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一種胡頹子再生植株的快速繁殖方法

文檔序號:265776閱讀:396來源:國知局
一種胡頹子再生植株的快速繁殖方法
【專利摘要】本發(fā)明研究了一種胡頹子再生植株的快速繁殖方法,包括無菌葉片的獲得、愈傷組織的誘導(dǎo)、愈傷組織的分化、生根培養(yǎng),煉苗移栽等步驟,本發(fā)明方法所制備的胡頹子繁殖率好,再生率高,生長周期短,可以在短期內(nèi)獲得大量的胡頹子幼苗。
【專利說明】 一種胡頹子再生植株的快速繁殖方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及胡頹子組織培養(yǎng)的快繁方法,屬于植物【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002]胡頹子別名半春子、甜棒槌、雀兒酥、羊奶子,屬胡頹子科常綠灌木。果熟時味甜可食。根、葉、果實均供藥用。主要分布在北半球溫帶和亞熱帶地區(qū),原產(chǎn)中國,中國有2屬41種??购Ρ容^強(qiáng),在華北南部,可露地越冬,能忍耐零下8°C左右的絕對低溫,生長適溫為24_34°C,耐高溫酷暑。生長在山坡上的疏林下面及陰濕山谷中,但不怕陽光曝曬,也具有較強(qiáng)的耐陰力。對土壤要求不嚴(yán),在中性、酸性和石灰質(zhì)土壤上均能生長,耐干旱和瘠薄,不耐水澇。喜高溫、濕潤氣候,其耐鹽性、耐旱性和耐寒性佳,抗風(fēng)強(qiáng)。在我國分布于江蘇、浙江、安徽、江西、福建、湖南、湖北、四川、貴州、陜西、云南等地,胡頹子屬植物中主要化學(xué)成分有揮發(fā)油、萜類、生物堿、黃酮等;藥理活性主要有降血糖,降血脂、抗脂質(zhì)氧化、抗炎鎮(zhèn)痛、免疫等,繁殖方法:常用播種和扦插繁殖,種子發(fā)芽率只有50%左右,組織培養(yǎng)方法用于胡頹子的繁殖,目前尚未研究。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種胡頹子的快速繁殖方法,由該方法所制備得到的胡頹子繁殖率好,再生率高,生長周期短,可以在短期內(nèi)獲得大量的胡頹子幼苗。
[0004]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是通過以下方案來實現(xiàn)的:
取胡頹子幼嫩葉片,在漂白粉中浸泡2.5min,流水沖洗30min,超凈工作臺上過氧化氫處理12min,無菌水沖洗5遍,消毒處理過的胡頹子葉片接入培養(yǎng)基配方為S+2,4_D2mg/L+KT lmg/1 +6-BA1.0mg/L誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng),附加蔗糖30g/L,瓊脂6g/L,PH5.82,光照12001x,光照時間4h,溫度22±2°C,誘導(dǎo)出來的愈傷組織接入培養(yǎng)基S+NAA0.lmg/L+CH300-350 mg/l+6-BA0.5-1.0mg/L中進(jìn)行愈傷組織分化誘導(dǎo),附加蔗糖60g/L,瓊脂6g/L,PH5.82,光照20001x,光照時間10h,溫度22±2°C,誘導(dǎo)分化出來的芽苗放入生根培養(yǎng)基MS+IAA0.01-0.02mg/L+生根粉,附加蔗糖20g/L,瓊脂6g/L,PH5.82,光照8000lx,光照時間17h,溫度25 ± 2 °C,生根培養(yǎng)30d后的試管苗高3cm左右,用鑷子取出幼苗,洗凈根上所帶培養(yǎng)基,移栽一田園土:鋸末=2:1的基質(zhì)中,栽植前基質(zhì)經(jīng)過滅菌處理,且使用3%的高錳酸鉀溶液噴濕,4天后噴灑生根粉溶液,每周噴灑兩次,溫度25°C,濕度85%。
[0005]采用本發(fā)明制備的胡頹子成活率高,周期短,產(chǎn)量大,能耗少,利于大規(guī)模種植。
[0006]下面將結(jié)合【具體實施方式】對本發(fā)明作進(jìn)一步闡述,但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實施方式。

【具體實施方式】
[0007]實施例1 取胡頹子幼嫩葉片,在漂白粉中浸泡2.5min,流水沖洗30min,超凈工作臺上過氧化氫處理12min,無菌水沖洗5遍,消毒處理過的胡頹子葉片接入培養(yǎng)基配方為S+2,4_D2mg/L+KT lmg/1 +6-BA 1.0mg/L誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng),附加蔗糖30g/L,瓊脂6g/L,PH5.82,光照12001x,光照時間4h,溫度22±2°C,誘導(dǎo)出來的愈傷組織接入培養(yǎng)基S+NAA0.lmg/L+CH300mg/l+6-BA0.5mg/L中進(jìn)行愈傷組織分化誘導(dǎo),附加蔗糖60g/L,瓊脂6g/L,PH5.82,光照20001x,光照時間10h,溫度22±2°C,誘導(dǎo)分化出來的芽苗放入生根培養(yǎng)基MS+IAA0.0 lmg/L+生根粉,附加蔗糖20g/L,瓊脂6g/L,PH5.82,光照80001x,光照時間17h,溫度25±2°C,生根培養(yǎng)30d后的試管苗高3cm左右,用鑷子取出幼苗,洗凈根上所帶培養(yǎng)基,移栽一田園土:鋸末=2:1的基質(zhì)中,栽植前基質(zhì)經(jīng)過滅菌處理,且使用3%的高錳酸鉀溶液噴濕,4天后噴灑生根粉溶液,每周噴灑兩次,溫度25°C,濕度85%,成活率87%。
[0008]實施例2
取胡頹子幼嫩葉片,在漂白粉中浸泡2.5min,流水沖洗30min,超凈工作臺上過氧化氫處理12min,無菌水沖洗5遍,消毒處理過的胡頹子葉片接入培養(yǎng)基配方為S+2,4_D2mg/L+KT lmg/1 +6-BA 1.0mg/L誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng),附加蔗糖30g/L,瓊脂6g/L,PH5.82,光照12001x,光照時間4h,溫度22±2°C,誘導(dǎo)出來的愈傷組織接入培養(yǎng)基S+NAA0.lmg/L+CH350 mg/l+6-BAl.0mg/L中進(jìn)行愈傷組織分化誘導(dǎo),附加蔗糖60g/L,瓊脂6g/L,PH5.82,光照20001x,光照時間10h,溫度22±2°C,誘導(dǎo)分化出來的芽苗放入生根培養(yǎng)基MS+IAA0.02mg/L+生根粉,附加蔗糖20g/L,瓊脂6g/L,PH5.82,光照80001x,光照時間17h,溫度25±2°C,生根培養(yǎng)30d后的試管苗高3cm左右,用鑷子取出幼苗,洗凈根上所帶培養(yǎng)基,移栽一田園土:鋸末=2:1的基質(zhì)中,栽植前基質(zhì)經(jīng)過滅菌處理,且使用3%的高錳酸鉀溶液噴濕,4天后噴灑生根粉溶液,每周噴灑兩次,溫度25°C,濕度85%,成活率91%。
[0009]實施例3
取胡頹子幼嫩葉片,在漂白粉中浸泡2.5min,流水沖洗30min,超凈工作臺上過氧化氫處理12min,無菌水沖洗5遍,消毒處理過的胡頹子葉片接入培養(yǎng)基配方為S+2,4_D2mg/L+KT lmg/1 +6-BA 1.0mg/L誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng),附加蔗糖30g/L,瓊脂6g/L,PH5.82,光照12001x,光照時間4h,溫度22±2°C,誘導(dǎo)出來的愈傷組織接入培養(yǎng)基S+NAA0.lmg/L+CH350 mg/l+6-BAl.0mg/L中進(jìn)行愈傷組織分化誘導(dǎo),附加蔗糖60g/L,瓊脂6g/L,PH5.82,光照20001x,光照時間10h,溫度22±2°C,誘導(dǎo)分化出來的芽苗放入生根培養(yǎng)基MS+IAA0.0 lmg/L+生根粉,附加蔗糖20g/L,瓊脂6g/L,PH5.82,光照80001x,光照時間17h,溫度25± 2°C,生根培養(yǎng)30d后的試管苗高3cm左右,用鑷子取出幼苗,洗凈根上所帶培養(yǎng)基,移栽一田園土:鋸末=2:1的基質(zhì)中,栽植前基質(zhì)經(jīng)過滅菌處理,且使用3%的高錳酸鉀溶液噴濕,4天后噴灑生根粉溶液,每周噴灑兩次,溫度25°C,濕度85%,成活率90%。
【權(quán)利要求】
1.一種胡頹子再生植株的快速繁殖方法,包括無菌葉片的獲得、愈傷組織的誘導(dǎo)、愈傷組織的分化、生根培養(yǎng),煉苗移栽,其主要步驟如下: (1)取胡頹子幼嫩的葉片,進(jìn)行消毒處理; (2)將步驟(I)消毒處理過的胡頹子葉片接入培養(yǎng)基配方為S+2,4-D2mg/L+KTlmg/1+6-BA1.0mg/L誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng),附加蔗糖30g/L,瓊脂6g/L,PH5.82,光照12001x,光照時間4h,溫度22±2°C ; (3 )取步驟(2 )誘導(dǎo)出來的愈傷組織接入培養(yǎng)基S+NAA0.lmg/L+CH300-350mg/1+6-BA0.5-1.0mg/L中進(jìn)行愈傷組織分化誘導(dǎo),附加蔗糖60g/L,瓊脂6g/L,PH5.82,光照20001x,光照時間10h,溫度22±2°C ; (4)取步驟(3)誘導(dǎo)分化出來的芽苗放入生根培養(yǎng)基MS+IAA0.01-0.02mg/L+生根粉,附加蔗糖20g/L,瓊脂6g/L,PH5.82,光照80001x,光照時間17h,溫度25±2°C ; (5)取步驟(4)生根后的胡頹子試管苗移栽到大田進(jìn)行煉苗培養(yǎng)。
2.按照權(quán)利要求1所述的一種胡頹子再生植株的快速繁殖方法,其特征在于:步驟(I)中所述胡頹子無菌葉片獲得為,取胡頹子幼嫩葉片,在漂白粉中浸泡2.5min,流水沖洗30min,超凈工作臺上過氧化氫處理12min,無菌水沖洗5遍。
3.按照權(quán)利要求1所述的一種胡頹子再生植株的快速繁殖方法,其特征在于:步驟(4)生根誘導(dǎo)培養(yǎng)基加入了少量生根粉,可以促進(jìn)胡頹子的生根率。
4.按照權(quán)利要求1所述的一種胡頹子再生植株的快速繁殖方法,其特征在于:步驟(5)中胡頹子的煉苗培養(yǎng)方法為生根培養(yǎng)30d后的試管苗高3cm左右,用鑷子取出幼苗,洗凈根上所帶培養(yǎng)基,移栽一田園土:鋸末=2: I的基質(zhì)中,栽植前基質(zhì)經(jīng)過滅菌處理,且使用3%的高錳酸鉀溶液噴濕,4天后噴灑生根粉溶液,每周噴灑兩次,溫度25°C,濕度85%。
【文檔編號】A01H4/00GK104255468SQ201410463131
【公開日】2015年1月7日 申請日期:2014年9月12日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月12日
【發(fā)明者】楊存 申請人:南京通澤農(nóng)業(yè)科技有限公司
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