一種杉木正冠組培苗繼代芽培育方法
【專利摘要】本發(fā)明公開的一種杉木正冠組培苗繼代芽培育方法，是以杉木優(yōu)良無性系當年生嫩枝為外植體，通過滅菌消毒組培獲取繁殖芽，將繁殖芽接種于包括1/2MS，6-BA1.0mg/L和IBA0.5mg/L的增殖培養(yǎng)基內(nèi)誘導(dǎo)叢生芽發(fā)生，選擇繁殖芽基部萌發(fā)、生長健壯的繼代芽扦插于常用的生根培養(yǎng)基上，煉苗，移栽，杉木苗高15～30cm時出圃造林。使用本方法，杉木繼代芽增殖系數(shù)高，達4～6，繁殖速度快、育苗量大、可以在短期內(nèi)批量生產(chǎn)遺傳穩(wěn)定性高、組培苗正冠率100%，生根率高達96%以上的組培繼代芽，能適應(yīng)我國杉木儲備基地建設(shè)發(fā)展對良種種苗的需要，具有較好的經(jīng)濟效益、社會效益和生態(tài)效益。
【專利說明】一種杉木正冠組培苗繼代芽培育方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于植物無性快繁【技術(shù)領(lǐng)域】，尤其是涉及一種杉木正冠組培苗繼代芽培育 方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 杉木（CunninghamiaLanceolata)屬杉科（Taxodiaceae)，杉木屬 (Cunninghamia)。是我國特有的速生商品材樹種，生長快,材質(zhì)好。木材紋理通直,結(jié)構(gòu)均 勻，不翹不裂。材質(zhì)輕韌，強度適中，質(zhì)量系數(shù)高。具香味，材中含有"杉腦"，能抗蟲耐腐， 加工容易。廣泛用于建筑、家具、器具、造船等各方面。
[0003] 我國既是一個木材生產(chǎn)大國，又是一個木材消費大國。天然林保護工程實施以后， 木材供需矛盾進一步加劇，木材供需缺口逐年增加。預(yù)計到2015年，我國生產(chǎn)建設(shè)用木材 需求量約為4.8億m3,缺口將達1.9億m 3。如果按照近10年我國木材消費平均年增長率 3. 71 %計算，到2020年我國木材消費總量將達到6. 78億m3,供需矛盾有增無減。
[0004] 無性系林業(yè)生產(chǎn)力高，在國內(nèi)外許多研究和造林實踐廣泛證實。1990年開始，廣西 林科院和區(qū)林業(yè)技術(shù)推廣總站等單位，分別在融安縣西山林場等十多單位推廣杉木優(yōu)良無 性系造林，以杉木良種（融水白云康杉）實生苗作對照。1997年測定分析，在初選參試的 927個無性系中有230個無性系表現(xiàn)較為優(yōu)良，其木材總平均比對照增益45. 1 %;最優(yōu)的無 性系89個，材積總平均比對照增益53. 5% ;較優(yōu)的無性系141個，材積總平均比對照增益 39. 9%。而杉木優(yōu)良無性系比杉木家系的增益還高12. 5%?37. 5%。篩選出的優(yōu)良無性 系增產(chǎn)效果顯著，應(yīng)用前景廣闊。南京林業(yè)大學(xué)、福建省林業(yè)科學(xué)研究院和廣西林科院已成 功地將杉木優(yōu)良無性系以組培工廠化育苗方式擴繁，推進了杉木良種的應(yīng)用進程，因此，杉 木良種繁育，特別是組培快繁前景看好。
[0005] 中國專利201110195928. 6的一種杉木組織培養(yǎng)方法。本發(fā)明所述培養(yǎng)方法采用 開放式組織培養(yǎng)，采用的抑制劑菌殺果、代森錳鋅和次氯酸鈉中的一種或幾種。該方法，在 不影響組培效果的同時，能夠?qū)⑽廴韭式档偷娇山邮艿姆秶?，在抑菌劑的作用下，使杉木組 織培養(yǎng)脫離嚴格無菌的操作環(huán)境，在自然、開放的有菌環(huán)境中進行植物的組織培養(yǎng)，從根本 上簡化組培環(huán)節(jié)，降低組培成本。
[0006] 中國專利200810070456. X-種杉木組織培養(yǎng)生根方法。本發(fā)明提供了一種杉木 組織培養(yǎng)生根方法，切去杉木增殖繼代小苗，接種于杉木生根培養(yǎng)基進行組織培養(yǎng)生根，杉 木生根培養(yǎng)基由改良MS培養(yǎng)基、ABT1#0. 4?0. 8mg/L、IBA0. 1?0. 5mg/L和根太陽稀釋液 2?6ml/L組成。采用上述杉木生根培養(yǎng)基后，杉木的生根時間縮短至16?22天，經(jīng)22天 培養(yǎng)后，杉木的生根率達到96%，苗木生長速度快，使得育苗成本降低，實現(xiàn)杉木產(chǎn)業(yè)化生 產(chǎn)。
[0007] 杉木具有一定的遺傳保守性，主干上的不定芽有明顯的形態(tài)極性（這就是頂端優(yōu) 勢），長出的枝條能形成直立的主干。一旦斷頂截干后，頂芽與側(cè)芽之間失去了平衡，相應(yīng)地 受活躍的頂端分生組織抑制的側(cè)芽就大量的萌發(fā)。自然狀態(tài)下，斷稍后萌芽位置效應(yīng)效果 見表1。
[0008] 表1杉木斷稍后萌芽情況表
[0009]

【權(quán)利要求】
1. 一種杉木正冠組培苗繼代芽培育方法，其特征在于：包括獲取外植體、正冠組培苗 繼代芽培養(yǎng)、生根苗培養(yǎng)、生根苗移栽和出圃工序，通過獲取消毒滅菌后的外植體，依次接 種于初始培養(yǎng)基和增殖培養(yǎng)基后獲得正冠組培苗，對正冠組培苗進行不定根誘導(dǎo)生根后移 栽，出圃，具體操作步驟如下： (1) 獲取外植體：選擇優(yōu)良的無性系嫁接杉木幼樹當年生的嫩枝為外植體；將消毒滅 菌后的外植體接種到初始培養(yǎng)基內(nèi)，獲取繁殖芽； (2) 繼代芽增殖培養(yǎng)：將長1. 5?3cm的繁殖芽接種到增殖培養(yǎng)基內(nèi)，誘導(dǎo)繼代芽；待 繁殖芽基部萌發(fā)出2?3個長0. 3?0. 5cm的繼代芽時進行轉(zhuǎn)接；每次轉(zhuǎn)接，將繁殖芽逐漸 剪短至0. 3?0. 5cm ;取剪短后的繁殖芽基部萌發(fā)扦插生根用的繼代芽，獲得正冠組培苗； (3) 生根苗培養(yǎng)：在正冠組培苗中選擇繁殖芽基部萌發(fā)、生長健壯的繼代芽扦插于常用 的生根培養(yǎng)基上，在溫度25?30°C，2000?7000Lx光照條件下進行不定根誘導(dǎo)，培養(yǎng)10? 15d后開始生根，25?30d根長0. 4?0. 6cm時，獲得生根苗，將生根苗轉(zhuǎn)到煉苗室煉苗； (4) 生根苗移栽：煉苗20?30d，待根系由白色轉(zhuǎn)變成灰白色時，將生根苗進行移栽， 移栽時先將生根苗置于清水中漂洗，洗凈根部的培養(yǎng)基，晾干根系的表面水分，將生根苗栽 入裝有紅心土與椰糠的混合基質(zhì)容器中培養(yǎng)； (5) 出圃：在容器中的生根苗進行培養(yǎng)8?10月，杉木苗高15?30cm時出圃造林。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種杉木正冠組培苗繼代芽培育方法，其特征在于：步驟（1) 所述的外植體消毒滅菌的方法為：剪除外植體上的葉片，在洗潔精溶液中用毛刷輕輕刷洗， 放入質(zhì)量濃度為〇. 1%的新吉爾滅中浸泡40?50min，再用純凈水沖洗3?5遍，將外植體剪 切成1?2cm的長莖段；在超凈工作臺用體積濃度75%的乙醇對剪切后的外植體消毒10s， 然后將外植體置于10?30mg/L的抗壞血酸中浸泡5?12min ;最后用無菌水沖洗3?4 遍。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種杉木正冠組培苗繼代芽培育方法，其特征在于：步驟（1) 中對外植體進行消毒滅菌，當外植體屬于幼嫩莖尖處時，置于l〇mg/L的抗壞血酸中浸泡 5min ;當外植體屬于半木質(zhì)化莖段時，置于30mg/L的抗壞血酸中浸泡8min ;當外植體屬于 木質(zhì)化莖段時，置于30mg/L的抗壞血酸中浸泡12min。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種杉木正冠組培苗繼代芽培育方法，其特征在于：步驟（1) 所述的初始培養(yǎng)基是以2/3MS為基本培養(yǎng)基，還包括6-BA1. 0mg/L、IBA0. 5mg/L和ΖΤ0. 2mg/ L ;其中2/3MS基本培養(yǎng)基中的Ca(N03)2含量為150mg/L，Na2S0 4含量為50mg/L。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種杉木正冠組培苗繼代芽培育方法，其特征在于：步驟 (2)中所述的增殖培養(yǎng)基是以1/2MS為基本培養(yǎng)基，還包括6-BAO. 8mg/L、IBAO. 4mg/L和 ΖΤ0. lmg/L ;其中1/2MS基本培養(yǎng)基中的Ca(N03)2含量為150mg/L。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1或5任一所述的一種杉木正冠組培苗繼代芽培育方法，所述的增 殖培養(yǎng)基用500ml的三角瓶分裝，每瓶70ml，用棉球封口，再用牛皮紙包扎棉球和瓶口，在 120°C和1. lkg. cm2條件下，用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌15min。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種杉木正冠組培苗繼代芽培育方法，其特征在于：步驟（2) 中所述的繼代增殖培養(yǎng)控制光照2000?7000Lx，溫度25?30°C。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種杉木正冠組培苗繼代芽培育方法，其特征在于：步驟（4) 中所述的混合基質(zhì)是按紅心土與椰糠的體積比為3:1的比例混合。
【文檔編號】A01H4/00GK104145824SQ201410439694
【公開日】2014年11月19日 申請日期:2014年9月1日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月1日
【發(fā)明者】吳幼媚, 蔡玲, 戴春香, 黃金使, 韋穎文, 王以紅 申請人:廣西壯族自治區(qū)林業(yè)科學(xué)研究院