一種秦嶺細(xì)鱗鮭人工繁殖方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種秦嶺細(xì)鱗鮭人工繁殖方法，步驟是：A、篩選成熟、活力強(qiáng)的秦嶺細(xì)鱗鮭作為親本；B、親本強(qiáng)化培育；C、人工催產(chǎn)：選擇3月底至4月中旬，采用兩針注射進(jìn)行催產(chǎn)；D、人工采精卵：注射催產(chǎn)藥物后的親本分養(yǎng)在催產(chǎn)池，在催產(chǎn)池一端架設(shè)進(jìn)水管，選秦嶺細(xì)鱗鮭親魚采用腹部節(jié)律擠壓進(jìn)行活體采精卵；E、人工授精：采到卵后，用魚用生理鹽水漂洗，將雄魚的精液擠于卵上，后用羽毛攪拌，進(jìn)行人工授精；F、人工孵化：將受精卵用純凈水清洗，倒入底部有多空篦子的孵化槽中孵化，待魚苗沖游出現(xiàn)后，移出孵化設(shè)備，轉(zhuǎn)至魚盆培育。方法易行，操作簡便，其受精率和孵化率高，所得子代魚體健壯、勻稱，成活率和餌料利用率高，生長速度快。
【專利說明】一種秦嶺細(xì)鱗鮭人工繁殖方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于瀕危野生動物種質(zhì)資源保護(hù)【技術(shù)領(lǐng)域】，具體為一種秦嶺細(xì)鱗鮭人工繁 殖方法。其方法適用于秦嶺細(xì)鱗鮭自然種群恢復(fù)及人工保種方面。

【背景技術(shù)】
[0002] 秦嶺細(xì)鱗鮭俗稱花魚、五色魚、梅花魚，隸 屬鮭形目（Saloniformes)、鮭科（Salmonidae)為我國特有種、局部分布的陸封型冷水性魚 類。秦嶺細(xì)鱗鮭分布范圍極為狹窄，棲息水域條件嚴(yán)格，天然種群稀少，僅分布于秦嶺太白 山峯東麓的黑河，北麓的石頭河、南麓的滑水河和太白河，隴縣的千河支流及甘肅渭河上游 及支流（陜西省動物所等，1987)。由于自然和人為因素的雙重影響，秦嶺細(xì)鱗鮭棲息與生 存環(huán)境日趨惡化，種質(zhì)資源受到嚴(yán)重破壞，已被列入國家二級野生保護(hù)動物(樂珮琦和陳宜 瑜，1998)，對秦嶺細(xì)鱗鮭的保護(hù)已經(jīng)刻不容緩。隨著人工繁殖、苗種培育及各種養(yǎng)殖方式的 日趨成熟，加之我國加大對瀕危物種保護(hù)重視，采用人工繁殖技術(shù)保護(hù)秦嶺細(xì)鱗鮭資源成 為最行之有效的手段。但由于秦嶺細(xì)鱗鮭個體小型化嚴(yán)重，性成熟資源量銳減，生境條件苛 亥IJ,加之秦嶺細(xì)鱗鮭性急躁、喜跳善游，體表黏液少，體被細(xì)鱗，體內(nèi)魚骨相對細(xì)小,應(yīng)激性 強(qiáng)等特點，其親本容易擦傷起病致死(施德亮等，2012)。另外，秦嶺細(xì)鱗鮭為肉食性冷水魚 類，雌魚絕對懷卵量??；在自然環(huán)境中受精率、孵化率和成活率低，且生長速度慢、生長周期 長、人工馴養(yǎng)較難；性成熟一般需要3?4年，500 g魚生長周期一般在4?5年，這增加秦 嶺細(xì)鱗鮭種質(zhì)資源恢復(fù)的難度。近年來，通過多年實踐探索，研究出一種成熟、高效的秦嶺 細(xì)鱗鮭親魚培育和人工催產(chǎn)技術(shù)，提高了受精率、孵化率和苗種成活率。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 鑒于上述問題，本發(fā)明的目的是在于提供了一種秦嶺細(xì)鱗鮭人工繁殖方法，方法 易行，操作簡便，親魚具有穩(wěn)定的產(chǎn)卵量和排精量，其受精率和孵化率高，所得子代魚體健 壯、勻稱，成活率和餌料利用率高，具有較強(qiáng)的環(huán)境耐受性和抗病力，生長速度快。
[0004] 為了實現(xiàn)上述的目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)措施： 一種秦嶺細(xì)鱗鮭人工繁殖方法，其步驟是： 1) 篩選成熟、活力強(qiáng)的秦嶺細(xì)鱗鮭作為親本， 2) 親本強(qiáng)化培育： a)按雌雄比例為1 :2?3,放養(yǎng)量為5?8尾/m3,投喂黃粉蟲或夜間懸掛黑光燈，自2 月底開始，加大水流量（〇. 05?0. 1 m3/s)，促進(jìn)秦嶺細(xì)鱗鮭親魚的性腺發(fā)育。
[0005] b)自3月初（2?8日）開始，每日監(jiān)測水溫，水溫達(dá)到6?7 °C，開始減食，后每 隔3?5天進(jìn)行聚維酮碘水體消毒(不停水，在進(jìn)水口進(jìn)行潑灑，使用濃度為3?5 mg/L)， 催產(chǎn)前5?7天停食，并停止水體消毒。水溫接近繁殖溫度（8?9°C )時，雌雄親魚進(jìn)行分 池培育。
[0006] 3)人工催產(chǎn)： 選擇3月底（28 - 31日）至4月中旬（13 - 17日），采用兩針注射進(jìn)行催產(chǎn)，第一針對 親本注射催產(chǎn)藥物DOM與LHRH-A2的混合物，每1000 g秦嶺細(xì)鱗鮭雌魚劑量為：DOM 2?4 mg + LHRH-A2 7?10 μ8,秦嶺細(xì)鱗鮭雄魚注射劑量減半。24?48 h注射第二針，每1000 g 秦嶺細(xì)鱗鮭雌魚注射劑量為DOM 1?2 mg + LHRH_A2 3?5 +維生素 B12 4 μ8,秦嶺細(xì)鱗鮭 雄魚注射劑量減半或者不注射。
[0007] 4)人工采精卵： 注射催產(chǎn)藥物后的親本分養(yǎng)在催產(chǎn)池，在催產(chǎn)池一端架設(shè)進(jìn)水管，離水面高度〇. 5? 1.0 m，水流量控制在0. 1?0. 15 m3/s，周圍用1.5 m進(jìn)行圈圍，防止親魚跳出催產(chǎn)池，待效 應(yīng)期后，選秦嶺細(xì)鱗鮭親魚采用腹部節(jié)律擠壓進(jìn)行活體采精卵，雌雄親本比例為1 :1?3。
[0008] 5)人工授精： 采到卵后，用魚用生理鹽水漂洗2?3次，迅速將雄魚的精液擠于卵上，后用羽毛輕輕 攪拌2?3分鐘，進(jìn)行人工授精。
[0009] 6)人工孵化： 將受精卵用純凈水進(jìn)行多次（2?3次）清洗，每次為30秒，緩慢倒入底部有多空篦子 的孵化槽中孵化。所述的孵化密度為8萬/m3,采用下端進(jìn)水，水流以魚卵不粘黏為度，每日 早晚在進(jìn)水口倒入粗鹽（Nacl含量：彡90 %) 2?3 kg，待魚苗沖游出現(xiàn)后，移出孵化設(shè)備， 轉(zhuǎn)至魚盆或網(wǎng)箱進(jìn)行苗種培育。
[0010] 所述的步驟1中篩選體重〇. 25?0. 4 kg，3?4齡以上性成熟的秦嶺細(xì)鱗鮭作為 親本。
[0011] 所述的步驟2中a步驟中培育池設(shè)計為河渠狀水泥池，形成落差，池底鋪設(shè)礫石 和石塊，進(jìn)水口端設(shè)置噴水管或揚水設(shè)施(單相潛水電泵QD6-32/3-1. 1，口徑40 mm),進(jìn)水 口下方水深加大，形成人工深潭（1. 2?1. 5 m)，每個渠道體積約為16?20 m3,平均水深為 0. 5?0. 8 m,排水方便，池水水質(zhì)透明度為0. 5?0. 7 m,溶氧高于8 mg/L。
[0012] 所述的步驟3中催產(chǎn)時水溫達(dá)到8?12°C時，進(jìn)行人工催產(chǎn)。
[0013] 所述的步驟3采用兩針注射，D0M與LHRH_A2的混合劑，每尾親本注射量小于或等 于2 ml混合劑量，第一針對親本注射催產(chǎn)藥物D0M與LHRH-A2的混合劑，每1000 g秦嶺細(xì) 鱗鮭雌魚劑量為：DOM 3 mg + LHRH-A2 8?9 Pg，24?48 h注射第二針，每1000 g秦嶺細(xì)鱗 鮭雌魚注射劑量為DOM 1. 5 mg + LHRH-A2 4 Pg +維生素 B12 4 Pg。
[0014] 所述的步驟4中催產(chǎn)池平均水深0. 5 m，架設(shè)進(jìn)水管管口高度離水面0. 5 m，周圍用 細(xì)網(wǎng)進(jìn)彳丁圈圍，防止魚體跳出和擦傷。
[0015] 所述的步驟5人工采卵后先用魚用生理鹽水漂洗，后迅速將精液擠在卵上用羽毛 攪拌。
[0016] 所述的步驟6人工授精后，迅速用純凈水淘洗2?3次，每次為30秒，緩慢倒入底 部有多空篦子的孵化槽中孵化，孵化密度為8萬/m 3,采用下端進(jìn)水，水流以魚卵不粘黏為 度。
[0017] 所述的步驟6每日早晚在進(jìn)水口倒入粗鹽2?3 kg進(jìn)行水體過濾消毒。
[0018] 所述的步驟6水溫為8?9 °C時，孵化出膜時間為450?480 h。
[0019] 所述的步驟6水溫為10?12 °C時，孵化出膜時間為408?445 h。
[0020] 本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下優(yōu)點和效果： 上述一種秦嶺細(xì)鱗鮭人工繁殖方法，通過人工調(diào)控環(huán)境因子，使雌雄魚性腺發(fā)育基本 同步，保證人工催產(chǎn)順利進(jìn)行，方法簡單，可操作性強(qiáng)，實踐應(yīng)用性好，其受精率高于90. 00 %，孵化率高于83. 00 %，成活率高于90. 00 %，和其余鮭鱒冷水魚類繁殖一樣，完全適用于苗 種的規(guī)?；a(chǎn)，從而用于秦嶺細(xì)鱗鮭物種資源保護(hù)及其自然種群恢復(fù)。

【具體實施方式】
[0021] 以下結(jié)合具體的實施方式，對本發(fā)明進(jìn)一步說明。
[0022] 實施例1 : 一種秦嶺細(xì)鱗鮭人工繁殖方法，其步驟是： 1.親本選擇： 篩選體重在0. 25?0. 4 kg成熟、活力強(qiáng)的秦嶺細(xì)鱗鮭作為親本。
[0023] 2.親本強(qiáng)化培育： 自然條件下，秦嶺細(xì)鱗鮭生活習(xí)性特殊，棲息地條件苛刻，且其雄魚性腺發(fā) 育早于雌魚。因此，為了促使親本對人工設(shè)施適應(yīng)，并保證雌雄魚性腺發(fā)育同步，順利 進(jìn)行人工繁殖，需要對親本進(jìn)行仿生態(tài)模擬強(qiáng)化培育，并人工調(diào)控雌雄親本的性腺發(fā)育。
[0024] a)秦嶺細(xì)鱗鮭親魚的強(qiáng)化培育：建設(shè)仿生態(tài)模擬配培育池，培育池設(shè)計為河渠 狀水泥池，形成落差，池底鋪設(shè)礫石和石塊，進(jìn)水口端設(shè)置噴水管或揚水設(shè)施，進(jìn)水口 下方水深加大，形成人工深潭（1. 2?1. 5 m)，每個渠道體積約為16或17或18或19或20 m3,平均水深為0. 5或0. 6或0. 7或0. 8 m，排水方便，池水水質(zhì)透明度為0. 5或0. 6或0. 7 m，溶氧高于8 mg/L，放養(yǎng)量為20或25或35或40尾/m3,雌雄比例為1 :2,黃粉蟲為親魚餌 料投喂，同時伴乳酸恩諾沙星1 g/kg餌料，一周內(nèi)連續(xù)投喂3天，每隔一周使用。自2月底， 加大水流量進(jìn)行流水刺激，促進(jìn)秦嶺細(xì)鱗鮭親魚的性腺發(fā)育； b)從3月中旬抽用井水進(jìn)行人工調(diào)控，減少極溫差值（8?12°C )，維持日均溫穩(wěn)定 (10?11°C )，促進(jìn)秦嶺細(xì)鱗鮭雌雄親魚性腺發(fā)育同步；每隔3或4或5天進(jìn)行聚維酮碘水 體消毒，催產(chǎn)前5或6或7天停止投喂，并停止水體消毒。水溫接近繁殖溫度（8?9°C )時 雌雄親魚分池培育，以避免親魚個別自產(chǎn)。
[0025] 3.人工催產(chǎn)： (1)雌雄鑒別與配比： 秦嶺細(xì)鱗鮭雌魚在生殖季節(jié)胸鰭、腹鰭手摸硬度增加，體色為青褐色，體側(cè)伴有橙紅色 帶狀條紋，生殖孔突起呈棕紅色；而雄魚在生殖季節(jié)胸鰭、腹鰭手摸較為柔軟，體色為黑褐 色，體側(cè)伴有絳紅色條紋，生殖孔錐形明顯呈紅褐色。
[0026] (2)成熟親魚的選擇： 秦嶺細(xì)鱗鮭雌魚：腹部均為膨大，柔軟、彈性強(qiáng)，觸摸腹壁有豐滿和松軟感，即為性腺發(fā) 育良好。秦嶺細(xì)鱗鮭雄魚：輕壓腹部兩側(cè)有乳白色黏稠狀的精液流出且遇水立即散開。
[0027] (3)注射催產(chǎn)劑與劑量： 注射方法一般采用胸腔注射，部分為胸鰭基部或腹鰭基部，采用兩次注射，藥物為馬來 酸地歐酮（D0M)和促黃體素釋放激素 A2 (LHRH-A2)的混合物，第二針劑量減半，添加維生素 B12混合；雄魚劑量均減半使用。
[0028] (4)人工催產(chǎn)的藥物使用： 選擇3月下旬至4月中旬，分別對兩種親本注射催產(chǎn)藥物DOM(馬來酸地歐酮，寧波，三 生藥業(yè)有限公司）與LHRH-A2 (促黃體素釋放激素 A2，寧波，三生藥業(yè)有限公司）的混合物， 每1000 g秦嶺細(xì)鱗鮭親魚的劑量：DOM 3 mg + LHRH-A2 8?9 Pg混合劑；24或28或32或36 或40或44或48 h注射第二針，每1000 g秦嶺細(xì)鱗鮭親魚注射劑量為DOM 1. 5 mg + LHRH-A2 4 Pg +維生素 B12 4 Pg混合劑，以上雄魚劑量減半。效應(yīng)時間與水溫相關(guān)，水溫8或9 °C，秦 嶺細(xì)鱗鮭雌魚效應(yīng)時間為48或55或62或70或82或88 h，雄魚效應(yīng)時間為36或39或44 或46或48 h ;水溫10或11或12 °C，秦嶺細(xì)鱗鮭雌魚效應(yīng)時間為24或27或29或32或34 或36 h，雄魚效應(yīng)為12或15或18或21或24 h，因此雌魚要早于12 h注射催產(chǎn)藥物，不同 溫度下秦嶺細(xì)鱗鮭雌魚的催產(chǎn)效應(yīng)時間表，見表1。
[0029] 表1不同溫度下秦嶺細(xì)鱗鮭雌雄親魚的催產(chǎn)效應(yīng)時間

【權(quán)利要求】
1. 一種秦嶺細(xì)鱗鮭人工繁殖方法，其步驟是： A、 篩選成熟、活力強(qiáng)的秦嶺細(xì)鱗鮭作為親本，篩選體重0. 25?0. 4 kg，3?4齡的秦嶺 細(xì)鱗鮭作為親本； B、 親本培育： a) 按雌雄比例為1 :2?3,放養(yǎng)量為5?8尾/m3,投喂黃粉蟲或夜間懸掛黑光燈，自2 月底開始，加大水流量〇. 05?0. lm3/s ; b) 自3月初開始，每日監(jiān)測水溫，水溫達(dá)到6?7 °C，開始減食，后每隔3?5天進(jìn)行 聚維酮碘水體消毒：不停水，在進(jìn)水口進(jìn)行潑灑，使用濃度為3?5 mg/L，催產(chǎn)前5?7天停 食，并停止水體消毒，水溫接近繁殖溫度時，雌雄親魚進(jìn)行分池培育； C、 人工催產(chǎn)：選擇3月底至4月中旬，采用兩針注射進(jìn)行催產(chǎn)，第一針對親本注射催產(chǎn) 藥物DOM與LHRH-A2的混合物，每1000 g秦嶺細(xì)鱗鮭雌魚劑量為：DOM 2?4 mg + LHRH-A2 7?10 μ8,秦嶺細(xì)鱗鮭雄魚注射劑量減半，24?48 h注射第二針，每1000 g秦嶺細(xì)鱗鮭雌 魚注射劑量為DOM 1?2 mg + LHRH_A2 3?5 +維生素 B12 4 μ8,秦嶺細(xì)鱗鮭雄魚注射劑量 減半或不注射； D、 人工采精卵：注射催產(chǎn)藥物后的親本分養(yǎng)在催產(chǎn)池，在催產(chǎn)池一端架設(shè)進(jìn)水管，離水 面高度0.5?1.0 m，水流量控制在0. 1?0. 15 m3/s，周圍用1.5 m進(jìn)行圈圍，選秦嶺細(xì)鱗鮭 親魚采用腹部節(jié)律擠壓進(jìn)行活體采精卵，雌雄親本比例為1 :1?3 ; E、 人工授精：采到卵后，用魚用生理鹽水漂洗2?3次，將雄魚的精液擠于卵上，后用 羽毛攪拌2?3分鐘，進(jìn)行人工授精； F、 人工孵化：將受精卵用純凈水進(jìn)行2?3次清洗，每次為30秒，倒入孵化槽中孵化， 所述的孵化密度為8萬/m3,采用下端進(jìn)水，水流以魚卵不粘黏為度，每日早晚在進(jìn)水口倒入 粗鹽2?3 kg，待魚苗沖游出現(xiàn)后，移出孵化設(shè)備，轉(zhuǎn)至魚盆或網(wǎng)箱進(jìn)行苗種培育； 所述的步驟B中a步驟培育池設(shè)計為河渠狀水泥池，形成落差，池底鋪設(shè)礫石和石塊， 進(jìn)水口端設(shè)置噴水管或揚水設(shè)施，進(jìn)水口下方水深加大，形成人工深潭，每個渠道體積為 16?20 m3,水深為0· 5?0· 8 m,排水方便，池水水質(zhì)透明度為0· 5?0· 7 m,溶氧高于8 mg/ L ； 所述的步驟C中催產(chǎn)時水溫達(dá)到8?12°C時，進(jìn)行人工催產(chǎn)。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種秦嶺細(xì)鱗鮭人工繁殖方法，其特征在于：所述的步驟C 采用兩針注射，DOM與LHRH-A2的混合劑，每尾親本注射量小于或等于2 ml混合劑量，第一 針對親本注射催產(chǎn)藥物DOM與LHRH-A2的混合劑，每1000 g秦嶺細(xì)鱗鮭雌魚劑量為：DOM 3 mg + LHRH-A2 8?9 Pg，24?48 h注射第二針，每1000g秦嶺細(xì)鱗鮭雌魚注射劑量為DOM 1. 5 mg + LHRH-A2 4 Pg + 維生素 B12 4 Pg。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種秦嶺細(xì)鱗鮭人工繁殖方法，其特征在于：所述的步驟D 中催產(chǎn)池平均水深0. 5 m，架設(shè)進(jìn)水管管口高度離水面0. 5 m，周圍用細(xì)網(wǎng)進(jìn)行圈圍。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種秦嶺細(xì)鱗鮭人工繁殖方法，其特征在于：所述的步驟F 水溫為8?9 °C時，孵化出膜時間為450?480 h。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種秦嶺細(xì)鱗鮭人工繁殖方法，其特征在于：所述的步驟F 水溫為10?12 °C時，孵化出膜時間為408?445 h。
【文檔編號】A01K67/02GK104041457SQ201410319444
【公開日】2014年9月17日 申請日期:2014年7月7日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月7日
【發(fā)明者】邵儉, 危起偉, 吳金明, 孫慶亮 申請人:中國水產(chǎn)科學(xué)研究院長江水產(chǎn)研究所