一種蘋果砧木t337快速繁殖的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種蘋果砧木T337快速繁殖的方法，該蘋果砧木T337快速繁殖的方法，通過采用培養(yǎng)基為MS+6-BA0.5mg/L+IBA0.1mg+PVP500mg/L的培養(yǎng)基初代培養(yǎng)、采用MS(NH4+0.75mg/L，K+2.2mg/L)+6-BA0.6mg/L+IBA0.5mg/L處理的繼代培養(yǎng)、采用生根培養(yǎng)基1/2MS+IBA0.9mg/L的生根培養(yǎng)、用純鋸末的煉苗移栽；實(shí)現(xiàn)了蘋果砧木T337快速的繁殖，不僅保證了較高的成活率，而且也保留了砧木的優(yōu)良特性，為蘋果產(chǎn)業(yè)的發(fā)展和進(jìn)一步擴(kuò)大提供了便捷的方法和途徑。
【專利說明】一種蘋果砧木T337快速繁殖的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于蘋果苗木栽培【技術(shù)領(lǐng)域】，尤其涉及一種蘋果砧木T337快速繁殖的方 法。

【背景技術(shù)】
[0002] 蘋果產(chǎn)業(yè)在中國農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)中占有非常重要的地位，2013年中國蘋果種植面積 225.3萬公頃，產(chǎn)量為3170萬噸。占世界總產(chǎn)量的1/2。目前，我國的蘋果生產(chǎn)模式由傳統(tǒng) 低效郁閉果園模式逐步的轉(zhuǎn)變?yōu)楝F(xiàn)代化矮砧密植集約高效生產(chǎn)栽培模式、并由世界蘋果生 產(chǎn)大國逐步的轉(zhuǎn)變?yōu)樘O果產(chǎn)業(yè)強(qiáng)國。蘋果苗木是蘋果生產(chǎn)栽培的基礎(chǔ)，苗木的質(zhì)量直接影 響著蘋果樹體的生長、開花、結(jié)果以及抗逆性、抗病能力和壽命。苗木受到病毒的侵染之后， 樹體正常的細(xì)胞增殖，就會(huì)受到破壞，嚴(yán)重的話會(huì)影響果樹的生長勢(shì)、果實(shí)品質(zhì)和產(chǎn)量等正 常生理機(jī)制，這成為中國蘋果產(chǎn)業(yè)發(fā)展的隱患。今后一段時(shí)期是我國蘋果大規(guī)模更新?lián)Q代 的關(guān)鍵時(shí)期，如何從苗木方面提供支持和保障便成為一個(gè)值得高度重視的問題。目前，我國 矮化蘋果苗木市場(chǎng)供不應(yīng)求，限制苗木產(chǎn)業(yè)發(fā)展的關(guān)鍵在于，一方面缺乏適應(yīng)性廣優(yōu)良矮 化砧木，另一方面對(duì)現(xiàn)有矮化砧木繁育技術(shù)尚未取得突破。蘋果砧木T337是由'M9'選育 出來的脫毒矮化砧木優(yōu)系，其具有結(jié)果早、適應(yīng)性廣、干性強(qiáng)、易成花、結(jié)果大小均勻、豐產(chǎn) 性好等特點(diǎn)，目前已成為世界各國應(yīng)用最廣泛的脫毒矮化砧木，其特別適宜于矮砧集約栽 培模式下的高紡錘形樹形。本發(fā)明建立一種蘋果砧木T337快速繁殖的方法，對(duì)于生產(chǎn)優(yōu)質(zhì) 矮化無病毒苗木，具有重要意義，市場(chǎng)前景廣闊。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明實(shí)施例的目的在于提供一種蘋果砧木T337快速繁殖的方法，旨在為我國 蘋果苗木的栽培提供一種快速繁殖的方法，以加快我國蘋果大規(guī)模更新?lián)Q代。
[0004] 本發(fā)明實(shí)施例是這樣實(shí)現(xiàn)的，一種蘋果砧木T337快速繁殖的方法，該蘋果砧木 T337快速繁殖的方法包括以下步驟：
[0005] 步驟一，以蘋果砧木T337為材料，選擇生長健壯無病蟲害的母樹，于3月份取1年 生枝條，放置25°C的溫室內(nèi)進(jìn)行水培，每升水含有30g蔗糖，每隔3d換一次水并剪掉舊剪 口，當(dāng)水培的一年生枝條上的芽抽生為1. 5?2. 0cm時(shí)，剪取嫩芽，去除展開葉片，在自來水 下沖洗6?8h，用75 %酒精處理8s，0. 1 %升萊處理7min ;
[0006] 步驟二，進(jìn)行消毒處理后，用超聲波清洗機(jī)清洗3min，再用無菌水沖洗3?4次，將 處理好的嫩芽接種到MS+6-BA0. 5mg/L+IBA0. lmg+PVP (聚乙烯吡咯烷酮）500mg/L的培養(yǎng)基 中進(jìn)行培養(yǎng)，每升培養(yǎng)基附加30g蔗糖，8g瓊脂，然后放置在光照16h/d、光照20001u X，26°C 條件下進(jìn)行培養(yǎng)；
[0007] 步驟三，將獲得的T337無菌外植體接種最優(yōu)培養(yǎng)基處理M14,即MS (NH4+0. 75mg/ L，K+2. 2mg/L)+6-BA0. 6mg/L+IBA0. 5mg/L 瓊脂 8g/L，光照 20001ux 的培養(yǎng)基中進(jìn)行繼代培 養(yǎng)，每升附加30g蔗糖，8g瓊脂；
[0008] 步驟四，選擇繼代培養(yǎng)獲得的生長健壯，高度大于1. 5cm，生長時(shí)間為20天的芽 子，接種于1/2MS+IBA0. 9mg/L (蔗糖30g/L，瓊脂8g/L)生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)；
[0009] 步驟五，當(dāng)組培苗根長度達(dá)到2cm后，移到室外遮陰煉苗10?12天左右，然后將 培養(yǎng)容器瓶口打開，自然光下進(jìn)行開瓶煉苗2?4天后，將生根苗從培養(yǎng)基中取出，放入濃 度為0. 1 %多菌靈溶液中浸泡5min，并把根部多余的培養(yǎng)基清洗干凈，最后用清水沖洗2? 3次，然后用純鋸末移栽到的營養(yǎng)缽中。
[0010] 進(jìn)一步，在步驟五中，移栽苗的管理方式為：移栽后將生根苗在遮陰網(wǎng)下進(jìn)行管 理，第一周采用濃度為0. 1 %多菌靈溶液進(jìn)行噴灌，第二周每天用水噴灌一次，保持基質(zhì)濕 潤透氣。待生根苗抽生出新芽之后即可移出遮陰網(wǎng)。
[0011] 本發(fā)明提供的蘋果砧木T337快速繁殖的方法，通過采用培養(yǎng)基為MS+6-BA0. 5mg/ L+IBA0.1mg+PVP500mg/L 的培養(yǎng)基初代培養(yǎng)、采用 MS(NH4+0.75mg/L，K+2.2mg/ L)+6-BA0. 6mg/L+IBA0. 5mg/L處理的繼代培養(yǎng)、采用生根培養(yǎng)基1/2MS+IBA0. 9mg/L的生根 培養(yǎng)、用純鋸末進(jìn)行煉苗移栽；實(shí)現(xiàn)了蘋果砧木T337快速的繁殖，不僅保證了較高的成活 率，而且也保留了砧木的優(yōu)良特性，為蘋果產(chǎn)業(yè)的發(fā)展和進(jìn)一步擴(kuò)大提供了便捷的方法和 途徑。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0012] 圖1是本發(fā)明實(shí)施例提供的蘋果砧木T337快速繁殖的方法流程圖。

【具體實(shí)施方式】
[0013] 為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，以下結(jié)合實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明 進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于 限定本發(fā)明。
[0014] 下面結(jié)合附圖及具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的應(yīng)用原理作進(jìn)一步描述。
[0015] 如圖1所示，本發(fā)明實(shí)施例的蘋果砧木T337快速繁殖的方法包括以下步驟：
[0016] S101 :以蘋果砧木T337為材料，選擇生長健壯無病蟲害的母樹，于3月份取1年生 枝條，放置25°C的溫室內(nèi)進(jìn)行水培，每升水含有30g蔗糖，每隔3d換一次水并剪掉舊剪口， 當(dāng)水培的一年生枝條上的芽抽生為1. 5?2. 0cm時(shí)，剪取嫩芽，去除展開葉片，在自來水下 沖洗6?8h，用75%酒精處理8s，0. 1%升汞處理7min ;
[0017] S102 :進(jìn)行消毒處理后，用超聲波清洗機(jī)清洗3min，再用無菌水沖洗3?4次，將 處理好的嫩芽接種到MS+6-BA0. 5mg/L+IBA0. lmg+PVP (聚乙烯吡咯烷酮）500mg/L的培養(yǎng)基 中進(jìn)行培養(yǎng)，每升培養(yǎng)基附加30g蔗糖，8g瓊脂，然后放置在光照16h/d、光照20001u X，26°C 條件下進(jìn)行培養(yǎng)；
[0018] S103 :將獲得的T337無菌外植體接種最優(yōu)培養(yǎng)基處理M14,即MS(NH4+0. 75mg/L， K+2. 2mg/L)+6-BA0· 6mg/L+IBA0· 5mg/L 瓊脂 8g/L，光照 20001ux 的培養(yǎng)基中進(jìn)行繼代培養(yǎng)， 每升附加30g蔗糖，8g瓊脂；
[0019] S104 :選擇繼代培養(yǎng)獲得的生長健壯，高度大于1. 5cm，生長時(shí)間為20天的芽子， 接種于1/2MS+IBA0. 9mg/L (蔗糖30g/L，瓊脂8g/L)生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)；
[0020] S105 :當(dāng)組培苗根長度達(dá)到2cm后，移到室外遮陰煉苗10?12天左右，然后將培 養(yǎng)容器瓶口打開，自然光下進(jìn)行開瓶煉苗2?4天后，將生根苗從培養(yǎng)基中取出，放入濃度 為0. 1 %多菌靈溶液中浸泡5min，并把根部多余的培養(yǎng)基清洗干凈，最后用清水沖洗2?3 次，然后用純鋸末移栽到的營養(yǎng)缽中。
[0021] 在步驟S105中，移栽苗的管理方式為：移栽后將生根苗在遮陰網(wǎng)下進(jìn)行管理，第 一周采用濃度為〇. 1 %多菌靈溶液進(jìn)行噴灌，第二周每天用水噴灌一次，保持基質(zhì)濕潤透 氣。待生根苗抽生出新芽之后即可移出遮陰網(wǎng)。
[0022] 本發(fā)明的具體步驟如下：
[0023] 步驟一，初代培養(yǎng)
[0024] 蘋果砧木T337為材料，選擇生長健壯無病蟲害的母樹，于3月份取1年生枝條，放 置25°C的溫室內(nèi)進(jìn)行水培（每升水含有30g蔗糖），每隔3d換一次水并剪掉舊剪口，當(dāng)水 培的一年生枝條上的芽抽生為1. 5?2. 0cm時(shí)，剪取嫩芽，去除展開葉片，在自來水下沖洗 6?8h，用75%酒精處理8s，0. 1 %升汞處理7min，進(jìn)行消毒處理后，用超聲波清洗機(jī)清洗 3min，再用無菌水沖洗3?4次，將處理好的嫩芽接種到MS+6-BA0. 5mg/L+IBA0. lmg/L+不 同濃度處理（〇、〇. 3、0. 5、0. 7、1. Og/L)的聚乙烯吡咯烷酮（PVP)的培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，每升 培養(yǎng)基附加30g蔗糖，8g瓊脂，每個(gè)三角瓶接3個(gè)芽，每處理15瓶，然后放置在光照16h/d、 光照20001ux，26°C條件下進(jìn)行培養(yǎng)，14d后分別調(diào)查污染率、褐化率、成活率，得出T337的 初代培養(yǎng)是最適宜的培養(yǎng)基為MS+6-BA0. 5mg/L+IBA0. lmg+PVP500mg/L (蔗糖30g/L，瓊脂 8g/L)；
[0025] 步驟二，繼代培養(yǎng)
[0026] 將獲得的無菌外植體接種到含有不同6-BA、瓊脂、激素、NH4+和K+與NOT離子 濃度、光照的MS培養(yǎng)基中進(jìn)行繼代培養(yǎng)，每升附加30g蔗糖，8g瓊脂，每瓶3株，每個(gè)處 理10瓶，重復(fù)3次，T337的最優(yōu)培養(yǎng)處理為M14處理，即MS (NH4+0. 75mg/L，K+2. 2mg/ L)+6-BA0· 6mg/L+IBA0. 5mg/L (瓊脂 8g/L，光照 20001ux);
[0027] 步驟三，生根培養(yǎng)
[0028] 選擇繼代培養(yǎng)獲得的生長健壯，高度大于1.5cm的植株，生長時(shí)間為20天的 芽子，接種于1/2MS+不同濃度IBA處理（0、0. 8、0. 9、1.0、1. lmg/L)的生根培養(yǎng)中進(jìn)行 生根培養(yǎng)，每瓶接種3個(gè)，每個(gè)處理10瓶，重復(fù)3次，得到T337最適宜的生根培養(yǎng)基為 1/2MS+IBA0. 9mg/L (蔗糖 30g/L，瓊脂 8g/L);
[0029] 步驟四，煉苗移栽
[0030] 當(dāng)組培苗根長度達(dá)到2cm后，移到室外遮陰煉苗10?12天左右，然后將培養(yǎng)容器 瓶口打開，自然光下進(jìn)行開瓶煉苗2?4天后，將生根苗從培養(yǎng)基中取出，放入濃度為0. 1% 多菌靈溶液中浸泡5min，并把根部多余的培養(yǎng)基清洗干凈，最后用清水沖洗2?3次，然后 移栽到容量相同的不同基質(zhì)處理（純鋸末、鋸末+基質(zhì)、純基質(zhì)、基質(zhì)+珍珠巖）的營養(yǎng)缽 中，移栽苗的管理方式為：將生根苗在遮陰網(wǎng)下進(jìn)行管理，第一周采用濃度為〇. 1%多菌靈 溶液進(jìn)行噴灌，第二周每天用水噴灌一次，保持基質(zhì)濕潤透氣。于14天后統(tǒng)計(jì)煉苗移栽成 活率，得出用純鋸末的煉苗移栽成活率最好。
[0031] 通過以下的實(shí)驗(yàn)和數(shù)據(jù)對(duì)本發(fā)明的原理做進(jìn)一步的說明：
[0032] 1、參考表1不同濃度PVP處理對(duì)外植體生長的影響；
[0033] 表1不同濃度PVP處理對(duì)外植體生長的影響
[0034]

【權(quán)利要求】
1. 一種蘋果砧木T337快速繁殖的方法，其特征在于，蘋果砧木T337在組培技術(shù)下能夠 進(jìn)行快速繁殖，具體方法包括以下步驟： 步驟一，以蘋果砧木T337為材料，選擇生長健壯無病蟲害的母樹，于3月份取1年生枝 條，放置25°C的溫室內(nèi)進(jìn)行水培，水培為每升水含有30g蔗糖，每隔3d換一次水并剪掉舊剪 口，當(dāng)水培的一年生枝條上的芽抽生為1. 5?2. Ocm時(shí)，剪取嫩芽，去除展開葉片，在自來水 下沖洗6?8h，用75 %酒精處理8s，0. 1 %升萊處理7min ; 步驟二，用超聲波清洗機(jī)清洗3min，再用無菌水沖洗3?4次，將處理好的嫩芽接種到 聚乙烯吡咯烷酮500mg/L的培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，每升培養(yǎng)基附加30g蔗糖，8g瓊脂，然后放 置在光照16h/d、光照20001ux，26°C條件下進(jìn)行培養(yǎng)； 步驟三，將獲得的無菌外植體接種到NH4+0. 75mg/L，K+2. 2mg/L+6-BA0. 6mg/ L+IBAO. 5mg/L，光照20001ux的培養(yǎng)基中進(jìn)行繼代培養(yǎng)，T337的最優(yōu)培養(yǎng)處理為M14處理， 即每升附加30g蔗糖，8g瓊脂； 步驟四，選擇繼代培養(yǎng)獲得的生長健壯，高度大于1. 5cm的植株，生長時(shí)間為20天的芽 子，接種于1/2MS+IBA0. 9mg/L生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)，每升加蔗糖30g/L，瓊脂8g/L ; 步驟五，當(dāng)組培苗根長度達(dá)到2cm后，移到室外遮陰煉苗10?12天，然后將培養(yǎng)容器 瓶口打開，自然光下進(jìn)行開瓶煉苗2?4天后，將生根苗從培養(yǎng)基中取出，放入濃度為0. 1% 多菌靈溶液中浸泡5min，并把根部多余的培養(yǎng)基清洗干凈，最后用清水沖洗2?3次，然后 用純鋸末移栽到的營養(yǎng)缽中。
2. 如權(quán)利要求1所述的蘋果砧木快速繁殖的方法，其特征在于，在步驟五中，移栽苗的 管理方式為：移栽后將生根苗在遮陰網(wǎng)下進(jìn)行管理，第一周采用濃度為0. 1%多菌靈溶液 進(jìn)行噴灌，第二周每天用水噴灌一次，保持基質(zhì)濕潤透氣；待生根苗抽生出新芽之后即可移 出遮陰網(wǎng)。
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK104054583SQ201410331177
【公開日】2014年9月24日 申請(qǐng)日期:2014年7月14日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月14日
【發(fā)明者】韓明玉, 王超, 張東, 邢利博, 韓靜, 趙彩平 申請(qǐng)人:西北農(nóng)林科技大學(xué)