乳酸桿菌改善玩賞動(dòng)物食物中賴氨酸的吸收的用途
【專利摘要】本發(fā)明涉及非致病性、刺激賴氨酸吸收的乳酸桿菌菌株的選擇和用途；優(yōu)選路氏乳酸桿菌菌株，例如路氏乳酸桿菌菌株ATCCPTA-6127。本發(fā)明還包括使用這種菌株例如用于改善玩賞動(dòng)物的皮毛和爪的質(zhì)量的產(chǎn)品和方法。
【專利說明】乳酸桿菌改善玩賞動(dòng)物食物中賴氨酸的吸收的用途 發(fā)明領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及非致病性、刺激賴氨酸吸收的乳酸桿菌菌株的選擇和用途，和使用這 種菌株用于改善玩賞動(dòng)物的皮毛和爪的質(zhì)量的產(chǎn)品和方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 1908年，俄國(guó)生物學(xué)家Eli Metchnikoff確信某些保加利亞和俄國(guó)公民長(zhǎng) 壽在于消費(fèi)大量發(fā)酵乳產(chǎn)品（1)。這些食物中的關(guān)鍵生物隨后被鑒定為嗜酸乳桿菌 (lactobacillus acidophilus)--種乳酸生產(chǎn)細(xì)菌（2)。該乳酸生產(chǎn)細(xì)菌由此因它們生產(chǎn) 乳酸的能力而被命名。然而，生產(chǎn)乳酸僅僅是由這個(gè)細(xì)菌集合得到的諸多益處之一。
[0003] 基于Metchnikoff和其他人的工作，科學(xué)家們發(fā)展了益生微生物的想法，直接將 活的乳酸生產(chǎn)細(xì)菌和酵母飼喂動(dòng)物以改善它們的健康和特性。所觀察到的益處可能由以下 原因引起的：1)競(jìng)爭(zhēng)消化道中的附著部位，2)競(jìng)爭(zhēng)必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，3)產(chǎn)生抗微生物的物 質(zhì)，4)增加有益細(xì)菌的生長(zhǎng)和5)刺激免疫系統(tǒng)（3)。
[0004] 一些致病菌通過破壞小腸內(nèi)壁而降低動(dòng)物吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的能力（4)。研究表明乳 酸生產(chǎn)細(xì)菌附著于小腸并產(chǎn)生防止致病生物結(jié)合腸壁的物質(zhì)（5)。此外，有益細(xì)菌的附著可 以增加小腸的吸收表面積并提高酶活性，使動(dòng)物吸收更多營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（8,6)。
[0005] 促進(jìn)健康和致病的細(xì)菌的生長(zhǎng)都需要某些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。乳酸生產(chǎn)細(xì)菌可以利用維生 素、氨基酸或也另外支持有害細(xì)菌的生長(zhǎng)的其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（7)。
[0006] 相當(dāng)多的研究集中于直接飼喂微生物培養(yǎng)物產(chǎn)生抑制致病生物的物質(zhì)的能力。乳 酸、乙酸和甲酸降低腸內(nèi)pH以產(chǎn)生不適合有害生物的環(huán)境（4)。乳酸生產(chǎn)細(xì)菌還分泌過氧 化氫，產(chǎn)生不利于需氧微生物的條件（8)。
[0007] 已經(jīng)鑒定了兩組抗微生物物質(zhì)，低分子量的抗微生物物質(zhì)，例如路氏乳酸桿菌產(chǎn) 生的無蛋白菌質(zhì)（reuterin);和細(xì)菌素。細(xì)菌素是微生物產(chǎn)生的物質(zhì)，抑制通常遺傳上相 關(guān)的細(xì)菌的生長(zhǎng)（4)。細(xì)菌素是多肽且蛋白酶破壞他們的抑制特性，而無蛋白菌質(zhì)是一種廣 譜抗微生物物質(zhì)，不是多肽且它的抗微生物活性不受蛋白酶影響。
[0008] 研究已證明了乳酸生產(chǎn)細(xì)菌抑制大腸桿菌（E. coli)、鼠傷寒沙門氏桿菌 (Salmonella typhimurium)、金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus)和產(chǎn)氣莢膜梭菌 (Clostridiumperfingens)的能力。減少引起腹瀉的生物在新生和幼年動(dòng)物中尤為重要。
[0009] 然而對(duì)伴生動(dòng)物中的益生菌研究很少。最近的一項(xiàng)研究（9)調(diào)查了嗜酸乳桿菌 DSM 13241在犬中的應(yīng)用。根據(jù)它的生長(zhǎng)特征、對(duì)病原體的抗微生物活性和在腸模型中的存 活率選擇這個(gè)菌株。飼喂健康狗導(dǎo)致糞便中可回收乳酸桿菌數(shù)量顯著增加，梭菌屬數(shù)量伴 隨減少。研究人員做出結(jié)論飼喂益生菌劑引起腸微生物學(xué)和全身效應(yīng)方面的積極改變，提 示免疫系統(tǒng)刺激，如在人類消耗乳酸桿菌種屬后在他們中觀察到的（10)。
[0010] 像狗、貓、紹（Mustela vison)和藍(lán)狐（Alopex Iagopus)屬于食肉目哺乳動(dòng)物。食 肉動(dòng)物適合于相對(duì)濃縮和很易消化的飲食，其特點(diǎn)是胃和相對(duì)短且簡(jiǎn)單的腸道。貂缺少盲 腸且消化道短，結(jié)腸中細(xì)菌活性非常有限。狗和狐具有一個(gè)小容量的盲腸和一個(gè)非囊狀的 結(jié)腸，但是一些細(xì)菌發(fā)酵在盲腸和結(jié)腸進(jìn)行（11)。
[0011] 蛋白對(duì)于身體組織的生長(zhǎng)、修復(fù)和維持是至關(guān)重要的。它形成酶和抗體的基礎(chǔ)。 對(duì)于動(dòng)物和鳥類，很多蛋白被用作制造皮毛、羽毛和爪的能量，主要是a-角蛋白。a-角 蛋白由長(zhǎng)的a螺旋多肽組成，這些多肽彼此旋繞形成三股螺旋。通常對(duì)于毛皮動(dòng)物，含硫 氨基酸通常被認(rèn)為是最有限制作用的氨基酸（12)。制造毛皮、羽毛和爪的蛋白只能來自飲 食。飲食必須供給充足的氨基酸以滿足必需氨基酸的需要，足夠過量的氨基酸供給制造非 必需氨基酸的氮。飲食中額外的蛋白不能儲(chǔ)存并將轉(zhuǎn)變成脂肪或被腎臟排泄出去。
[0012] 賴氨酸是必需氨基酸，因此不能通過轉(zhuǎn)氨基作用合成。它有助于通過產(chǎn)生肉毒堿 使脂肪變得對(duì)身體有用，從身體去除毒素，制造皮毛、羽毛和骨頭。高水平增加對(duì)精氨酸的 需要。賴氨酸在完整蛋白中高度不穩(wěn)定。它與葡萄糖反應(yīng)，并且在溫暖和潮濕環(huán)境下反應(yīng) 加快。對(duì)幼年豬和家禽的研究發(fā)現(xiàn)賴氨酸是對(duì)生長(zhǎng)最有限制作用的氨基酸（例如Boisen et al. , 2000 ; (13,14)。
[0013] 甲硫氨酸和半胱氨酸是營(yíng)養(yǎng)氨基酸，并且是基本氨基酸中最具活性的氨基酸。它 們用于制造這種重要的分子，如肉毒堿（用于運(yùn)輸脂肪酸）、肌酸、煙酸、聚胺和嘌呤（用于 產(chǎn)生尿酸）。它們還用于制造皮毛和羽毛。半胱氨酸可以從甲硫氨酸合成，因此它被分類為 非必需氨基酸。然而，半胱氨酸及其氧化產(chǎn)物胱氨酸可以滿足總含硫氨基酸的大約百分之 五十的需要，這樣可以降低對(duì)甲硫氨酸的需要。甲硫氨酸不能從半胱氨酸合成，因此它是必 需氨基酸。在缺乏胱氨酸的情況下，甲硫氨酸可以滿足對(duì)含硫氨基酸的全部需要。一些研 究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)甲硫氨酸是對(duì)貂的毛發(fā)生長(zhǎng)和皮毛質(zhì)量最具限制作用的氨基酸（15,16,17,18， 19,20,21)〇
[0014] 在大多數(shù)家庭寵物中，健康的皮和毛通常表明動(dòng)物身體健康。因?yàn)槠ず兔珕栴}在 家庭寵物中是普遍的，已經(jīng)進(jìn)行很多研究提供修復(fù)皮和毛狀況變質(zhì)的飲食，由此提供基本 水平的健康皮和毛，如下文所述。
[0015] 研究表明補(bǔ)充鋅及亞油酸的全面且均衡的商業(yè)狗糧可以使狗的皮和毛狀況顯著 和實(shí)質(zhì)性提高。與接受標(biāo)準(zhǔn)飲食的對(duì)照組相比時(shí)，狗在皮毛光澤度和皮毛大小方面表現(xiàn)出 顯著的改善。專利EP0987961B1中也描述了這個(gè)方法。
[0016] 營(yíng)養(yǎng)可能影響皮膚屏障功能。國(guó)際專利申請(qǐng)W00207531A1公開了含抗微生物的脂 肪酸的飲食脂類在制備用于改善或維持皮膚健康和/或皮毛質(zhì)量的食品組合物中的用途。
[0017] 在Kerminen-Hakkio的研究（21)中，紹中蛋白質(zhì)量粗劣使毛皮長(zhǎng)度平均降低4cm。 在優(yōu)質(zhì)、高水平蛋白組觀察到最好的總體皮毛質(zhì)量。作者做出結(jié)論增加飲食中蛋白水平不 能完全彌補(bǔ)必需氨基酸供給的缺乏。
[0018] 有些情況下，仍應(yīng)添加非必需氨基酸以確保最佳的可利用量。我們發(fā)現(xiàn)可利用的 甲硫氨酸應(yīng)該與貓和狗的食物中也存在的賴氨酸保持平衡，以改善皮毛和爪的生長(zhǎng)和質(zhì) 量。一個(gè)更好地利用來自食物的賴氨酸的值得稱贊的方法不是僅僅飼喂更多，而是尋找改 善它吸收的方法。
[0019] 眾所周知含乳酸桿菌（LAB)的飼料能促進(jìn)生長(zhǎng)，這是因?yàn)槠渫ǔＤ芨纳茽I(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 的吸收。在今天的現(xiàn)代動(dòng)物育種中，很多國(guó)家已經(jīng)使用含益生微生物的飼料添加劑以催肥 動(dòng)物。動(dòng)物消耗LAB時(shí)，它們移植于消化道并開始產(chǎn)生消化淀粉（淀粉酶）、蛋白（蛋白 酶）、脂肪（脂肪酶）的酶。這些酶有助于將飼料中復(fù)合有機(jī)化合物分解為低分子化合物。 這些動(dòng)物可以更好利用這些低分子化合物。它們的食欲改善，飼料轉(zhuǎn)化率更好和生產(chǎn)性能 改善。LAB在動(dòng)物飼養(yǎng)中的應(yīng)用還有助于免疫防御病原體。LAB將碳水化合物分解為乳酸， 乳酸降低消化道內(nèi)容物的PH，形成極其不利于病原體微生物的環(huán)境。
[0020] 我們驚訝地發(fā)現(xiàn)食物或胃腸道中存在的不同LAB菌株可以不同地輔助氨基酸的 吸收，尤其是賴氨酸。而且這種差異可以測(cè)定，從而使得選擇會(huì)最大量改善賴氨酸吸收的特 定乳酸桿菌菌株是可能的。
[0021] 已經(jīng)證明Caco-2細(xì)胞系統(tǒng)是對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)[肽和氨基酸（23, 24, 25, 26)]和藥物產(chǎn) 品（27, 24)的腸上皮滲透性研究都合適的模型系統(tǒng)。Twaites 1996年進(jìn)行的研究描述了腸 內(nèi)Caco-2細(xì)胞運(yùn)輸二堿氨基酸賴氨酸的能力（28)。
[0022] 然而對(duì)乳酸桿菌促進(jìn)或增加玩賞動(dòng)物中來自飲食的氨基酸吸收很少研究。
[0023] 使用限定的四種不同細(xì)菌（莢膜甲基球菌（Methylococcus capsulatus)、食酸 產(chǎn)喊菌（Alcaligenes acidovorans)、短芽抱桿菌（Bacillus brevis)和堅(jiān)強(qiáng)芽抱桿菌 (Bacillus firmus))的混合物,和天然氣作為碳源和能源,經(jīng)由連續(xù)細(xì)菌發(fā)酵產(chǎn)生的細(xì)菌蛋 白膳食（BPM)是一種新的高蛋白飼料成分。使用藍(lán)狐作為模型動(dòng)物進(jìn)行研究，擴(kuò)展對(duì)BPM 作為狗糧成分的認(rèn)識(shí)。動(dòng)物通常顯示出很好的生長(zhǎng)，但是沒有數(shù)據(jù)顯示皮毛質(zhì)量改善（7)。
[0024] 專利WO 01/17365A1描述了改善和保養(yǎng)寵物皮毛系統(tǒng)的方法，其中營(yíng)養(yǎng)劑可以是 前生物或任何益生微生物。該 申請(qǐng)人:提及益生菌類的十七種不同細(xì)菌，和將近三十種益生 微生物的具體實(shí)例。凝結(jié)芽抱桿菌（Bacillus coagulans)Lacris_S菌株（SANKYO LIFETECH CO. , LTD, Hongo, Bunkyo-ku，Tokyo, Japan)是唯一描述的特定菌株，沒有提及優(yōu)選菌株的 選擇，也沒有任何基于LAB菌株刺激賴氨酸吸收的能力。
[0025] 盡管為了動(dòng)物皮毛和羽毛更好而使用益生菌是本領(lǐng)域已知的，但是以前沒有認(rèn)識(shí) 到不同的益生菌株改善動(dòng)物，例如狗或貓的皮毛和爪的質(zhì)量的能力差異，和這種能力與益 生菌株對(duì)動(dòng)物腸道吸收賴氨酸的影響有關(guān)。
[0026] 因此本發(fā)明的一個(gè)目的是通過分析它們直接促進(jìn)或改善動(dòng)物吸收賴氨酸的能力 來選擇這種更合適的菌株，和將該選擇出的菌株用于動(dòng)物飼料或添加劑中，例如以改善狗 或貓的皮毛和爪質(zhì)量的應(yīng)用。路氏乳酸桿菌的一個(gè)新菌株ATCC PTA-6127顯示出刺激皮毛 動(dòng)物中的賴氨酸吸收和這個(gè)特性引起皮毛和爪質(zhì)量改善。
[0027] 由下列公開內(nèi)容和所附權(quán)利要求，其他目的和優(yōu)點(diǎn)將更加明顯。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0028] 本發(fā)明涉及非致病性、刺激賴氨酸吸收的乳酸桿菌菌株的選擇和用途，和使用這 種菌株用于治療和預(yù)防玩賞動(dòng)物的皮毛和爪的質(zhì)量的產(chǎn)品和方法。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0029] 圖1條線圖顯示了 7. OX 107cfu/ml不同的LAB菌株對(duì)Caco-2腸細(xì)胞吸收賴氨 酸的影響。所用菌株是路氏乳酸桿菌ATCC PTA-6127、路氏乳酸桿菌1068、路氏乳酸桿菌 SD2112和凝結(jié)芽孢桿菌Lacris-S菌株。

【具體實(shí)施方式】
[0030] 本發(fā)明涉及非致病性、刺激賴氨酸吸收的乳酸桿菌菌株的選擇和用途，和使用這 種菌株用于治療和預(yù)防玩賞動(dòng)物的皮毛和爪的質(zhì)量的產(chǎn)品和方法。
[0031] 本發(fā)明的一個(gè)目的是通過分析它們直接促進(jìn)或改善動(dòng)物吸收賴氨酸的能力來選 擇最好的合適菌株，和將該選擇出的菌株用于動(dòng)物飼料或添加劑中，例如以改善狗或貓的 皮毛和爪質(zhì)量的應(yīng)用。路氏乳酸桿菌的一個(gè)新菌株（ATCC PTA-6127)顯示出刺激皮毛動(dòng)物 中的賴氨酸吸收和這個(gè)特性引起皮毛和爪質(zhì)量改善。這個(gè)菌株根據(jù)布達(dá)佩斯條約于2004 年7月22日保藏在美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心（Manassas，VA)。
[0032] 本發(fā)明的產(chǎn)品可以是飼料或片劑或膠囊或其他制劑等劑型，和制備本領(lǐng)域已知的 下述產(chǎn)品的標(biāo)準(zhǔn)方法，包括所選擇的LAB培養(yǎng)物。
[0033] 盡管這里陳述了某些代表性的實(shí)施方案，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員會(huì)很容易地認(rèn)識(shí)到 可以進(jìn)行改動(dòng)而不背離本發(fā)明的精神或范圍。
[0034] 實(shí)施例1 ?細(xì)胞培養(yǎng)物的制備
[0035] Caco-2 細(xì)胞（ATCC 號(hào)：HTB-37, Manassas，VA，USA)如（Thwaites et al.，1993a ; 1993b)所述進(jìn)行培養(yǎng)。細(xì)胞單層制備如下：高密度（4. 4-5. 0° -IO5細(xì)胞/cm2)接種在12或 24. 5mm直徑組織培養(yǎng)插片上[Transwell聚碳酸酯濾膜（Costar)]。細(xì)胞單層維持在37°C, 含5% CO2的濕潤(rùn)空氣下。顯微術(shù)估測(cè)細(xì)胞融合并測(cè)定跨上皮電阻。
[0036] 接種后18-25天和飼喂后18-24小時(shí)進(jìn)行放射性同位素標(biāo)記的賴氨酸流通量測(cè) 定。
[0037] 實(shí)施例2.選擇刺激腸吸收賴氨酸的路氏乳酸桿菌菌株的方法
[0038] Caco-2細(xì)胞單層用500ml改良的Krebs緩沖液（其組分（全部為mmol/1)，NaCl 140, KCl 5. 4, CaCl22. 8, MgSO4L 2, NaH2PO4O. 3, KH2PO4O. 3, HEPES 10,葡萄糖 10 (用 Tris 堿 調(diào)pH至7.4, 37°C ))洗滌4次，或適當(dāng)時(shí)，用不含Na+的Krebs緩沖液（如上，除了用膽堿 Cl替換NaCl和NaH2PO4，并放置于含2ml預(yù)熱（37°C )的不含Na+的Krebs緩沖液的6孔板 (Life Technologies)。等分的新鮮Krebs緩沖液或不含Na+的Krebs緩沖液置于容器中。 使用追蹤濃度（〇. 2microCi/ml)的放射性同位素標(biāo)記的賴氨酸（(3H)Amersham)。然后上皮 層與各種待測(cè)試的LAB孵育；路氏乳酸桿菌ATCC PTA-6127、路氏乳酸桿菌1068、路氏乳酸 桿菌SD2112和凝結(jié)芽孢桿菌Lacris-S菌株以7. 0xl07cfu/ml的濃度在37°C孵育6小時(shí)。 每60分鐘從基礎(chǔ)溶液中取200微升樣品測(cè)定跨上皮運(yùn)輸。用閃爍計(jì)數(shù)法測(cè)定放射性同位 素標(biāo)記。結(jié)果參見圖1。
[0039] 實(shí)施例3.含所選擇菌株的飼料產(chǎn)品的制備
[0040] 在這個(gè)實(shí)施例中，為了將菌株添加到商品中，通?；诹己玫纳L(zhǎng)特性和實(shí)施例2 中在先提及的選擇中的有利結(jié)果來選擇路氏乳酸桿菌"Shiny" (ATCC PTA-6127)。使用工業(yè) 上培養(yǎng)乳桿菌的標(biāo)準(zhǔn)方法來培養(yǎng)路氏乳酸桿菌Shiny菌株并將其凍干。
[0041] 飼料混合物由玉米、玉米麩質(zhì)、雞和魚粉、鹽、維生素和礦物質(zhì)組成。將飼料混合物 裝入預(yù)調(diào)節(jié)器并潤(rùn)濕。離開預(yù)調(diào)節(jié)器的潤(rùn)濕飼料接著被裝入擠壓機(jī)-蒸煮器并膠質(zhì)化。離 開擠壓機(jī)的膠質(zhì)化基質(zhì)通過模具沖壓并壓出。離開模具壓頭的壓出物切成適于飼喂給狗的 塊，在大約140°C干燥大約20分鐘并冷卻形成球丸。球丸的水活度大約為0. 6。
[0042] 球丸用包含動(dòng)物脂肪的包被基質(zhì)噴霧。在動(dòng)物脂肪凝結(jié)之前，通過干燥噴霧以IO7 CFU/克產(chǎn)品的水平應(yīng)用益生菌路氏乳酸桿菌"Shiny"(ATCC PTA-6127)，以便其附著于或部 分滲入脂肪層中。37°C保存8周的結(jié)果表明微生物顯示出極好的穩(wěn)定性且在正常條件下保 存一年后可能仍是穩(wěn)定的。
[0043] 實(shí)施例4.狗試驗(yàn)
[0044] 使用45只比格犬進(jìn)行試驗(yàn)。試驗(yàn)開始之前，給狗飼喂與實(shí)施例3中飲食相當(dāng)?shù)?標(biāo)準(zhǔn)干燥飲食一周。在試驗(yàn)開始之前，立即通過實(shí)施例5描述的評(píng)價(jià)小組評(píng)價(jià)參與的狗的 皮毛狀況。將狗分為三組，每組15只狗。一組狗飼喂覆蓋有路氏乳酸桿菌"Shiny"（ATCC PTA-6127)的干燥球丸，另一組狗飼喂覆蓋有路氏乳酸桿菌菌株1068的干燥球丸和第三組 繼續(xù)飼喂標(biāo)準(zhǔn)飲食，由此提供對(duì)照飲食。所有的組自由攝取食物和水。12周后，再次評(píng)價(jià) 每只狗的皮毛狀況。飼喂覆蓋有路氏乳酸桿菌"Shiny"的球丸的狗比飼喂覆蓋有路氏乳酸 桿菌1068菌株的球丸的狗和對(duì)照組的狗具有明顯更光亮的外觀并且沒有顯示出明顯的皮 屑。
[0045] 實(shí)施例5.爪和皮毛的生長(zhǎng)特性
[0046] 技術(shù)熟練的趾甲美容師對(duì)實(shí)施例4中的狗爪進(jìn)行打分，兩位有經(jīng)驗(yàn)的專門研究比 格犬品種的狗形象裁判對(duì)皮毛進(jìn)行打分。試驗(yàn)之前，根據(jù)皮毛和爪的質(zhì)量將狗平均分布在 各組之中。12周后，評(píng)價(jià)趾甲被切割生長(zhǎng)時(shí)對(duì)抗裂開的質(zhì)量并以五個(gè)水平的等級(jí)進(jìn)行打分， 1是低劣和5是極好。評(píng)價(jià)皮毛的總體質(zhì)量、皮屑、皮毛長(zhǎng)度和光澤度，等級(jí)范圍從1 (最差） 至5 (最好）。

【權(quán)利要求】
1. 一種路氏乳桿菌菌株在改善伴生動(dòng)物的皮毛和爪質(zhì)量的應(yīng)用，所述應(yīng)用包括選擇非 致病性、刺激賴氨酸吸收的路氏乳桿菌菌株，和給動(dòng)物提供含有所選擇菌株的生物學(xué)上純 培養(yǎng)物的產(chǎn)品。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其中，所述路氏乳桿菌菌株為路氏乳酸桿菌1068、路氏 乳酸桿菌SD2112。
3. -種用于改善玩賞動(dòng)物的皮毛和爪質(zhì)量的產(chǎn)品，所述產(chǎn)品包括： a) -種根據(jù)權(quán)利要求1或2所選擇的路氏乳酸桿菌菌株的生物學(xué)上純培養(yǎng)物；和b) - 種飼料混合物，其中所述飼料混合物覆蓋有包被基質(zhì)，隨后被所選擇菌株的生物學(xué)上純培 養(yǎng)物的噴霧干燥覆蓋。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的產(chǎn)品，其中，所述飼料混合物被制成球丸。
5. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的產(chǎn)品，其中，所述路氏乳桿菌菌株為路氏乳酸桿菌1068、路氏 乳酸桿菌SD2112。
6. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的產(chǎn)品，其中，所述飼料混合物包含玉米、玉米麩質(zhì)、雞和魚粉、 鹽、維生素和礦物質(zhì)。
7. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的產(chǎn)品，其中，所述包被基質(zhì)包含動(dòng)物脂肪。
8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的產(chǎn)品，其中，在動(dòng)物脂肪凝結(jié)之前，通過噴霧干燥以IO7CFU/ 克產(chǎn)品的水平應(yīng)用生物學(xué)上純培養(yǎng)物，以便其附著于或部分滲入脂肪層中。
9. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的產(chǎn)品，其中，所述產(chǎn)品的劑型選自由球丸、片劑和膠囊組成的 組。
【文檔編號(hào)】A23K1/16GK104206706SQ201410340998
【公開日】2014年12月17日 申請(qǐng)日期:2008年2月29日 優(yōu)先權(quán)日:2007年3月2日
【發(fā)明者】埃蒙·康諾利布·莫爾斯泰姆 申請(qǐng)人:生命大地女神有限公司