一種條斑紫菜無配生殖育種方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種條斑紫菜無配生殖育種方法，包括：根據(jù)育種目的選擇所需性狀表達(dá)的單株條斑紫菜葉狀體，葉狀體表面經(jīng)過清洗、陰干、冷凍；將冷凍后的藻體取出，再清洗，分離切取微片組織；微片組織在弱光、15～18℃，PES培養(yǎng)液或煮沸海水加N、P的培養(yǎng)液條件下靜止培養(yǎng)，得到種質(zhì)絲狀體。本發(fā)明通過使目標(biāo)組織不經(jīng)過有性生殖，而是通過無配生殖的途徑形成種質(zhì)絲狀體，并作為種源可長年保存，可隨時擴(kuò)增使用；彌補(bǔ)、縮短了傳統(tǒng)紫菜選育過程中種質(zhì)反復(fù)提純選育的時間，為獲取更多具有優(yōu)良性狀的條斑紫菜純系種質(zhì)創(chuàng)造了條件和可能。
【專利說明】一種條斑紫菜無配生殖育種方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于紫菜育種領(lǐng)域，特別涉及一種條斑紫菜無配生殖育種方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 紫菜葉狀體是其生活史中的單倍體世代，無法作為種苗保存，而其絲狀體階段為 雙倍體世代可以作為種苗長期保存。條斑紫菜葉狀體雌雄同株，屬于雌雄生殖細(xì)胞混生型 種類，其自交率達(dá)到50 %，果孢子是受精產(chǎn)物，由它萌發(fā)長成的是絲狀體。為此，傳統(tǒng)生產(chǎn)采 用果孢子進(jìn)行采苗培育種苗，在種源遺傳背景方面有不確定性，無法避免種群的同質(zhì)化，種 質(zhì)性狀質(zhì)量下降快的問題。從國內(nèi)外紫菜育種研究進(jìn)展來看，選育是早期形成的育種技術(shù) 方法，對紫菜栽培產(chǎn)業(yè)影響最大，至今仍是種質(zhì)改良的主要途徑，然而存在時間長、育種效 率低的問題。
[0003] 目前，紫菜遺傳學(xué)研究進(jìn)展對紫菜育種理論及技術(shù)方法也產(chǎn)生了重要影響。特別 是有關(guān)紫菜的減數(shù)分裂位置已基本弄清了紫菜的遺傳學(xué)特征，認(rèn)識到殼孢子萌發(fā)形成的條 斑紫菜葉狀體是具有四分子性質(zhì)的特殊生長體。由于殼孢子萌發(fā)經(jīng)過減數(shù)分裂后形成的4 個配子是不能自由分離，因而決定其發(fā)生的葉狀體植株是具不同遺傳背景藻體組織的嵌合 體，若沒有顏色標(biāo)記則無法區(qū)分配子組織之間的差異。
[0004] 選擇已知性狀葉狀體藻體，取微小組織切塊（盡可能減少不同配子組織的差異）， 在控制的條件下進(jìn)行組織培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)細(xì)胞經(jīng)多態(tài)變化直接萌發(fā)成絲狀體，而其中并無 雌雄生殖細(xì)胞（雌雄配子）的出現(xiàn)及受精過程，這些切塊細(xì)胞經(jīng)類似于愈傷組織的途徑、通 過無配生殖直接轉(zhuǎn)化成絲狀體，并且形成的絲狀體可以完成生活史。這一方法大大縮短了 自交提純的育種時間。關(guān)于無配生殖在海藻中，例如在海帶目植物中是指雄性配子體細(xì)胞 直接發(fā)育成孢子體的過程，海帶雌性配子體細(xì)胞不經(jīng)受精發(fā)育為孢子體的過程稱謂孤雌生 殖，這兩種生殖方式都具無配生殖的特征與性質(zhì)。紫菜組織培養(yǎng)的結(jié)果表明無配生殖在紫 菜物種中的真實(shí)性和普遍性。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種條斑紫菜無配生殖育種方法，該方法克服 了以往條斑紫菜良種選育過程中耗時長的問題。
[0006] 本發(fā)明的一種條斑紫菜無配生殖育種方法，包括：
[0007] 根據(jù)育種目的選擇所需性狀表達(dá)的單株條斑紫菜葉狀體，葉狀體表面經(jīng)過清洗、 陰干、冷凍；將冷凍后的藻體取出，再清洗，分離切取微片組織；微片組織在弱光、15? 18°C，PES培養(yǎng)液（Provasoli，1963)或煮沸海水加 N、P的培養(yǎng)液條件下靜止培養(yǎng)，得到種 質(zhì)絲狀體。
[0008] 所述葉狀體為單株條斑紫菜葉狀體。
[0009] 所述葉狀體表面經(jīng)過消毒海水（煮沸）反復(fù)清洗，包括冷凍后的藻體也需反復(fù)清 洗，才能減少組織培養(yǎng)過程中的污染。
【權(quán)利要求】
1. 一種條斑紫菜無配生殖育種方法，包括： 根據(jù)育種目的選擇所需性狀表達(dá)的單株條斑紫菜葉狀體，葉狀體表面經(jīng)過清洗、陰干、 冷凍；將冷凍后的藻體取出，再清洗，分離切取微片組織；微片組織在弱光、15?18°C，PES 培養(yǎng)液或煮沸海水加 N、P的培養(yǎng)液條件下靜止培養(yǎng)，得到種質(zhì)絲狀體。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種條斑紫菜無配生殖育種方法，其特征在于：所述葉狀體 為單株條斑紫菜葉狀體。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種條斑紫菜無配生殖育種方法，其特征在于：所述葉狀體 表面經(jīng)過消毒海水反復(fù)清洗、陰干后冷凍，冷凍溫度為-18°C。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種條斑紫菜無配生殖育種方法，其特征在于：所述分離切 取的微片組織大小為〇. 5X0. 5cm。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種條斑紫菜無配生殖育種方法，其特征在于：所述弱光具 體為弱光 1，〇〇〇 ?2, OOOLx，12L: 12D。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種條斑紫菜無配生殖育種方法，其特征在于：操作都在隔 離的環(huán)境中進(jìn)行。
【文檔編號】A01H4/00GK104094847SQ201410320849
【公開日】2014年10月15日 申請日期:2014年7月4日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月4日
【發(fā)明者】朱建一, 陸勤勤, 周偉, 姜紅霞, 張濤, 胡傳明, 姜波, 張美如 申請人:常熟理工學(xué)院