一種白花燈籠的快速繁殖方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種白花燈籠的快速繁殖方法,包括外植體的消毒、腋芽的誘導、叢生芽的增殖、生根誘導、煉苗移栽、生長的調控。本發(fā)明白花燈籠組培方法操作簡便,成活率高,周期短,可以短期內獲得大量生長速度快的白花燈籠幼苗,為其藥用資源的開發(fā)奠定基礎。
【專利說明】一種白花燈籠的快速繁殖方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及組培條件下白花燈籠的培養(yǎng),屬于植物【技術領域】。
【背景技術】
[0002] 白花燈籠,Cyeroofeflt//-- 又名:燈籠草,鬼燈籠,苦燈籠,是馬鞭草科 大青屬植物。灌木,產中國江西南部和華南部分地區(qū)。喜陽光,較耐干旱和瘠薄土壤。生于 海拔1000米以下的丘陵、山坡、路邊、村旁和曠野,主要產于江西南部、福建、廣東、廣西地 區(qū),其它各地溫室亦有栽培。藥用部位:以莖及葉、根或根皮入藥,含有赪桐烯醇,赪桐二醇 烯酮,赪桐酮,赪桐留醇,留醇,蔗糖,乳糖,麥芽糖,半乳糖,果糖等。莖及葉主治:肺癆咳嗽, 骨蒸潮熱,咽喉腫痛,跌打損傷,癤腫疔瘡。根主治:感冒發(fā)熱,咳嗽,咽痛,衄血,赤痢,瘡疥, 瘰疬,跌打腫痛。繁殖技術主要通過播種繁殖,具有一定的局限性,利用組培技術可以有效 的提高白花燈籠的繁殖率,且簡單易操作,但目前國內外尚無研究。
【發(fā)明內容】
[0003] 本發(fā)明所要解決的技術問題是提供白花燈籠的快速繁殖方法,并采用赤霉素對其 生長進行調控,繁殖率高,生長速度快,操作簡單,可以獲得大量白花燈籠幼苗。
[0004] 為解決上述技術問題,本發(fā)明采用下列技術方案: 取白花燈籠帶腋芽的莖段,在漂白粉中浸泡3min,流水沖洗45min,超凈工作臺上 75%酒精處理30s,氯化汞處理12min,無菌水沖洗5-7遍,滅菌處理過的白花燈籠接入改 良DKW+lg/L活性炭培養(yǎng)基中培養(yǎng),附加蔗糖30g/L,瓊脂6. 5g/L,PH5. 8,光照20001x, 溫度25 °C,生長出來的白花燈籠腋芽,放入增殖培養(yǎng)基改良DKW+IAAO. 2mg/L+ABA2mg/ L+KT1. 5mg/L+6mg/LAgN03,附加蔗糖 30g/L,瓊脂 6. 5g/L,PH5. 8,光照 20001x,增殖培養(yǎng)出 來的叢生芽放入生根培養(yǎng)基1/4MS+NAA0. 2mg/L+IBA0. 3mg/L,光照40001x,溫度25°C,光期 15h,暗期9h,生根后的白花燈籠試管苗從培養(yǎng)瓶中取出,洗去根部的培養(yǎng)基,甲基托布津浸 根,栽植于椰子殼:珍珠巖:腐殖土 =2 :1 :1的基質中培養(yǎng),噴施30mg/LGA3,培養(yǎng)20天后,統(tǒng) 計成活率。
[0005] 采用本發(fā)明制備的白花燈籠生長速度快,成活率達93%,操作簡單,能耗小。
[0006] 下面將結合【具體實施方式】對本發(fā)明作進一步闡述,但本發(fā)明要求保護的范圍并不 局限于下列實施方式。
【具體實施方式】 [0007] 實施例1 取白花燈籠帶腋芽的莖段,在漂白粉中浸泡3min,流水沖洗45min,超凈工作臺上 75%酒精處理30s,氯化汞處理12min,無菌水沖洗5-7遍,滅菌處理過的白花燈籠接入改 良DKW+lg/L活性炭培養(yǎng)基中培養(yǎng),附加蔗糖30g/L,瓊脂6. 5g/L,PH5. 8,光照20001x, 溫度25 °C,生長出來的白花燈籠腋芽,放入增殖培養(yǎng)基改良DKW+I AAO. lmg/L+ABA2mg/ L+KTO. 5mg/L+6mg/LAgN03,附加蔗糖 30g/L,瓊脂 6. 5g/L,ΡΗ5· 8,光照 20001x,增殖培養(yǎng)出 來的叢生芽放入生根培養(yǎng)基1/4MS+NAA0. 2mg/L+IBA0. 3mg/L,光照40001χ,溫度25°C,光期 15h,暗期9h,生根后的白花燈籠試管苗從培養(yǎng)瓶中取出,洗去根部的培養(yǎng)基,甲基托布津浸 根,栽植于椰子殼:珍珠巖:腐殖土 =2 :1 :1的基質中培養(yǎng),噴施20mg/LGA3,培養(yǎng)20天后,成 活率達89%。
[0008] 實施例2 取白花燈籠帶腋芽的莖段,在漂白粉中浸泡3min,流水沖洗45min,超凈工作臺上 75%酒精處理30s,氯化汞處理12min,無菌水沖洗5-7遍,滅菌處理過的白花燈籠接入改 良DKW+lg/L活性炭培養(yǎng)基中培養(yǎng),附加蔗糖30g/L,瓊脂6. 5g/L,PH5. 8,光照20001x, 溫度25 °C,生長出來的白花燈籠腋芽,放入增殖培養(yǎng)基改良DKW+IAAO. 3mg/L+ABA2mg/ L+KT1. 5mg/L+6mg/LAgN03,附加蔗糖 30g/L,瓊脂 6. 5g/L,PH5. 8,光照 20001x,增殖培養(yǎng)出 來的叢生芽放入生根培養(yǎng)基1/4MS+NAA0. 2mg/L+IBA0. 3mg/L,光照40001x,溫度25°C,光期 15h,暗期9h,生根后的白花燈籠試管苗從培養(yǎng)瓶中取出,洗去根部的培養(yǎng)基,甲基托布津浸 根,栽植于椰子殼:珍珠巖:腐殖土 =2 :1 :1的基質中培養(yǎng),噴施40mg/LGA3,培養(yǎng)20天后,成 活率達91%。
[0009] 實施例3 取白花燈籠帶腋芽的莖段,在漂白粉中浸泡3min,流水沖洗45min,超凈工作臺上75% 酒精處理30s,氯化汞處理12min,無菌水沖洗5-7遍,滅菌處理過的白花燈籠接入改良 DKW+lg/L活性炭培養(yǎng)基中培養(yǎng),附加蔗糖30g/L,瓊脂6. 5g/L,PH5. 8,光照20001x,溫度 25°C,生長出來的白花燈籠腋芽,放入增殖培養(yǎng)基改良DKW+IAAO. 2mg/L+ABA2mg/L+KTlmg/ L+6mg/LAgN03,附加蔗糖30g/L,瓊脂6. 5g/L,PH5. 8,光照20001x,增殖培養(yǎng)出來的叢生芽放 入生根培養(yǎng)基 1/4MS+NAA0. 2mg/L+IBA0. 3mg/L,光照 40001x,溫度 25°C,光期 15h,暗期 9h, 生根后的白花燈籠試管苗從培養(yǎng)瓶中取出,洗去根部的培養(yǎng)基,甲基托布津浸根,栽植于椰 子殼:珍珠巖:腐殖土 =2 :1 :1的基質中培養(yǎng),噴施30mg/LGA3,培養(yǎng)20天后,成活率達92%。 [0010] 實施例4 取白花燈籠帶腋芽的莖段,在漂白粉中浸泡3min,流水沖洗45min,超凈工作臺上75% 酒精處理30s,氯化汞處理12min,無菌水沖洗5-7遍,滅菌處理過的白花燈籠接入改良 DKW+lg/L活性炭培養(yǎng)基中培養(yǎng),附加蔗糖30g/L,瓊脂6. 5g/L,PH5. 8,光照20001x,溫度 25°C,生長出來的白花燈籠腋芽,放入增殖培養(yǎng)基改良DKW+IAAO. 3mg/L+ABA2mg/L+KTlmg/ L+6mg/LAgN03,附加蔗糖30g/L,瓊脂6. 5g/L,PH5. 8,光照20001x,增殖培養(yǎng)出來的叢生芽放 入生根培養(yǎng)基 1/4MS+NAA0. 2mg/L+IBA0. 3mg/L,光照 40001x,溫度 25°C,光期 15h,暗期 9h, 生根后的白花燈籠試管苗從培養(yǎng)瓶中取出,洗去根部的培養(yǎng)基,甲基托布津浸根,栽植于椰 子殼:珍珠巖:腐殖土 =2 :1 :1的基質中培養(yǎng),噴施30mg/LGA3,培養(yǎng)20天后,成活率達90%。
【權利要求】
1. 一種白花燈籠的快速繁殖方法,包括外植體的消毒、腋芽的誘導、叢生芽的增殖、生 根誘導、煉苗移栽、生長的調控,其主要步驟如下: (1) 取白花燈籠的帶芽莖段,對其進行消毒處理; (2) 將步驟(1)滅菌處理過的白花燈籠接入改良DKW+lg/L活性炭培養(yǎng)基中培養(yǎng),附加 蔗糖 30g/L,瓊脂 6. 5g/L,PH5. 8,光照 20001x,溫度 25°C ; (3) 取步驟(2)生長出來的白花燈籠腋芽,放入增殖培養(yǎng)基改良DKW+IAAO. 1-0. 3mg/ L+ABA2mg/L+KT0. 5-1. 5mg/L+6mg/LAgN03,附加蔗糖 30g/L,瓊脂 6. 5g/L,PH5. 8,光照 20001x ; (4) 取步驟(3)增殖培養(yǎng)出來的叢生芽放入生根培養(yǎng)基1/4MS+NAA0. 2mg/L+IBA0. 3mg/ L,光照40001x,溫度25°C,光期15h,暗期9h ; (5) 取步驟(4)生根后的白花燈籠試管苗移栽到大田進行煉苗培養(yǎng),噴施20-40mg/ LGA3〇
2. 按照權利要求1所述的一種白花燈籠的快速繁殖方法,其特征在于:步驟(1)中所 述白花燈籠外植體的消毒處理為:取白花燈籠帶腋芽的莖段,在漂白粉中浸泡3min,流水 沖洗45min,超凈工作臺上75%酒精處理30s,氯化汞處理12min,無菌水沖洗5-7遍。
3. 按照權利要求1所述的一種白花燈籠的快速繁殖方法,其特征在于:步驟(2)無菌 苗生長培養(yǎng)中附加了活性炭,可以防止褐化現(xiàn)象。
4. 按照權利要求1所述的一種白花燈籠的快速繁殖方法,其特征在于:步驟(3)中的 增殖培養(yǎng)基中附加了 ΑΒΑ和6mg/LAgN03, ΑΒΑ可以促進叢生芽的分化,AgN03可以防止玻璃 化現(xiàn)象,此兩種物質需待滅菌后的培養(yǎng)基冷卻到60°C以下進行過濾滅菌。
5. 按照權利要求1所述的一種白花燈籠的快速繁殖方法,其特征在于:步驟(5)中加 入了 GA3,可以促進幼苗的粗壯和生長,且采用葉面噴施。
6. 按照權利要求1所述的一種白花燈籠的快速繁殖方法,其特征在于:步驟(5)中白 花燈籠的煉苗培養(yǎng)方法為將試管苗從培養(yǎng)瓶中取出,洗去根部的培養(yǎng)基,甲基托布津浸根, 栽植于椰子殼:珍珠巖:腐殖土 =2 :1 :1的基質中培養(yǎng),培養(yǎng)20天后,統(tǒng)計成活率。
【文檔編號】A01H4/00GK104186330SQ201410463008
【公開日】2014年12月10日 申請日期:2014年9月12日 優(yōu)先權日:2014年9月12日
【發(fā)明者】楊存 申請人:南京通澤農業(yè)科技有限公司