一種蒙古櫟的快速繁殖方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種蒙古櫟的快速繁殖方法,包括外植體的消毒、芽誘導培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)和煉苗移栽。本發(fā)明的蒙古櫟組培方法操作簡便,生長周期短,成活率高,可以短期內(nèi)獲得大量的制藥原料。
【專利說明】一種蒙古櫟的快速繁殖方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及蒙古櫟組織培養(yǎng)的快繁方法,屬于植物【技術(shù)領(lǐng)域】。
【背景技術(shù)】
[0002]蒙古櫟,ft/eciAWWgoJica,為殼斗科、櫟屬,落葉喬木,國家二級珍貴樹種,又名:柞木,柞櫟,蒙櫟,柞樹,是中國東北林區(qū)中主要的次生林樹種。蒙古櫟主要分布在中國東北、華北、西北各地,華中地區(qū)亦少量分布。在俄羅斯、日本、蒙古及朝鮮半島也有分布。喜光,在側(cè)方庇蔭條件下,高生長較快。適應(yīng)性強,耐火,耐干旱瘠薄,耐寒性強,能耐-50°C低溫。喜溫涼氣候,喜中性至酸性土壤,通常生于向陽干燥山坡。深根性,主根發(fā)達,不耐移植。其樹皮中藥名為柞樹皮,春、秋季采,刮去外層粗皮,曬干或煅灰。清熱利濕,解毒消腫。主治痢疾,腸炎,小兒消化不良,氣管炎,黃疸,痔瘡等癥。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種蒙古櫟的快速繁殖方法,由該方法所制備的蒙古櫟組培方法簡便,生長周期短,成活率高,可以短期內(nèi)獲得大量的制藥原料。
[0004]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是通過以下方案來實現(xiàn)的:
取蒙古櫟帶芽莖段,在漂白粉中浸泡3min,清洗表面,流水沖洗lh,超凈工作臺上75%酒精處理30s,氯化汞處理8min,無菌水沖洗5_7遍,滅菌處理過的蒙古櫟帶芽莖段接入培養(yǎng)基配方為MS+N0A0.lmg/L+ZT0.5mg/l誘導培養(yǎng)基中進行芽誘導培養(yǎng),附加蔗糖30g/L,瓊脂6.5g/L,PH5.8,光照30001x,誘導出來的芽放入增殖培養(yǎng)基MS+2,4_D0.2mg/L+TDZ0.2mg/L+50mg/L 半胱氨酸,附加蔗糖 30g/L,瓊脂 6.5g/L,PH5.8,光照 20001x,增殖培養(yǎng)出來的叢生芽放入生根培養(yǎng)基WS+NAA0.2mg/L+8mg/LAgN03,然后進行苗床移栽,移栽前用50%多菌靈可濕性粉劑1000倍液對苗床進行滅菌,將生根試管苗小心取出,洗凈根部培養(yǎng)基,栽植于純沙:園田土 =1: I中,噴灑多菌靈藥液,每隔10天噴一次,40天后統(tǒng)計成活率。
[0005]采用本發(fā)明制備的蒙古櫟成活率為93%,周期短,產(chǎn)量大,能耗少,利于大規(guī)模種植。
[0006]下面將結(jié)合【具體實施方式】對本發(fā)明作進一步闡述,但本發(fā)明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。
[0007]實施例1
取蒙古櫟帶芽莖段,在漂白粉中浸泡3min,清洗表面,流水沖洗lh,超凈工作臺上75%酒精處理30s,氯化汞處理8min,無菌水沖洗5_7遍,滅菌處理過的蒙古櫟帶芽莖段接入培養(yǎng)基配方為MS+N0A0.lmg/L+ZT0.5mg/l誘導培養(yǎng)基中進行芽誘導培養(yǎng),附加蔗糖30g/L,瓊脂6.5g/L,PH5.8,光照30001x,誘導出來的芽放入增殖培養(yǎng)基MS+2,4_D0.1mg/L+TDZ0.lmg/L+50mg/L 半胱氨酸,附加蔗糖 30g/L,瓊脂 6.5g/L,PH5.8,光照 20001x,增殖培養(yǎng)出來的叢生芽放入生根培養(yǎng)基WS+NAA0.lmg/L+8mg/LAgN03,生根后的蒙古櫟試管苗進行煉苗培養(yǎng),蒙古櫟成活率為90%。
[0008]實施例2
取蒙古櫟帶芽莖段,在漂白粉中浸泡3min,清洗表面,流水沖洗lh,超凈工作臺上75%酒精處理30s,氯化汞處理8min,無菌水沖洗5_7遍,滅菌處理過的蒙古櫟帶芽莖段接入培養(yǎng)基配方為MS+N0A0.lmg/L+ZT0.5mg/l誘導培養(yǎng)基中進行芽誘導培養(yǎng),附加蔗糖30g/L,瓊脂6.5g/L,PH5.8,光照30001x,誘導出來的芽放入增殖培養(yǎng)基MS+2,4_D0.3mg/L+TDZ0.3mg/L+50mg/L 半胱氨酸,附加蔗糖 30g/L,瓊脂 6.5g/L,PH5.8,光照 20001x,增殖培養(yǎng)出來的叢生芽放入生根培養(yǎng)基WS+NAA0.3mg/L+8mg/LAgN03,生根后的蒙古櫟試管苗進行煉苗培養(yǎng),蒙古櫟成活率為91%。
[0009]實施例3
取蒙古櫟帶芽莖段,在漂白粉中浸泡3min,清洗表面,流水沖洗lh,超凈工作臺上75%酒精處理30s,氯化汞處理8min,無菌水沖洗5_7遍,滅菌處理過的蒙古櫟帶芽莖段接入培養(yǎng)基配方為MS+N0A0.lmg/L+ZT0.5mg/l誘導培養(yǎng)基中進行芽誘導培養(yǎng),附加蔗糖30g/L,瓊脂6.5g/L,PH5.8,光照30001x,誘導出來的芽放入增殖培養(yǎng)基MS+2,4_D0.2mg/L+TDZ0.2mg/L+50mg/L 半胱氨酸,附加蔗糖 30g/L,瓊脂 6.5g/L,PH5.8,光照 20001x,增殖培養(yǎng)出來的叢生芽放入生根培養(yǎng)基WS+NAA0.lmg/L+8mg/LAgN03,生根后的蒙古櫟試管苗進行煉苗培養(yǎng),蒙古櫟成活率為92%。
[0010]實施例4
取蒙古櫟帶芽莖段,在漂白粉中浸泡3min,清洗表面,流水沖洗lh,超凈工作臺上75%酒精處理30s,氯化汞處理8min,無菌水沖洗5_7遍,滅菌處理過的蒙古櫟帶芽莖段接入培養(yǎng)基配方為MS+N0A0.lmg/L+ZT0.5mg/l誘導培養(yǎng)基中進行芽誘導培養(yǎng),附加蔗糖30g/L,瓊脂6.5g/L,PH5.8,光照30001x,誘導出來的芽放入增殖培養(yǎng)基MS+2,4_D0.2mg/L+TDZ0.2mg/L+50mg/L 半胱氨酸,附加蔗糖 30g/L,瓊脂 6.5g/L,PH5.8,光照 20001x,增殖培養(yǎng)出來的叢生芽放入生根培養(yǎng)基WS+NAA0.3mg/L+8mg/LAgN03,生根后的蒙古櫟試管苗進行煉苗培養(yǎng),蒙古櫟成活率為92%。
【權(quán)利要求】
1.一種蒙古櫟的快速繁殖方法,包括外植體的消毒、芽誘導培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)和煉苗移栽,其主要步驟如下: (1)取蒙古櫟帶芽的莖段,按照常規(guī)的消毒方法對其進行消毒處理; (2)將步驟(I)滅菌處理過的蒙古櫟帶芽莖段接入培養(yǎng)基配方為MS+NOA0.1mg/L+ZT0.5mg/l誘導培養(yǎng)基中進行芽誘導培養(yǎng),附加蔗糖30g/L,瓊脂6.5g/L,PH5.8,光照30001x ; (3)取步驟(2)誘導出來的芽放入增殖培養(yǎng)基MS+2,4-D0.1-0.3mg/L+TDZ0.1-0.3mg/L+50mg/L半胱氨酸,附加蔗糖30g/L,瓊脂6.5g/L,PH5.8,光照20001x ; (4)取步驟(3)增殖培養(yǎng)出來的叢生芽放入生根培養(yǎng)基WS+NAA0.1-0.3mg/L+8mg/LAgNO3 ; (5)取步驟(4)生根后的蒙古櫟試管苗進行煉苗培養(yǎng)。
2.按照權(quán)利要求1所述的一種蒙古櫟的快速繁殖方法,其特征在于:步驟(I)中所述蒙古櫟無菌芽的獲得為,取蒙古櫟帶芽莖段,在漂白粉中浸泡3min,清洗表面,流水沖洗lh,超凈工作臺上75%酒精處理30s,氯化汞處理8min,無菌水沖洗5_7遍。
3.按照權(quán)利要求1所述的一種蒙古櫟的快速繁殖方法,其特征在于:步驟(3)芽增殖過程中附加了 50mg/L半胱氨酸,可以抗氧化,防止培養(yǎng)過程中褐化現(xiàn)象的產(chǎn)生。
4.按照權(quán)利要求1所述的一種蒙古櫟的快速繁殖方法,其特征在于:步驟(4)中的生根培養(yǎng)基中附加了 8mg/LAgN03,可以促進蒙古櫟的生根培養(yǎng)。
5.按照權(quán)利要求1所述的一種蒙古櫟的快速繁殖方法,其特征在于:步驟(4)中加入了硝酸鈰0.5-lmg/L,稀土物質(zhì)可以促進蒙古櫟的生根。
6.按照權(quán)利要求1所述的一種蒙古櫟的快速繁殖方法,其特征在于:步驟(5)中蒙古櫟的煉苗培養(yǎng)方法為苗床移栽,移栽前用50%多菌靈可濕性粉劑1000倍液對苗床進行滅菌,將生根試管苗小心取出,洗凈根部培養(yǎng)基,栽植于純沙:園田土 =1: I中,噴灑多菌靈藥液,每隔10天噴一次,40天后統(tǒng)計成活率。
【文檔編號】A01H4/00GK104160960SQ201410445601
【公開日】2014年11月26日 申請日期:2014年9月4日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月4日
【發(fā)明者】張金芳, 楊存 申請人:南京標科生物科技有限公司