸種加倍方法，其特征在于： 步驟（1)中所述的體積分?jǐn)?shù)為15%的次氯酸鈉溶液處理的時(shí)間為15min。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的甜玉米單倍體化學(xué)浸種加倍方法，其特征在于： 步驟（1)中所述的無(wú)菌水的沖洗次數(shù)為3?5 ; 步驟（2)中所述的清水沖洗的時(shí)間為30min?40min。
10. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的甜玉米單倍體化學(xué)浸種加倍方法，其特征在于： 步驟（2)中所述的營(yíng)養(yǎng)液包含MS大量元素、MS微量元素和20g/L鹿糖。
【文檔編號(hào)】A01H1/08GK104082132SQ201410290716
【公開日】2014年10月8日 申請(qǐng)日期:2014年6月24日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月24日
【發(fā)明者】胡建廣, 李高科, 陳新振, 李春艷 申請(qǐng)人:廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物研究所